Name: experimental infection with listeria monocytogenes as a model for studying host interferon-&#947; responses
Uploaded: 2016-11-16T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Experimental Infection with Listeria monocytogenes as a Model for Studying Host Interferon-ÃŽÂ³ Responses at JoVE.com

Development of this protocol was supported by an operating grant from CIHR (MOP97807) to SED.

بيان السلامة يصف هذا البروتوكول إصابة الفئران مع المستوحدة L. الحية. تتم معالجة العوامل المسببة للأمراض بأمان في ظل ظروف BSL2 من قبل أفراد مدربين الذين لا يعانون من نقص المناعة. تشمل الأشخاص القليلي المناعة النساء الحوامل وكبار...

نحن هنا وصف بروتوكول لكيفية إجراء العدوى التجريبية الأساسية مع سلالة EGD من L. اللستيريا 25 في الذكور أو الإناث C57BL / 6J الفئران. تم تعيين هذا البروتوكول لهذا الغرض من دراسة تأثير رواية IS001 جزيء صغير على إنتاج الإنترفيرون γ بواسطة الخلايا الليمفاوية الفطرية وال?...

IFN-γ هو خلوى أن أمر حاسم للوساطة مناعة ضد مسببات الأمراض داخل الخلايا والسيطرة على نمو الورم 5. أهمية هذا خلوى في مقاومة البكتيريا هو واضح في الملاحظة بأن البشر مع طفرات في إشارة مسار IFN-γ هي عرضة للإصابة مع المتفطرات وsalmonellae 6. وبالمثل، الفئران التي تعاني من نقص في أي من الإنترفيرون γ أو العيوب مستقبلات المعرض الإنترفيرون جاما في مقاومة المتفطرات 7-9 وغيرها من مسببات الأمراض داخل الخلايا بما في ذلك L. المستوحدة 10،11، الليشمانيا الرئيسي 12، السالمونيلا التيفية الفأرية 13، وبعض الفيروسات 11. بالإضافة إلى مسببات الأمراض مكافحة، يلعب IFN-γ دورا حاسما في الدفاع المضيف ضد الأورام 14. على الرغم من ارتفاع إنتاج الإنترفيرون γ هو مفيد في سياق العدوى أو السرطان، والإنتاج لفترات طويلة من هذا خلوى ارتبط رس تطوير مناعة ذاتية جهازية 15-17 وتسارع من نوع الأول من مرض السكري في غير البدناء نموذج الفأر السكري 18. وتشمل المصادر الرئيسية للIFN-γ الخلايا القاتلة الطبيعية، والخلايا NKT، γδ خلايا T، المساعد 1 خلايا T (TH1)، والخلايا الليمفاوية التائية السامة (CTL) 5،19،20. IFN-γ يعزز كلا المناعة الفطرية والتكيفية من (1)، حتى تنظيم التوافق النسيجي الرئيسي المعقدة (MHC) من الدرجة الأولى والثانية التعبير، (2) زيادة التعبير عن جزيئات شارك في تنشيطية على خلايا مقدمة للمستضد، (3) تعزيز البلاعم العوامل البلعمة وإنتاج السيتوكينات الموالية للالتهابات وميكروبات (على سبيل المثال، وأكسيد النيتريك وأنواع الاكسجين التفاعلية)، (4) تعزيز تمايز الخلايا CD4 + T ساذجة إلى خلايا المستجيب TH1، (5) تشجيع التحول من الدرجة الأجسام المضادة للالمناعي ( IG) 2A و IgG3 (في الماوس)، (6) يحفز إنتاج كيموكينات لتجنيد الخلايا المناعية لمواقع طnfection، و (7) تعزيز الخلايا القاتلة الطبيعية وردود CTL 5،19. نظرا للأهمية الحاسمة من الإنترفيرون γ في استجابة المضيف لمسببات الأمراض والأورام، وقد تم اختبار المؤتلف الإنترفيرون γ كعلاج لمختلف الأمراض والأورام الخبيثة (التي استعرضت في 19). ومع ذلك، لأن إدارة النظامية من الإنترفيرون γ أو TH1 تعزيز خلوى انترلوكين 12 (IL-12) ويرتبط مع الآثار الجانبية والسمية 19،21 المتعلقة جرعة، هناك مصلحة في وضع استراتيجيات بديلة لزيادة إنتاج الإنترفيرون جاما من قبل الخلايا المناعية. تطوير البيولوجية الجديدة والجزيئات الصغيرة تتطلب في أدوات فيفو فحص لاختبار ما إذا كان هذه العوامل زيادة إنتاج الإنترفيرون γ خلال الاستجابة المناعية وإذا كان هذا يترجم إلى تأثيرات بيولوجية ذات مغزى مثل الزيادات في البقاء على قيد الحياة الحيوانية. وكانت العدوى التجريبية من الفئران مع بكتيريا اللستيريا L. إيجابية الجرام نموذج فعال لفك رموز دور الإنترفيرون γ في المضيف مناعة ضد مسببات الأمراض داخل الخلايا 1،22. إصابة الفئران مع الممرض عن طريق الوريد أو داخل الصفاق (IP) يؤدي إلى الانتشار السريع للبكتيريا إلى الطحال والكبد، حيث تصبح داخليا من قبل الضامة المقيمة وخلايا الكبد مع الحمل البكتيري الذروة في الطحال التي تحدث بين 3 و 4 أيام مرحلة ما بعد عدوى 1،3،22. إنتاج الإنترفيرون γ بواسطة الخلايا القاتلة الطبيعية مهم لتنشيط البلاعم والمقاومة الأولى ضد الممرض 3؛ ولكن في جرعات المعدية العالية، وإنتاج الإنترفيرون γ يمكن أيضا أن يكون ضارا لإزالة مسببات المرض 23. خلايا NKT هي أيضا مصدر من الإنترفيرون γ في الطحال والكبد أثناء المكافحة المبكرة من مسببات الأمراض 2،24 ولقد ثبت هذا الإنتاج لتضخيم إنتاج الإنترفيرون γ من أنواع الخلايا الأخرى بما في ذلك الخلايا القاتلة الطبيعية (2). من ناحية أخرى، في وقت لاحق المفعول الخلايا اللمفية تي التكيف، وخلايا CD8 + T في حزبدائرية، هي مهمة للوساطة في تخليص الممرض وتوفير الحماية ضد 1،4،22 إعادة العدوى. وكان هذا النموذج العدوى جذابة للباحثين لعدد من الأسباب (التي استعرضت في 1). أولا، والعدوى مع الممرض هو تكرار للغاية ويؤدي الى استجابة مناعية قوية Th1 و الخلوية. ثانيا، خلال العدوى دون المميت، يتركز الحمل البكتيري في الكبد والطحال حيث يمكن قياسه بسهولة. ثالثا، الممرض يمكن التعامل معها بأمان تحت السلامة الأحيائية المستوى 2 (BSL2) الظروف. رابعا، إن الكائن الحي والاستجابة المناعية أنه يولد اتسمت على نطاق واسع. وأخيرا، وضعت مجموعة متنوعة من سلالات متحولة والمعدلة وراثيا التي تتوفر للاستخدام. وصفت هنا هو بروتوكول الأساسي للتلقيح C57BL / 6J الفئران بسلالة EGD من L. اللستيريا 25 ولقياس IFN - γ إعادةردود الأفعال التي كتبها NK، NKT، والخلايا الليمفاوية على التكيف في مرحلة ما بعد الإصابة. كما وصفت هو كيفية قياس الحمولة الجرثومية في الطحال والكبد بعد الإصابة دون المميت وإجراء دراسات البقاء على قيد الحياة بعد الإصابة مع تعديل LD 50 جرعة من العوامل المسببة للأمراض. وأخيرا، أظهرت بيانات تمثيلية لكيفية هذا البروتوكول يمكن استخدامها لفحص تأثير علاجات جديدة على الردود IFN-γ والبقاء على قيد الحياة الماوس من L. المستوحدة العدوى.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="923">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:353px;">Brain Heart Infusion Broth, Modified</td>
			<td style="width:191px;">BD</td>
			<td style="width:107px;">299070</td>
			<td style="width:273px;">any brand should be appropriate</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Agar</td>
			<td>BD</td>
			<td style="width:107px;">214010</td>
			<td>any brand should be appropriate</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:353px;">Triton X-100</td>
			<td style="width:191px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:107px;">X100</td>
			<td>any brand should be appropriate</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:353px;">1xPBS</td>
			<td style="width:191px;">Sigma</td>
			<td style="width:107px;">D8537</td>
			<td>any brand should be appropriate</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:353px;">TissueLyser II</td>
			<td style="width:191px;">Qiagen</td>
			<td style="width:107px;">85300</td>
			<td>any brand should be appropriate</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:353px;">Ammonium Chloride (NH3Cl)</td>
			<td style="width:191px;"></td>
			<td style="width:107px;"></td>
			<td>any brand should be appropriate</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:353px;">KHCO3</td>
			<td style="width:191px;"></td>
			<td style="width:107px;"></td>
			<td>any brand should be appropriate</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:353px;">Na2EDTA</td>
			<td style="width:191px;"></td>
			<td style="width:107px;"></td>
			<td>any brand should be appropriate</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:353px;">RPMI 1640</td>
			<td style="width:191px;">Gibco</td>
			<td style="width:107px;">22400089</td>
			<td>any brand should be appropriate</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:353px;">Fetal Bovine Serum&#160;</td>
			<td style="width:191px;">Gibco</td>
			<td style="width:107px;">12483</td>
			<td>Before use, heat-inactivate at 56 &#176;C for 30 min</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:353px;">L-glutamine</td>
			<td style="width:191px;">Gibco</td>
			<td style="width:107px;">25030</td>
			<td>any brand should be appropriate</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:353px;">Non-essential amino acids</td>
			<td style="width:191px;">Gibco</td>
			<td style="width:107px;">11140</td>
			<td>any brand should be appropriate</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:353px;">Penicillin/Streptomycin</td>
			<td style="width:191px;">Gibco</td>
			<td style="width:107px;">15140</td>
			<td>any brand should be appropriate</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:353px;">GolgiStop Protein Transport Inhibitor (containing Monensin)</td>
			<td style="width:191px;">BD</td>
			<td style="width:107px;">554724</td>
			<td>Use 4 &#956;l in 6 ml cell culture</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:353px;">16% Paraformaledehye</td>
			<td style="width:191px;">Electron Microscopy Sciences</td>
			<td style="width:107px;">15710</td>
			<td>Dilute to 4% PFA in ddH20 or 1xPBS</td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;width:353px;">10 x Perm/Wash buffer</td>
			<td style="width:191px;">BD</td>
			<td style="width:107px;">554723</td>
			<td>Dilute 10x in ddH20</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:353px;">Fc block, Anti-Mouse CD16/CD32 Purified</td>
			<td style="width:191px;">eBioscience</td>
			<td style="width:107px;">14-0161</td>
			<td>Dilute 1:50</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:353px;">Fixable Viability Dye eFluor 506</td>
			<td style="width:191px;">eBioscience</td>
			<td style="width:107px;">65-0866</td>
			<td>Dilute 1:1000 (we have also used viability dyes from Molecular Probes)</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:353px;">anti-Mouse CD4-PE-Cy5 (GK1.5)</td>
			<td style="width:191px;">eBioscience</td>
			<td style="width:107px;">15-0041</td>
			<td>Manufacturer recommends a certain test size; however this should be titrated before use.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:353px;">anti-Mouse CD8-FITC (53-6.7)</td>
			<td style="width:191px;">eBioscience</td>
			<td style="width:107px;">11-0081</td>
			<td>Manufacturer recommends a certain test size; however this should be titrated before use.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:353px;">PBS57/mCD1d tetramer-APC</td>
			<td style="width:191px;">NIH Tetramer Core Facility</td>
			<td style="width:107px;">N/A</td>
			<td>Obtained as a gift from the facility</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">anti-Mouse TCR&#946;-PE-Cy7 (H56-597)</td>
			<td style="width:191px;">eBioscience</td>
			<td style="width:107px;">25-5961</td>
			<td>Manufacturer recommends a certain test size; however this should be titrated before use.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">anti-Mouse NKp46-APC-eFluor780 (29A1.4)</td>
			<td style="width:191px;">eBioscience</td>
			<td style="width:107px;">47-3351</td>
			<td>Manufacturer recommends a certain test size; however this should be titrated before use.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:353px;">anti-Mouse CD45 PE-Cyanine7 (30-F11)</td>
			<td style="width:191px;">eBioscience</td>
			<td style="width:107px;">25-0451</td>
			<td>Manufacturer recommends a certain test size; however this should be titrated before use.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:353px;">anti-Mouse IFN gamma-PE (XMG1.2)</td>
			<td style="width:191px;">eBioscience</td>
			<td style="width:107px;">12-7311</td>
			<td>Manufacturer recommends a certain test size; however this should be titrated before use.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:353px;">OneComp eBeads</td>
			<td style="width:191px;">eBioscience</td>
			<td style="width:107px;">01-1111</td>
			<td>Manufacturer recommends a certain test size; however this should be titrated before use.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:353px;">Mouse IFN gamma ELISA kit</td>
			<td style="width:191px;">eBioscience</td>
			<td>88-7314</td>
			<td>Used for measuring the interferon gamma in the culture supernatant</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:353px;">50 mL vented tubes for culture</td>
			<td style="width:191px;"></td>
			<td style="width:107px;"></td>
			<td>Used for culturing the bacteria, any brand should be appropriate</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:353px;">1.5 ml microcentrifuge tubes</td>
			<td style="width:191px;"></td>
			<td style="width:107px;"></td>
			<td>any brand should be appropriate</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:353px;">bacterial petri dishes</td>
			<td style="width:191px;"></td>
			<td style="width:107px;"></td>
			<td>any brand should be appropriate</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:353px;">2 ml cyrovials</td>
			<td style="width:191px;"></td>
			<td style="width:107px;"></td>
			<td>any brand should be appropriate</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:353px;">UV spectrometer</td>
			<td style="width:191px;"></td>
			<td style="width:107px;"></td>
			<td>any brand should be appropriate</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:353px;">safety engineered needles</td>
			<td style="width:191px;"></td>
			<td style="width:107px;"></td>
			<td>any brand should be appropriate</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:353px;">C57BL6/J</td>
			<td style="width:191px;">Jackson laboratories</td>
			<td style="width:107px;">Stock#000664</td>
			<td>Order for arrival at 7 wks</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:353px;">Bleach</td>
			<td style="width:191px;"></td>
			<td style="width:107px;"></td>
			<td>For decontamination</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:353px;">70% Ethanol</td>
			<td style="width:191px;"></td>
			<td style="width:107px;"></td>
			<td>For decontamination</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:353px;">Glass beads</td>
			<td style="width:191px;"></td>
			<td style="width:107px;"></td>
			<td>any brand should be appropriate</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:353px;">Centrifuge</td>
			<td style="width:191px;"></td>
			<td style="width:107px;"></td>
			<td>rotor, buckets, bucket covers.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:353px;">Microcentrifuge</td>
			<td style="width:191px;"></td>
			<td style="width:107px;"></td>
			<td>any brand should be appropriate</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:353px;">Sterile Glycerol</td>
			<td style="width:191px;"></td>
			<td style="width:107px;"></td>
			<td>any brand should be appropriate</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:353px;">Pipette Tips</td>
			<td style="width:191px;"></td>
			<td style="width:107px;"></td>
			<td>any brand should be appropriate</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:353px;">Pipette</td>
			<td style="width:191px;"></td>
			<td style="width:107px;"></td>
			<td>any brand should be appropriate</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:353px;">Surgical instruments</td>
			<td style="width:191px;"></td>
			<td style="width:107px;"></td>
			<td>any brand should be appropriate</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:353px;">70 micron strainers</td>
			<td style="width:191px;"></td>
			<td style="width:107px;"></td>
			<td>any brand should be appropriate</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:353px;">3 ml syringe</td>
			<td style="width:191px;"></td>
			<td style="width:107px;"></td>
			<td>any brand should be appropriate</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:353px;">Pipette gun</td>
			<td style="width:191px;"></td>
			<td style="width:107px;"></td>
			<td>any brand should be appropriate</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:353px;">Filtration Units</td>
			<td style="width:191px;"></td>
			<td style="width:107px;"></td>
			<td>any brand should be appropriate</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:353px;">Trypan Blue</td>
			<td style="width:191px;"></td>
			<td style="width:107px;"></td>
			<td>Dilute 1 to 9 in ddH20, any brand should be appropriate</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:353px;">Hemocytometer</td>
			<td style="width:191px;"></td>
			<td style="width:107px;"></td>
			<td>any brand should be appropriate</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:353px;">Round bottomed plates</td>
			<td style="width:191px;"></td>
			<td style="width:107px;"></td>
			<td>any brand should be appropriate</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:353px;">FACs tubes</td>
			<td style="width:191px;">BD</td>
			<td style="width:107px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:353px;">BD LSR II</td>
			<td style="width:191px;">BD</td>
			<td style="width:107px;"></td>
			<td>Any flow cytometer could be used for acquisition that has an appropriate laser configuration and filter set to discriminate the fluorochormes</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:353px;">Flowjo software</td>
			<td style="width:191px;">Treestar</td>
			<td style="width:107px;"></td>
			<td>Used for data analysis. Other types of data analysis software will also be appropriate</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:353px;">Multichannel pipettor (0-300 &#181;l)</td>
			<td style="width:191px;">Eppendorf</td>
			<td style="width:107px;"></td>
			<td>Used for washing cells and adding antibodies during flow cytometry staining</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:353px;">Acetic Acid</td>
			<td style="width:191px;"></td>
			<td style="width:107px;"></td>
			<td>Used for washing glass beads, any brand should be appropriate</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:353px;">Microbank Bacterial Preservation System</td>
			<td style="width:191px;">Pro-lab Diagnositics</td>
			<td style="width:107px;"></td>
			<td>Used as an alternative to glycerol stocks for long-term storage of bacteria</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

experimental infection with listeria monocytogenes as a model for studying host interferon-&#947; responses

اللستيريا L. هي نوع من البكتيريا إيجابية الجرام التي هي سبب الأمراض التي تنقلها الأغذية في البشر. وكانت العدوى التجريبية من الفئران مع هذا الممرض بالمعلومات كبير على دور الخلايا المناعية الفطرية والتكيفية والسيتوكينات محددة في الحصانة المضيف ضد مسببات الأمراض داخل الخلايا. إنتاج الإنترفيرون γ الخلايا الفطرية خلال العدوى دون المميت مع المستوحدة L. مهم لتفعيل الضامة والمكافحة المبكرة من مسببات المرض 1-3. وبالإضافة إلى ذلك، إنتاج الإنترفيرون γ بواسطة الخلايا الليمفاوية الذاكرة التكيف مهم لفتيلة تنشيط الخلايا الفطرية على الإصابة مرة أخرى 4. وL. المستوحدة نموذج العدوى بالتالي بمثابة أداة عظيمة للتحقيق في ما إذا كانت العلاجات الجديدة التي تهدف إلى زيادة إنتاج الإنترفيرون γ لها تأثير على ردود الإنترفيرون جاما في الجسم الحي ولها آثار بيولوجية الإنتاجية مثل زيادة إزالة البكتيريا أو تحسين البقاء على قيد الحياة الماوس من عندعدوى. وصفت هنا هو بروتوكول الأساسي لكيفية إجراء التهابات في الغشاء البريتوني من C57BL / 6J الفئران بسلالة EGD من المستوحدة L. ولقياس إنتاج الإنترفيرون γ بواسطة الخلايا القاتلة الطبيعية، والخلايا NKT، والخلايا الليمفاوية التكيف التدفق الخلوي. وبالإضافة إلى ذلك، وصفت الإجراءات ما يلي: (1) النمو وتعد البكتيريا للتلقيح، (2) قياس الحمولة الجرثومية في الطحال والكبد، و (3) بقاء التدبير الحيوان إلى النهاية. يتم توفير بيانات تمثيلية أيضا لتوضيح كيفية هذا النموذج العدوى يمكن استخدامها لاختبار تأثير عوامل معينة على الردود IFN-γ إلى المستوحدة L. وبقاء الفئران من هذه العدوى.

ويعرض الشكل 3 بعض تدفق نموذجي الخلوي تلطيخ IFN-γ في الخلايا القاتلة الطبيعية وNKT الطحال في 24 ساعة بعد العدوى مع 10 5 كفو من مسببات المرض. كما يوضح هذا الرقم استراتيجية النابضة لوحة تلطيخ هو موضح في الجدول رقم (2). ويبين الشكل 4</s...

Watch this Scientific Journal Video about Experimental Infection with Listeria monocytogenes as a Model for Studying Host Interferon-ÃŽÂ³ Responses at JoVE.com

Experimental Infection with Listeria monocytogenes as a Model for Studying Host Interferon-ÃƒÆ’Ã…Â½Ãƒâ€šÃ‚Â³ Responses

يصف هذا البروتوكول كيفية تطعيم C57BL / 6J الفئران بسلالة EGD من المستوحدة الليستيريا (اللستيريا L.) وقياس الإنترفيرون γ (IFN-γ) ردود القاتلة الطبيعية (NK) الخلايا، القاتلة الطبيعية الخلايا التائية (NKT)، والتكيف الخلايا اللمفية تي بعد الإصابة. يصف هذا البروتوكول أيضا كيفية إجراء دراسات البقاء على قيد الحياة في الفئران بعد الإصابة مع تعديل LD 50 جرعة من العوامل المسببة للأمراض.

العدوى التجريبية مع<em&gt; المستوحدة الليستيريا</em&gt; نموذجا لدراسة المضيف الردود انترفيرون γ

L. monocytogenes is a gram-positive bacterium that is a cause of food borne disease in humans. Experimental infection of mice with this pathogen has been ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Experimental Infection with Listeria monocytogenes as a Model for Studying Host Interferon-&#947; Responses

Measuring Bacterial Load and Immune Responses in Mice Infected with Listeria monocytogenes

Measuring Bacterial Load and Immune Responses in Mice Infected with Listeria monocytogenes

قياس الحمولة الجرثومية والاستجابات المناعية في الفئران المصابة المستوحدة الليستيريا</em

Listeria monocytogenes (Listeria) is a Gram-positive facultative intracellular pathogen1. Mouse studies typically employ intravenous injection of ...

Introducing Shear Stress in the Study of Bacterial Adhesion

إدخال إجهاد القص في دراسة الالتصاق الجرثومي

During bacterial infections a sequence of interactions occur between the pathogen and its host. Bacterial adhesion to the host cell surface is often the ...

The Citrobacter rodentium Mouse Model: Studying Pathogen and Host Contributions to Infectious Colitis

The Citrobacter rodentium Mouse Model: Studying Pathogen and Host Contributions to Infectious Colitis

ال<em&gt; الليمونية rodentium</em&gt; نموذج الفأر: دراسة العوامل الممرضة والمضيفة المساهمات في التهاب القولون المعدية

This protocol  outlines the steps required to produce a robust model of infectious disease and  colitis, as well as the methods used to characterize ...

Oral Transmission of Listeria monocytogenes in Mice via Ingestion of Contaminated Food

Oral Transmission of Listeria monocytogenes in Mice via Ingestion of Contaminated Food

النقل الشفوي لل<em&gt; المستوحدة الليستيريا</em&gt; في الفئران عن طريق ابتلاع الطعام الملوث

L. monocytogenes are facultative intracellular bacterial pathogens that cause food borne infections in humans. Very little is known about the ...

Use of Galleria mellonella as a Model Organism to Study Legionella pneumophila Infection

Use of Galleria mellonella as a Model Organism to Study Legionella pneumophila Infection

استخدام<em&gt; غاليريا mellonella</em&gt; كما كائن نموذج لدراسة<em&gt; البكتيريا المستروحة</em&gt; عدوى

Legionella pneumophila, the causative agent of a severe pneumonia named Legionnaires&#39; disease, is an important human pathogen that infects and ...

Imaging InlC Secretion to Investigate Cellular Infection by the Bacterial Pathogen Listeria monocytogenes

Imaging InlC Secretion to Investigate Cellular Infection by the Bacterial Pathogen Listeria monocytogenes

التصوير InlC إفراز المعنية بالتحقيق في العدوى البكتيرية الخلوية من قبل الممرض<em&gt; المستوحدة الليستيريا</em

Bacterial intracellular  pathogens can be conceived as molecular tools to dissect cellular signaling  cascades due to their capacity to exquisitely ...

Porphyromonas gingivalis as a Model Organism for Assessing Interaction of Anaerobic Bacteria with Host Cells

Porphyromonas gingivalis as a Model Organism for Assessing Interaction of Anaerobic Bacteria with Host Cells

اللثوية Porphyromonas كما كائن نموذج لتقييم تفاعل البكتيريا اللاهوائية مع خلايا المضيف

Anaerobic bacteria far outnumber aerobes in many human niches such as the gut, mouth, and vagina. Furthermore, anaerobic infections are common and ...

RNA Purification from Intracellularly Grown Listeria monocytogenes in Macrophage Cells

RNA Purification from Intracellularly Grown Listeria monocytogenes in Macrophage Cells

RNA تنقية من داخل الخلية المزروعة<em&gt; المستوحدة الليستيريا</em&gt; في خلايا البلاعم

Analysis of the transcriptome of bacterial pathogens during mammalian infection is a valuable tool for studying genes and factors that mediate infection. ...

Methodologies for Studying B. subtilis Biofilms as a Model for Characterizing Small Molecule Biofilm Inhibitors

Methodologies for Studying B. subtilis Biofilms as a Model for Characterizing Small Molecule Biofilm Inhibitors

منهجيات لدراسة<em&gt; B. الرقيقة</em&gt; الأغشية الحيوية نموذجا للتميز الصغيرة جزيء بيوفيلم المانعون

This work assesses different methodologies to study the impact of small molecule biofilm inhibitors, such as D-amino acids, on the development and ...

Listeria monocytogenes Infection of the Brain

Listeria monocytogenes Infection of the Brain

الليستريه المستوحدة التهاب الدماغ

Listeria monocytogenes is an intracellular bacterial pathogen that is frequently associated with food-borne infection. The ability of&#160;L. ...