Name: visualizing the interrenal steroidogenic tissue and its vascular microenvironment in zebrafish
Uploaded: 2016-12-21T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Visualizing the Interrenal Steroidogenic Tissue and Its Vascular Microenvironment in Zebrafish at JoVE.com

Wir danken Prof. Christoph Englert und Prof. Didier Stainier zum Verschenken der Tg (wt1b: GFP) LI1 und Tg (kdrl: EGFP) S843 Stämme sind, und die Taiwan Zebrabärbling Core Facility für die Bereitstellung von Tg (kdrl: mCherry) CI5. Diese Studie wurde unterstützt durch Zuschüsse aus Taiwan Ministerium für Wissenschaft und Technologie (96-2628-B-029-002-MY3, unterstützt 101-2313-B-029-001, 102-2628-B-029-002-MY3, 102- 2321-B-400-018).

Ethikerklärung: Alle experimentellen Verfahren auf Zebrabärbling wurden von der Institutional Animal Care und Use Committee von Tunghai University (IRB Zulassung NO 101-12.) Genehmigt und in Übereinstimmung mit den genehmigten Richtlinien durchgeführt. 1. Stammlösungen für 3β -HSD enzymatischen Aktivität Färbung <ol><li> Vorbereitung trans-Dehydroandrosteron [10 mg / ml in Dimethylsulfoxid (DMSO)]. </li><li> Bereiten β-Nicotinamidadenindinucleotid-Hydrat (1,2 mg / ml in 0,1 M Pho...

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	<li>Hsu, H. J., Lin, G., Chung, B. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Parallel+early+development+of+zebrafish+interrenal+glands+and+pronephros:+differential+control+by+wt1+and+ff1b.">Parallel early development of zebrafish interrenal glands and pronephros: differential control by wt1 and ff1b.</a> Development. 130, 2107-2116 (2003).</li><li>To, T. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pituitary-interrenal+interaction+in+zebrafish+interrenal+organ+development.">Pituitary-interrenal interaction in zebrafish interrenal organ development.</a> Mol Endocrinol. 21, 472-485 (2007).</li><li>Liu, Y. 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D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+inherited+variant+of+the+3+beta-hydroxysteroid+dehydrogenase-isomerase+deficiency+syndrome:+evidence+for+the+existence+of+two+isoenzymes.">A new inherited variant of the 3 beta-hydroxysteroid dehydrogenase-isomerase deficiency syndrome: evidence for the existence of two isoenzymes.</a> J Clin Endocrinol Metab. 63, 360-367 (1986).</li><li>Lachance, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+human+3+beta-hydroxysteroid+dehydrogenase/delta+5-delta+4-isomerase+gene+and+its+expression+in+mammalian+cells.">Characterization of human 3 beta-hydroxysteroid dehydrogenase/delta 5-delta 4-isomerase gene and its expression in mammalian cells.</a> J Biol Chem. 267, 3551 (1992).</li><li>Simard, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+biology+of+the+3beta-hydroxysteroid+dehydrogenase/delta5-delta4+isomerase+gene+family.">Molecular biology of the 3beta-hydroxysteroid dehydrogenase/delta5-delta4 isomerase gene family.</a> Endocr Rev. 26, 525-582 (2005).</li><li>Lin, J. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Two+zebrafish+hsd3b+genes+are+distinct+in+function,+expression,+and+evolution.">Two zebrafish hsd3b genes are distinct in function, expression, and evolution.</a> Endocrinology. 156, 2854-2862 (2015).</li><li>Grassi Milano, E., Basari, F., Chimenti, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adrenocortical+and+adrenomedullary+homologs+in+eight+species+of+adult+and+developing+teleosts:+morphology,+histology,+and+immunohistochemistry.">Adrenocortical and adrenomedullary homologs in eight species of adult and developing teleosts: morphology, histology, and immunohistochemistry.</a> Gen Comp Endocrinol. 108, 483-496 (1997).</li><li>Chai, C., Liu, Y. W., Chan, W. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ff1b+is+required+for+the+development+of+steroidogenic+component+of+the+zebrafish+interrenal+organ.">Ff1b is required for the development of steroidogenic component of the zebrafish interrenal organ.</a> Dev Biol. 260, 226-244 (2003).</li><li>Liu, Y. W., Gao, W., Teh, H. L., Tan, J. H., Chan, W. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prox1+is+a+novel+coregulator+of+Ff1b+and+is+involved+in+the+embryonic+development+of+the+zebra+fish+interrenal+primordium.">Prox1 is a novel coregulator of Ff1b and is involved in the embryonic development of the zebra fish interrenal primordium.</a> Mol Cell Biol. 23, 7243-7255 (2003).</li><li>Chai, C., Liu, Y. W., Chan, W. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ff1b+is+required+for+the+development+of+steroidogenic+component+of+the+zebrafish+interrenal+organ.">Ff1b is required for the development of steroidogenic component of the zebrafish interrenal organ.</a> Dev. Biol. 260, 226-244 (2003).</li><li>Chou, C. W., Zhuo, Y. L., Jiang, Z. Y., Liu, Y. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+hemodynamically-regulated+vascular+microenvironment+promotes+migration+of+the+steroidogenic+tissue+during+its+interaction+with+chromaffin+cells+in+the+zebrafish+embryo.">The hemodynamically-regulated vascular microenvironment promotes migration of the steroidogenic tissue during its interaction with chromaffin cells in the zebrafish embryo.</a> PLoS One. 9, e107997 (2014).</li><li>Liu, Y. W., Guo, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelium+is+required+for+the+promotion+of+interrenal+morphogenetic+movement+during+early+zebrafish+development.">Endothelium is required for the promotion of interrenal morphogenetic movement during early zebrafish development.</a> Dev Biol. 297, 44-58 (2006).</li><li>Jin, S. W., Beis, D., Mitchell, T., Chen, J. N., Stainier, D. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cellular+and+molecular+analyses+of+vascular+tube+and+lumen+formation+in+zebrafish.">Cellular and molecular analyses of vascular tube and lumen formation in zebrafish.</a> Development. 132, 5199-5209 (2005).</li><li>Proulx, K., Lu, A., Sumanas, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cranial+vasculature+in+zebrafish+forms+by+angioblast+cluster-derived+angiogenesis.">Cranial vasculature in zebrafish forms by angioblast cluster-derived angiogenesis.</a> Dev Biol. 348, 34-46 (2010).</li><li>Perner, B., Englert, C., Bollig, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Wilms+tumor+genes+wt1a+and+wt1b+control+different+steps+during+formation+of+the+zebrafish+pronephros.">The Wilms tumor genes wt1a and wt1b control different steps during formation of the zebrafish pronephros.</a> Dev Biol. 309, 87-96 (2007).</li><li>Chou, C. W., Chiu, C. H., Liu, Y. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fibronectin+mediates+correct+positioning+of+the+interrenal+organ+in+zebrafish.">Fibronectin mediates correct positioning of the interrenal organ in zebrafish.</a> Dev Dyn. 242, 432-443 (2013).</li><li>Chiu, C. H., Chou, C. W., Takada, S., Liu, Y. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+and+fibronectin+signaling+requirements+of+the+zebrafish+interrenal+vessel.">Development and fibronectin signaling requirements of the zebrafish interrenal vessel.</a> PLoS One. 7, e43040 (2012).</li></ol>

Die Signalstärke des 3β -HSD-Aktivität erhöht sich im Laufe der Reaktion. Klare Signale der 3β-HSD wurden nach 4 Stunden Reaktions für die Stufen von 28 HPF weiter erkannt. Jedoch erfordert die Reaktionsdauer empirische Bestimmung, abhängig von dem Zweck des Assays. In Fällen, in denen die Färbung über Nacht Verarbeitung erfordert, neigt eine leicht bläuliche Hintergrund auf den Proben zu entwickeln. Dieses Problem kann durch Erhöhen der Fixationsdauer (beispielsweise 4 Stunden in 4% PFAT bei RT) vo...

Die Nebenniere, eine entscheidende Komponente des Hypothalamus-Hypophysen-Nebennieren-Achse, sondert Steroide und koordiniert Steroid-Homöostase und die körperliche Reaktion auf Stress. Die Nebenniere besteht aus der äußeren Rinde, die Steroide in einer Zone spezifisch und innere Medulla, die Katecholamine synthetisiert absondert. Die Interrenal- Drüse in teleosts ist das Gegenstück der Nebenniere bei Säugetieren und ist steroidogenen Interrenal- und chromaffinen Zellen zusammengesetzt aus, die funktionale Äquivalente der Nebennierenrinde und Medulla sind jeweils 1-3. Studien mit der Zebrabärbling - Modell durchgeführt , haben berichtet , dass beide steroidogenen und chromaffinen Zelllinien von molekularen und zellulären Mechanismen gebildet sind ähnlich denen hoch in Säugetieren 1,2. Daher ist der Zebrabärbling ein potenziell leistungsfähiges Modell für genetische Erkrankungen zu studieren, neuroendokrinen Kontrolle und Systembiologie des Hypothalamus-Hypophysen-Nebennieren (Interrenal-) Achse. <p class = &quot;jove_content&quot;&gt; in der Nebenniere, 3β-Hsd katalysiert die Umwandlung von Progesteron aus Pregnenolon, 17α-Hydroxyprogesteron aus 17α-hydroxypregnelolone und Androstendion aus Dehydroepiandrosteron 4,5. 3β-HSD wichtig, alle Klassen der hormonellen Steroide für die Biosynthese, nämlich Progesteron, Glucocorticoide, Mineralocorticoiden, Androgene und Östrogene. Die beiden menschlichen 3β HSD Isoenzyme HSD3B1 und HSD3B2 sind differentiell exprimiert 6. HSD3B1 wird in der Plazenta und peripheren Geweben exprimiert, während HSD3B2 in der Nebennierenrinde und Gonaden exprimiert wird. Menschliche HSD3B1 und HSD3B2 co-Orthologe von Zebrabärbling hsd3b1, die am Interrenal- Gewebe und adulte Gonaden exprimiert wird; Zebrabärbling hsd3b2 ist ein maternal exprimierte Gen , dessen Transkripte verschwinden vor organogenesis 7. Das Protokoll des gesamten Montage 3β-Hsd enzymatischen Aktivitätstest für Zebrabärbling durch Modifizieren Levy-Verfahren entwickelt wurde, eins von Milano et al. , Auf Gefrierschnitten von acht Teleostier Arten 8. Aufgrund der Gewebedurchlässigkeit und optische Transparenz der Entwicklungs Zebrabärbling, Vollmontage 3β-Hsd Histochemie kann erfolgreich für die feste Zebrafischembryo und Larven und speziell die differenzierten Interrenal- Gewebe abzugrenzen verwendet werden. Dieses empfindliche und schnelle Assay wurde auf verschiedenen Mutanten und morphants angewendet wurden verschiedene Arten von Interrenal- dysmorphogenesis demonstriert. Die Interrenal- 3β -HSD - Aktivität im Embryo abwesend wo Spezifikation des Interrenal- Gewebe durch eine bestimmte Zuschlags des FF1b Transkriptionsfaktor gestört ist und verringert so die Interrenal- Differenzierung durch eine Zuschlags des FF1b coregulator Prox1 9,10 betroffen ist. Bemerkenswert ist , kann der 3β-HSD in Mutanten mit schweren frühzeitig Defekte wie einäugige Stecknadelkopf und schielen, wo der 3β-H detektiert werdensd histochemistry umreißt , wie die Interrenal- Zellmigration 11 betroffen. Die Differenzierung des Interrenal- Gewebe wird nicht einmal in der vollständigen Abwesenheit von Blut und Vaskulatur kompromittiert. Deshalb, wie Endothel-abgeleiteten Signale die Entwicklung Interrenal- Organ formen kann 12,13 bestimmt werden. Insgesamt ist dieser histochemischen Assay zur Untersuchung der Spezifikation, Differenzierung und Migration von steroidogenen Zellen im Zebrafisch Modell erfolgreich verwendet wurde. Daher sollte ein effizientes und zuverlässiges Werkzeug für jede genetische oder chemische Bildschirme Targeting Nebennieren- und Interrenal- Organstörungen sein.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="565">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:307px;">Confocal microscope</td>
			<td style="width:187px;">Carl Zeiss&#160;</td>
			<td style="width:72px;">LSM510&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">DMSO</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>D8418&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Glycerol</td>
			<td>USB</td>
			<td>US16374</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Hyclone Fetal Calf Serum&#160;</td>
			<td>GE Healthcare Life Sciences</td>
			<td>SH30073</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Nicotinamide</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>N0636</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">&#946;-Nicotinamide adenine dinucleotide hydrate</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>N1636</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">4-Nitro blue tetrazolium</td>
			<td>Promega</td>
			<td>S380C</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Nusieve GTG</td>
			<td>Lonza</td>
			<td>50081</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Paraformaldehyde</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P6148</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Phenylthiourea</td>
			<td>Sigma&#160;</td>
			<td>P7629</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Phosphate buffered saline</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P4417-100Tab</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">PYREX Spot Plate</td>
			<td>Corning</td>
			<td>7220-85</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Reef Salt</td>
			<td>AZOO</td>
			<td>AZ28001</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">trans-Dehydroandrosterone</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>D4000</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Triton X-100</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>T8787</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Tween 20</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P9416</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Vibratome</td>
			<td>Leica</td>
			<td>VT1000M</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

visualizing the interrenal steroidogenic tissue and its vascular microenvironment in zebrafish

This protocol introduces how to detect differentiated interrenal steroidogenic cells through a simple whole-mount enzymatic activity assay. Identifying differentiated steroidogenic tissues through chromogenic histochemical staining of 3-&#946;-Hydroxysteroid dehydrogenase /&#916;5-4 isomerase (3&#946;-Hsd) activity-positive cells is critical for monitoring the morphology and differentiation of adrenocortical and interrenal tissues in mammals and teleosts, respectively. In the zebrafish model, the optical transparency and tissue permeability of the developing embryos and larvae allow for whole-mount staining of 3&#946;-Hsd activity. This staining protocol, as performed on transgenic fluorescent reporter lines marking the developing pronephric and endothelial cells, enables the detection of the steroidogenic interrenal tissue in addition to the kidney and neighboring vasculature. In combination with vibratome sectioning, immunohistochemistry, and confocal microscopy, we can visualize and assay the vascular microenvironment of interrenal steroidogenic tissues. The 3&#946;-Hsd activity assay is essential for studying the cell biology of the zebrafish interrenal gland because to date, no suitable antibody is available for labeling zebrafish steroidogenic cells. Furthermore, this assay is rapid and simple, thus providing a powerful tool for mutant screens targeting adrenal (interrenal) genetic disorders as well as for determining disruption effects of chemicals on steroidogenesis in pharmaceutical or toxicological studies.

Um zu bestimmen , wie die steroidogenen Interrenal- Gewebe codevelops mit der pronephric Niere Glomeruli und seiner im Entstehen begriffenen Gefäße, die 3β -HSD enzymatische Aktivität Assay auf der doppelt transgenen Tg (wt1b: GFP) durchgeführt wurde , LI1; Tg (kdrl: mCherry) CI5 Embryo bei 34 HPF (Abbildung 1). In diesem Stadium wird die 3β-HSD-positive steroidogenen Gewebe rechts der Mittellinie liegt und unmittelbar kaudal...

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Visualizing the Interrenal Steroidogenic Tissue and Its Vascular Microenvironment in Zebrafish

Die Interrenal- Drüse in Zebrabärbling ist die Teleosteer Pendant der Säugetiernebenniere. Dieses Protokoll führt , wie das 3-β-Hydroxysteroid - Dehydrogenase (Δ 5-4 Isomerase; 3β-Hsd) zur Durchführung enzymatischer Aktivitätstest, der differenzierte steroidogenen Zellen in der Entwicklungs Zebrabärbling erkennt.

Visualisierung der Interrenal- Steroidogenic Gewebe und seine Vascular Mikromilieu in Zebrabärbling

This protocol introduces how to detect differentiated interrenal steroidogenic cells through a simple whole-mount enzymatic activity assay. Identifying ...

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Capturing Tissue Repair in Zebrafish Larvae with Time-lapse Brightfield Stereomicroscopy

Erfassen von Gewebereparatur in Zebrafisch-Larven mit Zeitrafferhellstereomikroskopie

The zebrafish larval tail fin is ideal for studying tissue regeneration due to the simple architecture of the larval fin-fold, which comprises of two ...

Forschung

Entwicklungsbiologie

Analysis of Zebrafish Larvae Skeletal Muscle Integrity with Evans Blue Dye

Analyse von Zebrafisch-Larven Skelettmuskel Integrität mit Evans Blue Dye

The zebrafish model is an emerging system for the study of neuromuscular disorders.  In the study of neuromuscular diseases, the integrity of the muscle ...

Dissection of Larval Zebrafish Gonadal Tissue

Dissection von Larval Zebrabärbling Gonadal Tissue

Although wild zebrafish possess a ZZ/ZW sex-determination system, domesticated zebrafish have lost the sex chromosome. They utilize a polygenic sex ...

Protocols for Visualizing Steroidogenic Organs and Their Interactive Organs with Immunostaining in the Fruit Fly Drosophila melanogaster

Protocols for Visualizing Steroidogenic Organs and Their Interactive Organs with Immunostaining in the Fruit Fly Drosophila melanogaster

Protokolle für die Visualisierung Steroidogenic Organe und deren Interactive Organe mit Immunostaining in der Fruchtfliege<em&gt; Drosophila melanogaster</em

In multicellular organisms, a small group of cells is endowed with a specialized function in their biogenic activity, inducing a systemic response ...

A Novel Mammary Fat Pad Transplantation Technique to Visualize the Vessel Generation of Vascular Endothelial Stem Cells

Eine neuartige Mamma-Fat-Pad-Transplantationstechnik zur Visualisierung der Gefäßerzeugung von vaskulären endothelialen Stammzellen

Endothelial cells (ECs) are the fundamental building blocks of the vascular architecture and mediate vascular growth and remodeling to ensure proper ...

Live Imaging of Mouse Secondary Palate Fusion

Live Imaging der Maus Sekundärer Gaumen Fusion

The fusion of the secondary palatal shelves to form the intact secondary palate is a key process in mammalian development and its disruption can lead to ...

Visualizing Multiciliated Cells in the Zebrafish Through a Combined Protocol of Whole Mount Fluorescent In Situ Hybridization and Immunofluorescence

Visualizing Multiciliated Cells in the Zebrafish Through a Combined Protocol of Whole Mount Fluorescent In Situ Hybridization and Immunofluorescence

Visualisierung von Multiciliated Zellen in der Zebrabärbling durch ein kombiniertes Protokoll der ganze Berg Leuchtstofflampen In Situ Hybridisierung und Immunfluoreszenz

In recent years, the zebrafish embryo has emerged as a popular model to study developmental biology due to traits such as ex utero embryo development and ...

Cell Aggregation Assays to Evaluate the Binding of the Drosophila Notch with Trans-Ligands and its Inhibition by Cis-Ligands

Cell Aggregation Assays to Evaluate the Binding of the Drosophila Notch with Trans-Ligands and its Inhibition by Cis-Ligands

Handy-Aggregation-Assays, die Bindung der Drosophila Kerbe mit Transzu bewerten-Liganden und ihre Hemmung von Cis-Liganden

Notch signaling is an evolutionarily conserved cell-cell communication system used broadly in animal development and adult maintenance. Interaction of the ...

Following Endocardial Tissue Movements via Cell Photoconversion in the Zebrafish Embryo

Folgenden endokardialen Gewebe Bewegungen über Zelle Ladungszustand des Zebrafish Embryos

During embryogenesis, cells undergo dynamic changes in cell behavior, and deciphering the cellular logic behind these changes is a fundamental goal in the ...

Visualizing the Node and Notochordal Plate In Gastrulating Mouse Embryos Using Scanning Electron Microscopy and Whole Mount Immunofluorescence

Visualisierung der Knoten und Notochordal Platte In Gastrulating Maus-Embryonen mittels Rasterelektronenmikroskopie und ganze Mount Immunfluoreszenz

The post-implantation mouse embryo undergoes major shape changes after the initiation of gastrulation and morphogenesis. A hallmark of morphogenesis is ...