Name: preparation and characterization of lipophilic doxorubicin pro-drug micelles
Uploaded: 2016-08-02T15:00:00
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This work was supported by the following grants: NIH-SC3 grant, NSF-PREM grant, Hampton University Faculty Research Grant. We would like to thank Mrs. Michele A. Cochran at Virginia Institute of Marine Science (VIMS) for the use of the particle size analyzer. We would also like to thank Mrs. Corinne R. Ramaley for reviewing the manuscript.

1. Síntese de DOX-PA <ol><li> Pesar 390 mg de doxorrubicina e 243 mg de hidrazida de ácido palmítico, e transferir para um balão de fundo redondo. </li><li> Adicionar 150 ml de metanol anidro para o balão com uma seringa de vidro. Adicionar 39 ul de ácido trifluoroacético (TFA), com uma pipeta. Usando um agitador magnético, agita-se a mistura de reacção durante 18 horas à temperatura ambiente no escuro. NOTA: As quantidades de materiais de reacção podem ser ampliados ou reduzidos p...

<ol>
	<li>Hennenfent, K. L., Govindan, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Novel+formulations+of+taxanes:+a+review.+Old+wine+in+a+new+bottle?.">Novel formulations of taxanes: a review. Old wine in a new bottle?.</a> ESMO. 17 (5), 735-749 (2006).</li><li>Paliwal, S. R., Paliwal, R., Agrawal, G. P., Vyas, S. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Liposomal+nanomedicine+for+breast+cancer+therapy.">Liposomal nanomedicine for breast cancer therapy.</a> Nanomedicine. 6 (6), 1085-1100 (2011).</li><li>Mahapatro, A., Singh, D. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biodegradable+nanoparticles+are+excellent+vehicle+for+site+directed+in+vivo+delivery+of+drugs+and+vaccines.">Biodegradable nanoparticles are excellent vehicle for site directed in vivo delivery of drugs and vaccines.</a> J Nanobiotechnology. 9 (55), (2011).</li><li>Danquah, M., Li, F., Duke, C. B., Miller 3rd, ., D, D., Mahato, R. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Micellar+delivery+of+bicalutamide+and+embelin+for+treating+prostate+cancer.">Micellar delivery of bicalutamide and embelin for treating prostate cancer.</a> Pharm Res. 26 (9), 2081-2092 (2009).</li><li>Li, F., Danquah, M., Mahato, R. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synthesis+and+characterization+of+amphiphilic+lipopolymers+for+micellar+drug+delivery.">Synthesis and characterization of amphiphilic lipopolymers for micellar drug delivery.</a> Biomacromolecules. 11 (10), 2610-2620 (2010).</li><li>Li, F., Danquah, M., Singh, S., Hao, W., Mahato, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Paclitaxel-+and+lapatinib-loaded+lipopolymer+micelles+overcome+multidrug+resistance+in+prostate+cancer.">Paclitaxel- and lapatinib-loaded lipopolymer micelles overcome multidrug resistance in prostate cancer.</a> Drug Deliv. and Transl. Res. 1 (6), 9 (2011).</li><li>Li, F., Lu, Y., Li, W., Miller, D. D., Mahato, R. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synthesis,+formulation+and+in+vitro+evaluation+of+a+novel+microtubule+destabilizer,+SMART-100.">Synthesis, formulation and in vitro evaluation of a novel microtubule destabilizer, SMART-100.</a> J Control Release. 143 (1), 151-158 (2010).</li><li>Minko, T., Kopeckova, P., Pozharov, V., Kopecek, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=HPMA+copolymer+bound+adriamycin+overcomes+MDR1+gene+encoded+resistance+in+a+human+ovarian+carcinoma+cell+line.">HPMA copolymer bound adriamycin overcomes MDR1 gene encoded resistance in a human ovarian carcinoma cell line.</a> J Control Release. 54 (2), 223-233 (1998).</li><li>Rosenholm, J. M., Mamaeva, V., Sahlgren, C., Linden, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nanoparticles+in+targeted+cancer+therapy:+mesoporous+silica+nanoparticles+entering+preclinical+development+stage.">Nanoparticles in targeted cancer therapy: mesoporous silica nanoparticles entering preclinical development stage.</a> Nanomedicine. 7 (1), 111-120 (2012).</li><li>Kaur, I. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Issues+and+concerns+in+nanotech+product+development+and+its+commercialization.">Issues and concerns in nanotech product development and its commercialization.</a> J Control Release. 193, 51-62 (2014).</li><li>Jones, M., Leroux, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Polymeric+micelles+-+a+new+generation+of+colloidal+drug+carriers.">Polymeric micelles - a new generation of colloidal drug carriers.</a> Eur J Pharm Biopharm. 48 (2), 101-111 (1999).</li><li>Wang, H., Li, F., Du, C., Mahato, R. I., Huang, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Doxorubicin+and+lapatinib+combination+nanomedicine+for+treating+resistant+breast+cancer.">Doxorubicin and lapatinib combination nanomedicine for treating resistant breast cancer.</a> Mol Pharm. 11 (8), 2600-2611 (2014).</li><li>Ma, P., Rahima Benhabbour, S., Feng, L., Mumper, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=2'-Behenoyl-paclitaxel+conjugate+containing+lipid+nanoparticles+for+the+treatment+of+metastatic+breast+cancer.">2'-Behenoyl-paclitaxel conjugate containing lipid nanoparticles for the treatment of metastatic breast cancer.</a> Cancer Lett. 334 (2), 253-262 (2013).</li><li>Lundberg, B. B., Risovic, V., Ramaswamy, M., Wasan, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+lipophilic+paclitaxel+derivative+incorporated+in+a+lipid+emulsion+for+parenteral+administration.">A lipophilic paclitaxel derivative incorporated in a lipid emulsion for parenteral administration.</a> J Control Release. 86 (1), 93-100 (2003).</li><li>Perche, F., Patel, N. R., Torchilin, V. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Accumulation+and+toxicity+of+antibody-targeted+doxorubicin-loaded+PEG-PE+micelles+in+ovarian+cancer+cell+spheroid+model.">Accumulation and toxicity of antibody-targeted doxorubicin-loaded PEG-PE micelles in ovarian cancer cell spheroid model.</a> J Control Release. 164 (1), 95-102 (2012).</li><li>Gill, K. K., Kaddoumi, A., Nazzal, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mixed+micelles+of+PEG(2000)-DSPE+and+vitamin-E+TPGS+for+concurrent+delivery+of+paclitaxel+and+parthenolide:+enhanced+chemosenstization+and+antitumor+efficacy+against+non-small+cell+lung+cancer+(NSCLC)+cell+lines.">Mixed micelles of PEG(2000)-DSPE and vitamin-E TPGS for concurrent delivery of paclitaxel and parthenolide: enhanced chemosenstization and antitumor efficacy against non-small cell lung cancer (NSCLC) cell lines.</a> Eur J Pharm Sci. 46 (1-2), 67-71 (2012).</li><li>Still, W. C., Kahn, M., Mitra, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rapid+Chromatographic+Technique+for+Preparative+Separations+with+Moderate+Resolution.">Rapid Chromatographic Technique for Preparative Separations with Moderate Resolution.</a> J. Org. Chem. 43 (14), 2923-2925 (1978).</li><li>Morton, L. A., Saludes, J. P., Yin, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Constant+pressure-controlled+extrusion+method+for+the+preparation+of+Nano-sized+lipid+vesicles.">Constant pressure-controlled extrusion method for the preparation of Nano-sized lipid vesicles.</a> J Vis Exp. (64), (2012).</li><li>Ulbrich, K., Etrych, T., Chytil, P., Jelinkova, M., Rihova, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=HPMA+copolymers+with+pH-controlled+release+of+doxorubicin:+in+vitro+cytotoxicity+and+in+vivo+antitumor+activity.">HPMA copolymers with pH-controlled release of doxorubicin: in vitro cytotoxicity and in vivo antitumor activity.</a> J Controlled Release. 87 (1-3), 33-47 (2003).</li><li>Patil, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cellular+Delivery+of+Doxorubicin+via+pH-Controlled+Hydrazone+Linkage+Using+Multifunctional+Nano+Vehicle+Based+on+Poly(beta-L-Malic+Acid).">Cellular Delivery of Doxorubicin via pH-Controlled Hydrazone Linkage Using Multifunctional Nano Vehicle Based on Poly(beta-L-Malic Acid).</a> Int J Mol Sci. 13 (9), 11681-11693 (2012).</li><li>Hu, X., Liu, S., Huang, Y., Chen, X., Jing, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biodegradable+block+copolymer-doxorubicin+conjugates+via+different+linkages:+preparation,+characterization,+and+in+vitro+evaluation.">Biodegradable block copolymer-doxorubicin conjugates via different linkages: preparation, characterization, and in vitro evaluation.</a> Biomacromolecules. 11 (8), 2094-2102 (2010).</li><li>Huynh, L., Neale, C., Pomes, R., Allen, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Computational+approaches+to+the+rational+design+of+nanoemulsions,+polymeric+micelles,+and+dendrimers+for+drug+delivery.">Computational approaches to the rational design of nanoemulsions, polymeric micelles, and dendrimers for drug delivery.</a> Nanomedicine. 8 (1), 20-36 (2012).</li><li>Shi, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+drug-specific+nanocarrier+design+for+efficient+anticancer+therapy.">A drug-specific nanocarrier design for efficient anticancer therapy.</a> Nat Commun. 6, 7449 (2015).</li></ol>

Neste trabalho, nós descrevemos, um método de filme rápida dispersão simples para a preparação de micelas. Este método utiliza as propriedades de auto-montagem de um polímero anfifílico (por exemplo, DSPE-PEG) para formar micelas com núcleo e camadas estruturadas num ambiente aquoso. Este método de preparação de micelas tem várias vantagens. 1. Trata-se de um processo de formulação simples, o que evita a utilização de passos de redução de tamanho (complicados, tais como extrusão ou homogene...

A quimioterapia é utilizada para tratar várias formas de cancro. A maioria, se não todos, os fármacos de quimioterapia têm efeitos secundários tóxicos que podem variar de pequenas condições controláveis, tais como náusea e diarreia, condições que ameaçam a vida mais. Uma vez que a maioria dos fármacos anti-cancerígenos são tóxicos, não-exposição selectiva destes fármacos ao tecido normal, inevitavelmente, provoca toxicidade. Por conseguinte, existe uma grande necessidade de uma abordagem terapêutica que possa entregar drogas selectivamente em células cancerosas. Um outro desafio com a administração de fármacos anti-cancro é a sua fraca solubilidade em água. Normalmente, os agentes de solubilização são necessários para formular estes fármacos pouco solúveis. No entanto, a maioria dos agentes de solubilização, tais como o sulfóxido de dimetilo (DMSO), Cremophor EL, e polissorbato 80 (Tween 80) podem causar toxicidade hepática e renal, hemólise, as reacções de hipersensibilidade aguda e neuropatias periféricas. 1 Assim, formulações seguros e biocompatíveis são necessários para o uso clínico de máfármacos anti-cancerígenos ly solúveis. Nanocarriers são promissores sistemas de entrega de drogas para enfrentar os desafios acima. Estes nanocarriers incluem lipossomas, 2 nanopartículas, 3 micelas, 4-7 conjugados de polímero-droga, 8 e materiais inorgânicos. 9 Vários produtos nanomedicina (por exemplo, DOXIL, Abraxane e Genexol) foram aprovados pelas agências reguladoras para tratar pacientes com câncer. 10 As micelas poliméricas são promissores transportadores de distribuição de drogas de nano-escala, que têm sido utilizados com êxito para a administração de fármacos anti-cancro. 4-7,11,12 micelas poliméricas típicas são preparadas a partir de polímeros anfifílicos através de um processo de auto-montagem. Os core-shell micelas poliméricas estruturadas incluem uma camada hidrófila e um núcleo hidrofóbico. A camada hidrófila pode estabilizar estereoquimicamente micelas e prolongar a sua circulação na corrente sanguínea. O núcleo hidrofóbico pode encapsular eficazmente d hidrofóbicotapetes. Devido ao pequeno tamanho de micelas (normalmente inferiores a 200 nM) e propriedades de longa circulação, micelas poliméricas são acreditados para atingir tumores direccionamento por meio de efeitos de retenção (EPR) (tumor passivo segmentação) e permeabilidade aumentada. A carga de droga a estabilidade é crítica para a capacidade de direccionamento tumoral de micelas. Para alcançar segmentação tumor ideal, micelas deve ter vazamento de drogas mínima antes de chegar ao local do tumor, mas liberte rapidamente a droga depois de entrar células cancerosas. Além disso, a estabilidade da formulação é também um requisito essencial para o desenvolvimento do produto, porque a estabilidade da formulação determina a viabilidade do desenvolvimento do produto, bem como a vida de prateleira de produtos desenvolvidos. Recentemente, muitos esforços têm sido feitos para melhorar o carregamento de medicamentos em transportadores de entrega. A abordagem de pró-fármaco lipofílico é uma estratégia que tem sido explorado para melhorar a carga de fármaco em nanopartículas de lípidos e emulsões. 13,14 O conjugation de lipídios com drogas pode melhorar significativamente a sua lipofilicidade e aumentar a carga e retenção nos componentes lipofílicos de nanocarriers. Aqui, descrevemos um protocolo para a preparação de doxorrubicina lipofílico pró-drogas micelas carregadas. Em primeiro lugar, é descrito o procedimento de síntese para a doxorubicina lipofílico pró-droga. Então, um protocolo para a geração de micelas com um método de película-dispersão é introduzida. Este método tem sido utilizado com sucesso nos estudos anteriores. 5 DSPE-PEG foi seleccionado como o material transportador para a preparação de micelas porque tem sido utilizado com sucesso para a entrega de drogas micela 15,16. Finalmente, descreve-se vários testes in vitro utilizados para caracterizar micela formulações e para avaliar a atividade anticâncer.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="693">
	<tbody>
		<tr height="23">
			<td height="23" style="height:23px;width:216px;">DSPE-PEG2K</td>
			<td style="width:191px;">Cordenpharm</td>
			<td style="width:119px;">LP-R4-039</td>
			<td style="width:167px;">&#62;95%</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Doxorubicin</td>
			<td style="width:191px;">LC Laboratories</td>
			<td style="width:119px;">D-4000</td>
			<td>&#62;99%</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Palmitic Acid Hydrazide</td>
			<td style="width:191px;">TCI AMERICA&#160;&#160;</td>
			<td style="width:119px;">P000425G</td>
			<td>&#62;98.0%</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Methanol</td>
			<td style="width:191px;">ACROS Organics</td>
			<td style="width:119px;">610981000</td>
			<td>Anhydrous</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Methylene chloride&#160;</td>
			<td style="width:191px;">FISHER&#160;</td>
			<td style="width:119px;">D151-4</td>
			<td>99.90%</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Methyl sulfoxide-d6</td>
			<td style="width:191px;">ACROS Organics</td>
			<td style="width:119px;">AC320760075</td>
			<td>NMR solvent</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Trifluoroacetic Acid&#160;</td>
			<td style="width:191px;">ACROS Organics</td>
			<td style="width:119px;">AC293811000</td>
			<td>99.50%</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Silica Gel</td>
			<td style="width:191px;">FISHER&#160;</td>
			<td style="width:119px;">L-7446</td>
			<td>230-400 mesh</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">BAKER FLEX TLC PLATES&#160;</td>
			<td style="width:191px;">FISHER&#160;</td>
			<td style="width:119px;">NC9990129</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">DPBS</td>
			<td style="width:191px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">D8537</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">DU 145&#160; Prostate Cancer Cells</td>
			<td style="width:191px;">ATCC</td>
			<td style="width:119px;">HTB-81</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">MTT</td>
			<td style="width:191px;">ACROS Organics</td>
			<td style="width:119px;">158990050</td>
			<td>98%</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">RPMI 1640 Medium</td>
			<td style="width:191px;">MEDIATECH INC&#160;</td>
			<td style="width:119px;">10041CV</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Antibiotic-Antimycotic&#160;</td>
			<td style="width:191px;">LIFE TECHNOLOGIES&#160;</td>
			<td style="width:119px;">15240062</td>
			<td>100x stock solution</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Fetal Bovine Serum</td>
			<td style="width:191px;">LIFE TECHNOLOGIES&#160;</td>
			<td style="width:119px;">10437077</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Nuclear Magnetic Resonance Spectroscopy</td>
			<td style="width:191px;">Varian, Inc</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>300 NMR&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">B&#252;chi R-3 Rotavapor</td>
			<td style="width:191px;">Buchi</td>
			<td style="width:119px;">1103022V1&#160;</td>
			<td>Rotary evaporator</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Ultrasonic Bath</td>
			<td style="width:191px;">BRANSON ULTRASONICS CORPORATION&#160;</td>
			<td style="width:119px;">CPX952318R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">UV-VIS spectrometer Biomate 3</td>
			<td style="width:191px;">Thermo Spectronic</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Zetasizer Nano ZS90&#160;</td>
			<td style="width:191px;">Malvern Instruments</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>Particle Size Analyer</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Microplate Spectrophotometer&#160;</td>
			<td style="width:191px;">Rio-Rad</td>
			<td style="width:119px;">Benchmark Plus&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Cell Culture Incubator</td>
			<td style="width:191px;">Napco</td>
			<td style="width:119px;">CO2 6000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Biological Safety Cabinet</td>
			<td style="width:191px;">Nuaire</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">SigmaPlot&#160;</td>
			<td style="width:191px;">Systat Software, Inc.</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>Analytical Software</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">96-Well Cell Culture Plate</td>
			<td style="width:191px;">Becton Dickinson</td>
			<td style="width:119px;">353072</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Trypsin&#160; 0.25%</td>
			<td style="width:191px;">Corning Cellgro</td>
			<td style="width:119px;">25-053-CI</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

preparation and characterization of lipophilic doxorubicin pro-drug micelles

Micelles have been successfully used for the delivery of anticancer drugs. Amphiphilic polymers form core-shell structured micelles in an aqueous environment through self-assembly. The hydrophobic core of micelles functions as a drug reservoir and encapsulates hydrophobic drugs. The hydrophilic shell prevents the aggregation of micelles and also prolongs their systemic circulation in vivo. In this protocol, we describe a method to synthesize a doxorubicin lipophilic pro-drug, doxorubicin-palmitic acid (DOX-PA), which will enhance drug loading into micelles. A pH-sensitive hydrazone linker was used to conjugate doxorubicin with the lipid, which facilitates the release of free doxorubicin inside cancer cells. Synthesized DOX-PA was purified with a silica gel column using dichloromethane/methanol as the eluent. Purified DOX-PA was analyzed with thin layer chromatography (TLC) and 1H-Nuclear Magnetic Resonance Spectroscopy (1H-NMR). A film dispersion method was used to prepare DOX-PA loaded DSPE-PEG micelles. In addition, several methods for characterizing micelle formulations are described, including determination of DOX-PA concentration and encapsulation efficiency, measurement of particle size and distribution, and assessment of in vitro anticancer activities. This protocol provides useful information regarding the preparation and characterization of drug-loaded micelles and thus will facilitate the research and development of novel micelle-based cancer nanomedicines.

A Figura 1 mostra o esquema de síntese de DOX-PA. DOX-PA foi sintetizada por conjugação de ácido palmítico com doxorrubicina através de uma ligação de hidrazona sensível a pH. Um ligeiro excesso de hidrazida de ácido palmítico foi usada para facilitar a finalização da reacção. Este método de reacção tem uma eficiência muito elevada e apenas uma pequena quantidade de doxorubicina permaneceu após uma reacção de 18 h (Figura 2). O rend...

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Preparation and Characterization of Lipophilic Doxorubicin Pro-drug Micelles

Um protocolo para a preparação e caracterização de doxorrubicina lipofílico pró-fármaco carregado 1,2-distearoyl--sn-glicero-3-phosphoethanolamine- N - [amino (polietileno glicol) -2000] (DSPE-PEG) micelas é descrito.

Preparação e caracterização de Lipofílica Doxorrubicina micelas Pro-drogas

Micelles have been successfully used for the delivery of anticancer drugs. Amphiphilic polymers form core-shell structured micelles in an aqueous ...

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Construction and Characterization of a Novel Vocal Fold Bioreactor

Construção e Caracterização de um biorreator Fold Novel Vocal

In vitro engineering of mechanically active tissues requires the presentation of physiologically relevant mechanical conditions to cultured cells. To ...

Bioengenharia

Preparation and Characterization of Novel HDL-mimicking Nanoparticles for Nerve Growth Factor Encapsulation

Preparação e caracterização de novas nanopartículas simuladoras de HDL para encapsulação de fatores de crescimento nervoso

The objective of this article is to introduce preparation and characterization methods for nerve growth factor (NGF)-loaded, high-density, lipoprotein ...

Synthesis of Monocyte-targeting Peptide Amphiphile Micelles for Imaging of Atherosclerosis

Síntese de monócitos-direcionamento do Peptide Amphiphile micelas para a imagem latente da aterosclerose

Atherosclerosis is a major contributor to cardiovascular disease, the leading cause of death worldwide, which claims 17.3 million lives annually. ...

Fabrication and Characterization of Optical Tissue Phantoms Containing Macrostructure

Fabricação e caracterização de espectros ópticos de tecido contendo Macrostructure

The rapid development of new optical imaging techniques is dependent on the availability of low-cost, customizable, and easily reproducible standards. By ...

Detection of Endotoxin in Nano-formulations Using Limulus Amoebocyte Lysate (LAL) Assays

Detection of Endotoxin in Nano-formulations Using Limulus Amoebocyte Lysate LAL Assays

Deteção da endotoxina em Nano-formulações usando Limulus Amoebocyte Lysate (LAL) ensaios

When present in pharmaceutical products, a Gram-negative bacterial cell wall component endotoxin (often also called lipopolysaccharide) can cause ...

Growth and Characterization of Irradiated Organoids from Mammary Glands

Crescimento e caracterização de organóides irradiados de glândulas mamárias

Organoids derived from the digested tissue are multicellular three-dimensional (3D) constructs that better recapitulate in vivo conditions than cell ...

Preparation and Characterization of Nanoliposomes for the Entrapment of Bioactive Hydrophilic Globular Proteins

Preparação e caracterização de Nanolipossomas para a aprisionamento de proteínas globulares hidrofílicas bioativas

Liposome nanocapsules have been applied for many purposes in the pharmaceutical, cosmetic, and food industries. Attributes of liposomes include their ...

Focused Ion Beam Lithography to Etch Nano-architectures into Microelectrodes

Litografia de feixe de íons focada para etch nano-arquiteturas em microeletrodos

With advances in electronics and fabrication technology, intracortical microelectrodes have undergone substantial improvements enabling the production of ...

Generation and Quantitative Characterization of Functional and Polarized Biliary Epithelial Cysts

Geração e Caracterização Quantitativa de Cistos Epiteliais Biliar funcionais e polarizados

Cholangiocytes, the epithelial cells that line up the bile ducts in the liver, oversee bile formation and modification. In the last twenty years, in the ...

Temperature-Controlled Assembly and Characterization of a Droplet Interface Bilayer

Montagem controlada por temperatura e caracterização de um Bilayer de interface de gotícula

The droplet interface bilayer (DIB) method for assembling lipid bilayers (i.e., DIBs) between lipid-coated aqueous droplets in oil offers key benefits ...