Name: protocol for isolating the mouse circle of willis
Uploaded: 2016-10-22T14:00:00
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Este trabajo fue apoyado por la Universidad de París VI y una donación de Pierre Fabre Innovación.

Todos los procedimientos se realizaron de conformidad con las normas de la Comunidad Europea para el cuidado y uso de animales de laboratorio, con la aprobación del comité de ética local de la experimentación con animales (Ile de France-Paris-Comité, Autorización 4270). 1. anestesia <ol><li> Infundir una dosis letal de pentobarbital (hasta 1 mg / 10 g de peso corporal) (aguja de calibre 27 y una jeringa de 1 ml) por vía intraperitoneal en ratones adultos antes de la cirugía. </li><...

<ol>
	<li>Beckmann, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Age-dependent+cerebrovascular+abnormalities+and+blood+flow+disturbances+in+APP23+mice+modeling+Alzheimer's+disease.">Age-dependent cerebrovascular abnormalities and blood flow disturbances in APP23 mice modeling Alzheimer's disease.</a> J Neurosci. 23 (24), 8453-8459 (2003).</li><li>Sadasivan, C., Fiorella, D. J., Woo, H. H., Lieber, B. 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Se describe aquí un protocolo reproducible para el aislamiento del círculo de Willis. Los trastornos cerebrovasculares más comunes que implican el CdT son vasculopatías CAA-asociado, aterosclerosis intracraneal y aneurisma intracraneal, todos los cuales afectan a las paredes de los vasos arteriales. Los factores de riesgo son bien conocidos, pero la patogénesis molecular de estos trastornos cerebrales sigue siendo poco conocida y los marcadores biológicos específicos para predecir su ocurrencia son insuficientes....

El círculo arterial cerebral (circulus arterioso cerebri), también conocido como el polígono de Willis (vaca), el lazo de Willisor Willis polígono) fue descrito por primera vez por Thomas Willis en 1664. Es una anastomosis circulatorio situado alrededor del quiasma óptico y el hipotálamo que pueden ser considerado como un eje central el suministro de sangre al cerebro y las estructuras circundantes. La sangre entra en esta estructura a través de la carótida interna y las arterias vertebrales y fluye fuera del círculo a través de la mitad interior y las arterias cerebrales posteriores. Cada una de estas arterias ha ramas izquierda y derecha de cada lado del círculo. El basilar, puesto comunicación, y la comunicación de las arterias completa el círculo anterior (Figura 1 y Figura 2). El riesgo de alteración del flujo sanguíneo en cualquiera de las arterias de salida de flujo se reduce al mínimo por la fusión de sangre que entra en el círculo de la carótida y las arterias cerebrales, garantizando de este modo que la sangre suficiente se suministra a la blluvia. Esta estructura también sirve como la principal vía de flujo sanguíneo colateral en enfermedades oclusivas graves de la arteria carótida interna. Existen varios tipos de trastornos cerebrovasculares tienen su origen en la vaca. Los más comunes son la angiopatía amiloide cerebral (CAA) -asociado vasculopatías, la aterosclerosis intracraneal y los aneurismas intracraneales. 1, 2, 3 Estos trastornos pueden conducir a la hipoperfusión debido a la vasodilatación, e intracerebral y / o hemorragias subaracnoideas en última instancia se traduce en accidentes cerebrovasculares hemorrágicos o isquémicos o , a lo sumo, un ataque isquémico transitorio. Los recientes avances en los procedimientos de diagnóstico, incluyendo neuroimagen, posiblemente combinado con la angiografía, han hecho posible diagnosticar estas enfermedades cerebrovasculares importantes clínicamente, sin la necesidad de una biopsia cerebral. Sin embargo, los tratamientos eficaces y específicos (farmacológicos o endovasculares) la actualidad se carece y por lo tanto hay una necesidad de definir nuevosdianas moleculares. La identificación de nuevos objetivos de medicamentos para la prevención de estas enfermedades en los seres humanos requerirá modelos animales y formas de aislar el cerebro-vascular incluyendo la vaca. Estos modelos deben proporcionar evidencia de pistas y de los cambios específicos, incluyendo los cambios inflamatorios, que se producen en las paredes de los grandes vasos en modelos animales de aneurisma de la arteria intracraneal, AAC o aterosclerosis intracraneal. 4, 5, 6 Hemos establecido un método para el aislamiento CdT ratón para facilitar los estudios de inflamación de los vasos en la enfermedad de Alzheimer (AD) y enfermedades relacionadas, tales como la CAA. Este método para el aislamiento de la CoW ratón fue desarrollado para la evaluación de la expresión génica inflamatoria cerebrovascular durante la progresión de la enfermedad. Junto con la detección de la deposición de amiloide beta dentro de las paredes de las arterias y leptomeníngeo pial, este método podría hacer más fácil para disuadirmina de la posible relación entre la expresión de genes inflamatorios en la pared cerebro-vascular y acumulación de Aß-péptido. La red vascular del cerebro, incluyendo el leptomeníngeo y pial en el espacio subaracnoideo, es una extensión de las grandes arterias que forman el círculo de Willis. El método descrito aquí podría ser utilizado para aislar el CoW de cualquier linaje de ratón y podría ser utilizado para todo tipo de detección (por ejemplo, la expresión génica, la producción de proteínas y las modificaciones postraduccionales de proteínas) en los grandes vasos del ratón cerebro-vascular.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="692">
	<tbody>
		<tr height="46">
			<td height="46" style="height:47px;width:173px;">Dulbecco&#8217;s Phosphate Buffered Saline</td>
			<td style="width:173px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:173px;">D8537</td>
			<td style="width:173px;"></td>
		</tr>
		<tr height="46">
			<td height="46" style="height:47px;width:173px;">Dumont #55 Forceps</td>
			<td style="width:173px;">Fine Science Tools</td>
			<td style="width:173px;">11295-51</td>
			<td style="width:173px;"></td>
		</tr>
		<tr height="46">
			<td height="46" style="height:47px;width:173px;">Hardened Fine Iris Scissors&#160;</td>
			<td style="width:173px;">Fine Science Tools</td>
			<td style="width:173px;">14090-11</td>
			<td style="width:173px;"></td>
		</tr>
		<tr height="46">
			<td height="46" style="height:47px;width:173px;">Scissors - Straight / Sharp / Sharp&#160;&#160; 16.5 cm</td>
			<td style="width:173px;">Fine Science Tools</td>
			<td style="width:173px;">14002-16</td>
			<td style="width:173px;"></td>
		</tr>
		<tr height="46">
			<td height="46" style="height:47px;width:173px;">Dumont #7b Forceps&#160;</td>
			<td style="width:173px;">Fine Science Tools</td>
			<td style="width:173px;">11270-20</td>
			<td style="width:173px;"></td>
		</tr>
		<tr height="46">
			<td height="46" style="height:47px;width:173px;">Stereoscopic Zoom Microscope</td>
			<td style="width:173px;">Nikon</td>
			<td style="width:173px;">SMZ745T</td>
			<td style="width:173px;"></td>
		</tr>
		<tr height="46">
			<td height="46" style="height:47px;width:173px;">CellBIND Surface 60mm Culture Dish</td>
			<td style="width:173px;">Corning</td>
			<td style="width:173px;">#3295</td>
			<td style="width:173px;"></td>
		</tr>
		<tr height="46">
			<td height="46" style="height:47px;width:173px;">Peristaltic Pump - MINIPULS 3</td>
			<td style="width:173px;">Gilson</td>
			<td style="width:173px;">M312</td>
			<td style="width:173px;"></td>
		</tr>
		<tr height="46">
			<td height="46" style="height:47px;width:173px;">Pentobarbital Sodique</td>
			<td style="width:173px;">Ceva Sant&#233; Animale</td>
			<td style="width:173px;">FR/V/2770465 3/1992</td>
			<td style="width:173px;"></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

protocol for isolating the mouse circle of willis

El círculo arterial cerebral (circulus arterioso cerebral) o círculo de Willis (vaca) es una anastomosis circulatorio que rodea el quiasma óptico y el hipotálamo que suministra sangre al cerebro y las estructuras circundantes. Se ha implicado en varios trastornos cerebrovasculares, incluyendo angiopatía cerebral amiloide (CAA) vasculopatías -asociado, aterosclerosis intracraneal y aneurismas intracraneales. Los estudios de los mecanismos moleculares que subyacen a estas enfermedades para la identificación de nuevas dianas farmacológicas para su prevención requieren modelos animales. Algunos de estos modelos puede ser transgénico, mientras que otros implican el aislamiento del cerebro-vascular, incluyendo el método CoW.The descrito aquí es adecuado para el aislamiento de vaca en cualquier linaje de ratón y tiene un potencial considerable para el cribado (expresión de genes, la producción de proteínas, proteínas modificaciones posteriores a la traducción, análisis secretoma, etc.) los estudios sobre los grandes vasos del cerebro-ratónvasculatura. También se puede utilizar para estudios ex vivo, mediante la adaptación del sistema de baño de órganos aislados desarrollado para arterias olfativas ratón.

<html> El ratón perfundidos con PBS se mata y se aísla la vaca como se describe en la sección 3.2 del protocolo. Cuando la disección se realiza correctamente, la vaca debe salir en una sola pieza y debe ser ligeramente transparente debido a la ausencia de sangre residual en la vasculatura. <img alt="Figura 2" src="/files/ftp_upload/54352/54352fig2.jpg" /> Figura 2: La vaca del ratón después d...

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Protocol for Isolating the Mouse Circle of Willis

We describe here a reproducible protocol for isolating the mouse circle of Willis.

Protocolo para el aislamiento del Círculo de Willis Ratón

The cerebral arterial circle (circulus arteriosus cerebri) or circle of Willis (CoW) is a circulatory anastomosis surrounding the optic chiasma and ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

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Sensación operante Buscando en el ratón

Operant methods are powerful behavioral tools for the study of motivated behavior.  These 'self-administration' methods have been used extensively in drug ...

Investigación

Neurociencias

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El dispositivo de TMS NeuroStar: Realización de la FDA aprobó el Protocolo para el tratamiento de la depresión

The Neuronetics NeuroStar Transcranial Magnetic Stimulation (TMS) System is a class II medical device that produces brief duration, pulsed magnetic ...

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