Name: a syngeneic mouse model of metastatic renal cell carcinoma for quantitative and longitudinal assessment of preclinical therapies
Uploaded: 2017-04-12T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Syngeneic Mouse Model of Metastatic Renal Cell Carcinoma for Quantitative and Longitudinal Assessment of Preclinical Therapies at JoVE.com

Dette arbeidet ble støttet med tilskudd fra National Cancer Institute (R15CA173657 til AW og R01CA109446 til TSG), Simmons Cancer Institute (til AW), og Universitetet i Minnestoa klatre 4 Kidney Cancer Foundation (til TSG). Vi takker Dr. Kristin Anderson for å få hjelp med immunfluorescens.

Følgende protokoll beskrives en eksperimentell prosedyre for å indusere og overvåke veksten av eksperimentelle ortotopiske renale tumorer og eventuelle spontane metastaser. Alle de følgende prosedyrene er gjort i henhold til institusjonelle retningslinjer og godkjente prosedyrer vedrørende human bruk av forsøksdyr. 1. Vedlikehold av cellelinjer <ol><li> Oppretthold murine renal adenocarcinoma cellelinje, Renca, i Roswell Park Memorial Institute (RPMI) 1640-medium supplert med 10% føtalt kalveserum (FCS)...

<ol>
	<li>Siegel, R. L., Miller, K. D., Jemal, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cancer+statistics.">Cancer statistics.</a> CA Cancer J. Clin. 66, 7-30 (2016).</li><li>Chow, W. H., Dong, L. M., Devesa, S. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epidemiology+and+risk+factors+for+kidney+cancer.">Epidemiology and risk factors for kidney cancer.</a> Nat. Rev. Urol. 7, 245-257 (2010).</li><li>Hollingsworth, J. M., Miller, D. C., Daignault, S., Hollenbeck, B. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rising+incidence+of+small+renal+masses:+a+need+to+reassess+treatment+effect.">Rising incidence of small renal masses: a need to reassess treatment effect.</a> J. Natl. Cancer Inst. 98, 1331-1334 (2006).</li><li>Lee-Ying, R., Lester, R., Heng, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Current+management+and+future+perspectives+of+metastatic+renal+cell+carcinoma.">Current management and future perspectives of metastatic renal cell carcinoma.</a> Int. J. Urol. 21, 847-855 (2014).</li><li>Rini, B. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=New+strategies+in+kidney+cancer:+therapeutic+advances+through+understanding+the+molecular+basis+of+response+and+resistance.">New strategies in kidney cancer: therapeutic advances through understanding the molecular basis of response and resistance.</a> Clin. Cancer Res. 16, 1348-1354 (2010).</li><li>Acquavella, N., Fojo, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Renal+cell+carcinoma:+trying+but+failing+to+improve+the+only+curative+therapy.">Renal cell carcinoma: trying but failing to improve the only curative therapy.</a> J. Immunother. 36, 459-461 (2013).</li><li>Salup, R. R., Wiltrout, R. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adjuvant+immunotherapy+of+established+murine+renal+cancer+by+interleukin+2-stimulated+cytotoxic+lymphocytes.">Adjuvant immunotherapy of established murine renal cancer by interleukin 2-stimulated cytotoxic lymphocytes.</a> Cancer Res. 46, 3358-3363 (1986).</li><li>Ko, J. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Direct+and+differential+suppression+of+myeloid-derived+suppressor+cell+subsets+by+sunitinib+is+compartmentally+constrained.">Direct and differential suppression of myeloid-derived suppressor cell subsets by sunitinib is compartmentally constrained.</a> Cancer Res. 70, 3526-3536 (2010).</li><li>Kusmartsev, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oxidative+stress+regulates+expression+of+VEGFR1+in+myeloid+cells:+link+to+tumor-induced+immune+suppression+in+renal+cell+carcinoma.">Oxidative stress regulates expression of VEGFR1 in myeloid cells: link to tumor-induced immune suppression in renal cell carcinoma.</a> J. Immunol. 181, 346-353 (2008).</li><li>Rocha, F. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endostatin+gene+therapy+enhances+the+efficacy+of+IL-2+in+suppressing+metastatic+renal+cell+carcinoma+in+mice.">Endostatin gene therapy enhances the efficacy of IL-2 in suppressing metastatic renal cell carcinoma in mice.</a> Cancer Immunol. Immunother. 59, 1357-1365 (2010).</li><li>Shanker, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Treating+metastatic+solid+tumors+with+bortezomib+and+a+tumor+necrosis+factor-related+apoptosis-inducing+ligand+receptor+agonist+antibody.">Treating metastatic solid tumors with bortezomib and a tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand receptor agonist antibody.</a> J. Natl. Cancer Inst. 100, 649-662 (2008).</li><li>VanOosten, R. L., Griffith, T. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Activation+of+tumor-specific+CD8++T+Cells+after+intratumoral+Ad5-TRAIL/CpG+oligodeoxynucleotide+combination+therapy.">Activation of tumor-specific CD8+ T Cells after intratumoral Ad5-TRAIL/CpG oligodeoxynucleotide combination therapy.</a> Cancer Res. 67, 11980-11990 (2007).</li><li>Bibby, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Orthotopic+models+of+cancer+for+preclinical+drug+evaluation:+advantages+and+disadvantages.">Orthotopic models of cancer for preclinical drug evaluation: advantages and disadvantages.</a> Eur. J. Cancer. 40, 852-857 (2004).</li><li>Devaud, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tissues+in+different+anatomical+sites+can+sculpt+and+vary+the+tumor+microenvironment+to+affect+responses+to+therapy.">Tissues in different anatomical sites can sculpt and vary the tumor microenvironment to affect responses to therapy.</a> Mol. Ther. 22, 18-27 (2014).</li><li>Devaud, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differential+potency+of+regulatory+T+cell-mediated+immunosuppression+in+kidney+tumors+compared+to+subcutaneous+tumors.">Differential potency of regulatory T cell-mediated immunosuppression in kidney tumors compared to subcutaneous tumors.</a> Oncoimmunology. 3, 963395 (2014).</li><li>Devaud, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cross-talk+between+tumors+can+affect+responses+to+therapy.">Cross-talk between tumors can affect responses to therapy.</a> Oncoimmunology. 4, 975572 (2015).</li><li>Norian, L. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Eradication+of+metastatic+renal+cell+carcinoma+after+adenovirus-encoded+TNF-related+apoptosis-inducing+ligand+(TRAIL)/CpG+immunotherapy.">Eradication of metastatic renal cell carcinoma after adenovirus-encoded TNF-related apoptosis-inducing ligand (TRAIL)/CpG immunotherapy.</a> PLoS One. 7, 31085 (2012).</li><li>Matin, S. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunological+response+to+renal+cryoablation+in+an+in+vivo+orthotopic+renal+cell+carcinoma+murine+model.">Immunological response to renal cryoablation in an in vivo orthotopic renal cell carcinoma murine model.</a> J. Urol. 183, 333-338 (2010).</li><li>Wilber, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=RNA+as+a+source+of+transposase+for+Sleeping+Beauty-mediated+gene+insertion+and+expression+in+somatic+cells+and+tissues.">RNA as a source of transposase for Sleeping Beauty-mediated gene insertion and expression in somatic cells and tissues.</a> Mol. Ther. 13, 625-630 (2006).</li><li>Lim, E., Modi, K. D., Kim, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+bioluminescent+imaging+of+mammary+tumors+using+IVIS+spectrum.">In vivo bioluminescent imaging of mammary tumors using IVIS spectrum.</a> J. Vis. Exp. , (2009).</li><li>Skrypnyk, N. I., Harris, R. C., de Caestecker, M. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ischemia-reperfusion+model+of+acute+kidney+injury+and+post+injury+fibrosis+in+mice.">Ischemia-reperfusion model of acute kidney injury and post injury fibrosis in mice.</a> J Vis Exp. , (2013).</li><li>Zimmerman, M., Hu, X., Liu, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+metastasis+and+CTL+adoptive+transfer+immunotherapy+mouse.">Experimental metastasis and CTL adoptive transfer immunotherapy mouse.</a> J. Vis. Exp. , (2010).</li><li>Wexler, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Accurate+identification+of+experimental+pulmonary+metastases.">Accurate identification of experimental pulmonary metastases.</a> J. Natl. Cancer Inst. 36, 641-645 (1966).</li><li>James, B. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CpG-mediated+modulation+of+MDSC+contributes+to+the+efficacy+of+Ad5-TRAIL+therapy+against+renal+cell+carcinoma.">CpG-mediated modulation of MDSC contributes to the efficacy of Ad5-TRAIL therapy against renal cell carcinoma.</a> Cancer Immunol. Immunother. 63, 1213-1227 (2014).</li><li>James, B. R., Brincks, E. L., Kucaba, T. A., Boon, L., Griffith, T. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effective+TRAIL-based+immunotherapy+requires+both+plasmacytoid+and+CD8a+DC.">Effective TRAIL-based immunotherapy requires both plasmacytoid and CD8a DC.</a> Cancer Immunol. Immunother. 63, 685-697 (2014).</li><li>James, B. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diet-induced+obesity+alters+dendritic+cell+function+in+the+presence+and+absence+of+tumor+growth.">Diet-induced obesity alters dendritic cell function in the presence and absence of tumor growth.</a> J. Immunol. 189, 1311-1321 (2012).</li><li>Brincks, E. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Triptolide+enhances+the+tumoricidal+activity+of+TRAIL+against+renal+cell+carcinoma.">Triptolide enhances the tumoricidal activity of TRAIL against renal cell carcinoma.</a> FEBS J. 282, 4747-4765 (2015).</li><li>Anderson, K. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cutting+edge:+intravascular+staining+redefines+lung+CD8+T+cell+responses.">Cutting edge: intravascular staining redefines lung CD8 T cell responses.</a> J. Immunol. 189, 2702-2706 (2012).</li><li>Anderson, K. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intravascular+staining+for+discrimination+of+vascular+and+tissue+leukocytes.">Intravascular staining for discrimination of vascular and tissue leukocytes.</a> Nat. Protocols. 9, 209-222 (2014).</li></ol>

Vi presenterer en protokoll for en ortotopisk RCC musemodell. Implantasjon av musenyre adenokarsinom tumorceller inn i musenyre har en klinisk relevant modell av mRCC. Denne modellen resulterer i en primær tumor i nyre og fjernmetastaser i lungene, som begge er kjennetegnene til avansert RCC. Den beskrivelse som presenteres her er spesifikk for den Renca cellelinje hos immunkompetente Balb / c-mus. Ved hjelp av denne ortotopisk modell, har vi vist at Renca svulster er mottakelig for immunterapi, noe som viser anvendbar...

Nyrecellekarsinom (RCC) står for majoriteten av ondartede nyre svulster og omtrent 3% av alle voksne maligniteter verdensomspennende 1, 2. På grunn av mangel av symptomer, feildiagnoser og utilstrekkelig screening verktøy for RCC, vil nesten 30% av pasienter med metastatisk RCC frem (mRCC) på diagnosetidspunktet, med en ytterligere 20-30% av pasientene utvikler seg til en metastatisk trinn 2. Disse tilfellene føre til ~ 13.500 dødsfall årlig en, 3. Selv om tidligere oppdagelse og behandling av primær RCC har blitt bedre, frekvensen av RCC-dødsfall fortsetter å øke, noe som tyder på at metastatisk sykdom er i stor grad ansvarlig for dødelighet tre. Terapi utvikling for RCC har kommet i løpet av det siste tiåret med oppdagelsen og gjennomføring av målrettet terapi og immunterapi. Dessverre, progresjonsfri survival og total overlevelse av fremskredne tilfeller fremdeles er godt under 2 år for de fleste pasientene 4, 5, 6. Denne statistikken tilsier behov for videre forskning på identifisering og utvikling av effektive behandlinger for RCC. For å fremme adekvat terapeutisk intervensjon for mRCC, er translatorisk-relevante prekliniske modeller av sykdommen først nødvendig. Utvikling av en relevant og konsistent modell for å rekapitulere den menneskelige tilstand av avansert RCC bør ta flere viktige spørsmål: 1) Er modellen anatomisk relevant; 2) gjør svulsten fremskritt på samme måte som den menneskelige patologi; 3) Gjør metastaser oppstår fra den primære svulsten; og 4) kan primær og metastatisk tumorprogresjon overvåkes over tid? Avhengig av hvilken type behandling som skal undersøkes, mus RCC tumorcellelinjer, humane RCC-tumorcellelinjer og humane RCC pasient-avledet xenogflåter kan anvendes i immunundertrykte eller immunmang mus. En vert med en intakt og funksjonelt immunsystem er nødvendig for de studier som evaluerte noen aspekter av immunterapi, nødvendiggjør bruk av den vel beskrevne Renca cellelinje avledet fra en spontan renal adenocarcinoma fra Balb / c-mus 7. De fleste studier injisere Renca celler subkutant (SC), som danner en lett-å-måle lokal tumor eller intravenøst (iv) i Balb / c-mus for å fremstille eksperimentell lungemetastaser &quot;&quot; 8, 9, 10, 11, 12. Anvendelse av en sc-implantert Renca tumor for å modellere human RCC har en rekke begrensninger, blant annet unøyaktig innervasjon av vaskulatur 13, forskjeller i mikromiljøet 14, 15, og en manglende organ / tumor cellulær kommunikasjon;asjon 13, 16. I tillegg er det mange sc-tumorer (spesielt Renca) ikke metastasere til fjerntliggende organer, inhibering studiet av en hendelse som er et vanlig klinisk karakteristisk 17. For å studere mRCC kan Renca celler injiseres iv å etablere tumorbelastning i lungene-den primære lokaliseringen av metastaser i RCC-pasienter. Den iv injeksjon metode for initiering av metastatiske tumorer, men ikke tillater undersøkelse av hvordan, når, eller hvorfor cellene har migrert fra den primære organ (dvs. nyren) til den fjerntliggende sted. En modell med både primær og metastatisk sykdom tydelig i det samme dyr er avgjørende for å studere utviklingen og behandling av fremskreden sykdom, spesielt med tanke på at metastaser er vanligvis årsak til dødelighet i disse pasientene. Vårt laboratorium har utviklet en musemodell for mRCC som inkorporerer alle de funksjonene som er skissert ovenfor. Å etablere primary, ortotopiske tumorer, blir Renca celler implantert rett inn i nyrene av dyret gjennom den gjennomskinnelige peritoneum. Et lite snitt i den venstre flanke tillater visualisering av milt (som et fjell), og den venstre nyre. Ved hjelp av en liten nål, blir Renca tumorceller injisert direkte inn i nyrene inn i peritoneum til ortotopisk implantasjon. Sammenlignet med andre fremgangsmåter for implantering av Renca celler under nyrekapselen 18, denne metoden for implantasjon tillater en større gjennomstrømning, slik det er ganske ikke-invasiv, krever ikke suturering, er av en lav smerte klasse, og er tidsbesparende når praktiseres. Dette velkarakteriserte modell gir reproduserbare primær tumorbyrden (~ 99% foretar rate) i den injiserte nyrene, så vel som metastatisk tumorbelastning i lungene. De viktigste fordelene med denne modellen inkluderer dens syngen natur, noe som åpner for immunterapi undersøkelser; sine spontane metastaser, for å studere ene avansert sykdom; og dens ortotopisk implantasjon, for å modellere den anatomiske innvirkning på sykdomsprogresjon og behandling. Behandlinger som tar sikte på å målrette RCC vil ha stor nytte av utnyttelse av denne modellen under preklinisk utvikling.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="420">
	<colgroup>
		<col span="2" />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="52">
			<td height="52" style="height:52px;width:88px;">Artificial tears ophthalmic ointment</td>
			<td style="width:88px;">Akorn</td>
			<td style="width:156px;">NDC 17478-162-35</td>
			<td style="width:88px;"></td>
		</tr>
		<tr height="52">
			<td height="52" style="height:52px;width:88px;">Vetbond Tissue Adhesive</td>
			<td style="width:88px;">3M</td>
			<td style="width:156px;">CBGBIW011019</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="69">
			<td height="69" style="height:69px;width:88px;">Betadine Solution (Povidone-iodine, 5%)</td>
			<td style="width:88px;">Purdue Products, L.P.</td>
			<td style="width:156px;">NDC 67618-155-32</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="69">
			<td height="69" style="height:69px;width:88px;">0.25% Marcaine (bupivavaine HCL injection)</td>
			<td style="width:88px;">Hospira</td>
			<td style="width:156px;">0409-1587-50&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:88px;">Heating pad</td>
			<td style="width:88px;">Sunbeam</td>
			<td style="width:156px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:88px;">Syringes</td>
			<td style="width:88px;">BD</td>
			<td style="width:156px;">309659</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:88px;">Gauze</td>
			<td style="width:88px;">Venture</td>
			<td style="width:156px;">908291</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="29">
			<td height="51" rowspan="2" style="height:51px;width:88px;">Ketamine</td>
			<td rowspan="2" style="width:88px;">Phoenix Pharmaceuticals</td>
			<td rowspan="2" style="width:156px;">NDC 57319-609-02</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;"></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:88px;">Xylazine&#160;</td>
			<td style="width:88px;">Akorn</td>
			<td style="width:156px;">NDC 59399-111</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="52">
			<td height="52" style="height:52px;width:88px;">Hank&#8217;s Balanced Salts</td>
			<td style="width:88px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:156px;">H2387</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:88px;">IVIS</td>
			<td style="width:88px;">Caliper</td>
			<td style="width:156px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="52">
			<td height="52" style="height:52px;width:88px;">D-Luciferin, Potassium Salt</td>
			<td style="width:88px;">GoldBio</td>
			<td style="width:156px;">LUCK-1G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:88px;">India Ink</td>
			<td style="width:88px;">Chartpak Inc</td>
			<td style="width:156px;">44201</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:88px;">Scissors</td>
			<td style="width:88px;"></td>
			<td style="width:156px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:88px;">Forceps</td>
			<td style="width:88px;"></td>
			<td style="width:156px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="69">
			<td height="69" style="height:69px;width:88px;">Sleeping Beauty (SB) transposon system</td>
			<td style="width:88px;">Neuromics</td>
			<td style="width:156px;">SBT0200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:88px;">Renca</td>
			<td style="width:88px;">ATCC</td>
			<td style="width:156px;">CRL-2947</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a syngeneic mouse model of metastatic renal cell carcinoma for quantitative and longitudinal assessment of preclinical therapies

Nyrecellekarsinom (RCC) påvirker&gt; 60.000 mennesker i USA hvert år, og ~ 30% av RCC pasienter har flere metastaser på diagnosetidspunktet. Metastatisk RCC (mRCC) er uhelbredelig, med en median overlevelsestid på kun 18 måneder. Immun-basert behandling (f.eks, interferon (IFN) og interleukin (IL) -2) induserer vedvarende responser i en brøkdel av mRCC pasienter, og multikinasehemmer inhibitorer (f.eks sunitinib eller sorafenib) eller anti-VEGF-reseptor, monoklonale antistoffer (mAb) er i stor grad palliativ, som komplette remisjoner er sjeldne. Slike mangler ved eksisterende terapier for mRCC pasienter gi begrunnelsen for utviklingen av nye behandlingsprotokoller. En nøkkelkomponent i den prekliniske testing av nye terapier for mRCC er en egnet dyremodell. Fordelaktige trekk at rekapitulere den menneskelige tilstand inkluderer en primær nyretumor, nyretumormetastaser, og et intakt immunsystem for å undersøke enhver terapi-drevet immun Effector reaksjoner og dannelsen av tumor-indusert immunsuppressive faktorer. Denne rapporten beskriver en orthotopic mRCC mus modell som har alle disse funksjonene. Vi beskriver en intrarenal implantering teknikk ved å bruke musen renal adenocarcinoma cellelinje Renca, etterfulgt av vurdering av tumorvekst i nyrene (primær-området), og lungene (metastatisk site).

<html> Den vellykkede implantering av Renca celler vil resultere i tumorutvikling i nyrene og metastasering til lungene hos musene. Etter fjerning av tumoren bærende og de kontralaterale nyrer, ble anvendt våte vev vekter (g) måles for å påvise tumorbelastningen på grunnlag av økt vekt (figur 1). Renca tumorer kan identifiseres ved immunhistokjemi gjennom cytokeratin 8 og 18 farging (figur 2). For longitudinelle studier, ble en luciferase-uttrykken...

Watch this Scientific Journal Video about A Syngeneic Mouse Model of Metastatic Renal Cell Carcinoma for Quantitative and Longitudinal Assessment of Preclinical Therapies at JoVE.com

A Syngeneic Mouse Model of Metastatic Renal Cell Carcinoma for Quantitative and Longitudinal Assessment of Preclinical Therapies

Gjennomføring av en ortotopisk modell av nyrecellekarsinom i immunokompetente mus gir utprøver en klinisk relevant system definert ved nærværet av en primær nyretumor og lungemetastaser i det samme dyr. Dette systemet kan brukes til å teste preklinisk en rekke behandlinger in vivo.

En syngene mus modell av metastatisk nyrecellekarsinom for Kvantitativ og Langsgående vurdering av Prekliniske terapier

Renal cell carcinoma (RCC) affects &#62; 60,000 people in the United States annually, and ~ 30% of RCC patients have multiple metastases at the time of ...

Research

JoVE Journal

Cancer Research

Development and Maintenance of a Preclinical Patient Derived Tumor Xenograft Model for the Investigation of Novel Anti-Cancer Therapies

Utvikling og vedlikehold av en Preklinisk Pasient Avledet Tumor Xenotransplantat Modell for Undersøkelse av Novel Anti-Cancer Therapies

Patient derived tumor xenograft (PDTX) models provide a necessary platform in facilitating anti-cancer drug development prior to human trials. Human tumor ...

Surgical Procedures and Methodology for a Preclinical Murine Model of De Novo Mammary Cancer Metastasis

Surgical Procedures and Methodology for a Preclinical Murine Model of De Novo Mammary Cancer Metastasis

Kirurgiske prosedyrer og metodikk for en præklinisk murinmodell av<em&gt; De Novo</em&gt; Mammakreft Metastase

A rate-limiting aspect of transgenic mouse models of mammary adenocarcinoma is that primary tumor burden in mammary tissue typically defines study ...

The Colon-26 Carcinoma Tumor-bearing Mouse as a Model for the Study of Cancer Cachexia

Colon-26 karsinom Tumor-bærende mus som en modell for studier av kreft kakeksi

Cancer cachexia is the progressive loss of skeletal muscle mass and adipose tissue, negative nitrogen balance, anorexia, fatigue, inflammation, and ...

A Model for Perineural Invasion in Head and Neck Squamous Cell Carcinoma

En modell for perinevral invasjon i Head and Neck Plateepitelkarsinom

Perineural invasion (PNI) is found in approximately 40% of head and neck squamous cell carcinomas (HNSCC). Despite multimodal treatment with surgery, ...

Therapy Testing in a Spheroid-based 3D Cell Culture Model for Head and Neck Squamous Cell Carcinoma

Terapi Testing i en Spheroid-basert 3D celle kultur modell for hodet og nakken Squamous celle Carcinoma

Current treatment options for advanced and recurrent head and neck squamous cell carcinoma (HNSCC) enclose radiation and chemo-radiation approaches with ...

A Syngeneic Pancreatic Cancer Mouse Model to Study the Effects of Irreversible Electroporation

En Syngeneic bukspyttkjertelkreft musemodell å studere virkningene av Irreversible Electroporation

Pancreatic cancer (PC), a disease which kills approximately 40,000 patients each year in the US, has successfully evaded several therapeutic approaches ...

A Bioluminescent and Fluorescent Orthotopic Syngeneic Murine Model of Androgen-dependent and Castration-resistant Prostate Cancer

En Bioluminescent og fluorescerende Orthotopic Syngeneic murint modell av Androgen-avhengige og kastrering-resistente prostatakreft

Orthotopic tumor modeling is a valuable tool for pre-clinical prostate cancer research, as it has multiple advantages over both subcutaneous and ...

A Syngeneic Mouse B-Cell Lymphoma Model for Pre-Clinical Evaluation of CD19 CAR T Cells

En Syngeneic mus B-celle lymfom modell for pre-klinisk evaluering av CD19 bil T-celler

The astonishing clinical success of CD19 chimeric antigen receptor (CAR) T-cell therapy has led to the approval of two second generation chimeric antigen ...

Intramucosal Inoculation of Squamous Cell Carcinoma Cells in Mice for Tumor Immune Profiling and Treatment Response Assessment

Intramucosal vaksinasjon av Squamous celle Carcinoma celler i mus for svulst immun profilering og behandling respons vurdering

Head and neck squamous cell carcinoma (HNSCC) is a debilitating and deadly disease with a high prevalence of recurrence and treatment failure. To develop ...

Micromanipulation of Circulating Tumor Cells for Downstream Molecular Analysis and Metastatic Potential Assessment

Mikromanipulering av sirkulerende tumor celler for nedstrøms molekylær analyse og metastatisk potensiell vurdering

Blood-borne metastasis accounts for&#160;most cancer-related deaths and involves circulating tumor cells (CTCs) that are successful in establishing new ...