Name: plunge freezing: a tool for the ultrastructural and immunolocalization studies of suspension cells in transmission electron microscopy
Uploaded: 2017-05-05T12:30:00
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हम उनकी मदद और पांडुलिपि पर टिप्पणियों के लिए एम Bouchecareilh, ई Tétaud, एस Duvezin-Caubet, और ए डेविन के लिए हमारी कृतज्ञता व्यक्त करते हैं। हम बोर्डो इमेजिंग सेंटर के इलेक्ट्रॉनिक इमेजिंग ध्रुव जहां छवियों ले जाया गया के आभारी हैं। यह काम केंद्र राष्ट्रीय डी ला Recherche Scientifique द्वारा समर्थित किया गया।

1. फॉर्मवर ग्रिड फिल्म की तैयारी नोट: निजी सुरक्षा उपकरण (दस्ताने, प्रयोगशाला कोट, चश्मा) का उपयोग कर एक धूआं हुड के तहत क्लोरोफॉर्म हेरफेर करें। 400 मेष इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपी तांबा ग्रिड का ...

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	<li>Palade, G. E., Porter, K. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Studies+on+the+endoplasmic+reticulum.+I.+Its+identification+in+cells+in+situ.">Studies on the endoplasmic reticulum. I. Its identification in cells in situ.</a> J Exp Med. 100 (6), 641-656 (1954).</li><li>Kellenberger, E., Johansen, R., Maeder, M., Bohrmann, B., Stauffer, E., Villiger, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Artefacts+and+morphological+changes+during+chemical+fixation.">Artefacts and morphological changes during chemical fixation.</a> J Microsc. 168 (Pt 2), 181-201 (1992).</li><li>Studer, D., Humbel, B. M., Chiquet, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electron+microscopy+of+high+pressure+frozen+samples:+bridging+the+gap+between+cellular+ultrastructure+and+atomic+resolution.">Electron microscopy of high pressure frozen samples: bridging the gap between cellular ultrastructure and atomic resolution.</a> Histochem Cell Biol. 130 (5), 877-889 (2008).</li><li>McDonald, K. 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L., Walter, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Autophagy+counterbalances+endoplasmic+reticulum+expansion+during+the+unfolded+protein+response.">Autophagy counterbalances endoplasmic reticulum expansion during the unfolded protein response.</a> PLoS Biol. 4 (12), 2311-2324 (2006).</li><li>Kissov&#225;, I., Salin, B., Schaeffer, J., Bhatia, S., Manon, S., Camougrand, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Selective+and+non-selective+autophagic+degradation+of+mitochondria+in+yeast.">Selective and non-selective autophagic degradation of mitochondria in yeast.</a> Autophagy. 3 (4), 329-336 (2007).</li><li>Gilkey, J. 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M., Yi, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Self-pressurized+rapid+freezing+(SPRF):+a+novel+cryofixation+method+for+specimen+preparation+in+electron+microscopy.">Self-pressurized rapid freezing (SPRF): a novel cryofixation method for specimen preparation in electron microscopy.</a> J Microsc. 235 (1), 25-35 (2009).</li><li>Lefebvre, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=LdFlabarin+a+new+BAR+domain+membrane+protein+of+Leishmania+flagellum.">LdFlabarin a new BAR domain membrane protein of Leishmania flagellum.</a> PLoS One. 8 (9), 1-12 (2013).</li><li>Tetaud, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=TbFlabarin,+a+flagellar+protein+of+Trypanosoma+brucei,+highlights+differences+between+Leishmania+and+Trypanosoma+flagellar-targeting+signals.">TbFlabarin, a flagellar protein of Trypanosoma brucei, highlights differences between Leishmania and Trypanosoma flagellar-targeting signals.</a> Exp Parasitol. 166, 97-107 (2016).</li><li>Wasmer, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Solid-state+NMR+spectroscopy+reveals+that+E+coli+inclusion+bodies+of+HET-s(218-289)+are+amyloids.">Solid-state NMR spectroscopy reveals that E coli inclusion bodies of HET-s(218-289) are amyloids.</a> Angew Chem Int Ed Engl. 48 (26), 4858-4860 (2009).</li><li>Lefebvre-Legendre, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Failure+to+assemble+the+alpha+3+beta+3+subcomplex+of+the+ATP+synthase+leads+to+accumulation+of+the+alpha+and+beta+subunits+within+inclusion+bodies+and+the+loss+of+mitochondrial+cristae+in+Saccharomyces+cerevisiae.">Failure to assemble the alpha 3 beta 3 subcomplex of the ATP synthase leads to accumulation of the alpha and beta subunits within inclusion bodies and the loss of mitochondrial cristae in Saccharomyces cerevisiae.</a> J Biol Chem. 280 (18), 18386-18389 (2005).</li><li>Paumard, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+ATP+synthase+is+involved+in+generating+mitochondrial+cristae+morphology.">The ATP synthase is involved in generating mitochondrial cristae morphology.</a> EMBO J. 21 (3), 221-230 (2002).</li><li>Gabriel, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Fox2-dependent+fatty+acid+&#223;-oxidation+pathway+coexists+both+in+peroxisomes+and+mitochondria+of+the+ascomycete+yeast+Candida+lusitaniae.">A Fox2-dependent fatty acid &#223;-oxidation pathway coexists both in peroxisomes and mitochondria of the ascomycete yeast Candida lusitaniae.</a> PLoS One. 9 (12), 1-27 (2014).</li><li>Dubochet, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+physics+of+rapid+cooling+and+its+implications+for+cryoimmobilization+of+cells.">The physics of rapid cooling and its implications for cryoimmobilization of cells.</a> Methods Cell Biol. 79, 7-21 (2007).</li><li>Meryman, H. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cryopreservation+of+living+cells:+principles+and+practice.">Cryopreservation of living cells: principles and practice.</a> Transfusion. 47 (5), 935-945 (2007).</li><li>Vanhecke, D., Graber, W., Studer, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Close-to-native+ultrastructural+preservation+by+high+pressure+freezing.">Close-to-native ultrastructural preservation by high pressure freezing.</a> Methods Cell Biol. 88, 151-164 (2008).</li><li>Bobik, K., Dunlap, J. R., Burch-Smith, T. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tandem+high-pressure+freezing+and+quick+freeze+substitution+of+plant+tissues+for+transmission+electron+microscopy.">Tandem high-pressure freezing and quick freeze substitution of plant tissues for transmission electron microscopy.</a> J Vis Exp. (92), e51844 (2014).</li><li>Pinan-Lucarr&#233;, B., Clav&#233;, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Monitoring+autophagy+in+the+filamentous+fungus+Podospora+anserina.">Monitoring autophagy in the filamentous fungus Podospora anserina.</a> Methods Enzymol. 451, 251-270 (2008).</li><li>Follet-Gueye, M. L., Pagny, S., Faye, L., Gomord, V., Driouich, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+improved+chemical+fixation+method+suitable+for+immunogold+localization+of+green+fluorescent+protein+in+the+Golgi+apparatus+of+tobacco+Bright+Yellow+(BY-2)+cells.">An improved chemical fixation method suitable for immunogold localization of green fluorescent protein in the Golgi apparatus of tobacco Bright Yellow (BY-2) cells.</a> J Histochem Cytochem. 51 (7), 931-940 (2003).</li><li>Jesus, D. M., Moussatche, N., Condit, R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+improved+high+pressure+freezing+and+freeze+substitution+method+to+preserve+the+labile+vaccinia+virus+nucleocapsid.">An improved high pressure freezing and freeze substitution method to preserve the labile vaccinia virus nucleocapsid.</a> J Struct Biol. 195 (1), 41-48 (2016).</li></ol>

TEM अंगों, कोशिकाओं और ऊतकों की ultrastructural अवलोकन के लिए एक शक्तिशाली तरीका है। Cryofixation / फ्रीज प्रतिस्थापन वर्तमान में दोनों फैटी और प्रोटीन प्रतिजनकता के संरक्षण के लिए सबसे अच्छा तरीका है। रासायनिक fixatives घुसन?...

किसी भी इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपी अध्ययन की सफलता के लिए नमूना तैयार करना महत्वपूर्ण है। ट्रांसमिशन इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपी (मंदिर) 1 के लिए ऊतक या कोशिकाओं को फिक्स करने के लिए पारंपरिक ईएम निर्धारण प्राथमिक विधि था। सबसे पहले, एल्डिहाइड और ऑस्मियम टेट्रोक्साइड का उपयोग कमरे के तापमान पर रासायनिक पदार्थों को ठीक करने के लिए किया जाता है। फिर, सामग्री कार्बनिक सॉल्वैंट्स के साथ निर्जलित है, घुसपैठ, और एपॉक्सी राल में एम्बेडेड है। यह विधि सेल में फिक्सिव्स के प्रवेश दर पर निर्भर है। नतीजतन, सेल्युलर सामग्री की कलाकृतियों और निष्कर्षण आमतौर पर 2 देखे जाते हैं। सेलुलर संरचनाओं के संरक्षण के लिए स्पष्ट रूप से एक बेहतर विकल्प 3 , उन्हें बरकरार रखना Cryomyation / फ्रीज प्रतिस्थापन विधि का उपयोग करके पतली राल खंडों में मंदिरों की उच्चतम गुणवत्ता 4 प्राप्त की जा सकती है। इस तकनीक का उद्देश्य वर्थिफाइड द्वि प्राप्त करना हैबर्फ के क्रिस्टल गठन या युक्त बर्फ के क्रिस्टल काफी छोटा कोशिकाओं के फैटी नुकसान न बिना ological नमूने हैं। उच्च दबाव ठंड (HPF) और अति तीव्र cryofixation है, जो भी ठंड (पीएफ) डुबकी कहा जाता है, नमूने cryofix करने के लिए दो तरीके हैं। HPF तत्क्षण सेल में अणुओं immobilizes और पारंपरिक ईएम निर्धारण के कारण नुकसान से बचा जाता है। ठंड मशीनों और स्वत: प्रतिस्थापन उपकरणों के कई प्रकार विकसित किया गया है 5। ठंड मशीनों और उपभोज्य (तरल नाइट्रोजन, वाहक नमूना आदि) महंगे हैं, लेकिन वे उच्च गुणवत्ता वाले इलेक्ट्रॉन micrographs 6, 7 के उत्पादन के लिए अनुमति देते हैं। पीएफ एक तकनीक है कि 1950 के दशक में इस्तेमाल किया गया था और के रूप में सरल और सस्ते 8 पीएफ प्रक्रिया के दौरान, तैयार नमूना एक तेजी से दर पर जमे हुए है प्राप्त करने के लिए बर्फ के क्रिस्टल कम से कम 3 से 5 एनएम आकार साहित्य में वर्णित किया गया है। इस उद्देश्य के लिए नमूना हैएक तरल cryogen में कूद गया, जैसे कि ईथेन, प्रोपेन, या एथेन-प्रोपेन मिश्रण। 1 9 50 के दशक से, इस तकनीक को उपयोगकर्ताओं की एक बड़ी संख्या में उपलब्ध कराने के लिए पीएफ के सुधार किए गए हैं। उच्च दबाव ठंड वर्तमान में केवल 50 माइक्रोन (डिस्क आकार के नमूनों के लिए 200 माइक्रोन की मोटाई तक) की तुलना में अधिक मोटी नमूनों की एक विशाल विविधता को फ्रीज करने का एकमात्र व्यवहार्य तरीका है, जबकि पीएफ व्यापक रूप से छवि छोटी वस्तुओं (&lt;100 एनएम ), जैसे मैक्रोमोलेकुलर कॉम्प्लेक्स को अनाकार की 9 पतली फिल्म में निलंबित कर दिया गया उदाहरण के लिए बड़े नमूने, यूकेरियोटिक कोशिकाओं को पीएफ द्वारा रोशन किया जा सकता है, लेकिन नमूना धारकों की आवश्यकता होती है, जैसे केशिका तांबे ट्यूब या सैंडविच सिस्टम 8 , 10 , 11 । यहां, विभिन्न निलंबन सेल संस्कृतियों के लिए एक तेज़, आसान उपयोग और कम लागत वाली डुबकी फ्रीजिंग / फ़्रीज-प्रतिस्थापन तकनीक का उपयोग किया जाता है।

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="849">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:215px;">Grids</td>
			<td style="width:213px;">Electron Microscopy Sciences</td>
			<td style="width:171px;">T400-Cu</td>
			<td style="width:251px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:215px;">Formvar</td>
			<td style="width:213px;">Electron Microscopy Sciences</td>
			<td align="right" style="width:171px;">15800</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:215px;">Propane N35</td>
			<td style="width:213px;"></td>
			<td style="width:171px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:215px;">Liquid nitrogen</td>
			<td style="width:213px;"></td>
			<td style="width:171px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:215px;">Double edge dissecting needle</td>
			<td style="width:213px;">Electron Microscopy Sciences</td>
			<td align="right" style="width:171px;">72947</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:215px;">Cryovials</td>
			<td style="width:213px;">Electron Microscopy Sciences</td>
			<td style="width:171px;">61802-02</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:215px;">Osmium tetroxide</td>
			<td style="width:213px;">Electron Microscopy Sciences</td>
			<td align="right" style="width:171px;">19130</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:215px;">Glass vial 8,5 ml</td>
			<td style="width:213px;">Electron Microscopy Sciences</td>
			<td align="right" style="width:171px;">64252</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:215px;">Uranyl acetate</td>
			<td style="width:213px;">Electron Microscopy Sciences</td>
			<td align="right" style="width:171px;">48851</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:215px;">Acetone</td>
			<td style="width:213px;">Sigma</td>
			<td align="right" style="width:171px;">32201</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:215px;">Ethanol 100%</td>
			<td style="width:213px;">Sigma</td>
			<td align="right" style="width:171px;">32221</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:215px;">Glass slides</td>
			<td style="width:213px;">VWR international</td>
			<td style="width:171px;">631-9439</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:215px;">Tweezers</td>
			<td style="width:213px;"></td>
			<td style="width:171px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:215px;">Acrylic resin</td>
			<td style="width:213px;">Electron Microscopy Sciences</td>
			<td align="right" style="width:171px;">104371</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:215px;">Epoxy resin M</td>
			<td style="width:213px;">Sigma</td>
			<td align="right" style="width:171px;">10951</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:215px;">Epoxy resin M hardener</td>
			<td style="width:213px;">Sigma</td>
			<td align="right" style="width:171px;">10953</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:215px;">Dibutyl phtalate&#160;</td>
			<td style="width:213px;">Sigma</td>
			<td align="right" style="width:171px;">80102</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:215px;">Epoxy resin M accelerateur</td>
			<td style="width:213px;">Sigma</td>
			<td align="right" style="width:171px;">10952</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:215px;">Crystallizer</td>
			<td style="width:213px;">Fischer scientific</td>
			<td style="width:171px;">08-762-9</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:215px;">Joseph paper</td>
			<td style="width:213px;">VWR international</td>
			<td style="width:171px;">111-5009</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:215px;">Brass cups</td>
			<td style="width:213px;"></td>
			<td style="width:171px;"></td>
			<td>do it yourself shop or made by yourself</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:215px;">Saccharomyces cerevisiae</td>
			<td style="width:213px;"></td>
			<td style="width:171px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:215px;">Shizosacharomyces cerevisiae</td>
			<td style="width:213px;"></td>
			<td style="width:171px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:215px;">Trypanosoma brucei</td>
			<td style="width:213px;"></td>
			<td style="width:171px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:215px;">Leishmania amazonensis</td>
			<td style="width:213px;"></td>
			<td style="width:171px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:215px;">Escherichia Coli&#160;</td>
			<td style="width:213px;"></td>
			<td style="width:171px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:215px;">Airtight box</td>
			<td style="width:213px;">Fischer scientific</td>
			<td style="width:171px;">7135-0001&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:215px;">Air purifying respirator</td>
			<td style="width:213px;">Fischer scientific</td>
			<td style="width:171px;">3M 7502&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:215px;">Cartridge for respirator</td>
			<td>Fischer scientific</td>
			<td style="width:171px;">3M 6001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:215px;">Particulate filter</td>
			<td style="width:213px;">Fischer scientific</td>
			<td style="width:171px;">3M 5N11&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

plunge freezing: a tool for the ultrastructural and immunolocalization studies of suspension cells in transmission electron microscopy

ट्रांसमिशन इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपी (टीईएम) सेल अल्ट्राक्चर का अध्ययन करने के लिए एक असाधारण उपकरण है, ताकि प्रोटीन को स्थानांतरित किया जा सके और बहुत उच्च संकल्प पर मैक्रोमोलेकुलर कॉम्प्लेक्स का अनुमान लगाया जा सके। हालांकि, देशी राज्य के लिए जितना करीब हो सके, सही नमूना संरक्षण आवश्यक है। उदाहरण के लिए, एल्डिहाइड के साथ परंपरागत इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपी (ईएम) निर्धारण, अच्छा अल्टरस्ट्रक्चर संरक्षण प्रदान नहीं करता है। फिक्सिस्टिक्स के धीमे गति से सेल पुनर्गठन और विभिन्न सेल घटकों के नुकसान को प्रेरित करता है। इसलिए, पारंपरिक ईएम निर्धारण एक तात्कालिक स्थिरीकरण और संरचनाओं और प्रतिजन के संरक्षण की अनुमति नहीं देता है। इंट्रासेल्युलर घटनाओं की जांच करने के लिए सबसे अच्छा विकल्प रिक्ति-प्रतिस्थापन निर्धारण पद्धति के बाद क्रिस्टीशन का उपयोग करना है जो अपने मूल अवस्था में कोशिकाओं को रखता है। उच्च दबाव ठंड / फ्रीज-प्रतिस्थापन, जो सेलुलर मूलभूत संरचना की अखंडता को सुरक्षित रखता है, यह सबसे अधिक इस्तेमाल किया जाने वाला तरीका है, लेकिन इसकी आवश्यकता हैउपकरण किया है। यहाँ एक और उपयोग में आसान-कम लागत वाली फ्रीज निर्धारण विधि निलंबन कोशिका संवर्धन के लिए फ्रीज प्रतिस्थापन के बाद प्रस्तुत किया है।

इस लेख में, ultrastructural (आंकड़े 1 और चित्रा 2) और immunolabeling (चित्रा 3) के अध्ययन के लिए एक और उपयोग में आसान-कम लागत वाली डुबकी ठंड विधि प्रस्तुत किया है। हम जानते हैं कि यह...

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Plunge Freezing: A Tool for the Ultrastructural and Immunolocalization Studies of Suspension Cells in Transmission Electron Microscopy

यह पांडुलिपि संचरण इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपी द्वारा निलंबन कोशिकाओं दृश्यमान करने के लिए एक और उपयोग में आसान-कम लागत वाली cryofixation विधि का वर्णन है।

डुबकी बर्फ़ीली: ट्रांसमिशन इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपी में निलंबन कोशिकाओं के Ultrastructural और Immunolocalization अध्ययन के लिए एक उपकरण

Transmission Electron Microscopy (TEM) is an extraordinary tool for studying cell ultrastructure, in order to localize proteins and visualize ...

Research

JoVE Journal

Biology

Preparation of embryos for Electron Microscopy of the Drosophila embryonic heart tube

Preparation of embryos for Electron Microscopy of the Drosophila embryonic heart tube

भ्रूण की इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपी के लिए तैयार ड्रोसोफिला भ्रूण दिल ट्यूब

The morphogenesis of the Drosophila  embryonic heart tube has emerged as a valuable model system for studying cell migration, cell-cell adhesion and cell ...

Mutagenesis and Functional Analysis of Ion Channels Heterologously Expressed in Mammalian Cells

Mutagenesis और आयन चैनल के कार्यात्मक विश्लेषण Heterologously स्तनधारी कोशिकाओं में व्यक्त

We will demonstrate how to study the functional effects of introducing a point mutation in an ion channel. We study G protein-gated inwardly rectifying ...

Tracking Morphogenetic Tissue Deformations in the Early Chick Embryo

प्रारंभिक चिकी भ्रूण में Morphogenetic ऊतक विरुपणों ट्रैकिंग

Embryonic epithelia undergo complex deformations (e.g. bending, twisting, folding, and stretching) to form the primitive organs of the early embryo. ...

Tandem High-pressure Freezing and Quick Freeze Substitution of Plant Tissues for Transmission Electron Microscopy

मिलकर उच्च दबाव बर्फ़ीली और ट्रांसमिशन इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपी के लिए संयंत्र के ऊतकों के त्वरित रुक प्रतिस्थापन

Since the 1940s transmission electron microscopy (TEM) has been providing biologists with ultra-high resolution images of biological materials. Yet, ...

Sample Preparation and Imaging of Exosomes by Transmission Electron Microscopy

ट्रांसमिशन इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपी द्वारा Exosomes की नमूना तैयारी और इमेजिंग

Exosomes are nano-sized extracellular vesicles secreted by body fluids and are known to represent the characteristics of cells that secrete them. The ...

Miniaturized Sample Preparation for Transmission Electron Microscopy

ट्रांसमिशन इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपी के लिए लघुकृत नमूना तैयारी

Due to recent technological progress, cryo-electron microscopy (cryo-EM) is rapidly becoming a standard method for the structural analysis of protein ...

Biological Sample Preparation by High-pressure Freezing, Microwave-assisted Contrast Enhancement, and Minimal Resin Embedding for Volume Imaging

उच्च दबाव ठंड, माइक्रोवेव की सहायता के विपरीत वृद्धि, और मात्रा इमेजिंग के लिए ंयूनतम राल Embedding द्वारा जैविक नमूना तैयारी

The described sample preparation technique is designed to combine the best quality of ultrastructural preservation with the most suitable contrast for the ...

Cryo-Electron Microscopic Grid Preparation for Time-Resolved Studies using a Novel Robotic System, Spotiton

एक उपन्यास रोबोटिक सिस्टम, स्पॉटिटन का उपयोग करके समय-हल किए गए अध्ययनों के लिए क्रायो-इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपिक ग्रिड तैयारी

The capture of short-lived molecular states triggered by the early encounter of two or more interacting particles continues to be an experimental ...

Rapid Freezing using Sandwich Freezing Device for Good Ultrastructural Preservation of Biological Specimens in Electron Microscopy

इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपी में जैविक नमूनों के अच्छे अल्ट्रास्ट्रक्चरल संरक्षण के लिए सैंडविच फ्रीजिंग डिवाइस का उपयोग करके तेजी से ठंड

Chemical fixation has been used for observing the ultrastructure of cells and tissues. However, this method does not adequately preserve the ...

In Situ Exploration of Murine Megakaryopoiesis using Transmission Electron Microscopy

In Situ Exploration of Murine Megakaryopoiesis using Transmission Electron Microscopy

सीटू में ट्रांसमिशन इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपी का उपयोग करके मुरीन मेगाकारियोपोइसिस की खोज

Differentiation and maturation of megakaryocytes occur in close association with the cellular and extracellular components of the bone marrow. These ...