Name: the mouse isolated perfused kidney technique
Uploaded: 2016-11-17T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about The Mouse Isolated Perfused Kidney Technique Video at JoVE.com

The authors would like to thank Hans-Joachim Schurek for invaluable scientific advice. The authors would like to thank Monique Carrel and Mich&#232;le Heidemeyer for excellent technical assistance, David Penton Ribas and Nourdine Faresse for a critical reading of the manuscript and Carsten Wagner and J&#252;rg Biber for the NaPi-2a antibody. This work was supported by the Swiss National Centre for Competence in Research "Kidney.CH" and by a project grant (310030_143929/1) from the Swiss National Science Foundation.

इस पांडुलिपि में वर्णित सभी जानवरों को शामिल प्रक्रियाओं स्विस कानून के अनुसार और ज्यूरिख, स्विट्जरलैंड के केंटन के पशु चिकित्सा प्रशासन ने मंजूरी दे दी आयोजित की गई। 1. बफर तैयारी <ol><li> 4 और ant...

<ol>
	<li>Carrel, A., Lindbergh, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+culture+of+whole+organs.">The culture of whole organs.</a> Science (New York, N.Y.). 81 (2112), 621-623 (1935).</li><li>Skutul, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> &#220;ber Durchstr&#246;mungsapparate Pfl&#252;ger's Archiv. 123 (4-6), 249-273 (1908).</li><li>Nizet, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+isolated+perfused+kidney:+possibilities,+limitations+and+results.">The isolated perfused kidney: possibilities, limitations and results.</a> Kidney Int. 7 (1), 1-11 (1975).</li><li>Weiss, C., Passow, H., Rothstein, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Autoregulation+of+flow+in+isolated+rat+kidney+in+the+absence+of+red+cells.">Autoregulation of flow in isolated rat kidney in the absence of red cells.</a> Am J Physiol. 196 (5), 1115-1118 (1959).</li><li>Schurek, H. J., Kriz, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Morphologic+and+functional+evidence+for+oxygen+deficiency+in+the+isolated+perfused+rat+kidney.">Morphologic and functional evidence for oxygen deficiency in the isolated perfused rat kidney.</a> Lab Invest. 53 (2), 145-155 (1985).</li><li>Stolte, H., Schurek, H. J., Alt, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Glomerular+albumin+filtration:+a+comparison+of+micropuncture+studies+in+the+isolated+perfused+rat+kidney+with+in+vivo+experimental+conditions.">Glomerular albumin filtration: a comparison of micropuncture studies in the isolated perfused rat kidney with in vivo experimental conditions.</a> Kidney Int. 16 (3), 377-384 (1979).</li><li>Schweda, F., Wagner, C., Kr&#228;mer, B. K., Schnermann, J., Kurtz, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preserved+macula+densa-dependent+renin+secretion+in+A1+adenosine+receptor+knockout+mice.">Preserved macula densa-dependent renin secretion in A1 adenosine receptor knockout mice.</a> AJP Renal Physiol. 284 (4), F770-F777 (2003).</li><li>Moers, C., Smits, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Machine+perfusion+or+cold+storage+in+deceased-donor+kidney+transplantation.">Machine perfusion or cold storage in deceased-donor kidney transplantation.</a> N Engl J Med. 360 (1), 7-19 (2009).</li><li>Nicholson, M. L., Hosgood, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Renal+transplantation+after+ex+vivo+normothermic+perfusion:+the+first+clinical+study.">Renal transplantation after ex vivo normothermic perfusion: the first clinical study.</a> Am J Transplant. 13 (5), 1246-1252 (2013).</li><li>Worner, M., Poore, S., Tilkorn, D., Lokmic, Z., Penington, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+low-cost,+small+volume+circuit+for+autologous+blood+normothermic+perfusion+of+rabbit+organs.">A low-cost, small volume circuit for autologous blood normothermic perfusion of rabbit organs.</a> Art Org. 38 (4), 352-361 (2014).</li><li>Kaths, J. M., Spetzler, V. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Normothermic+Ex+Vivo+Kidney+Perfusion+for+the+Preservation+of+Kidney+Grafts+prior+to+Transplantation.">Normothermic Ex Vivo Kidney Perfusion for the Preservation of Kidney Grafts prior to Transplantation.</a> J Vis Exp. (101), e52909 (2015).</li><li>Song, J. J., Guyette, J. P., Gilpin, S. E., Gonzalez, G., Vacanti, J. P., Ott, H. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regeneration+and+experimental+orthotopic+transplantation+of+a+bioengineered+kidney.">Regeneration and experimental orthotopic transplantation of a bioengineered kidney.</a> Nature Med. 19 (5), 646-651 (2013).</li><li>Hall, A. M., Crawford, C., Unwin, R. J., Duchen, M. R., Peppiatt-Wildman, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multiphoton+imaging+of+the+functioning+kidney.">Multiphoton imaging of the functioning kidney.</a> JASN. 22 (7), 1297-1304 (2011).</li><li>Lindell, S. L., Williams, N., Brusilovsky, I., Mangino, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+IPK:+A+Powerful+Tool+to+Partially+Characterize+Renal+Reperfusion+and+Preservation+Injury.">Mouse IPK: A Powerful Tool to Partially Characterize Renal Reperfusion and Preservation Injury.</a> Open Transplant J. 5, 15-22 (2011).</li><li>Wagner, C., De Wit, C., Kurtz, L., Gr&#252;nberger, C., Kurtz, A., Schweda, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Connexin40+is+essential+for+the+pressure+control+of+renin+synthesis+and+secretion.">Connexin40 is essential for the pressure control of renin synthesis and secretion.</a> Circ Res. 100 (4), 556-563 (2007).</li><li>Czogalla, J., Vohra, T., Penton, D., Kirschmann, M., Craigie, E., Loffing, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+mineralocorticoid+receptor+(MR)+regulates+ENaC+but+not+NCC+in+mice+with+random+MR+deletion.">The mineralocorticoid receptor (MR) regulates ENaC but not NCC in mice with random MR deletion.</a> Pfl&#252;ger's Archiv. , (2016).</li><li>Poosti, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Precision-cut+kidney+slices+(PCKS)+to+study+development+of+renal+fibrosis+and+efficacy+of+drug+targeting+ex+vivo.">Precision-cut kidney slices (PCKS) to study development of renal fibrosis and efficacy of drug targeting ex vivo.</a> Dis Model Mech. 8 (10), 1227-1236 (2015).</li><li>Rahgozar, M., Guan, Z., Matthias, A., Gob&#233;, G. C., Endre, Z. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Angiotensin+II+facilitates+autoregulation+in+the+perfused+mouse+kidney:+An+optimized+in+vitro+model+for+assessment+of+renal+vascular+and+tubular+function.">Angiotensin II facilitates autoregulation in the perfused mouse kidney: An optimized in vitro model for assessment of renal vascular and tubular function.</a> Nephrology. 9 (5), 288-296 (2004).</li></ol>

माउस भरकर रखा गुर्दे पृथक 1 घंटे के लिए एक नियंत्रित वातावरण पूर्व vivo में गुर्दे समारोह के अध्ययन बरकरार पशुओं में इन विवो प्रयोगों, जो कई प्रणालीगत कारकों के प्रभाव से त्रुटिपूर्ण हो सकता है के ?...

अंगों के अलग छिड़काव कई दशकों के लिए 1 physiologists के बीच चल रहे एक प्रयास का विषय रहा है। तकनीक, अंग के समारोह में सक्षम बनाता है ऐसे रक्तचाप, हार्मोन, या नसों के रूप में प्रणालीगत प्रभाव के बिना, अध्ययन किया जाएगा। कार्ल Eduard Loebell पहले एक अलग गुर्दे का सफल छिड़काव का वर्णन किया है करने के लिए 1849 में 2, माना जाता है। तब से, छिड़काव उपकरण महत्वपूर्ण शोधन आया है। फ्रे और Gruber निरंतर छिड़काव 2 के लिए ऑक्सीजन और गुणवाला पंपों के लिए एक कृत्रिम फेफड़ों की शुरुआत की। जबकि जल्दी शोधकर्ताओं ने मुख्य रूप से बड़े स्तनधारियों-अर्थात्, सूअर 2 और 3 कुत्तों चूहे गुर्दे के उपयोग के -इस पहली रिपोर्ट, वेइस एट अल द्वारा के गुर्दे का अध्ययन किया। , छोटे स्तनपायी-अंग छिड़काव 4 के अध्ययन में एक मील का पत्थर था। Schurek एट अल। perfusate यदि पर्याप्त गुर्दे ट्यूबलर को स्तनधारी एरिथ्रोसाइट्स जोड़ने की आवश्यकता सूचना दीऑक्सीजन प्राप्त किया जा करने के लिए 5 था। लंबी अवधि के प्रयोगों के लिए महत्वपूर्ण एक ही अनुसंधान समूह 6 से बफर के निरंतर डायलिसिस की शुरूआत थी। 2003 में, Schweda एट अल। पहले एक कार्यात्मक माउस पृथक perfused गुर्दा (MIPK) 7, बाद में Rahgozar एट अल द्वारा परिष्कृत रिपोर्ट करने के लिए थे। 18 और Lindell एट अल। 14। जबकि चूहे भरकर रखा गुर्दे पृथक से तकनीकी रूप से अधिक चुनौतीपूर्ण, MIPK के उपयोग के आनुवंशिक रूप से परिवर्तित चूहों की एक विस्तृत सरणी का उपयोग को सक्षम करने का लाभ भालू। इस पत्र 1 घंटे के लिए पृथक माउस गुर्दे perfusing के लिए लेखकों को &#39;विधि का ब्यौरा प्रस्तुत करता है। विधि गुर्दे प्रवाह की दर, संवहनी प्रतिरोध, हार्मोन रिलीज, रक्त गैस विश्लेषण, मूत्र विश्लेषण, और दवाओं के आवेदन के सतत मूल्यांकन के लिए अनुमति देता है। प्रक्रिया के बाद, गुर्दे, आणविक और जैव रासायनिक विश्लेषण के लिए कार्रवाई की जा सकती है माइक्रोस्कोपी के लिए तय हो सकता है, या(चित्रा 1) एक प्राप्तकर्ता माउस में प्रत्यारोपित। <img alt="आकृति 1" src="/files/ftp_upload/54712/54712fig1.jpg" /> चित्रा 1: संभव इनपुट / आउटपुट, अलग भरकर रखा किडनी के अवलोकन। BGA: रक्त गैस विश्लेषण। <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/54712/54712fig1large.jpg" target="_blank">यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।</a> इस तकनीक की संभावना, 10 के रूप में कई नए अनुप्रयोगों के साथ (या विरोधी अस्वीकृति या जीनोम संपादन दवाओं के आवेदन के बिना) 8, 9 प्रत्यारोपण से पहले लंबे समय तक normothermic गुर्दे छिड़काव की सुबह के साथ विचार-विमर्श किया जा रहा है, आने वाले वर्षों में बढ़ती ध्यान प्राप्त होगा , 11, decellularized scaffolds 12 से पूरे गुर्दे की जैव अभियांत्रिकी और multiphoton इमेजिंग 13 के लिए फ्लोरोसेंट रंगों की उच्च खुराक के आवेदन </sup&gt;। यह भी जिसके साथ तीव्र गुर्दे चोट 14 के दौरान विशिष्ट जीन की भूमिका का अध्ययन करने के लिए एक आदर्श मॉडल है। एक कदम-दर-कदम प्रोटोकॉल अन्य प्रयोगशालाओं पृथक माउस गुर्दे छिड़काव सफलतापूर्वक प्रदर्शन करने के लिए अनुमति देने के लिए दिया जाता है। पहला, रचना और बफर की तैयारी निर्दिष्ट किया जाता है। फिर, सर्जरी में विस्तार से वर्णन किया गया है और महत्वपूर्ण कदम दिखाए जाते हैं। तीसरा, डेटा प्रस्तुत किया जाता है कि एक सफल तैयारी के प्रतिनिधि हैं: गुर्दे रक्त प्रवाह, संवहनी प्रतिरोध, glomerular निस्पंदन दर, और आंशिक इलेक्ट्रोलाइट उत्सर्जन सभी भरकर रखा गुर्दे के विभिन्न खंडों नेफ्रॉन की आकृति विज्ञान की व्यवहार्यता और संचरण इलेक्ट्रॉन micrographs के रूप में कार्य माप छिड़काव के 1 घंटे के बाद तय की।

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="906">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:447px;">Perfusion Circuit:</td>
			<td style="width:173px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="61">
			<td height="61" style="height:61px;">Moist chamber 834/8</td>
			<td style="width:173px;">Harvard Apparatus/Hugo Sachs Elektronik GmbH</td>
			<td style="width:119px;">73-2901</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="61">
			<td height="61" style="height:61px;">Cannular with basket and side port</td>
			<td style="width:173px;">Harvard Apparatus/Hugo Sachs Elektronik GmbH</td>
			<td style="width:119px;">73-2947</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="61">
			<td height="61" style="height:61px;">Thermostat TC120-ST5&#160;</td>
			<td style="width:173px;">Harvard Apparatus/Hugo Sachs Elektronik GmbH</td>
			<td style="width:119px;">73-4544</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="61">
			<td height="61" style="height:61px;">ISM 827/230V Roller Pump Reglo Analogue</td>
			<td style="width:173px;">Harvard Apparatus/Hugo Sachs Elektronik GmbH</td>
			<td style="width:119px;">73-0114</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="61">
			<td height="61" style="height:61px;">Reservoir jacketed for buffer solution 1L</td>
			<td style="width:173px;">Harvard Apparatus/Hugo Sachs Elektronik GmbH</td>
			<td style="width:119px;">73-3438</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="61">
			<td height="61" style="height:61px;">Reservoir jacketed for buffer solution 0.5L</td>
			<td style="width:173px;">Harvard Apparatus/Hugo Sachs Elektronik GmbH</td>
			<td style="width:119px;">73-3436</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="61">
			<td height="61" style="height:61px;">Pressure Transducer APT300&#160;</td>
			<td style="width:173px;">Harvard Apparatus/Hugo Sachs Elektronik GmbH</td>
			<td style="width:119px;">73-3862</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="61">
			<td height="61" style="height:61px;">TAM-D Plugsys Transducer</td>
			<td style="width:173px;">Harvard Apparatus/Hugo Sachs Elektronik GmbH</td>
			<td style="width:119px;">73-1793</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="61">
			<td height="61" style="height:61px;">SCP Plugsys servo controller</td>
			<td style="width:173px;">Harvard Apparatus/Hugo Sachs Elektronik GmbH</td>
			<td style="width:119px;">73-2806</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="61">
			<td height="61" style="height:61px;">Windkessel&#160;</td>
			<td style="width:173px;">Harvard Apparatus/Hugo Sachs Elektronik GmbH</td>
			<td style="width:119px;">73-3717</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="61">
			<td height="61" style="height:61px;">HSE-USB data acquisition</td>
			<td style="width:173px;">Harvard Apparatus/Hugo Sachs Elektronik GmbH</td>
			<td style="width:119px;">73-3330</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:447px;">Low-Flux Dialysator Diacap Polysulfone</td>
			<td style="width:173px;">B.Braun</td>
			<td align="right" style="width:119px;">7203525</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="41">
			<td height="41" style="height:41px;width:447px;">PE-Tubing for aorta cannulation 1.19mm I.D. x 1.70mm O.D.</td>
			<td style="width:173px;">Scientific Commodities Inc.</td>
			<td style="width:119px;">BB31695-PE/8</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:447px;">Name</td>
			<td style="width:173px;">Company</td>
			<td style="width:119px;">Catalog Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:447px;">Buffer reagents:</td>
			<td style="width:173px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:447px;">Aminoplasmal 10%</td>
			<td style="width:173px;">B.Braun</td>
			<td align="right" style="width:119px;">134518064</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:447px;">Sodium pyruvate</td>
			<td style="width:173px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">P2256-25G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:447px;">L-Glutamic acid monosodium salt hydrate</td>
			<td style="width:173px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">G1626-100G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:447px;">L-(-)-Malic acid sodium salt</td>
			<td style="width:173px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">M1125-25G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:447px;">Sodium-L-Lactate</td>
			<td style="width:173px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">L7022-10G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:447px;">alpha-Ketoglutaric acid sodium salt</td>
			<td style="width:173px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">K1875-25G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">NaCl</td>
			<td style="width:173px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">31434-1KG-R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:26px;">NaHCO3</td>
			<td style="width:173px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">S5761-5KG</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">KCl</td>
			<td style="width:173px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">60130-1KG</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Urea</td>
			<td style="width:173px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">U5378-500G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Creatinine</td>
			<td style="width:173px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">C4255-10G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Ampicillin</td>
			<td style="width:173px;">Roche</td>
			<td align="right" style="width:119px;">10835242001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:26px;">MgCl2 * 6H2O</td>
			<td style="width:173px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">M2393-500G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:447px;">D-Glucose</td>
			<td style="width:173px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">G8270-1KG</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:26px;">CaCl2 * 6H2O&#160;</td>
			<td style="width:173px;">Riedel-de-Ha&#235;n</td>
			<td align="right" style="width:119px;">12074</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:26px;">NaH2PO4</td>
			<td style="width:173px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">S9638-500G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:26px;">Na2HPO4</td>
			<td style="width:173px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">S0876-500G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:447px;">Antidiuretic Hormone dDAVP</td>
			<td style="width:173px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">V2013-1MG</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:447px;">FITC-Inulin</td>
			<td style="width:173px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:447px;">Filter used for erythrocyte filtration</td>
			<td>Macherey-Nagel</td>
			<td style="width:119px;">MN 615</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:447px;">BGA Analysis:</td>
			<td style="width:173px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="41">
			<td height="41" style="height:41px;">ABL 80 flex</td>
			<td style="width:173px;">Radiometer Medical ApS</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:447px;">Electron Microscope:</td>
			<td style="width:173px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Philips CM100 TEM</td>
			<td style="width:173px;">FEI</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

the mouse isolated perfused kidney technique

माउस पृथक perfused गुर्दा (MIPK) पूर्व vivo की स्थिति भरकर रखा और 1 घंटे के लिए कार्यात्मक के तहत एक माउस गुर्दे रखने के लिए एक तकनीक है। यह अलग अंग की और कई अभिनव अनुप्रयोगों है कि भविष्य में संभव हो सकता है, या गुर्दे bioengineering के लिए छिड़काव decellularization विरोधी अस्वीकृति या प्रधानमंत्री गुर्दे के लिए उच्च खुराक में जीनोम संपादन दवाओं के प्रशासन सहित, के लिए शरीर क्रिया विज्ञान के अध्ययन के लिए एक शर्त है प्रत्यारोपण के लिए। छिड़काव के समय के दौरान, गुर्दे, चालाकी से किया जा सकता है गुर्दे समारोह का आकलन किया जा सकता है, और विभिन्न दवाइयों दिलाई। प्रक्रिया के बाद, गुर्दा प्रत्यारोपित या आणविक जीव विज्ञान, जैव रासायनिक विश्लेषण, या माइक्रोस्कोपी के लिए कार्रवाई की जा सकती। इस पत्र perfusate और सर्जिकल तकनीक माउस गुर्दे के पूर्व vivo छिड़काव के लिए आवश्यक का वर्णन है। छिड़काव उपकरण का विवरण दिया जाता है और डेटा वी दिखा प्रस्तुत कर रहे हैंगुर्दे की तैयारी की iability: कार्यात्मक, रूपात्मक readouts, और आणविक readout के रूप में विभिन्न क्षेत्रों के नेफ्रॉन परिवहन प्रोटीन के पश्चिमी दाग ​​के रूप में विभिन्न क्षेत्रों के नेफ्रॉन के संचरण इलेक्ट्रॉन micrographs के रूप में गुर्दे रक्त प्रवाह, संवहनी प्रतिरोध, और मूत्र डेटा।

साथ विधि का वर्णन किया, पृथक माउस गुर्दे में कम से कम 1 घंटे के लिए व्यवहार्य रह सकते हैं। हम कार्यात्मक (गुर्दे रक्त प्रवाह और संवहनी प्रतिरोध, शिरापरक बहिर्वाह, glomerular निस्पंदन दर, मूत्र आंशि?...

Watch this Scientific Journal Video about The Mouse Isolated Perfused Kidney Technique Video at JoVE.com

The Mouse Isolated Perfused Kidney Technique Video (Video) | JoVE

माउस पृथक perfused गुर्दा (MIPK) पूर्व vivo की स्थिति भरकर रखा और 1 घंटे के लिए कार्यात्मक के तहत एक माउस गुर्दे रखने के लिए एक तकनीक है। buffers और सर्जिकल तकनीक में विस्तार से बताया गया है।

माउस पृथक perfused किडनी तकनीक

The mouse isolated perfused kidney (MIPK) is a technique for keeping a mouse kidney under ex vivo conditions perfused and functional for 1 hr. This is a ...

Research

JoVE Journal

Biology

The Mouse Isolated Perfused Kidney Technique

Chip-based Three-dimensional Cell Culture in Perfused Micro-bioreactors

Chip-based Three-dimensional Cell Culture in Perfused Micro-bioreactors Video (Video) | JoVE

चिप आधारित तीन आयामी perfused लघु बायोरिएक्टर में सेल संस्कृति

We have developed a chip-based cell culture system for the three-dimensional cultivation of cells. The chip is typically manufactured from ...

A Technique for Serial Collection of Cerebrospinal Fluid from the Cisterna Magna in Mouse 

A Technique for Serial Collection of Cerebrospinal Fluid from the Cisterna Magna in Mouse  Video (Video) | JoVE

माउस में Cisterna मैग्ना से मस्तिष्कमेरु द्रव के सीरियल संग्रह के लिए एक तकनीक

Alzheimer's disease (AD) is a progressive neurodegenerative disease that is pathologically characterized by extracellular deposition of &#946;-amyloid ...

Optical Mapping of Langendorff-perfused Rat Hearts

Optical Mapping of Langendorff-perfused Rat Hearts Video (Video) | JoVE

Langendorff perfused चूहा दिल के ऑप्टिकल मानचित्रण

Optical mapping of the cardiac surface with voltage-sensitive fluorescent dyes has become an important tool to investigate electrical excitation in ...

In vivo Imaging and Therapeutic Treatments in an Orthotopic Mouse Model of Ovarian Cancer

In vivo Imaging and Therapeutic Treatments in an Orthotopic Mouse Model of Ovarian Cancer Video (Video) | JoVE

Vivo इमेजिंग और डिम्बग्रंथि के कैंसर के एक Orthotopic माउस मॉडल में चिकित्सीय उपचार में

Human cancer and response to therapy is better represented in orthotopic animal models.  This paper describes the development of an orthotopic mouse model ...

Isolation and Culture of Cells from the Nephrogenic Zone of the Embryonic Mouse Kidney

Isolation and Culture of Cells from the Nephrogenic Zone of the Embryonic Mouse Kidney Video (Video) | JoVE

और भ्रूण माउस किडनी की nephrogenic क्षेत्र से कक्ष के अलगाव और संस्कृति

Embryonic development of the kidney has been extensively studied both as a model for epithelial-mesenchymal interaction in organogenesis and  to gain ...

Characterization of the Isolated, Ventilated, and Instrumented Mouse Lung Perfused with Pulsatile Flow

Characterization of the Isolated, Ventilated, and Instrumented Mouse Lung Perfused with Pulsatile Flow Video (Video) | JoVE

पृथक, हवादार, और instrumented माउस फेफड़े की विशेषता काँपने के गुणवाला फ्लो के साथ perfused

The isolated, ventilated and instrumented mouse lung preparation allows steady and pulsatile pulmonary vascular pressure-flow relationships to be measured ...

Transplantation of Cells Directly into the Kidney of Adult Zebrafish

Transplantation of Cells Directly into the Kidney of Adult Zebrafish Video (Video) | JoVE

कोशिकाओं के वयस्क Zebrafish की किडनी में सीधे प्रत्यारोपण

Regenerative medicine based on the transplantation of stem or progenitor cells into damaged tissues has the potential to treat a wide range of chronic ...

Dissection of the Adult Zebrafish Kidney

Dissection of the Adult Zebrafish Kidney Video (Video) | JoVE

वयस्क Zebrafish गुर्दे की विच्छेदन

Researchers working in the burgeoning field of adult stem cell biology seek to understand the signals that regulate the behavior and function of stem ...

Generation of Mice Derived from Induced Pluripotent Stem Cells

Generating Mice from Induced Pluripotent Stem Cells | Protocol (Video) | JoVE

प्रेरित pluripotent स्टेम सेल से व्युत्पन्न चूहों की पीढ़ी

The production of induced pluripotent stem cells (iPSCs) from somatic cells provides a means to create valuable tools for basic research and may also ...

Multi-parameter Measurement of the Permeability Transition Pore Opening in Isolated Mouse Heart Mitochondria

Multi-parameter Measurement of the Permeability Transition Pore Opening in Isolated Mouse Heart Mitochondria Video (Video) | JoVE

पारगम्यता संक्रमण ताकना खोलने की पृथक माउस Mitochondria हार्ट में मल्टी पैरामीटर मापन

The mitochondrial permeability transition pore (mtPTP) is a non specific channel that forms in the inner mitochondrial membrane to transport solutes with ...