Name: murine experimental model of original tumor development and peritoneal metastasis via orthotopic inoculation with ovarian carcinoma cells
Uploaded: 2016-12-09T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Murine Experimental Model of Original Tumor Development and Peritoneal Metastasis via Orthotopic Inoculation with Ovarian Carcinoma Cells at JoVE.com

המחברים מודים לחברי מחלקת נשים ויולדות וביולוגיה סרטן לדיונים שלהם מסייע סיוע טכני. מחקר זה נתמך על ידי האגודה יפן לקידום המדע (JSPs) גרנט ב- Aid למחקר מדעי (15K15604; לה &#39;Kajiyama).

פרוטוקול הטיפול פועל בהתאם להנחיות לניסויים בבעלי חיים שאימצה נאגויה האוניברסיטה. 1. הכנת השעיות תא <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שורת תאים ברורה תא קרצינומה שחלות אדם. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;...

<ol>
	<li>Jemal, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Global+cancer+statistics.">Global cancer statistics.</a> CA Cancer J Clin. 61 (2), 69-90 (2011).</li><li>Kajiyama, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long-term+clinical+outcome+of+patients+with+recurrent+epithelial+ovarian+carcinoma:+is+it+the+same+for+each+histological+type.">Long-term clinical outcome of patients with recurrent epithelial ovarian carcinoma: is it the same for each histological type.</a> Int J Gynecol Cancer. 22 (3), 394-399 (2012).</li><li>Kikkawa, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Advances+in+treatment+of+epithelial+ovarian+cancer.">Advances in treatment of epithelial ovarian cancer.</a> Nagoya J Med Sci. 68 (1-2), 19-26 (2006).</li><li>Yoshikawa, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clinicopathologic+features+of+epithelial+ovarian+carcinoma+in+younger+vs.+older+patients:+analysis+in+Japanese+women.">Clinicopathologic features of epithelial ovarian carcinoma in younger vs. older patients: analysis in Japanese women.</a> J Gynecol Oncol. 25 (2), 118-123 (2014).</li><li>Kajiyama, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Involvement+of+SDF-1alpha/CXCR4+axis+in+the+enhanced+peritoneal+metastasis+of+epithelial+ovarian+carcinoma.">Involvement of SDF-1alpha/CXCR4 axis in the enhanced peritoneal metastasis of epithelial ovarian carcinoma.</a> Int J Cancer. 122 (1), 91-99 (2008).</li><li>Terauchi, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Possible+involvement+of+TWIST+in+enhanced+peritoneal+metastasis+of+epithelial+ovarian+carcinoma.">Possible involvement of TWIST in enhanced peritoneal metastasis of epithelial ovarian carcinoma.</a> Clin Exp Metastasis. 24 (5), 329-339 (2007).</li><li>Bronstein, L., Zechner, C., Koeppl, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bayesian+inference+of+reaction+kinetics+from+single-cell+recordings+across+a+heterogeneous+cell+population.">Bayesian inference of reaction kinetics from single-cell recordings across a heterogeneous cell population.</a> Methods. 85, 22-35 (2015).</li><li>Guo, W., Zhang, S., Liu, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Establishment+of+a+novel+orthotopic+model+of+breast+cancer+metastasis+to+the+lung.">Establishment of a novel orthotopic model of breast cancer metastasis to the lung.</a> Oncol Rep. 33 (6), 2992-2998 (2015).</li><li>Lewis-Tuffin, L. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Src+family+kinases+differentially+influence+glioma+growth+and+motility.">Src family kinases differentially influence glioma growth and motility.</a> Mol Oncol. , (2015).</li><li>Saar, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Orthotopic+tumorgrafts+in+nude+mice:+A+new+method+to+study+human+prostate+cancer.">Orthotopic tumorgrafts in nude mice: A new method to study human prostate cancer.</a> Prostate. 75 (14), 1526-1537 (2015).</li><li>Zou, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=miR-29c+suppresses+pancreatic+cancer+liver+metastasis+in+an+orthotopic+implantation+model+in+nude+mice+and+affects+survival+in+pancreatic+cancer+patients.">miR-29c suppresses pancreatic cancer liver metastasis in an orthotopic implantation model in nude mice and affects survival in pancreatic cancer patients.</a> Carcinogenesis. 36 (6), 676-684 (2015).</li><li>Lau, D. H., Lewis, A. D., Ehsan, M. N., Sikic, B. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multifactorial+mechanisms+associated+with+broad+cross-resistance+of+ovarian+carcinoma+cells+selected+by+cyanomorpholino+doxorubicin.">Multifactorial mechanisms associated with broad cross-resistance of ovarian carcinoma cells selected by cyanomorpholino doxorubicin.</a> Cancer Res. 51 (19), 5181-5187 (1991).</li><li>Bao, L., Matsumura, Y., Baban, D., Sun, Y., Tarin, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+inoculation+site+and+Matrigel+on+growth+and+metastasis+of+human+breast+cancer+cells.">Effects of inoculation site and Matrigel on growth and metastasis of human breast cancer cells.</a> Br J Cancer. 70 (2), 228-232 (1994).</li><li>Huang, M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epidemiological+investigation+on+major+depressive+disorder+in+the+most+heavily+damaged+areas+from+Wenchuan+earthquake+in+2008.">Epidemiological investigation on major depressive disorder in the most heavily damaged areas from Wenchuan earthquake in 2008.</a> Zhonghua Liu Xing Bing Xue Za Zhi. 31 (2), 167-170 (2010).</li><li>Ma, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mortality+of+neonatal+respiratory+failure+related+to+socioeconomic+factors+in+Hebei+province+of+China.">Mortality of neonatal respiratory failure related to socioeconomic factors in Hebei province of China.</a> Neonatology. 100 (1), 14-22 (2011).</li><li>Lin, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Serum+levels+of+FGF-21+are+increased+in+coronary+heart+disease+patients+and+are+independently+associated+with+adverse+lipid+profile.">Serum levels of FGF-21 are increased in coronary heart disease patients and are independently associated with adverse lipid profile.</a> PLoS One. 5 (12), e15534 (2010).</li><li>Liu, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lumbar+interspinous+non-fusion+techniques:+comparison+between+Coflex+and+Wallis.">Lumbar interspinous non-fusion techniques: comparison between Coflex and Wallis.</a> Nan Fang Yi Ke Da Xue Xue Bao. 30 (11), 2455-2458 (2010).</li><li>Zhang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Wave+intensity+analysis+of+carotid+artery:+a+noninvasive+technique+for+assessing+hemodynamic+changes+of+hyperthyroid+patients.">Wave intensity analysis of carotid artery: a noninvasive technique for assessing hemodynamic changes of hyperthyroid patients.</a> J Huazhong Univ Sci Technolog Med Sci. 30 (5), 672-677 (2010).</li><li>Song, G. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparative+transcriptional+profiling+and+preliminary+study+on+heterosis+mechanism+of+super-hybrid+rice.">Comparative transcriptional profiling and preliminary study on heterosis mechanism of super-hybrid rice.</a> Mol Plant. 3 (6), 1012-1025 (2010).</li><li>Wan, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+analysis+of+variation+of+Han+female+adolescent+bone+development+in+Henan+and+Zhejiang+province.">The analysis of variation of Han female adolescent bone development in Henan and Zhejiang province.</a> Fa Yi Xue Za Zhi. 26 (2), 97-99 (2010).</li><li>Wang, H. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Excitation-emission+fluorescence+characterization+study+of+the+three+phenolic+compounds.">Excitation-emission fluorescence characterization study of the three phenolic compounds.</a> Guang Pu Xue Yu Guang Pu Fen Xi. 30 (5), 1271-1274 (2010).</li></ol>

במודלים של בעלי חיים חיוניים כדי לנתח את מנגנוני התפתחות גידולים, התקדמות, גרורות, וכן יעילות התרופה כנגד תאים סרטניים. בעכברים נושאי בתאי סרטן שחלות אדם גם שמשו במודל חיה. כאן אנו מתארים הליך פולשני פחות עבור הממשל של תאים סרטניים בשחלות ב אתר orthotopic. באמצעות הליך זה, ?...

קרצינומה שחלות אפיתל (EOC) מסבירה את השיעור הגבוה ביותר של תמותה מסרטן בקרב ממאירויות גינקולוגיות 1. EOC מזוהה עם פרוגנוזה גרועה, בעיקר בשל הסימפטומים שלה מאוחר, והיא קשורה לעיתים קרובות עם disseminations intraperitoneal מרובים גרורות מרוחקות 2-4. הפצת הצפק היא תהליך רב שלבים. ראשית, תאים סרטניים להתנתק גוש הראשוני, ולהעביר לתוך חלל הבטן. כאשר התאים הסרטניים לצרף mesothelium הצפק, הם מתחילים לפלוש לרקמות דרך 5,6 mesothelium. על מנת להבין טוב יותר את הביולוגיה של הגידול (למשל, התקדמות סרטן תגובה לטיפול), במודלים של עכברים מספקים שפע של מידע. Xenograft עם תאים סרטניים אנושיים נעשה שימוש נרחב עבור מודלי עכבר שבו תאים סרטניים אנושיים הם מחוסנים תת עורי, intraperitoneally, לתוך וריד, orthotopically. במודל חיה עם g orthotopicallyגידול rafted יכול יותר ביעילות ובדייקנות ליצור לתוצאות המשקפות את סביבת גידול באדם בהשוואה במודל חיה עם גידול מורכב heterotopically. לכן, עבור גידולים אנושיים רבים, מודלי השתלת orthotopic הוקמו 7-11. כאן, אנו מתארים את חיסון orthotopic של תאים אנושיים EOC באמצעות גישה retroperitoneal מסירה מאגף הגבי, אשר הגביל הפולשנות לעומת חיסון הגחון. טכניקה זו יכולה לספק מגוון רחב של מידע שימושי על EOC, במיוחד מנגנון הפצת intraperitoneal.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="744">
	<tbody>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:268px;">Matrigel matrix&#160;</td>
			<td style="width:151px;">BD</td>
			<td style="width:163px;">354234</td>
			<td style="width:163px;">ECM-based hydrogel</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Insulin syringe</td>
			<td>TERUMO</td>
			<td>SS-05M2913</td>
			<td>1/2cc, 29Gx1/2&#34;</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Suturing needle with suture</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>11mm, 3/8, Nylon6-0</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Reflex 7mm Wound Clip Applier</td>
			<td>CellPoint Scientific</td>
			<td>204-1000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">&#160;Reflex 7mm wound clips</td>
			<td>CellPoint Scientific</td>
			<td>203-1000</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

murine experimental model of original tumor development and peritoneal metastasis via orthotopic inoculation with ovarian carcinoma cells

קרצינומה השחלות אפיתל (EOC) קשורה עם פרוגנוזה גרועה כי זה מראה הפצת הצפק. כדי לשפר את סיכויי ההחלמה, חשוב לשלוט בהפצת הצפק. עם זאת, עדיין לא ברור כיצד תאים סרטניים להתנתק נגעים ראשוניים לצרף mesothelium. הקמת מודל חיה מתאים נדרשה כדי להשיג הבנה של המנגנון של הפצת הצפק in vivo. במחקר הנוכחי, אנחנו מציגים את התהליך מן הזריקה המקומית של תאי EOC לתוך שטח שחלות murine להתפתחות גרורה, כולל הצפק לאיברים מרוחקים. עכברים עירום נשי (BALB / c נו / נו) אחרי 8 שבועות של גיל היו בשימוש. תחת שדה מיקרוסקופי מבט, תאי EOC (1 x 10 5 תאים / μl של מטריקס הבינוני-תאי (ECM) מבוסס הידרוג&#39;ל / השחלה חד-צדדית / עכבר) הוזרקה השחלות בעכברים באמצעות גישת retroperitoneal מסיר המאגף הגבה. השיטה המוצעת זהו leהליך ss פולשני העכבר ממזער נזקים השחלה. כאן אנו מתארים את השלבים מתודולוגיים בפיתוח של היווצרות הגידול המקורי גרורתי של EOC.

<html> שישה עכברים בעירום חסנו השחלות שלהם עם תאי תאי קרצינומה הקו ברור הגזע עוברי-2, כמתואר בפרוטוקול זה. כפי שניתן לראות בתרשים 1 א &#39;, לאחר 2 שבועות, 5 מתוך 6 העכברים היה גידול בשחלה מחוסן עם ES-2 תאים, אבל לא היה גידול בשחלה הנגדי ללא חיסון (ששימשו...

Watch this Scientific Journal Video about Murine Experimental Model of Original Tumor Development and Peritoneal Metastasis via Orthotopic Inoculation with Ovarian Carcinoma Cells at JoVE.com

Murine Experimental Model of Original Tumor Development and Peritoneal Metastasis via Orthotopic Inoculation with Ovarian Carcinoma Cells

כדי להבהיר את תהליך רב שלבי של הפצת הצפק של קרצינומה השחלות, המחקר הנוכחי מציג מודל ניסיוני בעכברים של התפתחות גידולים המקורי וגרורות הצפק באמצעות חיסון orthotopic עם תאים סרטניים אלה.

Murine ניסיוני דגם של התפתחות גידולים מקורית גרור הצפק<em&gt; דרך</em&gt; Orthotopic הרכבה עם קרצינומה של תאי השחלות

Epithelial ovarian carcinoma (EOC) is associated with a poor prognosis because it shows peritoneal dissemination. To improve the prognosis, it is ...

The overall goal of this procedure is to observe the development of original and metastatic tumor formation in epithelial ovarian carcinoma.This method can help answer key questions in the gynecologic oncological field, such as understanding the tumor biology or peritoneal defemenation.The main advantage of this technique is that orospatic inoculation of human epithelial ovarian carcinoma, or EOC cells, is performed through a retroperitoneal approach grown with a dorsal flank.To prepare a human ovarian clear cell carcinoma cell line, plate and maintain ES2 cells in RPMI-1640 medium with 10%FBS and PenStrep at 37 degrees Celsius, and 5%CO2.In the logarithmic growth phase, remove the old medium from the culture and use three to four millimeters of PBS to wash the cells once.Next, add one millimeter of trypsin/EDTA and rock the vessel to cover the entire monolayer.Remove and discard the trypsin solution and return the cells to the incubator for three to five minutes.After examining the cells under a microscope to ensure the cells have detached and are floating, add five millimeters of fresh serum-containing growth medium to inactivate the trypsin and re-suspend the cells before transferring them to a 15-millimeter conical tube.Centrifuge the suspension at 300 times G and room temperature

Research

JoVE Journal

Cancer Research

Murine Experimental Model of Original Tumor Development and Peritoneal Metastasis via Orthotopic Inoculation with Ovarian Carcinoma Cells

In Vivo Model for Testing Effect of Hypoxia on Tumor Metastasis

In Vivo Model for Testing Effect of Hypoxia on Tumor Metastasis

In vivo מודל השפעת בדיקה של היפוקסיה על גרורות של גידולים

Hypoxia has been implicated in the metastasis of Ewing sarcoma (ES) by clinical observations and in vitro data, yet direct evidence for its pro-metastatic ...

A Murine Orthotopic Bladder Tumor Model and Tumor Detection System

מודל גידול Murine Orthotopic שלפוחית ​​השתן סרטן מערכת איתור

This protocol describes the generation of bladder tumors in female C57BL/6J mice using the murine bladder cancer cell line MB49, which has been modified ...

Isolation of Circulating Tumor Cells in an Orthotopic Mouse Model of Colorectal Cancer

בידוד של תאים סרטניים במחזור מודל עכבר אורתופטי של סרטן המעי הגס

Despite the advantages of easy applicability and cost-effectiveness, subcutaneous mouse models have severe limitations and do not accurately simulate ...

Acellular and Cellular Lung Model to Study Tumor Metastasis

דגם לונג acellular וסלולריות ללמוד גרורות הגידול

It is difficult to isolate tumor cells at different points of tumor progression. We created an ex vivo lung model that can show the interaction of tumor ...

Intramucosal Inoculation of Squamous Cell Carcinoma Cells in Mice for Tumor Immune Profiling and Treatment Response Assessment

חיסון intramucosal של תאי קרצינומה של תאים קשקשיים עכברים עבור פרופיל החיסונית הגידול והערכת התגובה לטיפול

Head and neck squamous cell carcinoma (HNSCC) is a debilitating and deadly disease with a high prevalence of recurrence and treatment failure. To develop ...

Patient-derived Orthotopic Xenograft Models for Human Urothelial Cell Carcinoma and Colorectal Cancer Tumor Growth and Spontaneous Metastasis

מטופל-נגזר אורתוטופית מודלים של תאים האדם Urothelial קרצינומה של סרטן המעי הגס ואת הגידול גרורות ספונטנית

Cancer patients have poor prognoses when lymph node (LN) involvement is present in both high-grade urothelial cell carcinoma (HG-UCC) of the bladder and ...

Micromanipulation of Circulating Tumor Cells for Downstream Molecular Analysis and Metastatic Potential Assessment

מיקרומניפולציה של במחזור תאים סרטניים לניתוח מולקולרי במורד הזרם והערכה פוטנציאלית גרורתית

Blood-borne metastasis accounts for&#160;most cancer-related deaths and involves circulating tumor cells (CTCs) that are successful in establishing new ...

Multidimensional Coculture System to Model Lung Squamous Carcinoma Progression

מערכת מרב התרבות Coculture מודל ריאות קשקש התקדמות קרצינומה

Tumor-stroma interactions play a critical role in the development of lung squamous carcinoma (LUSC). However, understanding how these dynamic interactions ...

A Syngeneic Orthotopic Osteosarcoma Sprague Dawley Rat Model with Amputation to Control Metastasis Rate

מודל עכברוש אוסטאוסרקומה סנגנית אורתוטופית עם קטיעה כדי לשלוט בקצב גרורות

The most recent advance in the treatment of osteosarcoma (OS) occurred in the 1980s when multi-agent chemotherapy was shown to improve overall survival ...

Generation of an Orthotopic Xenograft of Pancreatic Cancer Cells by Ultrasound-Guided Injection

Pancreatic cancer (PCa) represents one of the deadliest cancer types worldwide. The reasons for PCa malignancy mainly rely on its intrinsic malignant ...