Name: extraction of plant-based capsules for microencapsulation applications
Uploaded: 2016-11-09T14:00:00
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This work was supported by the National Research Foundation (NRF-NRFF2011-01) and the National Medical Research Council (NMRC/CBRG/0005/2012).

1. Extração de esporopolenina exina Cápsulas (segundos) a partir de L. clavatum Esporos Nota: O processo de extração SEC envolve um pó inflamável (L. clavatum), ácidos corrosivos picantes, e solventes inflamáveis, equipamentos, portanto, adequada proteção individual (óculos de proteção, máscara, luvas, jaleco), avaliação de risco aprovada em uso e descarte de produtos químicos por pessoal de laboratório autorizado é essencial. <ol><li> Spore Desengordurante</strong...

<ol>
	<li>Paunov, V. N., Mackenzie, G., Stoyanov, S. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sporopollenin+micro-reactors+for+in-situ+preparation,+encapsulation+and+targeted+delivery+of+active+components.">Sporopollenin micro-reactors for in-situ preparation, encapsulation and targeted delivery of active components.</a> J. Mater. Chem. 17 (7), 609-612 (2007).</li><li>Barrier, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Physical and chemical properties of sporopollenin exine particles. Doctoral dissertation thesis. , (2008).</li><li>Beckett, S. T., Atkin, S. 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Neste trabalho, uma análise sistemática da extração SEC de L. esporos clavatum é apresentada e este relatório mostra que é possível produzir cápsulas de qualidade superiores, ao mesmo tempo alcançar uma simplificação significativa do pré-existente protocolo vulgarmente usado. 11 Em contraste com o protocolo já existente que requer uma temperatura elevada de processo (180 ° C) e uma longa duração do processo (7 dias), a corrente 11 SEC optimização processamento e...

Existe um interesse significativo em cápsulas à base de plantas naturais, obtidos a partir de esporos de plantas e pólens para uso em aplicações de microencapsulação. 15/01 Na natureza, esporos e pólen proporcionar uma protecção para os materiais genéticos sensíveis contra condições ambientais adversas. A estrutura básica de esporos de plantas e do pólen compreende, tipicamente, uma camada de invólucro exterior (exina), uma camada de invólucro interior (intina), e o material citoplasmático interno. A exina é composta de um biopolímero quimicamente robusto 1,9,10,13,16 referido como esporopolenina eo intina é composta principalmente de materiais celulósicos. 16-18 cápsulas vazias podem ser isoladas por vários processos para a remoção de material de 7,9 citoplasmática , proteínas, e a camada intine. 2,12,16 Estas cápsulas exinas esporopolenina (segundos) fornecer uma alternativa atraente para encapsulantes sintéticos devido à sua distribuição de tamanho estreita e morfologia uniforme. 7,9,13,19,20 adesenvolvimento de processos padronizados para a obtenção de s a partir de várias espécies de plantas, tais como Licopódio clavatum, abre a possibilidade de uma vasta gama de aplicações de microencapsulação nos campos de entrega de drogas, alimentos, cosméticos e 6,10-13,21. A fim de obter SECs, investigadores trataram primeiro os esporos e pólen com solventes orgânicos e submetida a refluxo em soluções alcalinas para remover o conteúdo citoplasmático. 22-25 No entanto, a estrutura da cápsula remanescente foi determinada para conter ainda o intina camada celulósica. A fim de eliminar isto, os investigadores exploraram a utilização do tratamento de hidrólise ácida prolongada utilizando ácido clorídrico, ácido sulfúrico quente, ou ácido fosfórico quente ao longo de vários dias, 22-25 com ácido fosfórico a tornar-se o método preferido de remoção intina SEC. 2 No entanto, em curso investigação ao longo dos anos tem mostrado que vários esporos e pólenes têm diferentes graus de resistência à dura me processarthods comumente usados. 26,27 Alguns esporos e pólenes são completamente degradada e perder toda a integridade estrutural em soluções alcalinas fortes, ou tornar-se fortemente danificada em soluções ácidas fortes. 16 A variabilidade na resposta SEC para condições de tratamento é devido a variações sutis na química estrutura e morfologia do material de exina esporopolenina exina entre espécies. 28 Devido à variabilidade na robustez de cápsulas exinas esporopolenina (segundos), é necessário optimizar as condições de processamento para cada espécie de esporos e pólen. Esporos de plantas da espécie L. clavatum tornaram-se a única fonte mais amplamente estudado da SCEE. Propõe-se que isto é principalmente devido à sua ampla disponibilidade, baixo custo, monodispersity, robustez e química 9,29 Os esporos podem ser facilmente colhidas e conter conteúdo sporoplasmic sob a forma de agrupamentos de 1 -. 2 uM organelos celulares e biomolecules. 11 L. clavatum esporos foram usados como um lubrificante em pó natural, 30,31 base para cosméticos, 30 e 32-36 em fitoterapia para uma ampla gama de aplicações terapêuticas. O SCEE obtidos a partir de L. clavatum foram mostrados para ser mais resistente ao processamento de SECs de outras espécies de esporos e pólen. 2 Após o processamento, as SECs resultantes foram mostrados para manter suas estruturas microridge intrincados e alta uniformidade morfológica, proporcionando uma grande cavidade interna para encapsulamento. 7 estudos indicam que o L. SECs clavatum podem ser utilizados para a encapsulação de fármacos, vacinas, 10,13 11 proteínas, células, 8 7,14 óleos, 5-7,9 e suplementos alimentares. 5,15 observadas eficiências de carregamento SEC são relativamente elevadas em comparação com convencional materiais de encapsulamento. 7 Há também um certo número de benefícios relatadosSEC para encapsulação, tais como a capacidade de mascarar o gosto, 6,10 e para proporcionar um certo grau de protecção natural contra a oxidação. 12 Nos estudos existentes, o método de extracção mais utilizada SEC para L. clavatum baseia-se em quatro etapas principais. O primeiro passo é de refluxo do solvente em acetona durante até 12 h a 50 ° C para secar os esporos. 11 O segundo passo é a refluxo alcalina em hidróxido de potássio a 6% durante até 12 h a 120 ° C para remover citoplasmática e materiais proteicos. 11 Passo três é a refluxo ácido em ácido fosfórico a 85% durante 7 dias a 180 ° C para remover o material intina celulósico. 11 Passo quatro é um processo de lavagem exaustiva utilizando água, solventes, ácidos e bases para remover todo o material não-exina restante e resíduos químicos. Os principais objetivos da extração SEC em relação a aplicações de encapsulamento são para produzir cápsulas que estão vazios de material citoplasmático, livre from proteínas potencialmente alergênicas, e morfologicamente intactos. 2,37 No entanto, do ponto de vista de produção industrial, também é importante considerar factores económicos e ambientais adicionais, tais como, a eficiência energética, a duração de produção, segurança e resíduos resultantes. No que se refere à eficiência de energia, ambas as altas temperaturas e tempos de processamento longos afecta os custos de produção, bem como o impacto ambiental. duração produção e tempo de resposta são factores-chave que influenciam a rentabilidade de processamento. Particularmente preocupante é que o processamento de ácido fosfórico de alta temperatura aumenta a questões de segurança e é conhecido por resultar em escamação corrosivo que leva a aumentos significativos na manutenção da infra-estrutura e atrasos em tempos de rotação lote 38-40. Sempre que possível, minimizando o número de passos necessários pode levar a redução significativa dos resíduos produzidos. No entanto, a normalmente utilizada processo de quatro passos de L. extração clavatum SEC tem simplesmente evolved de décadas de pesquisa e teve pouco otimização processo real. Recentemente, Mundargi et al., 41 fez uma contribuição significativa para os trabalhos em curso neste domínio, através da avaliação e otimização de uma das técnicas de extração SEC mais comumente reportados de forma sistemática. Na primeira secção deste trabalho: desengorduramento de esporos é demonstrado utilizando processamento de acetona a 50 ° C durante 6 horas; sporoplasm procedimentos de remoção e intina são demonstradas utilizando processamento de ácido fosfórico a 85%, a 70 ° C durante 30 h; lavagem extensiva com água, solventes, ácido, e a base é utilizada para demonstrar a remoção de conteúdos sporoplasmic residuais; e SEC secagem é demonstrada utilizando secagem por convecção e vácuo secagem em estufa. Na terceira secção, SEC carregamento vácuo é demonstrada utilizando o carregamento de vácuo de um modelo de proteína, albumina de soro bovino (BSA), seguido de BSA-carregado-SEC lavagem e liofilização. Na quarta seção, a determinção da eficiência de encapsulamento de BSA é demonstrada utilizando centrifugação, a sonda de ultra-sons, e espectrometria de UV / Vis.

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		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:319px;">Lycopodium clavatum spores (s-type)</td>
			<td style="width:235px;">Sigma</td>
			<td style="width:171px;">19108-500G-F</td>
			<td style="width:171px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:319px;">Bovine serum albumin</td>
			<td style="width:235px;">Sigma</td>
			<td>A2153-50G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:319px;">FITC-conjugated BSA</td>
			<td style="width:235px;">Sigma</td>
			<td style="width:171px;">A9771-250MG</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:319px;">Phosphoric acid (85 % w/v)</td>
			<td style="width:235px;">Sigma</td>
			<td style="width:171px;">438081-2.5L&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:319px;">Hydrochloric acid</td>
			<td style="width:235px;">Sigma</td>
			<td style="width:171px;">V800202&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:319px;">Sodium hydroxide</td>
			<td style="width:235px;">Sigma</td>
			<td style="width:171px;">S5881-1KG&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:319px;">Acetone</td>
			<td style="width:235px;">Sigma</td>
			<td style="width:171px;">V800022</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:319px;">Ethanol</td>
			<td style="width:235px;">AcME&#160;</td>
			<td style="width:171px;">C000356</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:319px;">Deionized water</td>
			<td style="width:235px;">Millipore purified water&#160;</td>
			<td style="width:171px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:319px;">Qualitative filter paper (grade No. 1, cotton cellulose)</td>
			<td style="width:235px;"></td>
			<td style="width:171px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:319px;">Polystyrene microspheres (50 &#177; 1 &#181;m)&#160;</td>
			<td style="width:235px;">Thermoscientific (CA, USA)</td>
			<td style="width:171px;">4250A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:319px;">Vectashield&#160;</td>
			<td style="width:235px;">Vector labs (CA, USA)</td>
			<td style="width:171px;">H-1000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:319px;">Sticky-slides, D 263 M Schott glass, No.1.5H (170 &#956;m, 25 mm x 75 mm) unsterile glass slide</td>
			<td style="width:235px;">Ibidi GmbH (Munich, Germany)</td>
			<td style="width:171px;">10812</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:319px;">Commercial Lycopodium SECs (L-type)</td>
			<td style="width:235px;">Polysciences, Inc. (PA, USA)</td>
			<td style="width:171px;">16867-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:319px;">Heating plates</td>
			<td style="width:235px;">IKA, Germany</td>
			<td style="width:171px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:319px;">Scanning electron microscope</td>
			<td style="width:235px;">Jeol, Japan</td>
			<td style="width:171px;">&#160;JFC-1600</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:319px;">Elemental analyzer&#160;</td>
			<td style="width:235px;">Elementar, Germany</td>
			<td style="width:171px;">VarioEL III</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:319px;">FlowCam: The benchtop system</td>
			<td style="width:235px;">Fluid Imaging Technologies, USA</td>
			<td>FlowCamVS</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:319px;">Confocal laser scanning microscope</td>
			<td style="width:235px;">Carl Zeiss, Germany</td>
			<td style="width:171px;">LSM710</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:319px;">Freeze dryer</td>
			<td>Labconco, USA&#160;</td>
			<td style="width:171px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:319px;">UV Spectrometer</td>
			<td>Boeco, Germany</td>
			<td style="width:171px;">S220</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

extraction of plant-based capsules for microencapsulation applications

Microcápsulas derivados de esporos ou pólen à base de plantas fornecem uma plataforma robusta para uma gama diversificada de aplicações de microencapsulação. cápsulas esporopolenina exinas (segs) são obtidos quando os esporos ou pólen são processados ​​de modo a remover o conteúdo sporoplasmic internos. As microcápsulas ocas resultantes exibem um elevado grau de uniformidade micromerítica e reter características microestruturais intrincados relacionados com as espécies de plantas particulares. Aqui, demonstramos um processo simplificado para a produção de s a partir de esporos clavatum Lycopodium e para o carregamento de compostos hidrofílicos para estes segundos. O actual procedimento de isolamento SEC foi optimizado recentemente para reduzir significativamente os requisitos de processamento que são convencionalmente utilizados no isolamento SEC, e para assegurar a produção de microcápsulas intactas. Natural L. clavatum esporos são desengordurado com acetona, tratou-se com ácido fosfórico, e extensivamente lavadas para remover sporoplasmiconteúdo c. Depois de desengorduramento acetona, um único passo de processamento usando 85% de ácido fosfórico tem sido demonstrado para remover todo o conteúdo sporoplasmic. Ao limitar o tempo de processamento ácido para 30 horas, é possível isolar SECs limpas e evitar SEC fractura, o que tem sido demonstrado que ocorre com o tempo de processamento prolongado. lavagem extensiva com água, ácidos diluídos, diluir bases e solventes garante que todos os materiais e produtos químicos resíduos sporoplasmic são adequadamente removidos. A técnica de carga de vácuo é utilizada para carregar uma proteína modelo (Albumina de Soro Bovino) como um composto representativo hidrofílico. carregamento de vácuo proporciona uma técnica simples para carregar vários compostos, sem a necessidade de solventes agressivos ou produtos químicos indesejáveis ​​que são frequentemente necessários em outros protocolos de microencapsulação. Com base nestes protocolos de isolamento e de carregamento, segs proporcionar um material promissor para uso em uma grande variedade de aplicações de microencapsulação, tais como, agentes terapêuticos, alimentos, cosméticos, de cuidados pessoais e proddutos.

Processo de Extracção simplificado para esporopolenina exina Cápsulas O L. extracção clavatum SEC foi conseguida por três etapas principais: (1) Desengordurante usando acetona; (2) acidólise com ácido fosfórico a 85% (v / v); e (3) lavagem SEC extensa utilização de solventes. O fluxo do processo de extracção SEC simplificado é apresentado na Figura 1 A -. I Resu...

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Extraction of Plant-based Capsules for Microencapsulation Applications

Este protocolo / manuscrito descreve um processo simplificado para a produção de cápsulas exinas esporopolenina (segundos) a partir de esporos clavatum Lycopodium e para o carregamento de compostos hidrofílicos para estes segundos.

Cápsulas à base de plantas de extração de para aplicações de microencapsulação

Microcapsules derived from plant-based spores or pollen provide a robust platform for a diverse range of microencapsulation applications. Sporopollenin ...

Research

JoVE Journal

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Dois métodos para Decellularization de tecidos vegetais para aplicações de engenharia de tecidos

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