Name: studying dynamic processes of nano-sized objects in liquid using scanning transmission electron microscopy
Uploaded: 2017-02-05T14:00:00
Duration: 10 min 29 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Studying Dynamic Processes of Nano-sized Objects in Liquid using Scanning Transmission Electron Microscopy at JoVE.com

We thank E. Arzt for his support through INM. The research was in part supported by the Leibniz Competition 2014.

<ol>
	<li>Ring, E. A., de Jonge, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microfluidic+system+for+transmission+electron+microscopy.">Microfluidic system for transmission electron microscopy.</a> Microsc. Microanal. 16, 622-629 (2010).</li><li>Ross, F. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Opportunities+and+challenges+in+liquid+cell+electron+microscopy.">Opportunities and challenges in liquid cell electron microscopy.</a> Science. 350, 9881-9889 (2015).</li><li>de Jonge, N., Ross, F. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electron+microscopy+of+specimens+in+liquid.">Electron microscopy of specimens in liquid.</a> Nat. Nanotechnol. 6, 695-704 (2011).</li><li>Zheng, H., Smith, R. K., Jun, Y. W., Kisielowski, C., Dahmen, U., Alivisatos, A. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Observation+of+single+colloidal+platinum+nanocrystal+growth+trajectories.">Observation of single colloidal platinum nanocrystal growth trajectories.</a> Science. 324, 1309-1312 (2009).</li><li>Evans, J. E., Jungjohann, K. L., Browning, N. D., Arslan, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Controlled+growth+of+nanoparticles+from+solution+with+in+situ+liquid+transmission+electron+microscopy.">Controlled growth of nanoparticles from solution with in situ liquid transmission electron microscopy.</a> Nano Lett. 11, 2809-2813 (2011).</li><li>Alloyeau, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Unravelling+kinetic+and+thermodynamic+effects+on+the+growth+of+gold+nanoplates+by+liquid+transmission+electron+microscopy.">Unravelling kinetic and thermodynamic effects on the growth of gold nanoplates by liquid transmission electron microscopy.</a> Nano Lett. 15, 2574-2581 (2015).</li><li>Smeets, P. J., Cho, K. R., Kempen, R. G., Sommerdijk, N. A., De Yoreo, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Calcium+carbonate+nucleation+driven+by+ion+binding+in+a+biomimetic+matrix+revealed+by+in+situ+electron+microscopy.">Calcium carbonate nucleation driven by ion binding in a biomimetic matrix revealed by in situ electron microscopy.</a> Nat. Mater. 14, 394-399 (2015).</li><li>Peckys, D. B., de Jonge, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Liquid+Scanning+Transmission+Electron+Microscopy:+Imaging+Protein+Complexes+in+their+Native+Environment+in+Whole+Eukaryotic+Cells.">Liquid Scanning Transmission Electron Microscopy: Imaging Protein Complexes in their Native Environment in Whole Eukaryotic Cells.</a> Microsc. Microanal. 20, 346-365 (2014).</li><li>de Jonge, N., Peckys, D. B., Kremers, G. J., Piston, D. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electron+microscopy+of+whole+cells+in+liquid+with+nanometer+resolution.">Electron microscopy of whole cells in liquid with nanometer resolution.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. 106, 2159-2164 (2009).</li><li>Evans, J. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Visualizing+macromolecular+complexes+with+in+situ+liquid+scanning+transmission+electron+microscopy.">Visualizing macromolecular complexes with in situ liquid scanning transmission electron microscopy.</a> Micron. 43, 1085-1090 (2012).</li><li>Dukes, M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improved+microchip+design+and+application+for+in+situ+transmission+electron+microscopy+of+macromolecules.">Improved microchip design and application for in situ transmission electron microscopy of macromolecules.</a> Microsc. Microanal. 20, 338-345 (2014).</li><li>Ring, E. A., Peckys, D. B., Dukes, M. J., Baudoin, J. P., de Jonge, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Silicon+nitride+windows+for+electron+microscopy+of+whole+cells.">Silicon nitride windows for electron microscopy of whole cells.</a> J. Microsc. 243, 273-283 (2011).</li><li>de Jonge, N., Pfaff, M., Peckys, D. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Practical+aspects+of+transmission+electron+microscopy+in+liquid.">Practical aspects of transmission electron microscopy in liquid.</a> Adv. Imag. Electr. Phys. 186, 1-37 (2014).</li><li>Verch, A., Pfaff, M., De Jonge, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Exceptionally+slow+movement+of+gold+nanoparticles+at+a+solid:liquid+interface+investigated+by+scanning+transmission+electron+microscopy.">Exceptionally slow movement of gold nanoparticles at a solid:liquid interface investigated by scanning transmission electron microscopy.</a> Langmuir. 31, 6956-6964 (2015).</li><li>Schneider, N. M., Norton, M. M., Mendel, B. J., Grogan, J. M., Ross, F. M., Bau, H. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electron-water+interactions+and+implications+for+liquid+cell+electron+microscopy.">Electron-water interactions and implications for liquid cell electron microscopy.</a> J. Phys. Chem. C. 118, 22373-22382 (2014).</li><li>Hermannsdoerfer, J., de Jonge, N., Verch, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electron+beam+induced+chemistry+of+gold+nanoparticles+in+saline+solution.">Electron beam induced chemistry of gold nanoparticles in saline solution.</a> Chem. Comm. 51, 16393-16396 (2015).</li><li>Schuh, T., de Jonge, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Liquid+scanning+transmission+electron+microscopy:+Nanoscale+imaging+in+micrometers-thick+liquids.">Liquid scanning transmission electron microscopy: Nanoscale imaging in micrometers-thick liquids.</a> C. R. Phys. 15, 214-223 (2014).</li><li>Jensen, E., Burrows, A., Molhave, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Monolithic+chip+system+with+a+microfluidic+channel+for+in+situ+electron+microscopy+of+liquids.">Monolithic chip system with a microfluidic channel for in situ electron microscopy of liquids.</a> Microsc. Microanal. 20, 445-451 (2014).</li><li>Creemer, J. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+MEMS+reactor+for+atomic-scale+microscopy+of+nanomaterials+under+industrially+relevant+conditions.">A MEMS reactor for atomic-scale microscopy of nanomaterials under industrially relevant conditions.</a> J. Microelectromech. Syst. 19, 254-264 (2010).</li><li>Williamson, M. J., Tromp, R. M., Vereecken, P. M., Hull, R., Ross, F. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dynamic+microscopy+of+nanoscale+cluster+growth+at+the+solid-liquid+interface.">Dynamic microscopy of nanoscale cluster growth at the solid-liquid interface.</a> Nat. Mater. 2, 532-536 (2003).</li><li>Thiberge, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Scanning+electron+microscopy+of+cells+and+tissues+under+fully+hydrated+conditions.">Scanning electron microscopy of cells and tissues under fully hydrated conditions.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. 101, 3346 (2004).</li><li>Chen, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=3D+motion+of+DNA-Au+nanoconjugates+in+graphene+liquid+cell+electron+microscopy.">3D motion of DNA-Au nanoconjugates in graphene liquid cell electron microscopy.</a> Nano Lett. 13, 4556-4561 (2013).</li><li>Yuk, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-resolution+EM+of+colloidal+nanocrystal+growth+using+graphene+liquid+cells.">High-resolution EM of colloidal nanocrystal growth using graphene liquid cells.</a> Science. 336, 61-64 (2012).</li><li>Reimer, L., Kohl, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Transmission electron microscopy: physics of image formation. , (2008).</li><li>Abellan, P., Woehl, T. J., Parent, L. R., Browning, N. D., Evans, J. E., Arslan, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Factors+influencing+quantitative+liquid+(scanning)+transmission+electron+microscopy.">Factors influencing quantitative liquid (scanning) transmission electron microscopy.</a> Chem. Commun. 50, 4873-4880 (2014).</li><li>Woehl, T. J., Jungjohann, K. L., Evans, J. E., Arslan, I., Ristenpart, W. D., Browning, N. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+procedures+to+mitigate+electron+beam+induced+artifacts+during+in+situ+fluid+imaging+of+nanomaterials.">Experimental procedures to mitigate electron beam induced artifacts during in situ fluid imaging of nanomaterials.</a> Ultramicroscopy. 127, 53-63 (2013).</li><li>Hohmann-Marriott, M. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nanoscale+3D+cellular+imaging+by+axial+scanning+transmission+electron+tomography.">Nanoscale 3D cellular imaging by axial scanning transmission electron tomography.</a> Nat. Methods. 6, 729-731 (2009).</li><li>Unocic, R. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitative+electrochemical+measurements+using+in+situ+ec-S/TEM+devices.">Quantitative electrochemical measurements using in situ ec-S/TEM devices.</a> Microsc. Microanal. 20, 452-461 (2014).</li><li>Kourkoutis, L. F., Plitzko, J. M., Baumeister, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electron+Microscopy+of+Biological+Materials+at+the+Nanometer+Scale.">Electron Microscopy of Biological Materials at the Nanometer Scale.</a> Annu. Rev. Mater. Res. 42, 33-58 (2012).</li><li>Chao, W., Harteneck, B. D., Liddle, J. A., Anderson, E. H., Attwood, D. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Soft+X-ray+microscopy+at+a+spatial+resolution+better+than+15+nm.">Soft X-ray microscopy at a spatial resolution better than 15 nm.</a> Nature. 435, 1210-1213 (2005).</li><li>Larabell, C. A., Nugent, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+cellular+architecture+with+X-rays.">Imaging cellular architecture with X-rays.</a> Curr Opin Struct Biol. 20, 623-631 (2010).</li><li>Muller, D. J., Helenius, J., Alsteens, D., Dufrene, Y. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Force+probing+surfaces+of+living+cells+to+molecular+resolution.">Force probing surfaces of living cells to molecular resolution.</a> Nat. Chem. Biol. 5, 383-390 (2009).</li><li>Allison, D. P., Mortensen, N. P., Sullivan, C. J., Doktycz, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=atomic+force+microscopy+of+biological+samples.">atomic force microscopy of biological samples.</a> Wiley Interdiscip. Rev. Nanomed. Nanobiotechnol. 2, 618-634 (2010).</li><li>Fleming, A. J., Kenton, B. J., Leang, K. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bridging+the+gap+between+conventional+and+video-speed+scanning+probe+microscopes.">Bridging the gap between conventional and video-speed scanning probe microscopes.</a> Ultramicroscopy. 110, 1205-1214 (2010).</li><li>Sulchek, T., Hsieh, R., Adams, J. D., Minne, S. C., Quate, C. F., Adderton, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-speed+atomic+force+microscopy+in+liquid.">High-speed atomic force microscopy in liquid.</a> Rev. Sci. Instr. 71, 2097-2099 (2000).</li></ol>

The authors have nothing to disclose.

הפרוטוקול המתואר מאפשר STEM של AuNPs בנוזל, כולל תצפית של תהליכים דינמיים. ההרכבה של הבעל היא טכניקה קלה-כדי-ללמוד. עם זאת, כמה היבטים יש לקחת בחשבון כאשר עובדים עם בעל TEM זרימת הנוזל. לדוגמא, קצוות שבורים של שבב סי או חלקיקים גדולים על טבעות האטם עלולים לגרום דליפה של נוזל התא. מצד השני, חלקיקים גדולים (&gt; 200 ננומטר; למשל, אבק או פסולת Si) על הממברנה SiN עלול לגרום עובי מוגבר של נוזל התא, מה שמוביל ניגוד הדמיה נמוך או לרזולוציה מרחבית נמוכה ואף עלול לגרום חלונות SiN לשבור. חשוב לציין, שאריות של מלח או חומרים כימיים אחרים עשויות להשפיע על תוצאות הניסויים בצורה בלתי רצויה. לכן, חשוב כי את השלבים השונים של הכנת מדגם והרכבה בעל מבוצעים בזהירות בסביבה נקיה ונטול אבק. העובי של ce הנוזליll קובעת החלטת השגה, כמו גם את החדות של התמונות המתקבלות 17. עובי זה יכול להיות מותאם באמצעות מפרידים ממוקמים על אחד משני שבבי Si. בהתאם לממדי של המדגם, בעוביים שונים של נוזל התא יכול להתממש. לצורך המחקר של AuNPs, אפשר להשתמש מפרידים קטנים (200-500 ננומטר), בעוד תאי איקריוטיים כולו צריכים מפריד גדול של עד 5 מיקרומטר. העובי של נוזל התא מושפע יותר על ידי המתנפחות של חלונות קרום SiN נובעי פרש הלחצים בין נוזל התא ואת הוואקום שמסביב. אפקט זה הופך בולט יותר עם חלונות קרום SiN גדולות. לפיכך, על מנת למזער את העובי של נוזל התא, מומלץ להשתמש בחלונות קרום SiN קטנים. במקרה זה קשה למצוא חפיפה בין שני חלונות קטנים, הם ניתנים להרכבה בתצורה חצתה באמצעות שבב אלקטרוני בסיס שונה. larg תצורות חלופיותאיליי למנוע בולטות מורכבת של חלונות שבב 18 או קרום מונוליטי נתמך על ידי עמודים 19, אבל אלה חסרונות תערוכה לגבי טעינת מדגם. אחד ההיבטים המאתגרים ביותר של הטכנולוגיה הנוכחית הוא חוסר שליטה מדויקת עובי הנוזל. לעתים קרובות, הנוזל הוא הרבה יותר עבה ממה צפוי מן ממדי spacer בשימוש, כפי שראה כאן. מספר קבוצות השתמשו בתאי נוזלי סגורים 4, 20, 21, 22; יש מערכות אלה כמה יתרונות לגבי רזולוציה מרחבית, כמו עובי הנוזל יכול להיות מופחת על ידי גרימת בועה בנוזל. לחלופין, חלונות SiN ניתן לכפות לקרוס, שמובילים שכבת נוזל דלילה. שלישית, המתחם של חלונות מדלל אחרים קיים (למשל, גרפן) 23, גם וכתוצאה מכך הרבה נוזלים מדלליםממה אפשרי עם המערכה המתוארת בפרוטוקול זה. עם זאת, אי אפשר לזרום נוזל במערכות אלה. באשר כל טכניקה מיקרוסקופיה ברזולוציה גבוהה, מספר ההיבטים הניסיונות יש לקחת בחשבון. ההיבט החשוב ביותר הוא האינטראקציה של אלומת אלקטרונים עם הנוזל או המדגם. בנוסף לניזקי קרינה, אשר מגביל את הרזולוציה המרחבית השגה עבור דגימות רבות מוצקות 24, דגימות הנוזל מושפעות גם על ידי מוצרי radiolysis שנוצר אלומת אלקטרונים 15, 25. מאז מוצרים אלה עשויים להשפיע על הניסוי, נתונים לפרשנות זהירים ותכנון ניסויים חיוניים 26. הגדרות מיקרוסקופ צריכות להיבחר על פי היעדים של מחקר מסוים. STEM ADF חזק יותר עבור חלקיקי הדמיה של מספר אטומי גבוה (Z) בעוביים גדולים של נוזל התא, WHIle TEM נותן לעומת זאת טוב יותר על חומרים נמוך-Z הוא בדרך כלל מהר יותר אבל דורש שכבות נוזל דלילות 3. במקום להשתמש בגלאי ADF, מוארת שדה (BF) גלאי משמש לעתים כדי שזה יקלוט את נוזל התא, מאז STEM BF הוא יתרון עבור הדמיה חומרים נמוך Z בשכבות עבות 27. עם הגדלת עובי של נוזל התא, יותר הנוכחית היא זקוקה. עם זאת, זה גם מעלה את ריכוזי מוצרים radiolysis ומגביר נזקי הקרינה. ראוי גם לציין כי היפוך של ניגוד הוא ציין גלאי ADF לנוזלים עבים מאוד (&gt; 10 מיקרומטר עבור מים). התנאים הנוזלים שונו בין הניסויים שלנו על ידי הסרת בעל המיקרוסקופ וההחלפה הן מדגם הנוזל. בנוסף לשינוי ריכוז המלח, זה בקלות ניתן לשנות מאפיינים אחרים של הנוזל על ידי זורם נוזלים שונים (למשל, האם מותרמשתמשים בפתרונות חיץ כדי להגדיר pH ספציפי 16 או עשוי להציג פתרונות אורגניים או תוספים אחרים). כמו כן ניתן לשנות את הנוזל תוך המחזיק עדיין מוכנס המיקרוסקופ ידי זורם נוזלים דרך מערכת microfluidic. עם זאת, במקרה זה, לא ידוע באיזו שעה להצביע הנוזל על השינויים המדגמים. כמו כן ראוי לציין כי שבבים התומכים אלקטרודות זמינים, כך ניסויי אלקטרוכימיה ננו יכולים להתבצע 28. האובייקטים של מחקר אינם מוגבלים AuNPs במים, אלא מגוון רחב של דגימות ניתן ללמוד באמצעות הפרוטוקול המתואר לעיל, כולל סיליקה, טיטניום אוקסיד, ופולימרים. אם תנועות של האובייקטים הם מהר מדי כדי ללכוד בתמונה בתוך הרכישה, ניתן להפחית את הצמיגות ידי סדר גודל באמצעות תערובת של גליצרול 50% ו -50% מים. מתוך נקודות הנ&quot;ל,מספר יתרונות, אפשרויות, וגם החסרונות לעין. כשעובד עם STEM נוזל פאזיים, החסרונות החשובים ביותר שיש לשקול הם כי: 1) כל ניסוי מושפע האינטראקציה הדינמית של אלומת האלקטרונים עם הדגימה כולו (האובייקט תחת השגחה, הנוזל, ואת קרומי SiN); 2) טיפול מדגם הוא מייגע, וזה לעתים קרובות קשה להשיג שכבת נוזל דקה כי המדגם או השבבים להכיל כמה חלקיקים מיקרומטר בגודל; 3) עובי הנוזל בדרך כלל שונה במידה רבה מן העובי המיועד שקבע spacer; ו -4) רזולוציה וחדות מרחבית תלויה מאוד על עובי הנוזל ואת ההבדל בין צפיפות השינוי של האובייקט תחת השגחה ואת הנוזלים. נכון להיום, שיטות בשפע קיימים עבור מיקרוסקופיה של אובייקטים בתוך נוזל עם רזולוציה מרחבית ננומטרי. במיקרוסקופ אלקטרונים בקרח אמורפי היא טכניקה רבת עוצמה 29,אבל הפרוצדורות המעורבות הן עדינות, לא כל הניסויים לאפשר הכנת המדגם בקרח, וניסויי זמן נפתר הם בלתי אפשריים. קרן ה- X מיקרוסקופיה 30, 31 יכולה עקרונית לשמש, אבל זה בעל רזולוציה מרחבית מוגבלת ואינו זמין נרחב במעבדות. מיקרוסקופ כוח אטומי בנוזל כבר נקבע אך הוא טכניקת משטח 32 בלבד, 33, 34, 35. במיקרוסקופ אור אינה מראה רזולוציה מרחבית מספיק. בשלב הנוכחי, מיקרוסקופית אלקטרונים בנוזל נראה את הטכניקה החזקה ביותר עבור מיקרוסקופיה ישירה של אובייקטים ננו ותהליכים בנוזל. TEM גזע פאזיים נוזלים עדיין אינו שיטות אנליטיות שיגרתיות, אך עדיין מתפתח. מספר פרמטרים לקחת בחשבון הוא ניכר, וזה often קשה לשחזר את תוצאות הניסוי. יתר על כן, נתונים כמותיים קשה להשיג בגלל ההשפעות תחת חקירה שלובים התהליכים המתרחשים כתוצאה של אלומת אלקטרונים. הפרוטוקול המתואר כאן שואף ליצור אחידות פרוטוקול הניסוי, ובכך בדיווח על כל היבטי הבסיס הרלוונטיים של הניסוי. אנו מקווים כי פרוטוקול זה יוביל שחזור טוב יותר של עבודה ניסויית בתחום מתפתח זה.

קונבנציונלי סריקת הילוכי אלקטרונים מיקרוסקופי (STEM) הוא מוגבל על ידי המגוון של דגימות המתאים לניתוח, במיוחד הדגימות היבשות מוצקות עבור מיקום המתאימים ואקום גבוה. עם זאת, שאלות מדעיות וטכנולוגיות רבות נוגעות חומרים ננומטריים ותהליכים בסביבה נוזלית. דוגמאות המשובצות במלואם את הנוזל ניתן ללמוד עכשיו עם גזע באמצעות מושג הכרוך בתא microfluidic התאסף בעל דגימת הילוכים מיקרוסקופי אלקטרונים (TEM) ו STEM 1. טכניקה חדשה שפותחה זה הפכה יותר ויותר פופולרי, כפי שהוא מספק תובנה חדשה תהליכים חשובים של נושאי מחקר שונים, כוללים הצמיחה, הפירוק, ותהליכי צבירה של חלקיקים 2, 3, 4, 5, 6. לא מתכות בלבד, אלא גם biominerals 7 ומערכות ביולוגיות ניתן ללמוד 8, 9, 10, 11. טעינת מדגם רכישת תמונה עבור STEM נוזל שלב שונה מאשר גזע של דגימות יבשות כרוך פרוטוקול הדורש הכשרה ייעודית. מערכת microfluidic מורכבת משני שבבי סיליקון תמיכת סיליקון ניטריד (חטא) חלונות קרום שקופות עבור אלומת האלקטרונים ב 200 keV אנרגיה 12 (ראה איור 1 א). פרטים על המאפיינים של טיפול השבבים אלה ניתן למצוא במקום אחר 12, 13. המדגם כלל מכיל אובייקטים בקנה מידה ננומטרי. במאמר זה צפינו חלקיקי זהב (AuNPs). AuNPs הם משותקים ליד החלון העליון (ביחס קרן אלקטרונים מטה-נסיעה) או לצוף liquתְעוּדַת זֶהוּת. רזולוציה מרחבית ננו ב- STEM מתקבל על ידי סריקת אלומת אלקטרונים על AuNPs ואיסוף האלקטרונים מפוזרים מועבר באמצעות שדה האפל טבעתי (ADF) גלאי 9. שני השבבים ממוקמים בתוך חריץ קטן בקצה של בעל TEM זרימת נוזל 1 (בעל פועלת לשני STEM ו TEM אבל המכונה בעל TEM). אחד השבבים מכיל spacer כך תא נוזל נוצר בין השבבים. טבעות אטימה משני צידי שני שבבים לספק ואקום איטום של תא נוזלי 13 (ראה איור 1B). מטרת מאמר זה היא להדגים את השלבים הבסיסיים של טעינת מדגם ורכישת נתונים כך שמשתמש מעוניין יכול למצוא גישה קלה הטכניקה החדשה הזאת. מערכת זמינה מחברה ספציפית נלקחת בחשבון, אבל הפרוטוקול תקף גם עבור מערכות של חברות אחרות. הטכניקה היאמורכב יותר TEM גזע קונבנציונליים, ומספר ההיבטים המעשיים יש לקחת בחשבון כאשר עובדים עם מערכת בעל נוזלי 13. והחשוב מכל הוא להבטיח כי התא הנוזלי הוא מותקן בצורה נכונה, ובכך לספק שכבת נוזל דקה חותמת ואקום. לכן, חשוב מאוד לעבוד בצורה נקיה וכדי למנוע היווצרות אבק במהלך תקופת ההכנה וההרכבה של בעל TEM זרימת הנוזל. בפרט, טבעות האטם ושתיים שבבי סיליקון צריכים להיות חופשיים מכל הזיהום. אפילו חלקיקים קטנים של אבק על אחד השבבים עשויים קשות להגדיל את העובי של התא התאסף, אשר עשוי למנוע את השגת רזולוציה מרחבית שימושית. חותם ואקום חשוב כך שאף זיהום או נזק יישאר מיקרוסקופ אלקטרונים לאחר הניסוי. פרוטוקול זה מתאר את הליך טעינת בדיקות הנדרשות מספר. המבצע של מיקרוסקופ האלקטרונים הוא פשוט, but זה דורש כמה שלבים נוספים לעומת מיקרוסקופיה של דגימות מוצקות. עם הגדלת עובי הנוזל, יותר אלקטרונים נספגים מפוזרים על ידי הנוזל; מדידה של עובי הנוזל חיונית. לבסוף, הפרוטוקול מסביר כיצד תמונות נלקחות ואיך תהליכים דינמיים ניתן ללמוד. <img alt="איור 1" src="/files/ftp_upload/54943/54943fig1.jpg" /> איור 1: תא זרימת נוזל עבור סריקה הילוכים אלקטרונים מיקרוסקופית (STEM). (א) איור סכמטי של נוזל התא התאסף. שני שבבים סיליקון עם סיליקון ניטריד (חטא) חלונות קרום מוצבים בין שתי טבעות אטימות. הנוזל סגור בין הממברנה SiN ובכך מופרד הוואקום במיקרוסקופ האלקטרונים. סריקות אלומת אלקטרונים ממוקדות על המדגם. ניגודיות מתקבלת מאלקטרונים מפוזרים. חלקיקי זהב (AuNPs) הם משותקים בתוך הנוזל על הממברנה SiN אבל גם יכול לנוענוזל. (ב) חתך סכמטי הצד לנוכח ערימת שני שבבים עם טבעות אטימה. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/54943/54943fig1large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.</a>

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="800">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:408px;">Binocular light microscope</td>
			<td style="width:141px;">Leica</td>
			<td style="width:163px;">M60 CMO</td>
			<td style="width:88px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Scanning transmission electron mircoscope with spherical aberration corrector</td>
			<td>JEOL</td>
			<td>ARM200F</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;"></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Liquid flow TEM specimen holder</td>
			<td>DENS Solutions</td>
			<td>Ocean</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Microfluidic syringe pump</td>
			<td>Harvard Scientific</td>
			<td>PicoPlus</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Plasma cleaner</td>
			<td>Gatan</td>
			<td>Solarus950</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Chemicals</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Acetone, Rotisolv&#160; Plus for HPLC</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>7328.2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Water, chromasolv Plus for HPLC</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>34877-2.5L</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Ethanol, Rotisolv HPLC grade</td>
			<td>Carl Roth</td>
			<td>P076.2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Gold colloid citrate stabilized, diameter 30 nm</td>
			<td>British-Biocell</td>
			<td>EM.GC20</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Materials</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Base silicon microchips with silicon nitride membranes of 50 nm thickness and dimensions of 20 &#181;m x 0.40 mm</td>
			<td>DENS Solutions</td>
			<td>for Ocean system</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;"></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Spacer silicon microchips with silicon nitride membranes of 50 nm thickness, dimensions of 20 &#181;m x 0.40 mm, and spacer thickness of 200 nm</td>
			<td>DENS Solutions</td>
			<td>for Ocean system</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;"></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;"></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Microfluidic peek tubing</td>
			<td>Upchurch Scientific</td>
			<td>1570</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Plastic Replaceable tips Tweezers</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:408px;">(Anti-Magnetic Anti-Acid Stainless Steel body with ESD PVDF (SV) tips)</td>
			<td>ideal-tek</td>
			<td>2ASVR.SA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Teflon coated bent steel tweezers (EMS SA with &#34;PTFE&#34; Coating)</td>
			<td>Electron Microscopy Sciences</td>
			<td>78322-7Te</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Teflon coated broad beak steel tweezers (EMS 2A &#34;PTFE&#34; Coating)</td>
			<td>Electron Microscopy Sciences</td>
			<td>78322-2ATe</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Hamilton syringe, 1 mL, gastight (Model 1001 TLLX SYR)</td>
			<td>Hamilton</td>
			<td>81323</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Clean room tissue Sontara Micropure AP (224x224mm)</td>
			<td>DuPont</td>
			<td>Sontara MicroPure</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

studying dynamic processes of nano-sized objects in liquid using scanning transmission electron microscopy

דוגמאות מלא מוטבע בתוך נוזל ניתן ללמוד ברזולוציה מרחבית ננו עם סריקה הילוכים אלקטרונים מיקרוסקופית (STEM) באמצעות תא microfluidic התאספו בעל הדגימה עבור במיקרוסקופ אלקטרונים הילוכים (TEM) ו STEM. מערכת microfluidic מורכבת משני שבבי סיליקון תמיכת ניטריד הסיליקון דקה (חטא) חלונות הממברנה. מאמר זה מתאר את הפעולות הבסיסיות של טעינת מדגם ורכישת נתונים. והחשוב מכל הוא להבטיח כי התא הנוזלי הוא מותקן בצורה נכונה, ובכך לספק שכבת נוזל דקה חותמת ואקום. פרוטוקול זה כולל גם מספר הבדיקות הנדרשות לבצע במהלך טעינת מדגם כדי להבטיח הרכבה נכונה. לאחר המדגם טעון מיקרוסקופ האלקטרונים, עובי הנוזל צריך להימדד. הרכבה לא נכונה עשויה לגרום נוזל עבה מדי, בעוד נוזל מדי-דק עשוי להצביע על היעדר הנוזל, כגון כאשר נוצרת בועה. לבסוף, הפרוטוקולמסביר כיצד ניתן ללמוד תמונות תהליכים נלקחות ואיך דינמי. מדגם המכיל AuNPs הוא צלם הוא במים טהורים מלוח.

<html> בעל TEM זרימת הנוזל שמש ללמוד את ההתנהגות של AuNPs בנוזל. AuNPs היו משותקים ביציבות על הממברנה SiN במים טהורים הם צילמו עם רזולוציה ננו באמצעות נוזל פאזיים STEM (איור 6). ניגודיות מעולה הושגה על זהב הפיזור מאוד. הצפיפות הנוכחית במסך פוספור נמדד למדגם מבחן יבש הייתה 20 PA / cm², בזמן שהוא הסתכם 8 PA / cm² עם בעל TEM זרימת הנוזל המוכנס. באמצעות משוואה 1, מי t = 2.4 ± 0.5 מיקרומטר, הרבה יותר גדולה ממה שציפה מבוסס על עובי spacer של 200 ננומטר. אף על פי כן, עובי הוא לא גדול מדי עבור הדמיה של AuNPs עם רזולוציה מרחבית ננומטרי. עובי הנוזל היה עבה יותר ננומטר 200 שקבע spacer בשל בולטות של ממברנות SiN, הלא השטיחות של השבבים, ופסולה המתגוררת על השבבים. ther.within-page = &quot;1&quot;&gt; לקבלת מים טהורים, AuNPs לשמור על הצורה שלהם במהלך ההדמיה 16, אם כי מוצרים radiolysis תגובתי (ה - א.ק., H •, H +, OH •) שמקורן האינטראקציה של אלומת אלקטרונים עם מים עלולים לחמצן אטום זהב יחיד, שיביא לשינוי של צורת AuNPs 15. עם זאת, כאשר מערכת זרימת הנוזל שמשה להציג יוני כלוריד בניסוי שני, את היציבות של AuNPs השתנתה. יוני כלוריד מסוגל ייצוב אטום זהב חמצון בצורת tetrachloroaureat, AuCl 4 -. איור 7 מראה כי AuNPs מומס לאט במהלך סדרת זמן לשגות הדמיה STEM, בדומה לתוצאות שדווח קודם לכן 16. לבירור קצב במינון אלקטרונים משומש, זה לקח ~ 300 ים לפזר את 30 AuNPs ננומטר בגודל. התנועות של AuNPs ב wate<html> r נחקר בניסוי שלישי (איור 8). לפני הניסוי, בעל TEM זרימת הנוזל נוקה על מנת להסיר כל עקבות של מלח. בשונה מן הניסוי הראשון, גישת הכנת מדגם חלופי שמשה להשיג מצורפת החלשות AuNPs קרום SiN 14. בניסוי זה, הפתרון AuNP הונח על שבב סיליקון התאספו בעל TEM זרימת נוזל בלי לתת פתרון להתייבש. בדרך זו, את AuNPs בקלות מנותק מן הקרום SiN על הדמיה בשיעור המינון בשימוש. חלק AuNPs התרחק שדה הראייה אל הפתרונות בתפזורת, בעוד AuNPs הנותרים נשארו בתוך שדה הראייה בסמיכות לחלון SiN. תנועות של AuNPs אלה נצפו, ובסופו של דבר הם מגובבים. לאחר זמן מה, agglomerates אלה מנותקים גם מן הקרום SiN ועזב את שדה הראיה ואת לתוך התמיסה. ntent &quot;FO: keep-together.within-page =&quot; 1 &quot;&gt; <img alt="איור 6" src="/files/ftp_upload/54943/54943fig6.jpg" /> איור 6: מיקרוסקופיה סריקת ההילוכים אלקטרונים (STEM) מיקרוסקופ של AuNPs 30 ננומטר קוטר על גבי שכבת מים טהורה. התמונה המוצגת היא של אזור נבחר את התמונה המקורית. גודל התמונה היה 1,024 x 1,024 פיקסלים, להתעכב זמן פיקסל היה 19 מיקרו-שניות, גודל פיקסל היה 0.73 ננומטר, ואת ההגדלה היתה 400,000X. המינון שהאלקטרון ובכך 7.1 x 10 4 דואר - / nm². הצפיפות הנוכחית נמדדה על מסך זרחן הייתה 8 PA / 2 סנטימטר, כך עובי הנוזל חושב להסתכם 2.4 מיקרומטר. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/54943/54943fig6large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.</a> <img alt="איור 7" src="/files/ftp_upload/54943/54943fig7.jpg" /> איור 7: סדרת זמן לשגותשל STEM micrographs של AuNPs מלוחים. (AD) תמונות שחולצו מן הסדרה זמן לשגות של תמונות STEM ב 30 מרווחי ים. AuNPs לפזר בהדרגה בנוזל כתוצאה של נוכחות של יוני כלוריד. השעה להתעכב פיקסל היה 2 מיקרו-שניות, את מסגרת הזמן של הסדרה זמן לשגות היה 1.75 s, גודל פיקסל היה 0.44 ננומטר, ואת ההגדלה היתה 500,000X. המינון אלקטרונים לכל תמונה היה 1.2 x 10 4 דואר - / nm². עובי הנוזל היה 2.4 מיקרומטר. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/54943/54943fig7large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.</a> <img alt="הספרה 8" src="/files/ftp_upload/54943/54943fig8.jpg" /> איור 8: גבעול מיקרוסקופ של AuNPs העברת מים טהורים. (א) קרום SiN עם AuNPs, מתוכם כמה נבחרות עם החצים. (ב) מסלולים Motionשל AuNPs הנבחר (ראה א). AuNPs חלק להתרחק שדה הראייה בזמן הדמיה. AuNPs הנותר להעביר רוחבי לאורך הממברנה SiN ולהתחיל פרור לגושים. בהגיעם לגודל אשכול קריטי, הם לשגר מן הקרום להתרחק מתחום להתעכב זמן פיקסל view.The היה 1 מיקרו-שניות, הזמן מסגרת היה 0.52 s, גודל פיקסל היה 1.8 ננומטר, ואת ההגדלה היתה 120,000X. המינון אלקטרונים לכל תמונה היה 3.5 x 10 2 דואר - / nm² ואת עובי הנוזל היה 2.4 מיקרומטר. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/54943/54943fig8large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.</a>

Watch this Scientific Journal Video about Studying Dynamic Processes of Nano-sized Objects in Liquid using Scanning Transmission Electron Microscopy at JoVE.com

Studying Dynamic Processes of Nano-sized Objects in Liquid using Scanning Transmission Electron Microscopy

פרוטוקול זה מתאר את הפעולה של בעל דגימת זרימת נוזל עבור מיקרוסקופיית אלקטרוני הילוכים של AuNPs במים, כפי שמוצג על התצפית של תהליכים דינמיים ננומטריים.

לימוד תהליכים דינמיים של אובייקטים בגודל ננו בנוזל באמצעות מיקרוסקופי אלקטרוני סריקת הילוכים

Samples fully embedded in liquid can be studied at a nanoscale spatial resolution with Scanning Transmission Electron Microscopy (STEM) using a ...

Research

JoVE Journal

Engineering

Revealing Dynamic Processes of Materials in Liquids Using Liquid Cell Transmission Electron Microscopy

חושף תהליכים דינמיים של חומרים בנוזלים באמצעות מיקרוסקופ אלקטרוני הילוכים סלולריים נוזלי

The recent development for in situ transmission electron microscopy, which allows imaging through liquids with high spatial resolution, has attracted ...

Scanning-probe Single-electron Capacitance Spectroscopy

ספקטרוסקופיה קיבוליות חד אלקטרונים סורקות-בדיקה

The integration of low-temperature scanning-probe techniques and single-electron capacitance spectroscopy represents a powerful tool to study the ...

Dynamic Pore-scale Reservoir-condition Imaging of Reaction in Carbonates Using Synchrotron Fast Tomography

Dynamic נקבובית בקנה מידה Reservoir-מצב הדמיה של ריאקציה קרבונטים שימוש טומוגרפיה Synchrotron מהיר

Underground storage permanence is a major concern for carbon capture and storage. Pumping CO2 into carbonate reservoirs has the potential to dissolve ...

In Depth Analyses of LEDs by a Combination of X-ray Computed Tomography (CT) and Light Microscopy (LM) Correlated with Scanning Electron Microscopy (SEM)

In Depth Analyses of LEDs by a Combination of X-ray Computed Tomography CT and Light Microscopy LM Correlated with Scanning Electron Microscopy SEM

ב ניתוח עומק של נוריות ידי שילוב של טומוגרפיה ממוחשבת X-ray (CT) ואור מיקרוסקופית (LM) בקורלציה עם מיקרוסקופ אלקטרוני סורק (SEM)

In failure analysis, device characterization and reverse engineering of light emitting diodes (LEDs), and similar electronic components of ...

Precision Milling of Carbon Nanotube Forests Using Low Pressure Scanning Electron Microscopy

כרסום Precision של יערות Nanotube הפחמן באמצעות סריקה בלחץ נמוך למיקרוסקופיה אלקטרונית

A nanoscale fabrication technique appropriate for milling carbon nanotube (CNT) forests is described. The technique utilizes an environmental scanning ...

Characterization of Ultra-fine Grained and Nanocrystalline Materials Using Transmission Kikuchi Diffraction

אפיון של אולטרה-קפדניים Nanocrystalline חומרים באמצעות דיפרקציה הילוכים קיקוצ&#39;י

One of the challenges in microstructure analysis nowadays resides in the reliable and accurate characterization of ultra-fine grained (UFG) and ...

A Method for Obtaining Serial Ultrathin Sections of Microorganisms in Transmission Electron Microscopy

שיטה להשגת טורי זגוגית מקטעים של מיקרואורגניזמים במשחק במיקרוסקופ אלקטרונים הילוכים

Observing cells and cell components in three dimensions at high magnification in transmission electron microscopy requires preparing serial ultrathin ...

Single-Digit Nanometer Electron-Beam Lithography with an Aberration-Corrected Scanning Transmission Electron Microscope

חד-ספרתיות ננומטר ליתוגרפיה קרינה עם תיקון סטייה סריקה הילוכים מיקרוסקופ אלקטרוני

We demonstrate extension of electron-beam lithography using conventional resists and pattern transfer processes to single-digit nanometer dimensions by ...

Development of a Nose-only Inhalation Toxicity Test Chamber That Provides Four Exposure Concentrations of Nano-sized Particles

התפתחות תא בדיקת רעילות שאיפת האף בלבד המספק חשיפה ארבע, ריכוזי חלקיקים בגודל ננו

Using a numerical analysis based on computerized fluid dynamics, a nose-only inhalation toxicity chamber with four different exposure concentrations is ...