Name: preparation of primary mixed glial cultures from adult mouse spinal cord tissue
Uploaded: 2016-11-19T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Preparation of Primary Mixed Glial Cultures from Adult Mouse Spinal Cord Tissue at JoVE.com

Adult spinal cord mixed cultures were first developed using rats with grant support from an NIH/NIDA R01 award (PI De Leo) and an NIH T32 training grant (PI Green). These methods were further adapted for mouse spinal cords with support from the following grants: NIH/NIDA 5K01DA023503 (PI Cao), NIH/NINDS 5R21NS066130 (PI Cao), and NIH/NIGMS P20GM103643 (PI Meng). The authors would also like to thank Dr. Alejandro M. S. Mayer, Department of Pharmacology, Chicago College of Osteopathic Medicine, for his technical help in obtaining microglia-rich mixed glial cells.

Følgende protokoll ble godkjent av Institutional Animal Care og bruk Committee (IACUC) ved Universitetet i New England. Følgende protokoll er for å forberede gliaceller kulturer fra fire voksne mus ryggmargen. 1. Utarbeidelse av løsninger i en kultur Hood under aseptiske forhold <ol><li> Forbered vekstmedium: komplett Dulbeccos modifikasjon av Eagle medier (cDMEM) som inneholder DMEM (med 4,5 g / l glukose), 10% Fetal Bovine Serum (FBS), 2 mM L-glutamin, 100 IE / ml penicillin, 100 mg ...

<ol>
	<li>Gaskin, D. J., Richard, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+economic+costs+of+pain+in+the+United+States.">The economic costs of pain in the United States.</a> J Pain. 13 (8), 715-724 (2012).</li><li>Ji, R. R., Berta, T., Nedergaard, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Glia+and+pain:+Is+chronic+pain+a+gliopathy?.">Glia and pain: Is chronic pain a gliopathy?.</a> Pain. 154 (01), S10-S28 (2013).</li><li>Ni, M., Aschner, M., Maines, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neonatal+rat+primary+icroglia:+isolation,+culturing+and+selected+applications.">Neonatal rat primary icroglia: isolation, culturing and selected applications.</a> Curr Protoc Toxicol. , (2010).</li><li>Cao, L., Fei, L., Chang, T. T., DeLeo, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induction+of+interleukin-1beta+by+interleukin-4+in+lipopolysaccharide-treated+mixed+glial+cultures:+microglial-dependent+effects.">Induction of interleukin-1beta by interleukin-4 in lipopolysaccharide-treated mixed glial cultures: microglial-dependent effects.</a> J Neurochem. 102 (2), 408-419 (2007).</li><li>Malon, J. T., Maddula, S., Bell, H., Cao, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Involvement+of+calcitonin+gene-related+peptide+and+CCL2+production+in+CD40-mediated+behavioral+hypersensitivity+in+a+model+of+neuropathic+pain.">Involvement of calcitonin gene-related peptide and CCL2 production in CD40-mediated behavioral hypersensitivity in a model of neuropathic pain.</a> Neuron Glia Biol. 7 (2-4), 117-128 (2011).</li><li>Blasi, E., Barluzzi, R., Bocchini, V., Mazzolla, R., Bistoni, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immortalization+of+murine+microglial+cells+by+a+v-raf+/+v-myc+carrying+retrovirus.">Immortalization of murine microglial cells by a v-raf / v-myc carrying retrovirus.</a> J Neuroimmunol. 27 (2), 229-237 (1990).</li><li>Bocchini, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+immortalized+cell+line+expresses+properties+of+activated+microglial+cells.">An immortalized cell line expresses properties of activated microglial cells.</a> J Neurosci Res. 31 (4), 616-621 (1992).</li><li>Alliot, F. O., Marty, M. C., Cambier, D., Pessac, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+spontaneously+immortalized+mouse+microglial+cell+line+expressing+CD4.">A spontaneously immortalized mouse microglial cell line expressing CD4.</a> Dev Brain Res. 95 (1), 140-143 (1996).</li><li>Alliot, F. O., Pessac, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Astrocytic+cell+clones+derived+from+established+cultures+of+8-day+postnatal+mouse+cerebella.">Astrocytic cell clones derived from established cultures of 8-day postnatal mouse cerebella.</a> Brain Res. 306 (1-2), 283-291 (1984).</li><li>Malon, J. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microglial+content-dependent+inhibitory+effects+of+calcitonin+gene-related+peptide+(CGRP)+on+murine+retroviral+infection+of+glial+cells.">Microglial content-dependent inhibitory effects of calcitonin gene-related peptide (CGRP) on murine retroviral infection of glial cells.</a> J Neuroimmunol. 279, 64-70 (2015).</li><li>Cao, L., DeLeo, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CNS+Infiltrating+CD4(+)+T+lymphocytes+Contribute+to+Murine+Spinal+Nerve+Transection-Induced+Neuropathic+Pain.">CNS Infiltrating CD4(+) T lymphocytes Contribute to Murine Spinal Nerve Transection-Induced Neuropathic Pain.</a> Eur J Immunol. 38 (2), 448-458 (2008).</li><li>Mayer, A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+a+short-term+in+vitro+exposure+to+the+marine+toxin+domoic+acid+on+viability,+tumor+necrosis+factor-alpha,+matrix+metalloproteinase-9+and+superoxide+anion+release+by+rat+neonatal+microglia.">Effect of a short-term in vitro exposure to the marine toxin domoic acid on viability, tumor necrosis factor-alpha, matrix metalloproteinase-9 and superoxide anion release by rat neonatal microglia.</a> BMC Pharmacol. 1, 7 (2001).</li><li>Lawson, L. J., Perry, V. H., Dri, P., Gordon, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heterogeneity+in+the+distribution+and+morphology+of+microglia+in+the+normal+adult+mouse+brain.">Heterogeneity in the distribution and morphology of microglia in the normal adult mouse brain.</a> Neuroscience. 39 (1), 151-170 (1990).</li><li>Rock, R. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+Microglia+in+Central+Nervous+System+Infections.">Role of Microglia in Central Nervous System Infections.</a> Clin Microbiol Rev. 17 (4), 942-964 (2004).</li><li>Yang, I., Han, S. J., Kaur, G., Crane, C., Parsa, A. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Role+of+Microglia+in+Central+Nervous+System+Immunity+and+Glioma+Immunology.">The Role of Microglia in Central Nervous System Immunity and Glioma Immunology.</a> J Clin Neurosci. 17 (1), 6-10 (2010).</li></ol>

Det er viktig å utføre alle trinnene-, inkludert mediene skiftende tidsplan-på en konsekvent måte for å oppnå reproduserbare resultater mellom eksperimenter. Følgende trinn er spesielt kritisk i å få god kvalitet voksen mixed gliaceller. Enzymatisk nedbrytning er et viktig aspekt ved denne protokollen. Det er viktig at vevet bitene er godt spaltet for å oppnå en enkel cellesuspensjon. Imidlertid vil over fordøyelsen resultere i betydelig færre celler. Hver lab trenger for å utf...

Kronisk smerte er et alvorlig helseproblem som rammer ca 100 millioner voksne i USA, med en estimert årlig kostnad på opp til $ 635 000 000 000 1. Monterings bevis har antydet et betydelig bidrag av ryggmargs gliaceller i utviklingen av nevropatisk smerte, en av de mest ødeleggende typer kronisk smerte 2. En skikkelig in vitro kultur system ville hjelpe betraktelig i ytterligere undersøke rollene gliacellene på cellulære og molekylære nivåer. For tiden er in vitro gliaceller dyrkingssystemer som brukes av forskere omfatter hovedsakelig gliaceller avledet fra kortikale vev av nyfødte mus eller rottehjerner og udødelig glial cellelinjer avledet fra neonatal mus eller rotte primære gliaceller. Neonatale celler inneholder et betydelig antall udifferensierte celler som kan bli ytterligere differensieres til gliaceller (hovedsakelig astrocytter og mikroglia), for således å tilveiebringe enbundant celler for eksperimentell bruk tre. Imidlertid har vår tidligere studie vist at neonatal hjerne gliacellene svarte signifikant forskjellig fra voksne ryggmargs gliacellene på lipopolysakkarid (LPS) stimulering. For eksempel, interleukin (IL) -4 vises forbedret inhiberende effekt på LPS-indusert nitrogenoksid (NO) produksjon i voksen rotte ryggmarg gliaceller i forhold til neonatale hjerne gliaceller 4. Videre profiler av chemokin-produksjon ved stimulering av et nevropeptid, kalsitonin-relatert peptid (CGRP), er unarguably forskjellig mellom nyfødt musehjerne gliaceller (metoder som er beskrevet i Ref. 5) og voksne mus ryggmarg gliaceller (figur 1). Etablerte cellelinjer er lett å bruke og vedlikeholde, og kan tilveiebringe et stort antall celler i en kort tidsperiode. Generelt, udødeliggjort cellelinjer genereres enten ved hjelp av et virus-mediert immortalisering system (slik som den mest utbredte microglial cellelinje BV2) 6, 7 eller følgende the identifikasjon av spontan transformasjon (for eksempel astrocytt cellelinje C8-D1a og microglial cellelinje C8-B4) 8, 9 cellelinjer er utmerket i å studere de molekylære egenskaper av astrocytter og mikroglia hver for seg.; men de oppnådde resultatene fra cellelinjer krever alltid ytterligere validering i primærceller eller in vivo forhold. Det bør også bemerkes at det ikke har vært en rapport av en glial cellelinje som er avledet fra en gnager ryggmarg gliaceller. For å bidra til å undersøke rollen til ryggmargs gliaceller i utviklingen av nevropatisk smerte, et kultursystem som er avledet fra den voksne mus ryggmargen er utviklet ved å tilpasse en tidligere rapportert fremgangsmåte som brukes til å generere en voksen rotte blandede glial kulturer 4, 5 . musen ryggmarg glial kulturen ble ytterligere raffinert nylig 10 og er beskrevet i mer detalj i denne artikkelen. Voksen ryggmargs blandet glia kulturer cet etableres med en mus fra utvalgte stammer som passer til behovene til den spesielle undersøkelse, og cellene kan bli opprettholdt i kultur i opp til 21 d legge initiering av kulturen. Denne fremgangsmåten kan anvendes i nevropatisk smerte studier, samt i undersøkelser av forskjellige neurologiske sykdommer som involverer patologiske endringer i ryggmargen, slik som amyotrofisk lateral sklerose (ALS), humant immunsviktvirus (HIV) -associated sensorisk neuropati og multippel sklerose (MS).

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="2053">
	<tbody>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;width:489px;">Dulbecco&#8217;s modification of Eagle&#8217;s media (DMEM) with 4.5g/L glucose</td>
			<td style="width:277px;">Lonza</td>
			<td style="width:119px;">12-709F</td>
			<td style="width:1168px;">The cDMEM media is a standard, widely used culture media. Individual researcher can decide where to purchase the DMEM and all other component used to make cDMEM media.</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">L-Glutamine (100x)</td>
			<td style="width:277px;">Lonza</td>
			<td style="width:119px;">17-605E</td>
			<td>The L-glutamine is a standard, widely used component for various culture media. Individual researcher can decide where to purchase L-glutamine.</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;width:489px;">Antibiotic-Antimycotic Solution (100x)</td>
			<td style="width:277px;">Corning-Mediatech</td>
			<td style="width:119px;">30-004-CI</td>
			<td>This is a combination of penicillin, streptomycin and Amphotericin formulated to contain 10,000 units/ml penicillin G, 10 mg/ml streptomycin sulfate and 25 &#181;g/ml amphotericin B. Individual researcher can decide where to purchase individual component.</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">2-mercaptoethanol (2-ME)</td>
			<td style="width:277px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">M3148</td>
			<td>A BioReagent, suitable for cell culture, molecular biology and electrophoresis.</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Papain dissociation system</td>
			<td style="width:277px;">Worthington Biochemical Corporation</td>
			<td>LK003150</td>
			<td>Individual components of this kit can be purchased separately.&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;width:489px;">Percoll</td>
			<td>GE Health Care</td>
			<td style="width:119px;">17-0891-01</td>
			<td>Percoll is sold as sterile solution. Undiluted Percoll can be re-autoclaved if needed.</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;width:489px;">Lab-line incubator/shaker&#160;</td>
			<td style="width:277px;">Barstead/Lab-line</td>
			<td style="width:119px;">MaxQ4000&#160;</td>
			<td>This is the incubator/shaker we have currently. Other types of shakers can be used instead.</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;width:489px;">Lipopolysaccharides, Salmonella Minnesota Re595&#160;</td>
			<td style="width:277px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">L-9764</td>
			<td>Other strains of LPS can also induce glial responses. The magnitude of the responses may vary.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:489px;">Mouse IL-6 DuoSet ELISA&#160;</td>
			<td style="width:277px;">R&#38;D Systems</td>
			<td style="width:119px;">DY406</td>
			<td>Each individual Researcher can select the ELISA kit he or she prefers.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:489px;">Mouse TNF-alpha DuoSet ELISA</td>
			<td style="width:277px;">R&#38;D Systems</td>
			<td style="width:119px;">DY410</td>
			<td>Each individual Researcher can select the ELISA kit he or she prefers.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:489px;">Mouse IP-10 (CXCL10) DuoSet ELISA</td>
			<td style="width:277px;">R&#38;D Systems</td>
			<td style="width:119px;">DY466</td>
			<td>Each individual Researcher can select the ELISA kit he or she prefers.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:489px;">Mouse MCP-1 (CCL2) ELISA Opteia set</td>
			<td style="width:277px;">BD Biosciences</td>
			<td style="width:119px;">555260</td>
			<td>Each individual Researcher can select the ELISA kit he or she prefers.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:489px;">Mouse chemokine Q-Plex</td>
			<td style="width:277px;">Quansys Biosciences</td>
			<td style="width:119px;">120251MS</td>
			<td>This product was available for in-house assay at the time. Instead, we sent out samples to the manufacturer for analysis.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:489px;">APC-anti-mouse-CD45 (clone 30-F11)</td>
			<td style="width:277px;">eBioscience</td>
			<td style="width:119px;">17-0451</td>
			<td>Antibody of the same clone but from other vendors can be used.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:489px;">FITC-anti-mouse-CD11b (clone M1/70)</td>
			<td style="width:277px;">eBioscience</td>
			<td style="width:119px;">11-0112</td>
			<td>Antibody of the same clone but from other vendors can be used.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:489px;">Accuri C6 flow cytometer</td>
			<td style="width:277px;">BD Biosciences</td>
			<td style="width:119px;">BD Accuri C6&#160;</td>
			<td>Each individual Researcher can use any flow cytometer he or she prefers.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:489px;">FlowJo software</td>
			<td style="width:277px;">Tree Star, Inc.</td>
			<td style="width:119px;">FlowJo7.6.5</td>
			<td>Each individual Researcher can use any analysis software he or she prefers.</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

preparation of primary mixed glial cultures from adult mouse spinal cord tissue

Det har blitt godt akseptert at ryggmargs gliaceller responser bidra vesentlig til utviklingen av nevropatisk smerte. Enorm informasjon om gliaceller aktiviteter på de cellulære og molekylære nivå er oppnådd gjennom in vitro cellekultursystemer. In vitro-systemer benyttes, omfatter hovedsakelig primær gliaceller avledet fra neonatal hjerne kortikal vev og foreviget cellelinjer. Imidlertid kan disse systemene ikke reflekterer egenskapene til ryggmargen gliacellene in vivo. For ytterligere å undersøke rollene til ryggmargen gliaceller i utviklingen av perifer nerveskade-indusert nevropatisk smerte ved hjelp av en kultur system som bedre gjenspeiler in vivo tilstand, har vårt laboratorium utviklet en metode for å etablere primærryggmargs blandede glia kulturer fra voksne mus. Kort fortalt er ryggmargen hentet fra voksne mus og behandlet gjennom papain fordøyelsen etterfulgt av myelin fjerning med hiligheten-gradient medium. Enkeltcellesuspensjoner blir dyrket i fullstendig Dulbeccos modifiserte Eagle medium (cDMEM) supplert med 2-merkaptoetanol (2-ME) ved 35,9 o C. Disse kulturbetingelser ble optimalisert for vekst av blandede gliaceller. Under disse betingelser, cellene er klar til å brukes for eksperimentering mellom 12 - 14 d (celler er vanligvis i logaritmisk fase i løpet av denne tid) etter etableringen av kulturen (D 0) og kan holdes i kulturbetingelser opp til D-21. denne kulturen systemet kan brukes til å undersøke responsene fra ryggmargen gliaceller ved stimulering med forskjellige substanser og agenter. Dess nevropatisk smerte, kan dette system brukes til å studere glial responser i andre sykdommer som involverer patologiske forandringer av ryggmargs gliaceller.

Denne fremgangsmåte kan anvendes for å fremstille blandede gliaceller fra både mus og rotter. Den gjennomsnittlige totale celleantall per brønn i en 12-brønn plate på D 12 etter initiering av kulturen skal være forholdsvis stabile, med rundt 100.000 celler per brønn når cellene er avledet fra mus ryggmargen. Gliaceller hentet fra denne metoden kan brukes i eksperimenter som er utviklet for å undersøke voksen ryggmargs gliaceller reaksjoner ved administrering av stoffer og stof...

Watch this Scientific Journal Video about Preparation of Primary Mixed Glial Cultures from Adult Mouse Spinal Cord Tissue at JoVE.com

Preparation of Primary Mixed Glial Cultures from Adult Mouse Spinal Cord Tissue

Utviklingen av nevropatisk smerte innebærer patologiske forandringer av ryggmargs gliaceller. En pålitelig glial kultursystem avledet fra voksen ryggmarg vev og utformet for å studere disse cellene in vitro mangler. Derfor viser vi her hvordan etablere primær blandede gliaceller kulturer fra voksen mus ryggmarg vev.

Utarbeidelse av Primary Mixed Glial kulturer fra Adult Mouse Spinal Cord Tissue

It has been well-accepted that spinal cord glial responses contribute significantly to the development of neuropathic pain. Tremendous information ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

The Preparation of Oblique Spinal Cord Slices for Ventral Root Stimulation

Utarbeidelse av Oblique Spinal Cord Slices for Ventralt Root Stimulering

Electrophysiological recordings from spinal cord slices have proven to be a valuable technique to investigate a wide range of questions, from cellular to ...

Zebrafish In Situ Spinal Cord Preparation for Electrophysiological Recordings from Spinal Sensory and Motor Neurons

Zebrafish In Situ Spinal Cord Preparation for Electrophysiological Recordings from Spinal Sensory and Motor Neurons

sebrafisk<em&gt; In Situ</em&gt; Spinal Cord Forberedelse til Elektrofysiologiske Opptak fra Spinal sensoriske og motoriske nevroner

Zebrafish, first introduced as a developmental model, have gained popularity in many other fields. The ease of rearing large numbers of rapidly developing ...

Imaging Neural Activity in the Primary Somatosensory Cortex Using Thy1-GCaMP6s Transgenic Mice

Imaging Neural Activity in the Primary Somatosensory Cortex Using Thy1-GCaMP6s Transgenic Mice

Imaging nevrale aktivitet i primære Somatosensory Cortex ved hjelp av Thy1-GCaMP6s transgene mus

The mammalian brain exhibits marked symmetry across the sagittal plane. However, detailed description of neural dynamics in symmetric brain regions in ...

Laminectomy and Spinal Cord Window Implantation in the Mouse

Laminectomy og vindus kabel i mus

This protocol describes a method for spinal cord laminectomy and glass window implantation for in vivo imaging of the mouse spinal cord. An integrated ...

Isolation of Adult Spinal Cord Nuclei for Massively Parallel Single-nucleus RNA Sequencing

Isolasjon av voksen ryggmargen kjerner for massivt parallelle Single-kjernen RNA sekvensering

Probing an individual cell&#39;s gene expression enables the identification of cell type and cell state. Single-cell RNA sequencing has emerged as a ...

Intra-Arterial Delivery of Neural Stem Cells to the Rat and Mouse Brain: Application to Cerebral Ischemia

Intraarteriell levering av nevrale stamceller til rotte- og mushjernen: Søknad om cerebral iskemi

Neural stem cell (NSC) therapy is an emerging innovative treatment for stroke, traumatic brain injury and neurodegenerative disorders. As compared to ...

Magnetic Isolation of Microglial Cells from Neonate Mouse for Primary Cell Cultures

Magnetisk isolasjon av mikroglialceller fra nyfødt mus for primære cellekulturer

Microglia, as brain resident macrophages, are fundamental to several functions, including response to environmental stress and brain homeostasis. ...

Embryonic Mouse Brain Mixed Cell Cultures to Study Infection and Innate Immunity

Establishing Mixed Neuronal and Glial Cell Cultures from Embryonic Mouse Brains to Study Infection and Innate Immunity

Establishing Mixed Neuronal and Glial Cell Cultures from Embryonic Mouse Brains to Study Infection and Innate Immunity (Video) | JoVE 

Etablering av blandede nevron- og gliacellekulturer fra embryonale musehjerner for å studere infeksjon og medfødt immunitet

Models of the central nervous system (CNS) must recapitulate the complex network of interconnected cells found in vivo. The CNS consists primarily of ...

Extraction and Enzymatic Purification of Microglia from the Mouse Spinal Cord

Rapid and Efficient Enrichment of Mouse Spinal Cord Microglia

Microglia Research on Spinal Cord Heterogeneity and Purification (Video) | JoVE

Rask og effektiv anrikning av mus ryggmargen microglia

The vertebral column defines a vertebrate and shapes the spinal canal, a cavity that encloses and safeguards the spinal cord. Proper development and ...

Efficient Extraction of Astrocytes and Microglia from the Adult Mouse Spinal Cord

Isolation of Pure Astrocytes and Microglia from the Adult Mouse Spinal Cord For In Vitro Assays and Transcriptomic Studies

Isolation of Glial Cells from the Adult Mouse Spinal Cord (Video) | JoVE

Isolering av rene astrocytter og mikroglia fra ryggmargen hos voksne mus for in vitro-analyser og transkriptomiske studier

Astrocytes and microglia play pivotal roles in central nervous system development, injury responses, and neurodegenerative diseases. These highly dynamic ...