Name: preparation of primary mixed glial cultures from adult mouse spinal cord tissue
Uploaded: 2016-11-19T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Preparation of Primary Mixed Glial Cultures from Adult Mouse Spinal Cord Tissue at JoVE.com

Adult spinal cord mixed cultures were first developed using rats with grant support from an NIH/NIDA R01 award (PI De Leo) and an NIH T32 training grant (PI Green). These methods were further adapted for mouse spinal cords with support from the following grants: NIH/NIDA 5K01DA023503 (PI Cao), NIH/NINDS 5R21NS066130 (PI Cao), and NIH/NIGMS P20GM103643 (PI Meng). The authors would also like to thank Dr. Alejandro M. S. Mayer, Department of Pharmacology, Chicago College of Osteopathic Medicine, for his technical help in obtaining microglia-rich mixed glial cells.

Följande protokoll godkändes av Institutional Animal Care och användning kommittén (IACUC) vid University of New England. Följande protokoll är för framställning av gliaceller kulturer från fyra vuxna mus ryggmärg. 1. Beredning av lösningar i en kultur Hood under aseptiska förhållanden <ol><li> Förbereda odlingsmedia: komplett Dulbeccos modifikation av Eagles medium (cDMEM) innehållande DMEM (med 4,5 g / L glukos), 10% fetalt bovint serum (FBS), 2 mM L-glutamin, 100 lU / ml ...

<ol>
	<li>Gaskin, D. J., Richard, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+economic+costs+of+pain+in+the+United+States.">The economic costs of pain in the United States.</a> J Pain. 13 (8), 715-724 (2012).</li><li>Ji, R. R., Berta, T., Nedergaard, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Glia+and+pain:+Is+chronic+pain+a+gliopathy?.">Glia and pain: Is chronic pain a gliopathy?.</a> Pain. 154 (01), S10-S28 (2013).</li><li>Ni, M., Aschner, M., Maines, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neonatal+rat+primary+icroglia:+isolation,+culturing+and+selected+applications.">Neonatal rat primary icroglia: isolation, culturing and selected applications.</a> Curr Protoc Toxicol. , (2010).</li><li>Cao, L., Fei, L., Chang, T. T., DeLeo, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induction+of+interleukin-1beta+by+interleukin-4+in+lipopolysaccharide-treated+mixed+glial+cultures:+microglial-dependent+effects.">Induction of interleukin-1beta by interleukin-4 in lipopolysaccharide-treated mixed glial cultures: microglial-dependent effects.</a> J Neurochem. 102 (2), 408-419 (2007).</li><li>Malon, J. T., Maddula, S., Bell, H., Cao, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Involvement+of+calcitonin+gene-related+peptide+and+CCL2+production+in+CD40-mediated+behavioral+hypersensitivity+in+a+model+of+neuropathic+pain.">Involvement of calcitonin gene-related peptide and CCL2 production in CD40-mediated behavioral hypersensitivity in a model of neuropathic pain.</a> Neuron Glia Biol. 7 (2-4), 117-128 (2011).</li><li>Blasi, E., Barluzzi, R., Bocchini, V., Mazzolla, R., Bistoni, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immortalization+of+murine+microglial+cells+by+a+v-raf+/+v-myc+carrying+retrovirus.">Immortalization of murine microglial cells by a v-raf / v-myc carrying retrovirus.</a> J Neuroimmunol. 27 (2), 229-237 (1990).</li><li>Bocchini, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+immortalized+cell+line+expresses+properties+of+activated+microglial+cells.">An immortalized cell line expresses properties of activated microglial cells.</a> J Neurosci Res. 31 (4), 616-621 (1992).</li><li>Alliot, F. O., Marty, M. C., Cambier, D., Pessac, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+spontaneously+immortalized+mouse+microglial+cell+line+expressing+CD4.">A spontaneously immortalized mouse microglial cell line expressing CD4.</a> Dev Brain Res. 95 (1), 140-143 (1996).</li><li>Alliot, F. O., Pessac, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Astrocytic+cell+clones+derived+from+established+cultures+of+8-day+postnatal+mouse+cerebella.">Astrocytic cell clones derived from established cultures of 8-day postnatal mouse cerebella.</a> Brain Res. 306 (1-2), 283-291 (1984).</li><li>Malon, J. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microglial+content-dependent+inhibitory+effects+of+calcitonin+gene-related+peptide+(CGRP)+on+murine+retroviral+infection+of+glial+cells.">Microglial content-dependent inhibitory effects of calcitonin gene-related peptide (CGRP) on murine retroviral infection of glial cells.</a> J Neuroimmunol. 279, 64-70 (2015).</li><li>Cao, L., DeLeo, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CNS+Infiltrating+CD4(+)+T+lymphocytes+Contribute+to+Murine+Spinal+Nerve+Transection-Induced+Neuropathic+Pain.">CNS Infiltrating CD4(+) T lymphocytes Contribute to Murine Spinal Nerve Transection-Induced Neuropathic Pain.</a> Eur J Immunol. 38 (2), 448-458 (2008).</li><li>Mayer, A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+a+short-term+in+vitro+exposure+to+the+marine+toxin+domoic+acid+on+viability,+tumor+necrosis+factor-alpha,+matrix+metalloproteinase-9+and+superoxide+anion+release+by+rat+neonatal+microglia.">Effect of a short-term in vitro exposure to the marine toxin domoic acid on viability, tumor necrosis factor-alpha, matrix metalloproteinase-9 and superoxide anion release by rat neonatal microglia.</a> BMC Pharmacol. 1, 7 (2001).</li><li>Lawson, L. J., Perry, V. H., Dri, P., Gordon, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heterogeneity+in+the+distribution+and+morphology+of+microglia+in+the+normal+adult+mouse+brain.">Heterogeneity in the distribution and morphology of microglia in the normal adult mouse brain.</a> Neuroscience. 39 (1), 151-170 (1990).</li><li>Rock, R. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+Microglia+in+Central+Nervous+System+Infections.">Role of Microglia in Central Nervous System Infections.</a> Clin Microbiol Rev. 17 (4), 942-964 (2004).</li><li>Yang, I., Han, S. J., Kaur, G., Crane, C., Parsa, A. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Role+of+Microglia+in+Central+Nervous+System+Immunity+and+Glioma+Immunology.">The Role of Microglia in Central Nervous System Immunity and Glioma Immunology.</a> J Clin Neurosci. 17 (1), 6-10 (2010).</li></ol>

Det är viktigt att utföra alla steg-inklusive medierna förändras schema på ett konsekvent sätt i syfte att erhålla reproducerbara resultat mellan experiment. Följande steg är särskilt kritisk för att erhålla utmärkt kvalitet vuxen blandad glia. Den enzymatiska nedbrytning är en viktig aspekt av detta protokoll. Det är avgörande att vävnaden bitar är väl-digererad för att erhålla en enkelcellsuspension. Dock kommer över matsmältning leda till betydligt färre celler. Va...

Kronisk smärta är ett allvarligt hälsoproblem som drabbar cirka 100 miljoner vuxna i USA, med en uppskattad årlig kostnad på upp till $ 635.000.000.000 ett. Montera bevis har visat ett betydande bidrag av ryggmärgs gliaceller i utvecklingen av neuropatisk smärta, en av de mest förödande typer av kronisk smärta 2. En riktig odling in vitro-systemet skulle bidra avsevärt under ytterligare undersöka rollerna för gliaceller på cellulär och molekylär nivå. För närvarande är de in vitro-gliaceller kultursystem som används av forskare omfattar huvudsakligen gliaceller erhållna från kortikala vävnader från neonatala musen eller råtthjärnor och immortaliserade gliala cellinjer härledda från neonatal mus eller råtta primära gliaceller. Neonatala celler innehåller ett betydande antal odifferentierade celler som kan ytterligare differentieras till gliaceller (främst astrocyter och mikroglia), vilket ger enbundant celler för experimentell användning 3. Dock har vår tidigare studie visat att neonatal hjärn gliaceller svarade signifikant annorlunda än vuxna ryggmärgen gliaceller på lipopolysackarid (LPS) stimulering. Till exempel, interleukin (IL) -4 som visas förstärkt hämmande effekter på LPS-inducerad kväveoxid (NO) produktion i vuxen råtta ryggmärgen Glia jämfört med neonatal hjärna glia 4. Vidare profilerna av kemokinproduktion efter stimulering genom en neuropeptid, kalcitonin-gen-relaterad peptid (CGRP), är obestridligen olika mellan neonatal mushjärna glia (metoder som beskrivs i ref. 5) och vuxen mus ryggmärg glia (Figur 1). Etablerade cellinjer är lätta att använda och underhålla och kan ge ett stort antal celler i en kort tidsperiod. I allmänhet immortaliserade cellinjer genereras antingen med användning av ett virus-medierad immortalisering systemet (såsom utbredda microglial cellinje BV2) 6, 7 eller efter the identifiering av spontan transformation (såsom astrocyt cellinjen C8-D1A och microglial cellinje C8-B4) 8, 9 Cellinjer är utmärkta i att studera de molekylära egenskaperna hos astrocyter och mikroglia individuellt.; emellertid de resultat som erhållits från cellinjer kräver alltid ytterligare validering i primära celler eller i in vivo-betingelser. Det bör också noteras att det inte har funnits en rapport av en glia-cellinje som är härledd från en gnagare ryggmärgen glia. Att hjälpa till att undersöka rollen av ryggmärgs gliaceller i utvecklingen av neuropatisk smärta, ett kultursystem som är härledd från vuxen mus ryggmärg har utvecklats genom att anpassa en tidigare rapporterade metoden som används för att generera från vuxen råtta blandade gliaceller kulturer 4, 5 . musen ryggmärgen gliaceller kulturen ytterligare förfinas nyligen 10 och beskrivs mer detaljerat i den här artikeln. Vuxna ryggmärgen blandade gliaceller kulturer cen upprättas med en mus från utvalda stammar som passar behoven hos den särskilda studien, och celler kan upprätthållas i odling under upp till 21 d lägga initiering av kulturen. Denna metod kan användas i neuropatiska smärtstudier, samt i undersökningar av olika neurologiska sjukdomar som involverar patologiska förändringar i ryggmärgen, såsom amyotrofisk lateralskleros (ALS), humant immunbristvirus (HIV) -associated sensorisk neuropati och multipel skleros (MS).

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="2053">
	<tbody>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;width:489px;">Dulbecco&#8217;s modification of Eagle&#8217;s media (DMEM) with 4.5g/L glucose</td>
			<td style="width:277px;">Lonza</td>
			<td style="width:119px;">12-709F</td>
			<td style="width:1168px;">The cDMEM media is a standard, widely used culture media. Individual researcher can decide where to purchase the DMEM and all other component used to make cDMEM media.</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">L-Glutamine (100x)</td>
			<td style="width:277px;">Lonza</td>
			<td style="width:119px;">17-605E</td>
			<td>The L-glutamine is a standard, widely used component for various culture media. Individual researcher can decide where to purchase L-glutamine.</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;width:489px;">Antibiotic-Antimycotic Solution (100x)</td>
			<td style="width:277px;">Corning-Mediatech</td>
			<td style="width:119px;">30-004-CI</td>
			<td>This is a combination of penicillin, streptomycin and Amphotericin formulated to contain 10,000 units/ml penicillin G, 10 mg/ml streptomycin sulfate and 25 &#181;g/ml amphotericin B. Individual researcher can decide where to purchase individual component.</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">2-mercaptoethanol (2-ME)</td>
			<td style="width:277px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">M3148</td>
			<td>A BioReagent, suitable for cell culture, molecular biology and electrophoresis.</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Papain dissociation system</td>
			<td style="width:277px;">Worthington Biochemical Corporation</td>
			<td>LK003150</td>
			<td>Individual components of this kit can be purchased separately.&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;width:489px;">Percoll</td>
			<td>GE Health Care</td>
			<td style="width:119px;">17-0891-01</td>
			<td>Percoll is sold as sterile solution. Undiluted Percoll can be re-autoclaved if needed.</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;width:489px;">Lab-line incubator/shaker&#160;</td>
			<td style="width:277px;">Barstead/Lab-line</td>
			<td style="width:119px;">MaxQ4000&#160;</td>
			<td>This is the incubator/shaker we have currently. Other types of shakers can be used instead.</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;width:489px;">Lipopolysaccharides, Salmonella Minnesota Re595&#160;</td>
			<td style="width:277px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">L-9764</td>
			<td>Other strains of LPS can also induce glial responses. The magnitude of the responses may vary.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:489px;">Mouse IL-6 DuoSet ELISA&#160;</td>
			<td style="width:277px;">R&#38;D Systems</td>
			<td style="width:119px;">DY406</td>
			<td>Each individual Researcher can select the ELISA kit he or she prefers.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:489px;">Mouse TNF-alpha DuoSet ELISA</td>
			<td style="width:277px;">R&#38;D Systems</td>
			<td style="width:119px;">DY410</td>
			<td>Each individual Researcher can select the ELISA kit he or she prefers.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:489px;">Mouse IP-10 (CXCL10) DuoSet ELISA</td>
			<td style="width:277px;">R&#38;D Systems</td>
			<td style="width:119px;">DY466</td>
			<td>Each individual Researcher can select the ELISA kit he or she prefers.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:489px;">Mouse MCP-1 (CCL2) ELISA Opteia set</td>
			<td style="width:277px;">BD Biosciences</td>
			<td style="width:119px;">555260</td>
			<td>Each individual Researcher can select the ELISA kit he or she prefers.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:489px;">Mouse chemokine Q-Plex</td>
			<td style="width:277px;">Quansys Biosciences</td>
			<td style="width:119px;">120251MS</td>
			<td>This product was available for in-house assay at the time. Instead, we sent out samples to the manufacturer for analysis.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:489px;">APC-anti-mouse-CD45 (clone 30-F11)</td>
			<td style="width:277px;">eBioscience</td>
			<td style="width:119px;">17-0451</td>
			<td>Antibody of the same clone but from other vendors can be used.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:489px;">FITC-anti-mouse-CD11b (clone M1/70)</td>
			<td style="width:277px;">eBioscience</td>
			<td style="width:119px;">11-0112</td>
			<td>Antibody of the same clone but from other vendors can be used.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:489px;">Accuri C6 flow cytometer</td>
			<td style="width:277px;">BD Biosciences</td>
			<td style="width:119px;">BD Accuri C6&#160;</td>
			<td>Each individual Researcher can use any flow cytometer he or she prefers.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:489px;">FlowJo software</td>
			<td style="width:277px;">Tree Star, Inc.</td>
			<td style="width:119px;">FlowJo7.6.5</td>
			<td>Each individual Researcher can use any analysis software he or she prefers.</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

preparation of primary mixed glial cultures from adult mouse spinal cord tissue

Det har väl accepterat att ryggmärgen gliaceller svar bidrar i hög grad till utvecklingen av neuropatisk smärta. Enorma information om gliaceller aktiviteter på cellulär och molekylär nivå har erhållits genom in vitro cellodlingssystem. De in vitro-system som används, omfattar huvudsakligen primära glia härledd från neonatal hjärna kortikal vävnad och odödliggjorda cellinjer. Dock kan dessa system inte speglar egenskaperna hos ryggmärgs gliaceller in vivo. För att ytterligare undersöka rollerna för ryggmärgs gliaceller i utvecklingen av perifer nervskada inducerad neuropatisk smärta med ett odlingssystem som bättre speglar in vivo tillstånd, har vårt laboratorium utvecklat en metod för att fastställa primär ryggmärgs blandade gliaceller kulturer från vuxna möss. I korthet är ryggmärg in från vuxna möss och bearbetas genom papaindigestion följt av myelin avlägsnande med hålorhet-gradient medium. Enkelcellsuspensioner odlas i fullständigt Dulbeccos modifierade Eagle-medium (cDMEM) kompletterat med 2-merkaptoetanol (2-ME) vid 35,9 ° C Dessa odlingsbetingelser optimerades speciellt för tillväxten av blandade gliaceller. Under dessa betingelser, cellerna är redo att användas för experiment mellan 12-14 d (celler är vanligen i log-fasen under denna tid) efter upprättandet av kulturen (D 0) och kan hållas i odlingsbetingelser upp till D 21. detta odlingssystem kan användas för att undersöka svaren från ryggmärgs gliaceller vid stimulering med olika substanser och agenter. Förutom neuropatisk smärta, kan detta system användas för att studera gliaceller svar i andra sjukdomar som involverar patologiska förändringar av ryggmärgs gliaceller.

Denna metod kan användas för att framställa blandade gliaceller från både möss och råttor. Det genomsnittliga totala antalet celler per brunn i en 12-brunnar på D 12 post-initiering av kulturen bör vara relativt stabil, med ungefär 100.000 celler per brunn när celler är härledda från mus ryggmärg. Gliaceller erhållna från denna metod kan användas i experiment som är utformade för att undersöka vuxna ryggmärgen gliaceller svar vid administrering av ämnen och agenter...

Watch this Scientific Journal Video about Preparation of Primary Mixed Glial Cultures from Adult Mouse Spinal Cord Tissue at JoVE.com

Preparation of Primary Mixed Glial Cultures from Adult Mouse Spinal Cord Tissue

Utvecklingen av neuropatisk smärta innebär patologiska förändringar av ryggmärgs gliaceller. Ett pålitligt gliaceller odlingssystemet som härrör från vuxna ryggmärgsvävnad och utformade för att studera dessa celler in vitro saknas. Därför visar vi här hur man kan upprätta primära blandade gliaceller kulturer från vuxen mus ryggmärg.

Framställning av primära blandade Glial kulturer från vuxen mus ryggmärg

It has been well-accepted that spinal cord glial responses contribute significantly to the development of neuropathic pain. Tremendous information ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

The Preparation of Oblique Spinal Cord Slices for Ventral Root Stimulation

Beredning av Oblique ryggmärgs skivor för ventrala Root Stimulering

Electrophysiological recordings from spinal cord slices have proven to be a valuable technique to investigate a wide range of questions, from cellular to ...

Zebrafish In Situ Spinal Cord Preparation for Electrophysiological Recordings from Spinal Sensory and Motor Neurons

Zebrafish In Situ Spinal Cord Preparation for Electrophysiological Recordings from Spinal Sensory and Motor Neurons

zebrafisk<em&gt; In Situ</em&gt; Spinal Cord Förberedelse för elektrofysiologiska inspelningar från Spinal sensoriska och motoriska nervceller

Zebrafish, first introduced as a developmental model, have gained popularity in many other fields. The ease of rearing large numbers of rapidly developing ...

Imaging Neural Activity in the Primary Somatosensory Cortex Using Thy1-GCaMP6s Transgenic Mice

Imaging Neural Activity in the Primary Somatosensory Cortex Using Thy1-GCaMP6s Transgenic Mice

Imaging Neural aktivitet i den primära somatosensoriska Cortex med Thy1-GCaMP6s transgena möss

The mammalian brain exhibits marked symmetry across the sagittal plane. However, detailed description of neural dynamics in symmetric brain regions in ...

Laminectomy and Spinal Cord Window Implantation in the Mouse

Implantation av laminektomi och Ryggmärgs fönster i musen

This protocol describes a method for spinal cord laminectomy and glass window implantation for in vivo imaging of the mouse spinal cord. An integrated ...

Isolation of Adult Spinal Cord Nuclei for Massively Parallel Single-nucleus RNA Sequencing

Isolering av vuxna ryggmärgen kärnor för massivt parallella singel-nucleus RNA-sekvensering

Probing an individual cell&#39;s gene expression enables the identification of cell type and cell state. Single-cell RNA sequencing has emerged as a ...

Intra-Arterial Delivery of Neural Stem Cells to the Rat and Mouse Brain: Application to Cerebral Ischemia

Intra-arteriell leverans av neurala stamceller till råtta och mus hjärnan: Ansökan till cerebral ischemi

Neural stem cell (NSC) therapy is an emerging innovative treatment for stroke, traumatic brain injury and neurodegenerative disorders. As compared to ...

Magnetic Isolation of Microglial Cells from Neonate Mouse for Primary Cell Cultures

Magnetisk isolering av mikrogliaceller från nyfödd mus för primära cellkulturer

Microglia, as brain resident macrophages, are fundamental to several functions, including response to environmental stress and brain homeostasis. ...

Embryonic Mouse Brain Mixed Cell Cultures to Study Infection and Innate Immunity

Establishing Mixed Neuronal and Glial Cell Cultures from Embryonic Mouse Brains to Study Infection and Innate Immunity

Establishing Mixed Neuronal and Glial Cell Cultures from Embryonic Mouse Brains to Study Infection and Innate Immunity (Video) | JoVE 

Etablera blandade neuronala och gliacellskulturer från embryonala mushjärnor för att studera infektion och medfödd immunitet

Models of the central nervous system (CNS) must recapitulate the complex network of interconnected cells found in vivo. The CNS consists primarily of ...

Extraction and Enzymatic Purification of Microglia from the Mouse Spinal Cord

Rapid and Efficient Enrichment of Mouse Spinal Cord Microglia

Microglia Research on Spinal Cord Heterogeneity and Purification (Video) | JoVE

Snabb och effektiv anrikning av musens ryggmärgsmikroglia

The vertebral column defines a vertebrate and shapes the spinal canal, a cavity that encloses and safeguards the spinal cord. Proper development and ...

Efficient Extraction of Astrocytes and Microglia from the Adult Mouse Spinal Cord

Isolation of Pure Astrocytes and Microglia from the Adult Mouse Spinal Cord For In Vitro Assays and Transcriptomic Studies

Isolation of Glial Cells from the Adult Mouse Spinal Cord (Video) | JoVE

Isolering av rena astrocyter och mikroglia från ryggmärgen hos vuxna möss för in vitro-analyser och transkriptomiska studier

Astrocytes and microglia play pivotal roles in central nervous system development, injury responses, and neurodegenerative diseases. These highly dynamic ...