Name: experimental infection with listeria monocytogenes as a model for studying host interferon-&#947; responses
Uploaded: 2016-11-16T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Experimental Infection with Listeria monocytogenes as a Model for Studying Host Interferon-ÃŽÂ³ Responses at JoVE.com

Development of this protocol was supported by an operating grant from CIHR (MOP97807) to SED.

Déclaration de sécurité Ce protocole décrit l&#39; infection de souris avec vivants L. monocytogenes. L&#39;agent pathogène est manipulé en toute sécurité dans des conditions de BSL2 par du personnel qualifié qui ne sont pas immunodéprimés. Les personnes immunodéprimées sont les femmes enceintes, les personnes âgées et les personnes qui sont infectées par le VIH ou qui ont des maladies chroniques qui nécessitent un traitement avec la thérapie immunosuppressive. Le pe...

Nous décrivons ici un protocole sur la façon de procéder à une infection expérimentale de base avec la souche EGD de L. monocytogenes 25 C57BL / 6J mâles ou femelles. Ce protocole a été mis en place dans le but d&#39;étudier l&#39;effet d&#39;une nouvelle petite molécule IS001 sur la production d&#39; IFN-γ par les lymphocytes innées et adaptatives in vivo 31. En surveillant la clairance bactérienne et la survie post-infection, des idées ont été acquises sur la fa?...

IFN-γ est une cytokine qui est essentielle pour la médiation de l&#39; immunité contre les agents pathogènes intracellulaires et pour contrôler la croissance des tumeurs 5. L&#39;importance de cette cytokine dans la résistance bactérienne est évidente dans l&#39;observation que les humains avec des mutations dans la voie de signalisation de l&#39; IFN-γ sont très sensibles à l&#39; infection par des mycobactéries et salmonella 6. De même, des souris déficientes en soit l&#39; IFN-γ ou les défauts d&#39;exposition du récepteur de l&#39; IFN-γ dans la résistance aux mycobactéries 7-9 et d&#39; autres agents pathogènes intracellulaires , y compris L. monocytogenes 10,11, 12 Leishmania major, Salmonella typhimurium 13 et 11 certains virus. En plus des agents pathogènes la lutte contre, l&#39; IFN-γ joue un rôle crucial dans l&#39; hôte de défense contre les tumeurs 14. Bien que la production accrue d&#39;IFN-γ est bénéfique dans le contexte d&#39;une infection ou d&#39;un cancer, la production prolongée de cette cytokine a été liée tle diabète o le développement de l&#39; auto - immunité systémique 15-17 et l&#39;accélération de type I dans le modèle de souris diabétique non obèse 18. Les principales sources d&#39;IFN-γ comprennent les cellules NK, les cellules NKT, les lymphocytes T yô, helper 1 (Th1) des cellules T et des lymphocytes T cytotoxiques (CTL) 5,19,20. IFN-γ améliore l&#39;immunité innée et adaptative par: (1) vers le haut de régulation complexe majeur d&#39;histocompatibilité (CMH) de classe I et à l&#39;expression II, (2) l&#39;augmentation de l&#39;expression des molécules co-stimulatrices sur les cellules présentatrices d&#39;antigène, (3) macrophage améliorant phagocytose et la production de cytokines pro-inflammatoires et microbicides facteurs (par exemple, l&#39; oxyde nitrique et les espèces réactives de l&#39; oxygène), (4) la promotion de la différenciation des cellules T CD4 + naïves en cellules effectrices Th1, (5) la promotion de la commutation de classe d&#39;anticorps à l&#39; immunoglobuline ( Ig) 2a et IgG3 (chez la souris), (6) l&#39;induction de la production de chimiokines pour recruter des cellules immunitaires aux sites d&#39;infection, et (7) le renforcement de cellules NK et réponses CTL 5,19. Compte tenu de l&#39;importance capitale de l&#39; IFN-γ dans la réponse de l&#39; hôte aux agents pathogènes et les tumeurs, l&#39; IFN-γ recombinant a été testé en tant que traitement de diverses infections et de tumeurs malignes (passé en revue dans 19). Cependant, parce que l&#39; administration systémique de l&#39; IFN-γ ou la cytokine promotion Th1 interleukine-12 (IL-12) est associé à des effets secondaires et liée à la dose de toxicité 19,21, il y a intérêt à développer des stratégies alternatives pour augmenter la production d&#39;IFN-γ par les cellules immunitaires. Développement de nouveaux produits biologiques et de petites molécules nécessite des outils de dépistage in vivo pour tester si ces agents augmentent la production d&#39; IFN-γ au cours d&#39; une réponse immunitaire et si cela se traduit par des effets biologiques significatifs tels que l&#39; augmentation de la survie des animaux. L&#39; infection expérimentale de souris avec la bactérie L. monocytogenes gram-positives a été un modèle instrumental pourdéchiffrer le rôle de l&#39; IFN-γ dans l&#39; hôte une immunité contre les agents pathogènes intracellulaires 1,22. L&#39;infection des souris avec l&#39;agent pathogène par voie intraveineuse ou intrapéritonéale (ip) conduit à la diffusion rapide des bactéries à la rate et le foie, où ils deviennent internalisés par les macrophages résidents et les hépatocytes avec des charges bactériennes de pointe dans la rate qui se produisent entre 3 et 4 jours post infection 1,3,22. La production d&#39;IFN-γ par les cellules NK est importante pour l&#39; activation des macrophages et une résistance précoce contre le pathogène 3; mais à des doses infectieuses élevées, la production d&#39;IFN-γ peut également être préjudiciable à la clairance de l&#39; agent pathogène 23. Les cellules NKT sont également une source d&#39;IFN-γ dans la rate et le foie pendant le contrôle précoce des agents pathogènes 2,24 et cette production a été montré pour amplifier la production d&#39; IFN-γ par d&#39; autres types cellulaires , notamment les cellules NK 2. D&#39;autre part, plus tard, agissant lymphocytes T adaptatifs, des cellules T CD8 + en particulier, sont importants pour la médiation de la clairance de l&#39;agent pathogène et de fournir une protection contre la réinfection 1,4,22. Ce modèle d&#39;infection a été attrayante pour les chercheurs pour un certain nombre de raisons (examiné en 1). Tout d&#39;abord, l&#39;infection par l&#39;agent pathogène est hautement reproductible et induit une forte réponse immunitaire Th1 et cellulaire. Deuxièmement, lors de l&#39;infection sublétale, la charge bactérienne est concentrée dans le foie et la rate où il peut être facilement mesurée. Troisièmement, l&#39;agent pathogène peut être manipulé en toute sécurité sous le niveau de biosécurité 2 (NSB2) conditions. En quatrième lieu, l&#39;organisme et la réponse immunitaire qu&#39;il engendre ont été largement caractérisées. Enfin, une variété de souches mutantes ou génétiquement modifiés ont été développés qui sont disponibles pour l&#39;utilisation. Décrit ici est un protocole de base pour l&#39; inoculation de souris C57BL / 6J avec la souche EGD de L. monocytogenes 25 et pour mesurer l&#39; IFN - γ reponses par NK, NKT et les lymphocytes adaptatifs post-infection. On décrit également la façon de mesurer la charge bactérienne dans la rate et le foie après l&#39; infection sublétale et de réaliser des études de survie après l&#39; infection avec une DL 50 dose modifiée de l&#39;agent pathogène. Enfin, les données représentatives sont présentées de la manière dont ce protocole peut être utilisé pour cribler les effets de nouveaux traitements sur les réponses IFN-y et la survie de la souris de l&#39; infection par L. monocytogenes.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="923">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:353px;">Brain Heart Infusion Broth, Modified</td>
			<td style="width:191px;">BD</td>
			<td style="width:107px;">299070</td>
			<td style="width:273px;">any brand should be appropriate</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Agar</td>
			<td>BD</td>
			<td style="width:107px;">214010</td>
			<td>any brand should be appropriate</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:353px;">Triton X-100</td>
			<td style="width:191px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:107px;">X100</td>
			<td>any brand should be appropriate</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:353px;">1xPBS</td>
			<td style="width:191px;">Sigma</td>
			<td style="width:107px;">D8537</td>
			<td>any brand should be appropriate</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:353px;">TissueLyser II</td>
			<td style="width:191px;">Qiagen</td>
			<td style="width:107px;">85300</td>
			<td>any brand should be appropriate</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:353px;">Ammonium Chloride (NH3Cl)</td>
			<td style="width:191px;"></td>
			<td style="width:107px;"></td>
			<td>any brand should be appropriate</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:353px;">KHCO3</td>
			<td style="width:191px;"></td>
			<td style="width:107px;"></td>
			<td>any brand should be appropriate</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:353px;">Na2EDTA</td>
			<td style="width:191px;"></td>
			<td style="width:107px;"></td>
			<td>any brand should be appropriate</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:353px;">RPMI 1640</td>
			<td style="width:191px;">Gibco</td>
			<td style="width:107px;">22400089</td>
			<td>any brand should be appropriate</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:353px;">Fetal Bovine Serum&#160;</td>
			<td style="width:191px;">Gibco</td>
			<td style="width:107px;">12483</td>
			<td>Before use, heat-inactivate at 56 &#176;C for 30 min</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:353px;">L-glutamine</td>
			<td style="width:191px;">Gibco</td>
			<td style="width:107px;">25030</td>
			<td>any brand should be appropriate</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:353px;">Non-essential amino acids</td>
			<td style="width:191px;">Gibco</td>
			<td style="width:107px;">11140</td>
			<td>any brand should be appropriate</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:353px;">Penicillin/Streptomycin</td>
			<td style="width:191px;">Gibco</td>
			<td style="width:107px;">15140</td>
			<td>any brand should be appropriate</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:353px;">GolgiStop Protein Transport Inhibitor (containing Monensin)</td>
			<td style="width:191px;">BD</td>
			<td style="width:107px;">554724</td>
			<td>Use 4 &#956;l in 6 ml cell culture</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:353px;">16% Paraformaledehye</td>
			<td style="width:191px;">Electron Microscopy Sciences</td>
			<td style="width:107px;">15710</td>
			<td>Dilute to 4% PFA in ddH20 or 1xPBS</td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;width:353px;">10 x Perm/Wash buffer</td>
			<td style="width:191px;">BD</td>
			<td style="width:107px;">554723</td>
			<td>Dilute 10x in ddH20</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:353px;">Fc block, Anti-Mouse CD16/CD32 Purified</td>
			<td style="width:191px;">eBioscience</td>
			<td style="width:107px;">14-0161</td>
			<td>Dilute 1:50</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:353px;">Fixable Viability Dye eFluor 506</td>
			<td style="width:191px;">eBioscience</td>
			<td style="width:107px;">65-0866</td>
			<td>Dilute 1:1000 (we have also used viability dyes from Molecular Probes)</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:353px;">anti-Mouse CD4-PE-Cy5 (GK1.5)</td>
			<td style="width:191px;">eBioscience</td>
			<td style="width:107px;">15-0041</td>
			<td>Manufacturer recommends a certain test size; however this should be titrated before use.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:353px;">anti-Mouse CD8-FITC (53-6.7)</td>
			<td style="width:191px;">eBioscience</td>
			<td style="width:107px;">11-0081</td>
			<td>Manufacturer recommends a certain test size; however this should be titrated before use.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:353px;">PBS57/mCD1d tetramer-APC</td>
			<td style="width:191px;">NIH Tetramer Core Facility</td>
			<td style="width:107px;">N/A</td>
			<td>Obtained as a gift from the facility</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">anti-Mouse TCR&#946;-PE-Cy7 (H56-597)</td>
			<td style="width:191px;">eBioscience</td>
			<td style="width:107px;">25-5961</td>
			<td>Manufacturer recommends a certain test size; however this should be titrated before use.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">anti-Mouse NKp46-APC-eFluor780 (29A1.4)</td>
			<td style="width:191px;">eBioscience</td>
			<td style="width:107px;">47-3351</td>
			<td>Manufacturer recommends a certain test size; however this should be titrated before use.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:353px;">anti-Mouse CD45 PE-Cyanine7 (30-F11)</td>
			<td style="width:191px;">eBioscience</td>
			<td style="width:107px;">25-0451</td>
			<td>Manufacturer recommends a certain test size; however this should be titrated before use.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:353px;">anti-Mouse IFN gamma-PE (XMG1.2)</td>
			<td style="width:191px;">eBioscience</td>
			<td style="width:107px;">12-7311</td>
			<td>Manufacturer recommends a certain test size; however this should be titrated before use.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:353px;">OneComp eBeads</td>
			<td style="width:191px;">eBioscience</td>
			<td style="width:107px;">01-1111</td>
			<td>Manufacturer recommends a certain test size; however this should be titrated before use.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:353px;">Mouse IFN gamma ELISA kit</td>
			<td style="width:191px;">eBioscience</td>
			<td>88-7314</td>
			<td>Used for measuring the interferon gamma in the culture supernatant</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:353px;">50 mL vented tubes for culture</td>
			<td style="width:191px;"></td>
			<td style="width:107px;"></td>
			<td>Used for culturing the bacteria, any brand should be appropriate</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:353px;">1.5 ml microcentrifuge tubes</td>
			<td style="width:191px;"></td>
			<td style="width:107px;"></td>
			<td>any brand should be appropriate</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:353px;">bacterial petri dishes</td>
			<td style="width:191px;"></td>
			<td style="width:107px;"></td>
			<td>any brand should be appropriate</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:353px;">2 ml cyrovials</td>
			<td style="width:191px;"></td>
			<td style="width:107px;"></td>
			<td>any brand should be appropriate</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:353px;">UV spectrometer</td>
			<td style="width:191px;"></td>
			<td style="width:107px;"></td>
			<td>any brand should be appropriate</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:353px;">safety engineered needles</td>
			<td style="width:191px;"></td>
			<td style="width:107px;"></td>
			<td>any brand should be appropriate</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:353px;">C57BL6/J</td>
			<td style="width:191px;">Jackson laboratories</td>
			<td style="width:107px;">Stock#000664</td>
			<td>Order for arrival at 7 wks</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:353px;">Bleach</td>
			<td style="width:191px;"></td>
			<td style="width:107px;"></td>
			<td>For decontamination</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:353px;">70% Ethanol</td>
			<td style="width:191px;"></td>
			<td style="width:107px;"></td>
			<td>For decontamination</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:353px;">Glass beads</td>
			<td style="width:191px;"></td>
			<td style="width:107px;"></td>
			<td>any brand should be appropriate</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:353px;">Centrifuge</td>
			<td style="width:191px;"></td>
			<td style="width:107px;"></td>
			<td>rotor, buckets, bucket covers.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:353px;">Microcentrifuge</td>
			<td style="width:191px;"></td>
			<td style="width:107px;"></td>
			<td>any brand should be appropriate</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:353px;">Sterile Glycerol</td>
			<td style="width:191px;"></td>
			<td style="width:107px;"></td>
			<td>any brand should be appropriate</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:353px;">Pipette Tips</td>
			<td style="width:191px;"></td>
			<td style="width:107px;"></td>
			<td>any brand should be appropriate</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:353px;">Pipette</td>
			<td style="width:191px;"></td>
			<td style="width:107px;"></td>
			<td>any brand should be appropriate</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:353px;">Surgical instruments</td>
			<td style="width:191px;"></td>
			<td style="width:107px;"></td>
			<td>any brand should be appropriate</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:353px;">70 micron strainers</td>
			<td style="width:191px;"></td>
			<td style="width:107px;"></td>
			<td>any brand should be appropriate</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:353px;">3 ml syringe</td>
			<td style="width:191px;"></td>
			<td style="width:107px;"></td>
			<td>any brand should be appropriate</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:353px;">Pipette gun</td>
			<td style="width:191px;"></td>
			<td style="width:107px;"></td>
			<td>any brand should be appropriate</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:353px;">Filtration Units</td>
			<td style="width:191px;"></td>
			<td style="width:107px;"></td>
			<td>any brand should be appropriate</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:353px;">Trypan Blue</td>
			<td style="width:191px;"></td>
			<td style="width:107px;"></td>
			<td>Dilute 1 to 9 in ddH20, any brand should be appropriate</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:353px;">Hemocytometer</td>
			<td style="width:191px;"></td>
			<td style="width:107px;"></td>
			<td>any brand should be appropriate</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:353px;">Round bottomed plates</td>
			<td style="width:191px;"></td>
			<td style="width:107px;"></td>
			<td>any brand should be appropriate</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:353px;">FACs tubes</td>
			<td style="width:191px;">BD</td>
			<td style="width:107px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:353px;">BD LSR II</td>
			<td style="width:191px;">BD</td>
			<td style="width:107px;"></td>
			<td>Any flow cytometer could be used for acquisition that has an appropriate laser configuration and filter set to discriminate the fluorochormes</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:353px;">Flowjo software</td>
			<td style="width:191px;">Treestar</td>
			<td style="width:107px;"></td>
			<td>Used for data analysis. Other types of data analysis software will also be appropriate</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:353px;">Multichannel pipettor (0-300 &#181;l)</td>
			<td style="width:191px;">Eppendorf</td>
			<td style="width:107px;"></td>
			<td>Used for washing cells and adding antibodies during flow cytometry staining</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:353px;">Acetic Acid</td>
			<td style="width:191px;"></td>
			<td style="width:107px;"></td>
			<td>Used for washing glass beads, any brand should be appropriate</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:353px;">Microbank Bacterial Preservation System</td>
			<td style="width:191px;">Pro-lab Diagnositics</td>
			<td style="width:107px;"></td>
			<td>Used as an alternative to glycerol stocks for long-term storage of bacteria</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

experimental infection with listeria monocytogenes as a model for studying host interferon-&#947; responses

L. monocytogenes est une bactérie Gram-positif qui est une cause de maladies d&#39; origine alimentaire chez les humains. L&#39;infection expérimentale de souris avec cet agent pathogène a été très informatif sur le rôle des cellules du système immunitaire innée et adaptative et des cytokines spécifiques de l&#39;immunité de l&#39;hôte contre les pathogènes intracellulaires. La production d&#39;IFN-γ par des cellules innées lors de l&#39; infection par L. monocytogenes sublétale est importante pour l&#39; activation des macrophages et le contrôle précoce de l&#39;agent pathogène 1-3. En outre, la production d&#39; IFN-γ par les lymphocytes mémoire adaptative est importante pour amorcer l&#39;activation des cellules innée à 4 réinfection. Le L. monocytogenes modèle d&#39;infection sert ainsi un excellent outil pour examiner si de nouvelles thérapies qui sont conçus pour augmenter la production d&#39; IFN-γ ont un impact sur les réponses de l&#39; IFN-γ in vivo et ont des effets biologiques productifs tels que l&#39; augmentation de la clairance bactérienne ou l&#39; amélioration de la survie de la souris deinfection. Décrite ici est un protocole de base pour la façon de mener les infections intra - péritonéales de souris C57BL / 6J avec la souche EGD de L. monocytogenes et de mesurer la production d&#39; IFN-γ par les cellules NK, les cellules NKT et les lymphocytes adaptatifs par cytométrie en flux. En outre, les procédures sont décrites: (1) croître et de préparer les bactéries pour l&#39;inoculation (2), mesurer la charge bactérienne dans la rate et le foie, et (3) mesure la survie des animaux de points d&#39;extrémité. Des données représentatives sont également fournis pour illustrer la façon dont ce modèle d&#39;infection peut être utilisée pour tester l&#39;effet d&#39;agents spécifiques sur les réponses d&#39; IFN-y pour L. monocytogenes et la survie des souris de cette infection.

La figure 3 présente un certain écoulement typique cytométrie coloration de l&#39; IFN-γ dans les cellules NK et NKT spléniques à 24 h post-infection avec 10 5 CFU de l&#39;agent pathogène. Cette figure illustre également la stratégie de déclenchement pour le panneau de coloration décrit dans le tableau 2. La figure 4 montre une partie des données représentatives qui ont été obtenus dans une expérience où les ...

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Experimental Infection with Listeria monocytogenes as a Model for Studying Host Interferon-ÃƒÆ’Ã…Â½Ãƒâ€šÃ‚Â³ Responses

Ce protocole décrit comment inoculer des souris C57BL / 6J avec la souche EGD de Listeria monocytogenes (L. monocytogenes) et de mesurer l&#39; interféron-γ (IFN-γ) Réponses par tueuses naturelles (NK), T (NKT) des cellules tueuses naturelles, et adaptative des lymphocytes T post-infection. Ce protocole décrit également la façon de mener des études de survie chez les souris après l&#39; infection avec une DL 50 dose modifiée de l&#39;agent pathogène.

Infection expérimentale avec<em&gt; Listeria monocytogenes</em&gt; En tant que modèle pour l&#39;étude de l&#39;hôte Réponses Interféron-y

L. monocytogenes is a gram-positive bacterium that is a cause of food borne disease in humans. Experimental infection of mice with this pathogen has been ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Experimental Infection with Listeria monocytogenes as a Model for Studying Host Interferon-&#947; Responses

Measuring Bacterial Load and Immune Responses in Mice Infected with Listeria monocytogenes

Measuring Bacterial Load and Immune Responses in Mice Infected with Listeria monocytogenes

Mesure de la charge bactérienne et les réponses immunitaires chez des souris infectées avec des Listeria monocytogenes</em

Listeria monocytogenes (Listeria) is a Gram-positive facultative intracellular pathogen1. Mouse studies typically employ intravenous injection of ...

Recherche

Immunologie et infection

Introducing Shear Stress in the Study of Bacterial Adhesion

Présentation de contrainte de cisaillement dans l&#39;étude de l&#39;adhésion bactérienne

During bacterial infections a sequence of interactions occur between the pathogen and its host. Bacterial adhesion to the host cell surface is often the ...

The Citrobacter rodentium Mouse Model: Studying Pathogen and Host Contributions to Infectious Colitis

The Citrobacter rodentium Mouse Model: Studying Pathogen and Host Contributions to Infectious Colitis

La<em&gt; Citrobacter rodentium</emModèle de souris&gt;: Étudier Contributions des agents pathogènes et l&#39;hôte de la colite infectieuse

This protocol  outlines the steps required to produce a robust model of infectious disease and  colitis, as well as the methods used to characterize ...

Oral Transmission of Listeria monocytogenes in Mice via Ingestion of Contaminated Food

Oral Transmission of Listeria monocytogenes in Mice via Ingestion of Contaminated Food

La transmission orale de<em&gt; Listeria monocytogenes</em&gt; Chez la souris par l&#39;ingestion d&#39;aliments contaminés

L. monocytogenes are facultative intracellular bacterial pathogens that cause food borne infections in humans. Very little is known about the ...

Use of Galleria mellonella as a Model Organism to Study Legionella pneumophila Infection

Use of Galleria mellonella as a Model Organism to Study Legionella pneumophila Infection

Utilisation d&#39;<em&gt; Galleria mellonella</em&gt; Comme un organisme modèle pour l&#39;étude<em&gt; Legionella pneumophila</em&gt; Maladies infectieuses

Legionella pneumophila, the causative agent of a severe pneumonia named Legionnaires&#39; disease, is an important human pathogen that infects and ...

Imaging InlC Secretion to Investigate Cellular Infection by the Bacterial Pathogen Listeria monocytogenes

Imaging InlC Secretion to Investigate Cellular Infection by the Bacterial Pathogen Listeria monocytogenes

Imagerie RICL sécrétion d&#39;enquêter sur l&#39;infection cellulaire par le pathogène bactérien<em&gt; Listeria monocytogenes</em

Bacterial intracellular  pathogens can be conceived as molecular tools to dissect cellular signaling  cascades due to their capacity to exquisitely ...

Porphyromonas gingivalis as a Model Organism for Assessing Interaction of Anaerobic Bacteria with Host Cells

Porphyromonas gingivalis as a Model Organism for Assessing Interaction of Anaerobic Bacteria with Host Cells

Porphyromonas gingivalis comme un organisme modèle pour l&#39;évaluation de l&#39;interaction des bactéries anaérobies avec des cellules hôtes

Anaerobic bacteria far outnumber aerobes in many human niches such as the gut, mouth, and vagina. Furthermore, anaerobic infections are common and ...

RNA Purification from Intracellularly Grown Listeria monocytogenes in Macrophage Cells

RNA Purification from Intracellularly Grown Listeria monocytogenes in Macrophage Cells

ARN Purification de Intracellulairement Grown<em&gt; Listeria monocytogenes</em&gt; Dans les cellules macrophages

Analysis of the transcriptome of bacterial pathogens during mammalian infection is a valuable tool for studying genes and factors that mediate infection. ...

Methodologies for Studying B. subtilis Biofilms as a Model for Characterizing Small Molecule Biofilm Inhibitors

Methodologies for Studying B. subtilis Biofilms as a Model for Characterizing Small Molecule Biofilm Inhibitors

Méthodologies pour l&#39;étude<em&gt; B. subtilis</em&gt; biofilms comme un modèle pour Caractériser Inhibiteurs biofilm petites molécules

This work assesses different methodologies to study the impact of small molecule biofilm inhibitors, such as D-amino acids, on the development and ...

Listeria monocytogenes Infection of the Brain

Listeria monocytogenes Infection of the Brain

Listeria monocytogenes Infection du cerveau

Listeria monocytogenes is an intracellular bacterial pathogen that is frequently associated with food-borne infection. The ability of&#160;L. ...