Name: combined near-infrared fluorescent imaging and micro-computed tomography for directly visualizing cerebral thromboemboli
Uploaded: 2016-09-25T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Combined Near-infrared Fluorescent Imaging and Micro-computed Tomography for Directly Visualizing Cerebral Thromboemboli at JoVE.com

Detta arbete stöddes av Korea Healthcare Technology R &amp; D Project, ministeriet för hälsa och välfärd (HI12C1847, HI12C0066), Bio och sjukvård Technology Development Program (2010 till 0.019.862) och Global Research Lab (GRL) program (NRF-2015K1A1A2028228) av National Research Foundation, som finansieras av den koreanska regeringen.

Alla djurförsök visat i detta protokoll har granskats och godkänts av Dongguk Universitets Ilsan Hospital Djurvård och användning kommittén och genomförs i enlighet med de principer och förfaranden som beskrivs i NIH Guide för skötsel och användning av djur. 1. Framställning av Exogent Bildas Clot märkt med fluorescens Marker (Figur 1) <ol><li> Söva en mus i en induktionskammare med 3% isofluran blandat med 30% syre (1,5 l / min 100% syre). Säkerställa tillräcklig anestesidjup genom att observ...

<ol>
	<li>Saver, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Time+is+brain--quantified.">Time is brain--quantified.</a> Stroke. 37 (1), 263-266 (2006).</li><li>Latchaw, R. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recommendations+for+imaging+of+acute+ischemic+stroke:+a+scientific+statement+from+the+American+Heart+Association.">Recommendations for imaging of acute ischemic stroke: a scientific statement from the American Heart Association.</a> Stroke. 40 (11), 3646-3678 (2009).</li><li>Kim, D. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hyperacute+direct+thrombus+imaging+using+computed+tomography+and+gold+nanoparticles.">Hyperacute direct thrombus imaging using computed tomography and gold nanoparticles.</a> Ann Neurol. 73 (5), 617-625 (2013).</li><li>Kim, J. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Direct+Imaging+of+Cerebral+Thromboemboli+Using+Computed+Tomography+and+Fibrin-targeted+Gold+Nanoparticles.">Direct Imaging of Cerebral Thromboemboli Using Computed Tomography and Fibrin-targeted Gold Nanoparticles.</a> Theranostics. 5 (10), 1098-1114 (2015).</li><li>Kim, D. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Direct+thrombus+imaging+as+a+means+to+control+the+variability+of+mouse+embolic+infarct+models:+the+role+of+optical+molecular+imaging.">Direct thrombus imaging as a means to control the variability of mouse embolic infarct models: the role of optical molecular imaging.</a> Stroke. 42 (12), 3566-3573 (2011).</li><li>Parasuraman, S., Raveendran, R., Kesavan, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blood+sample+collection+in+small+laboratory+animals.">Blood sample collection in small laboratory animals.</a> J Pharmacol Pharmacother. 1 (2), 87-93 (2010).</li><li>Durukan, A., Tatlisumak, T., Fisher, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+ischemic+stroke.">Animal models of ischemic stroke.</a> Handbook of clinical neurology: Stroke Part 1: Basic and epidemiological aspects.Volume 92. 92, 43-66 (2009).</li><li>Overoye-Chan, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=EP-2104R:+a+fibrin-specific+gadolinium-Based+MRI+contrast+agent+for+detection+of+thrombus.">EP-2104R: a fibrin-specific gadolinium-Based MRI contrast agent for detection of thrombus.</a> J Am Chem Soc. 130 (18), 6025-6039 (2008).</li><li>Kim, D. E., Schellingerhout, D., Jaffer, F. A., Weissleder, R., Tung, C. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Near-infrared+fluorescent+imaging+of+cerebral+thrombi+and+blood-brain+barrier+disruption+in+a+mouse+model+of+cerebral+venous+sinus+thrombosis.">Near-infrared fluorescent imaging of cerebral thrombi and blood-brain barrier disruption in a mouse model of cerebral venous sinus thrombosis.</a> J Cereb Blood Flow Metab. 25 (2), 226-233 (2005).</li><li>Tung, C. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Novel+factor+XIII+probes+for+blood+coagulation+imaging.">Novel factor XIII probes for blood coagulation imaging.</a> Chembiochem. 4 (9), 897-899 (2003).</li><li>Robinson, B. R., Houng, A. K., Reed, G. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Catalytic+life+of+activated+factor+XIII+in+thrombi.+Implications+for+fibrinolytic+resistance+and+thrombus+aging.">Catalytic life of activated factor XIII in thrombi. Implications for fibrinolytic resistance and thrombus aging.</a> Circulation. 102 (10), 1151-1157 (2000).</li><li>Reed, G. L., Houng, A. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+contribution+of+activated+factor+XIII+to+fibrinolytic+resistance+in+experimental+pulmonary+embolism.">The contribution of activated factor XIII to fibrinolytic resistance in experimental pulmonary embolism.</a> Circulation. 99 (2), 299-304 (1999).</li><li>Sun, I. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biocompatible+glycol+chitosan-coated+gold+nanoparticles+for+tumor-targeting+CT+imaging.">Biocompatible glycol chitosan-coated gold nanoparticles for tumor-targeting CT imaging.</a> Pharm Res. 31 (6), 1418-1425 (2014).</li><li>Celi, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thrombus+formation:+direct+real-time+observation+and+digital+analysis+of+thrombus+assembly+in+a+living+mouse+by+confocal+and+widefield+intravital+microscopy.">Thrombus formation: direct real-time observation and digital analysis of thrombus assembly in a living mouse by confocal and widefield intravital microscopy.</a> J Thromb Haemost. 1 (1), 60-68 (2003).</li><li>Chen, I. Y., Wu, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardiovascular+molecular+imaging:+focus+on+clinical+translation.">Cardiovascular molecular imaging: focus on clinical translation.</a> Circulation. 123 (4), 425-443 (2011).</li><li>Wintermark, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+recommendations+for+acute+stroke+and+transient+ischemic+attack+patients:+a+joint+statement+by+the+American+Society+of+Neuroradiology,+the+American+College+of+Radiology+and+the+Society+of+NeuroInterventional+Surgery.">Imaging recommendations for acute stroke and transient ischemic attack patients: a joint statement by the American Society of Neuroradiology, the American College of Radiology and the Society of NeuroInterventional Surgery.</a> J Am Coll Radiol. 10 (11), 828-832 (2013).</li><li>Weissleder, R., Tung, C. H., Mahmood, U., Bogdanov, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+imaging+of+tumors+with+protease-activated+near-infrared+fluorescent+probes.">In vivo imaging of tumors with protease-activated near-infrared fluorescent probes.</a> Nat Biotechnol. 17 (4), 375-378 (1999).</li><li>Narayanan, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biocompatible+magnetite/gold+nanohybrid+contrast+agents+via+green+chemistry+for+MRI+and+CT+bioimaging.">Biocompatible magnetite/gold nanohybrid contrast agents via green chemistry for MRI and CT bioimaging.</a> ACS Appl Mater Interfaces. 4 (1), 251-260 (2012).</li><li>Amendola, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Magneto-plasmonic+Au-Fe+alloy+nanoparticles+designed+for+multimodal+SERS-MRI-CT+imaging.">Magneto-plasmonic Au-Fe alloy nanoparticles designed for multimodal SERS-MRI-CT imaging.</a> Small. 10 (12), 2476-2486 (2014).</li><li>Zhu, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synthesis+of+Au-Fe3O4+heterostructured+nanoparticles+for+in+vivo+computed+tomography+and+magnetic+resonance+dual+model+imaging.">Synthesis of Au-Fe3O4 heterostructured nanoparticles for in vivo computed tomography and magnetic resonance dual model imaging.</a> Nanoscale. 6 (1), 199-202 (2014).</li></ol>

Vi visade användningen av två kompletterande molekylära avbildningstekniker för direkttrombosavbildande i experimentella modeller av emboli stroke: en fibrin riktad guld nanopartiklar (FIB-GC-AuNP) för in vivo microCT baserad avbildning och en FXIIIa riktad optisk avbildning sond för ex vivo fluorescerande avbildning. Efter intravenös administrering av fib-GC-AuNPs blev tromber synliga för CT som täta strukturer, som orsakas av partiklarna blir inneslutna i tromber...

En av 6 personer kommer att ha en stroke någon gång under sin livstid. Ischemisk stroke är den i särklass vanligaste stroke typ, och svarar för cirka 80 procent av alla strokefall. Eftersom tromboemboli orsakar majoriteten av dessa ischemisk stroke, det finns ett ökande intresse för direkt trombosavbildande. Det uppskattas att cirka 2 miljoner hjärnceller dör under varje minut av Middle Cerebral artärocklusion en, vilket leder till parollen &quot;Time is Brain&quot;. Datortomografi (CT) studier kan göras snabbt, och är allmänt tillgängliga; av denna anledning förblir CT avbildning av valet för den inledande diagnos och behandling av hyperakut ischemisk stroke. CT är särskilt värdefullt för att informera de kritiska tidiga beslut: administrera vävnadsplasminogenaktivator (tPA) för trombolys och / eller triaging till endovaskulär koagulera-hämtning två. Nuvarande CT-baserad trombosavbildande kan emellertid inte i serie spåra cerebral tromboemboli in vivo, eftersom den använder indirekta metoder för att demonstrera tromber: efter kontrast blodet poolen av joderade kontrastmedel är tromb demonstreras som fyller defekter i kärlen. Det finns dosgränser och risker som är förknippade med upprepad administrering av joderade kontrastmedel, som förhindrar upprepade avbildning av tromber på detta sätt. Det finns således ett kritiskt behov av en direkt avbildning metodik för cerebral tromber hos strokepatienter, att möjliggöra bättre behandlingsbeslut snabbare och göras. Vi föreslår att åstadkomma detta genom att öka värdet på CT, det för närvarande använda frontlinjen avbildningsmodalitet för stroke, med användning av en tromb sökande nanopartikulära molekylär avbildningsmedel. Vi har visat att användningen av detta medel med hjälp av mikro-datortomografi (microCT), en hög upplösning ex vivo eller in vivo (litet djur) avbildning version av CT som tillåter snabb datainsamling &lt;sup&gt; 3,4. Även med den relativt dåliga mjukdels kontrast för små djur microCT (mycket värre än tillgängliga från humana stora skannrar), avbildningsmedlet kunde söka och markera tromber genom att göra dem hyperdense på CT, en &quot;tät fartyg tecken&quot; förstärks av molekylär avbildning. Som komplement till CT-tekniken, har vår grupp tidigare utvecklat en optisk direkttrombbildteknik med hjälp Cy5.5 nära infraröda fluorescerande (NIRF) sond för att visualisera cerebral trombos börda 5. Detta är en ex vivo teknik på obduktions hjärnor, men är mycket känslig, och tjänar till att bekräfta in vivo-data i inställningen forskning. Med både CT och NIRF baserad tromb söker avbildningstekniker tillåter oss att jämföra och kontrastera dessa tekniker för att uppnå mycket informativa uppgifter om rollen av blodproppar och tromber avbildning i processen för ischemisk stroke utveckling. Here, beskriver vi ett detaljerat protokoll av en kombinerad teknik för in vivo microCT och ex vivo NIRF avbildning för att direkt visualisera tromboemboli i en musmodell av emboli stroke. Dessa enkla och robusta metoder är användbara för att öka vår förståelse av trombotiska sjukdomar genom att aktivera exakt in vivo bedömning av trombbördan / distribution och karakterisering av dynamisk tromb utveckling på ett snabbt och kvantitativt sätt in vivo under behandlingen, följt av ex vivo-data som tjänar som en kontroll och referensstandard för bekräftelsen av in vivo imaging fynd.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="588">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:155px;">Machines</td>
			<td style="width:219px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:96px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">microCT</td>
			<td>NanoFocusRay, JeonJu, Korea</td>
			<td>NFR Polaris-G90</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">NIRF imaging system</td>
			<td>Roper-scientific,Tucson, AZ</td>
			<td>coolsnap-Ez</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Laser Doppler flowmeter</td>
			<td>Perimed, Stockholm, Sweden</td>
			<td>PeriFlux System 5000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Surgical microscope</td>
			<td>Leica Microsystems, Seoul, Korea</td>
			<td>EZ4HD</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:155px;">Inhalation anesthesia machine</td>
			<td>PerkinElmer, Massachusetts, USA</td>
			<td>XGI-8</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Software</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="60">
			<td height="60" style="height:60px;">NFR control</td>
			<td>NanoFocusRay, JeonJu, Korea</td>
			<td>NFR Polaris-G90</td>
			<td style="width:96px;">microCT control software</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:155px;">Lucion</td>
			<td>Infinitt, Seoul, Korea</td>
			<td>Lucion</td>
			<td style="width:96px;">3D render imaging software</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Lab chart 7</td>
			<td>ADInstruments, Colorado, USA</td>
			<td>Lab chart 7</td>
			<td>rCBF</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Image J software</td>
			<td>Wanye Rasband, NIH, USA</td>
			<td>1.49d</td>
			<td>imaging analysis</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Devices/Instruments</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Infusion pump</td>
			<td>Harvard, Massachusetts, USA</td>
			<td>pump 22(55-2226)</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Homeothermic blanket</td>
			<td>Panlab, Barcelona, Spain</td>
			<td>HB101</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Pocket cautery</td>
			<td>Daejong, Seoul, Korea</td>
			<td>DJE-39</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Brain matrice</td>
			<td>Ted pella, CA, USA</td>
			<td>15003</td>
			<td style="width:96px;">coronal section</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">PE-50 tubing</td>
			<td>Natsume, Tokyo, Japan</td>
			<td>SP-45(PE-50)</td>
			<td style="width:96px;">I.D. 0.58 mm O.D. 0.96 mm</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">PE-10 tubing</td>
			<td>Natsume, Tokyo, Japan</td>
			<td>SP-10(PE-10)</td>
			<td style="width:96px;">I.D. 0.28mm O.D. 0.61 mm</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:155px;">30 gauge needle</td>
			<td>sungshim-medical, Seoul, Korea</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Syringe</td>
			<td>CPL-medical, Ansan, Korea</td>
			<td></td>
			<td>1 &#38; 3 cc</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Gauze</td>
			<td>Panamedic, Cheonan, Korea</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Tape</td>
			<td>Scotch, Seoul, Korea</td>
			<td>3M-810</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Micro forceps</td>
			<td>Fine Science Tools, Vancouver, Canada</td>
			<td>&#160;11253-27</td>
			<td>Dumont #L5</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Micro scissor</td>
			<td>Fine Science Tools, Vancouver, Canada</td>
			<td style="width:119px;">15000-03</td>
			<td>Vannas spring</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Scissor</td>
			<td>Fine Science Tools, Vancouver, Canada</td>
			<td style="width:119px;">14084-08</td>
			<td>8.5 cm</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Black silk suture</td>
			<td>Ailee, Busan, Korea</td>
			<td>SK6071, SK728</td>
			<td>6-0 and 7-0</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Reagents</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">meloxicam</td>
			<td>Yuhan, Seoul, Korea</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">vet ointment</td>
			<td>Novartis, Basel, Swiss</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">10% Povidone-iodine (betadine)</td>
			<td>Firson, Cheon-an, Korea</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">FeCl3</td>
			<td>Sigma, Missouri, United States</td>
			<td>157740-5G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">TTC</td>
			<td>Amresco, Ohio, USA</td>
			<td>0765-100g</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Isoflurane</td>
			<td>Hana-Pham, Gyeonggi, Korea</td>
			<td>Ifran</td>
			<td>100 mL</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">PBS</td>
			<td>Welgene, Daegu, Korea</td>
			<td style="width:119px;">LB001-02</td>
			<td>500 mL</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Gold nanoparticles</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Synthesis</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">C15 optical agent</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Synthesis</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Tissue plasminogen activator</td>
			<td style="width:219px;">Boehringer Ingelheim, Biberach, Germany</td>
			<td style="width:119px;">rtPA(actilyse)</td>
			<td>20 mg</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Normal saline</td>
			<td>Daihan Pham, Seoul, Korea</td>
			<td>48N3AF3</td>
			<td>20 mL</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

combined near-infrared fluorescent imaging and micro-computed tomography for directly visualizing cerebral thromboemboli

Direkt trombosavbildande visualiserar den grundläggande orsaken till tromboembolisk infarkt. Att kunna bild tromb direkt tillåter mycket bättre undersökning av stroke än att förlita sig på indirekta mätningar, och kommer att vara en potent och robust vaskulär forskningsverktyg. Vi använder en optisk avbildningsteknik som märker tromber med en molekylär avbildning tromb markör - en Cy5.5 nära infraröda fluorescerande (NIRF) prob som är kovalent bunden till de fibrinsträngarna av tromben av fibrin-tvärbindande enzymatiska verkan av aktiverad koagulationsfaktor Xllla under processen för koagel mognad. En mikro-datortomografi (microCT) -baserade tillvägagångssätt använder tromb söker guldnanopartiklar (AuNPs) funktionaliserade för att rikta den största delen av proppen: fibrin. Detta dokument beskriver ett detaljerat protokoll för den kombinerade in vivo microCT och ex vivo NIRF avbildning av tromboemboli i en musmodell av emboli stroke. Vi visar att in vivo &lt;/ em&gt; microCT och fibrin inriktade glykol kitosan AuNPs (FIB-GC-AuNPs) kan användas för att visualisera både in situ tromber och cerebral embolisk tromber. Vi beskriver även användningen av in vivo microCT baserade direkttrombosavbildande för att seriellt övervaka de terapeutiska effekterna av vävnads-plasminogenaktivator-medierad trombolys. Efter den sista avbildning session, visar vi genom ex vivo NIRF avbildning omfattningen och fördelningen av rest tromboemboli i hjärnan. Slutligen beskriver vi kvantitativ bild analyser av microCT och NIRF bilddata. Den kombinerade tekniken direkt trombosavbildande gör två oberoende metoder för tromb visualisering att jämföra: området trombrelaterade fluorescerande signal på ex vivo NIRF imaging kontra volym hyperdense microCT tromber in vivo.

Baslinje microCT bilder, som erhållits in vivo efter administrering av fib-GC-AuNP (10 mg / ml, 300 | j, l) vid 1 h efter embolisk stroke, visualiseras tydligt cerebral tromb i MCA - ACA bifurkation område av det distala inre halsartären (Figur 6 ). Uppföljning microCT avbildning visade ingen förändring i COW tromben med koksaltlösning behandling. Emellertid behandling med tPA visade en gradvis upplösning av COW tromb (blå pilspetsar i figur 6)....

Watch this Scientific Journal Video about Combined Near-infrared Fluorescent Imaging and Micro-computed Tomography for Directly Visualizing Cerebral Thromboemboli at JoVE.com

Combined Near-infrared Fluorescent Imaging and Micro-computed Tomography for Directly Visualizing Cerebral Thromboemboli

Detta protokoll beskriver tillämpningen av kombinerade nära infraröda fluorescerande (NIRF) avbildning och mikro datortomografi (microCT) för visualisering cerebral tromboemboli. Denna teknik medger kvantifiering av trombbördan och evolution. Den NIRF avbildningsteknik visualiserar fluorescensmärkt tromb i utskuren hjärnan, medan microCT tekniken visualiserar trombos inuti levande djur med hjälp av guldnanopartiklar.

Kombinerad nära infraröda fluorescerande Imaging och Micro-datortomografi för direkt Visualisera Cerebral tromboemboli

Direct thrombus imaging visualizes the root cause of thromboembolic infarction. Being able to image thrombus directly allows far better investigation of ...

Research

JoVE Journal

Medicine

In vivo Near Infrared Fluorescence (NIRF) Intravascular Molecular Imaging of Inflammatory Plaque, a Multimodal Approach to Imaging of Atherosclerosis

In vivo Near Infrared Fluorescence NIRF Intravascular Molecular Imaging of Inflammatory Plaque, a Multimodal Approach to Imaging of Atherosclerosis

In vivo Near Infrared Fluorescence (NIRF) Intravaskulär Molecular Imaging av inflammatoriska plack, en multimodal metod för avbildning av åderförkalkning

The vascular response to injury is a well-orchestrated inflammatory response triggered by the accumulation of macrophages within the vessel wall leading ...

Retrograde Perfusion and Filling of Mouse Coronary Vasculature as Preparation for Micro Computed Tomography Imaging

Retrograd perfusion och påfyllning av mus kranskärlen som förberedelse för Micro datortomografi Imaging

Visualization of the vasculature is becoming increasingly important for understanding many different disease states. While several techniques exist for ...

Near Infrared Optical Projection Tomography for Assessments of &beta;-cell Mass Distribution in Diabetes Research

Near Infrared Optical Projection Tomography for Assessments of ÃƒÅ½Ã‚Â²-cell Mass Distribution in Diabetes Research

Near Infrared optisk projektionstomografi för bedömningar av β-cells massdistribution i diabetesforskning

By adapting OPT to include the capability of imaging in the near infrared (NIR) spectrum, we here illustrate the possibility to image larger bodies of ...

Osmotic Drug Delivery to Ischemic Hindlimbs and Perfusion of Vasculature with Microfil for Micro-Computed Tomography Imaging

Osmotisk Drug Delivery ischemisk bakben och perfusion av kärlsystemet med Microfil för Micro-Datortomografi Imaging

Preclinical research in animal models of peripheral arterial disease plays a vital role in testing the efficacy of therapeutic agents designed to ...

Tissue-simulating Phantoms for Assessing Potential Near-infrared Fluorescence Imaging Applications in Breast Cancer Surgery

Vävnads simulera Phantoms för bedömning Potentiella nära infraröda fluorescens bildåtergivning i bröstcancer kirurgi

Inaccuracies in intraoperative tumor localization and evaluation of surgical margin status result in suboptimal outcome of breast-conserving surgery ...

Assessment of Viability of Human Fat Injection into Nude Mice with Micro-Computed Tomography

Bedömning av livskraft Human Fat Injektion i nakna möss med Micro-datortomografi

Lipotransfer is a vital tool in the surgeon&#8217;s armamentarium for the treatment of soft tissue deficits of throughout the body. Fat is the ideal soft ...

Using Micro-computed Tomography for the Assessment of Tumor Development and Follow-up of Response to Treatment in a Mouse Model of Lung Cancer

Använda Micro-datortomografi för bedömning av tumörutveckling och uppföljning av behandlingssvar i en musmodell av lungcancer

Lung cancer is the most lethal cancer in the world. Intensive research is ongoing worldwide to identify new therapies for lung cancer. Several mouse ...

Skeletal Muscle Neurovascular Coupling, Oxidative Capacity, and Microvascular Function with 'One Stop Shop' Near-infrared Spectroscopy

Skelettmuskulaturen neurovaskulära koppling, oxidativ kapacitet och mikrovaskulära funktion med ”One Stop Shop' nära-infraröd spektroskopi

Exercise represents a major hemodynamic stress that demands a highly coordinated neurovascular response in order to match oxygen delivery to metabolic ...

How to Administer Near-Infrared Spectroscopy in Critically ill Neonates, Infants, and Children

Hur man administrerar nära infraröd spektroskopi i kritiskt sjuka nyfödda, spädbarn och barn

Near infrared spectroscopy (NIRS) calculates regional tissue oxygenation (rSO2) using the different absorption spectra of oxygenated and deoxygenated ...

Near Infrared Photoimmunotherapy for Mouse Models of Pleural Dissemination

Nära infraröd fotoimmunoterapi för musmodeller av pleuraspridning

The efficacy of photoimmunotherapy can be evaluated more accurately with an orthotopic mouse model than with a subcutaneous one. A pleural dissemination ...