Name: imaging metals in brain tissue by laser ablation - inductively coupled plasma - mass spectrometry (la-icp-ms)
Uploaded: 2017-01-22T14:00:00
Duration: 9 min 5 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Imaging Metals in Brain Tissue by Laser Ablation - Inductively Coupled Plasma - Mass Spectrometry LA-ICP-MS at JoVE.com

DJH und PAD werden von einem Australian Research Council Linkage Project (LP120200081) mit Agilent Technologies und ESI GmbH Der Beitrag von BK unterstützt von der Ruhr University Research School PLUS, finanziert durch Deutschland Exzellenzinitiative [DFG GSC 98/3] unterstützt wurde. DJH wurde von der Ramaciotti Stiftung teilweise unterstützt. KK wird von der Sigrid Juselius Foundation unterstützt.

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J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effect+of+paraformaldehyde+fixation+and+sucrose+cryoprotection+on+metal+concentration+in+murine+neurological+tissue.">The effect of paraformaldehyde fixation and sucrose cryoprotection on metal concentration in murine neurological tissue.</a> J Anal At Spectrom. 29, 565-570 (2014).</li><li>Dodt, H. -. U., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ultramicroscopy:+three-dimensional+visualization+of+neuronal+networks+in+the+whole+mouse+brain.">Ultramicroscopy: three-dimensional visualization of neuronal networks in the whole mouse brain.</a> Nat Meth. 4 (4), 331-336 (2007).</li><li>Hare, D. 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J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Three-dimensional+atlas+of+iron,+copper,+and+zinc+in+the+mouse+cerebrum+and+brainstem.">Three-dimensional atlas of iron, copper, and zinc in the mouse cerebrum and brainstem.</a> Anal Chem. 84 (9), 3990-3997 (2012).</li><li>Hjornevik, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Three-dimensional+atlas+system+for+mouse+and+rat+brain+imaging+data.">Three-dimensional atlas system for mouse and rat brain imaging data.</a> Frontiers Neuroinform. 1, 4 (2007).</li><li>Bishop, D. 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J., Sharp, B. L., Vanhaecke, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recent+developments+in+the+design+of+rapid+response+cells+for+laser+ablation-inductively+coupled+plasma-mass+spectrometry+and+their+impact+on+bioimaging+applications.">Recent developments in the design of rapid response cells for laser ablation-inductively coupled plasma-mass spectrometry and their impact on bioimaging applications.</a> J Anal At Spectrom. 31, 423-439 (2016).</li></ol>

RWH and COC are paid employees of ESI Ltd. FF and TPH are paid employees of Agilent Technologies Australia.

Bildgebungs Metalle in neurologischem Gewebe ist nur ein Beispiel dafür, wie dieses Protokoll nützliche Informationen über die Verteilung und die Mengen an Metallen in jeder biologischen Matrix zur Verfügung stellen kann. Obwohl Herstellung von Standardreferenzmaterialien beschwerlich sein kann, es ist ein Experiment, das einmal durchgeführt werden kann und für die spätere Verwendung archiviert. LA-ICP-MS hat bestimmte Vorteile gegenüber alternativen Methoden, wie Synchrotron-Röntgenfluoreszenzmikroskopie, hauptsächlich in Bezug auf Zugänglichkeit und Sensitivität. Es gibt jedoch gewisse Nachteile , die berücksichtigt werden sollten , wenn ein Experiment vorbereitet LA-ICP-MS, und als solche ist sie oft eine nützliche ergänzende Technik zur chemischen Bildgebung , die alternative Metallanalysetechniken umfasst, sowie vergleichende histochemistry 5. Die Angleichung an den bekannten anatomischen Merkmalen des Mäusegehirns können nützliche Informationen über die mögliche funktionelle relati bietenterschaft zwischen Metallebenen und die räumliche Verteilung. Bisher haben wir die Allen - Gehirn - Atlas Online - Ressource verwendet wird , 29, ist ein Open-Access - Repository beider anatomischen und Genexpressionsdaten in der C57BL / 6 - Maus Gehirn räumliche Korrelation der beiden Metall-abhängige Enzym - Expression 14 und Neuroanatomie 27 zu prüfen, 30. Andere Mittel, wie die Gehirn von Nagetieren Workbench 31 sind auch mit der Registrierung und Ausrichtung von Metallbildern zur Unterstützung in oft kleinen anatomischen Regionen in der korrekten Identifizierung der Metallverteilung zu unterstützen. Anwendungen dieser Technik sind bei der Beurteilung , wie Metallebenen und Verteilung Wechsel an der mikroskaligen in ganz normale Lebensereignisse (zB Alterung) und bei Krankheitszuständen nützlich; sowie die Untersuchung der Wirkungen der beiden metallhaltigen Verbindungen und Medikamente entwickelt me ​​Zieltal Stoffwechsel. Die aktuellen Hauptbeschränkungen von LA-ICP-MS als Technik-Bildgebung für die Metalldistribution sind Durchsatz und Empfindlichkeit räumlich zu beurteilen. Es gibt einen Kompromiss zwischen der Geschwindigkeit der Analyse und die räumliche Auflösung 5, 12, mit einer höheren Auflösung Bilder längere Analysezeiten erfordern. Die Technik ist gut geeignet, um biologische Elemente bei höheren Konzentrationen, aber Elemente wie Mangan, Kobalt und Selen aufgrund ihrer geringen Abundanz in normalem Gewebe beschränkt sind und / oder Einschränkungen in ihrer Detektion durch herkömmliche ICP-MS. Neue Fortschritte in ICP-MS - Technologie, wie die Einführung von Triple-Quadrupol - Massenanalysatoren, 33 zur gezielten Erfassung schwierig Analyten, wie Selen 32 bei höheren Empfindlichkeiten ermöglichen. Als technologieorientiertes Verfahren, Fortschritte in der Laser- und Massenspektrometrie-Design wird dieses Bildgebungstechnik sehen sich weiter entwickeln, zu erhöhendie Geschwindigkeit der Analyse und der Empfindlichkeit 34.

Die einzigartige Redoxchemie von Metallen erleichtert eine Reihe von neurologischen Funktionen, einschließlich Signaltransduktion, Energieerzeugung und Neurotransmittersynthese. In einer Reihe von wichtigen neurodegenerativen Erkrankungen, dyshomeostasis dieser Metalle sind sowohl als potentielle neue Targets in Pathogenese der Erkrankung und identifiziert impliziert worden für die therapeutische Intervention 1. Um besser zu verstehen, wie Metalle unter Bedingungen beteiligt sind, wie Alzheimer und Parkinson-Krankheit (AD und PD bezeichnet), ist es zwingend notwendig, der Lage sein, zu messen, wie Metallverteilung und Ebenen innerhalb der Regionen ändern negativ beeinflusst durch den Krankheitsprozess. Diese Veränderungen sind oft Anzeichen für subtile Verschiebungen in den biochemischen Reaktionen , die zu den Prozessen verknüpft werden innig kann, die den Zelltod einleiten, wie unsere kürzlich vorgeschlagene Mechanismus der Eisen - und Dopamin - Neurotoxizität in PD 2. Traditionell metal Ebenen innerhalb der definierten anatomischen Regionen wurde durch eine sorgfältige Exzision, Verdauung und Analyse erreicht 3 eine Reihe von analytischen Techniken. Aber ein solcher Ansatz verliert räumlichen Informationen, die entscheidend sein kann, wenn Krankheitszuständen untersucht beinhalten kleine, gut definierte Bereiche oder spezifischen Zelltypen. Eine Reihe von analytischen Methoden sind für Metalle in biologischen Systemen, von intakten Proben Gewebeschnitten und in zwei und drei Dimensionen unter Verwendung von Emissionsspektroskopie, Fluoreszenzsonden und Massenspektrometrie 4 visualisieren. Jede Technik hat Vorteile und Nachteile in Bezug auf Empfindlichkeit, Selektivität der chemischen Spezies, und die räumliche Auflösung, die erreicht werden kann. Für einen umfassenden Überblick über die Palette von Techniken zur Verfügung, siehe die Übersicht von Hare et al. 5. Die Massenspektrometrie (MS) -basierte Methoden der empfindlichste dieser Techniken sind, Lage , die meisten biologisch relevanten Metalle in ihrer nativen Konzentration 6 zu messen. Laser-Ablation - induktiv gekoppeltem Plasma - Massenspektrometrie (LA-ICP-MS) Bildgebung verwendet einen fokussierten UV-Laserstrahl in einer Größe von 1 bis&gt; 100 &amp; mgr; m im Durchmesser (oder Breite, wenn ein Viereck Strahlform verwendet wird), unter denen die Probe 7 bestanden. Quantitative Informationen können über die repräsentative Ablation von Standardreferenzmaterialien erreicht werden, die 8 mit einer Vielzahl von unterschiedlichen Ansätzen hergestellt werden können, die jeweils mit unterschiedlichem Grad der technischen Schwierigkeiten und analytische Funktionalität. Die am häufigsten verwendete Ansatz verwendet Matrix-Matching, wo ein Standard mit einer vorherrschenden chemischen Zusammensetzung vergleichbar mit der von der Probe durch Spicken mit dem Ziel - Analyten hergestellt wird und für die Homogenität und absolute Metallkonzentration durch unabhängige analytische Mittel genau beurteilt 9, </sup&gt; 10. Ablation der zubereiteten Standards können dann für die externe Kalibrierungszwecke verwendet werden, Konzentrationsdaten aus der erhaltenen Probenbildes ermöglicht pro Pixel extrahiert werden. Die Bildauflösung wird sowohl durch die Strahlgröße und die Geschwindigkeit, mit der die Probe abgetastet wird, bestimmt. Die Standard - Quadrupol-Design ICP-MS (die mehr als 90% aller Systeme ICP-MS installiert Konto weltweit 11) ist eine sequentielle Massenanalysator ist , daß der Massendetektor Zyklen durch alle ausgewählten Masse-Ladungs - Verhältnis (m / z ) und nicht gleichzeitig Daten sammeln. Somit muß die Erfassungszeit für jeden Zyklus der Massen auf die Zeit für die Probe entnommen gleichsetzen eine Breite des Laserstrahls zu durchqueren ein Pixel repräsentativ für die gewünschte Auflösung zu gewährleisten 12 erfasst. Laserstrahlgrößenauswahl ist ein wichtiger Parameter, der auf beide erhebliche Auswirkungen hat Empfindlichkeit und Gesamtanalysezeit. Als physi Laserablationmatisch entfernt Material, das die Menge der Materie der ICP-MS von einem Argonträgergas transportiert wird, die von dem Massenanalysator folgt dem inversen quadratischen Gesetz physikalisch nachgewiesen werden kann. Beispielsweise die Verringerung der Laserstrahldurchmesser von 50 bis 25 &amp; mgr; m führt zu einer Verringerung des abgetragenen Materials um einen Faktor von vier. Zusätzlich als Scanverfahren, erhöhen kleinere Strahldurchmesser die Gesamtzeit, einen ausgewählten Bereich abzutragen erforderlich. Daher ist experimentelles Design unerlässlich, um die notwendige räumliche Auflösung mit Empfindlichkeit Bedürfnisse und Zeitvorgaben zu balancieren. Imaging von LA-ICP-MS wurde auf eine Reihe von Proben, Matrizen und Krankheitszuständen angewendet, einschließlich Tiermodellen für neurologische Erkrankungen 13, 14, Schädel - Hirn - Verletzung 15, die Verteilung von metallhaltigen Krebsmedikamente 16, toxicant Exposition in der Plazenta 17 und Metall distribution in Zähne als Biomarker der frühen Lebensnahrungsübergänge. 18 In diesem Protokoll beschreiben wir ein allgemeines Verfahren zum Abbilden Eisen, Kupfer und Zink in der WT Mausgehirn bei einer Auflösung von 30 &amp; mgr; m, obwohl es leicht zu einer Reihe von Probentypen und experimentelle Ergebnisse angepasst werden kann, basierend auf den Bedürfnissen des Analytiker.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="668">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Soda glass microscope slides</td>
			<td style="width:71px;">n/a</td>
			<td style="width:119px;">n/a</td>
			<td style="width:263px;">Typical slides are suitable for all experiments</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">PTFE-coated microtome blades</td>
			<td style="width:71px;">C.L. Stuckey</td>
			<td style="width:119px;">DT315R50</td>
			<td>Blade size depends on cryostat blade holder. Check before ordering.</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Parafomaldehyde</td>
			<td style="width:71px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td align="right" style="width:119px;">16005</td>
			<td>Any supplier suitable</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Sucrose</td>
			<td style="width:71px;">n/a</td>
			<td style="width:119px;">n/a</td>
			<td>Commercial grade white sugar is suitable</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Phosphate buffer saline</td>
			<td style="width:71px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">P5368</td>
			<td>Pre-mixed sachets listed, can be prepared according to normal laboratory protocols</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Xylene</td>
			<td style="width:71px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td align="right" style="width:119px;">247624</td>
			<td>Any supplier suitable</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Ethanol</td>
			<td style="width:71px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">E7023</td>
			<td>Any supplier suitable</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Lamb brain</td>
			<td style="width:71px;">n/a</td>
			<td style="width:119px;">n/a</td>
			<td>Available from most local butchers</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Metal salts</td>
			<td style="width:71px;">n/a</td>
			<td style="width:119px;">n/a</td>
			<td>Use water soluble metal salts containing desired analytes</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Omni TH Tissue Homogeniser</td>
			<td style="width:71px;">Omni Inc</td>
			<td style="width:119px;">THP115</td>
			<td>Alternative homogenizers are suitable</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Polycarbonate homgenizer probes</td>
			<td style="width:71px;">Omni Inc</td>
			<td style="width:119px;">TH115-PCRH</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Microwave digestion unit</td>
			<td style="width:71px;">n/a</td>
			<td style="width:119px;">n/a</td>
			<td>Optional. See Section 2</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">1.5 mL microfuge tubes</td>
			<td style="width:71px;">TechnoPlas</td>
			<td style="width:119px;">P4010</td>
			<td>Metal-free polypropylene tubes. Acid washed tubes are also suitable</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">65% nitric acid</td>
			<td style="width:71px;">Merk Millipore</td>
			<td align="right" style="width:119px;">100441</td>
			<td>Trace analysis grade</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">30% hydrogen peroxide</td>
			<td style="width:71px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td align="right" style="width:119px;">95321</td>
			<td>Trace analysis grade</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">10 x 10 mm disposable cryomolds</td>
			<td style="width:71px;">Ted Pella</td>
			<td align="right" style="width:119px;">27181</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Iso-pentane</td>
			<td style="width:71px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td align="right" style="width:119px;">76871</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Liquid nitrogen</td>
			<td style="width:71px;">n/a</td>
			<td style="width:119px;">n/a</td>
			<td>Use local supplier</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">NWR213 Laser Ablation system</td>
			<td style="width:71px;">ESI Ltd</td>
			<td style="width:119px;">n/a</td>
			<td>Used in these experiments. Other manufacturers suitable, may require modifications to protocol</td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:216px;">Agilent 8800 Series ICP-MS</td>
			<td style="width:71px;">Agilent Technologies</td>
			<td style="width:119px;">n/a</td>
			<td>Used in these experiments. Other manufacturers suitable, may require modifications to protocol</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Iolite</td>
			<td style="width:71px;">Iolite Software</td>
			<td style="width:119px;">n/a</td>
			<td>Available from http://iolite-software.com/. Other methods are available, see protocol</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Excel</td>
			<td style="width:71px;">Microsoft</td>
			<td style="width:119px;">n/a</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">IGOR Pro</td>
			<td style="width:71px;">Wave Metrics</td>
			<td style="width:119px;">n/a</td>
			<td>Avalable from https://www.wavemetrics.com/products/igorpro/igorpro.htm</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

imaging metals in brain tissue by laser ablation - inductively coupled plasma - mass spectrometry (la-icp-ms)

Metalle sind ubiquitär im gesamten Organismus, mit ihrer biologischen Rolle diktiert durch beide ihre chemische Reaktivität und Fülle innerhalb eines bestimmten anatomischen Region gefunden. Im Gehirn haben Metalle eine hoch compartmentalized Verteilung in Abhängigkeit von der primären Funktion, die sie innerhalb des zentralen Nervensystems spielen. Abbilden der räumlichen Verteilung von Metallen ist vorgesehen einzigartigen Einblick in die biochemische Architektur des Gehirns, die eine direkte Korrelation zwischen neuroanatomischen Regionen und ihre bekannte Funktion im Hinblick auf metallabhängigen Prozessen. Darüber hinaus verfügen einige altersbedingte neurologische Erkrankungen Metall Homöostase gestört, was oft zu kleine Bereiche des Gehirns beschränkt ist, die sonst nur schwer zu analysieren. Hier beschreiben wir ein umfassendes Verfahren zur quantitativen Metalle in der Maus Bildgebung des Gehirns, Laser-Ablation unter Verwendung von - induktiv gekoppeltem Plasma - Massenspektrometrie (LA-ICP-MS) und speziell für die BildverarbeitungSoftware. Die Konzentration auf Eisen, Kupfer und Zink, die im Gehirn drei der am häufigsten vorkommenden und krankheitsrelevanten Metalle sind, beschreiben wir die wesentlichen Schritte bei der Probenvorbereitung, Analyse, quantitative Messungen und Bildverarbeitung zur Herstellung von Karten der Metallverteilung innerhalb des niedrigen Mikrometer Auflösungsbereich. Diese Technik, die für jeden Abschnitt geschnittenen Gewebes der Lage ist, die hoch variable Verteilung der Metalle in einem Organ oder System zeigt, und kann verwendet werden, um die Veränderungen der Metall Homöostase und absolute Ebenen innerhalb feinen anatomischen Strukturen.

Um die Möglichkeiten dieser LA-ICP-MS-Bildgebung Ansatz demonstrieren, ein einfaches Experiment, einen Abschnitt eines WT C57BL / 6-Maus Gehirn, halbierten im Corpus callosum und geschnitten in der koronalen Ebene verwendet wird, wird vorgestellt. Ein Workflow für die Analyse von Daten Biolite (Abbildung 1), wie zum Bereitstellen ein repräsentatives Bild von Metallverteilung im Abschnitt analysiert (Abbildung 2) auch in den Abschnitten 6 und 7 als gut beschrieben. Wie gesehen werden kann, Metallverteilung im Gehirn der Maus ist variabel entsprechend anatomischen Region. Dies kann auf die variable Rollen Metalle zugeschrieben werden, und insbesondere die Proteine , an die sie gebunden sind, 27 in jeder Region des Gehirns spielen. Zum Beispiel neigt Eisen höheren Konzentrationen in der Mittelhirns zu haben und entlang des Gyrus dentatus, während Zink am häufigsten in der Cortical Bereiche. Carbon, die eine häufig verwendete interne Standard - 8 ist, ist homogen verteilt. Elementar Karten (Figur 2) kann besonders nützlich sein , wenn sie in Verbindung mit vorhandenen anatomischen und funktionellen Referenz Atlanten 29 verwendet, wobei Informationen über die Kolokalisation von Metallen kann die Expression spezifischer metallbindenden Proteinen Einblick in die Funktion von Metallen in einem Gehirn liefern kann Region oder Änderungen der Metallebenen im Einklang mit einer krankheitsbedingten Biomolekül identifiziert. Unter Verwendung der Vorgehensweise beschrieben, die für ein breiteres Spektrum von Analyten optimiert ist, hat die Empfindlichkeit für niedrige entgegen Überfluß Elemente wie Mangan, und Verfahren angepasst werden kann, in erster Linie auf dieses Analyten zu konzentrieren, indem auf Kosten der anderen gemessenen Massen Verweilzeiten erhöhen. Der große Vorteil bei der Verwendung von Imaging-LA-ICP-MS beobachtet relativen Unterschiede in Metall concentration und Verteilung zwischen den Versuchsgruppen. Wir haben früher eine solche Technik zu demonstrieren erhöhten Eisen nach einem Neurotoxin Insult nachahmt PD 2, 10, und Veränderungen in cortical Eisenspiegel in menschlichen Alzheimer-Krankheit Gewebe 21 verwendet. Ein solches Protokoll, wie hier beschrieben werden, können auf andere Gewebetyp mit minimalen Änderungen an den aufgeführten Verfahren leicht angepasst werden. <img alt="Abbildung 1" src="/files/ftp_upload/55042/55042fig1.jpg" /> Abbildung 1: Workflow für die Bildverarbeitung. Workflow-komplementär zu den Abschnitten 6 und 7, der Darstellung Umwandlung von Roh-zeitaufgelöste Daten von der ICP-MS auf quantitative Bilder von Metallverteilung im Gehirn der Maus. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/55042/55042fig1large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier</a> , um <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/55042/55042fig1large.jpg" target="_blank">eine größere Version dieser Figur zu sehen.</a> </p&gt; <img alt="Figur 2" src="/files/ftp_upload/55042/55042fig2.jpg" /> Abbildung 2: Typische Elementverteilung von Biometalle innerhalb eines Mäusegehirns. Repräsentative Element Karten eines 30 um dicken koronalen Abschnitt einer einzelnen Maus Gehirnhemisphäre analysiert mit LA-ICP-MS. Bilder für Kohlenstoff-13 (C13), Magnesium-24 (MG24) und Phosphor-31 (S31) angezeigt in Gold-Farbskalen (Zählungen pro Sekunde; CPS) (obere Reihe). Quantitative Bilder (untere Reihe) für Mangan-55 (MN55), Kupfer-63 (Cu63), Eisen-56 (Fe56) und Zink-66 (Zn66) angezeigt mit entsprechenden BlueHot Farbskalen (ug g -1). Gesamtanalysezeit für das Gehirn Schnitt betrug etwa 5 h. Maßstabsbalken = 2 mm. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/55042/55042fig2large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier</a> , um <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/55042/55042fig2large.jpg" target="_blank">eine größere Version dieser Figur zu sehen.</a> <strong&gt; Zusatzcode 1. Open Source Python - Code - Datei in 6.1 beschrieben, die einen entsprechenden Python - Editor nach ICP-MS Hersteller Methode der Datenausgabe kann geändert werden. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/55042/CopyFilesFromSubDirs_3.txt" target="_blank">Bitte klicken Sie hier</a> , um <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/55042/CopyFilesFromSubDirs_3.txt" target="_blank">diese Datei herunterzuladen.</a>

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Imaging Metals in Brain Tissue by Laser Ablation - Inductively Coupled Plasma - Mass Spectrometry LA-ICP-MS

Quantitativ Metalle in Gewebe durch Laserablation Kartierung - induktiv gekoppelter Plasma - Massenspektrometrie (LA-ICP-MS) ist eine empfindliche analytische Technik, die in neue Erkenntnisse liefern kann, wie Metalle in normaler Funktion und Krankheitsprozessen teilzunehmen. Hier beschreiben wir ein Protokoll zur quantitativen Metalle in dünnen Schnitten von Mausgewebe neurologischen Bildgebung.

Imaging Metals im Hirngewebe durch Laserablation - Inductively Coupled Plasma - Mass Spectrometry (LA-ICP-MS)

Metals are found ubiquitously throughout an organism, with their biological role dictated by both their chemical reactivity and abundance within a ...

Research

JoVE Journal

Medicine

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Although acute brain trauma often results from head damage in different accidents and affects a substantial fraction of the population, there is no ...

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Epilepsy, affecting about 1% of the population, comprises a group of neurological disorders characterized by the periodic occurrence of seizures, which ...

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Quantitative massenspektrometrische Analyse von Krebs-Zellen-Proteome Abgeleitet von Liquid und soliden Tumoren

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