Wij danken Molly een getrouw voor verdunning en pesticide formulering hulp. We danken ook Troy Anderson probitmethode begeleiding en Zachary Adelman voor hulp bij experimenteel design. Dit onderzoek werd mede ondersteund door een Entomologische Foundation Award en door Virginia gewasbescherming beurs fondsen.

NB: Dit protocol omvat twee insecticide assays voor het afzonderlijk behandelen van bed bug eieren en de eerste stadia. Beide protocollen werden uitgevoerd met dezelfde insecticiden had echter de protocollen worden aangepast om blootstelling insecticide waarborgen en gemakkelijk de specimens manipuleren. 1. Egg Dompelen insecticide Assay <ol><li> Pull gekoppeld, goed gevoede insecten volwassen vrouwelijke bed uit een kolonie en plaats de vrouwtjes (5-10) in een Petri schaal met filtreerpap...

<ol>
	<li>Sabou, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bed+bugs+reproductive+life+cycle+in+the+clothes+of+a+patient+suffering+from+Alzheimer's+disease+results+in+iron+deficiency+anemia.">Bed bugs reproductive life cycle in the clothes of a patient suffering from Alzheimer's disease results in iron deficiency anemia.</a> Parasite. 20, (2013).</li><li>Reinhardt, K., Kempke, D., Naylor, R. A., Siva-Jothy, M. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sensitivity+to+bites+by+the+bedbug,+Cimex+lectularius.">Sensitivity to bites by the bedbug, Cimex lectularius.</a> Med. Vet. Entomol. 23, 163-166 (2009).</li><li>Leverkus, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bullous+allergic+hypersensitivity+to+bed+bug+bites+mediated+by+IgE+against+salivary+nitrophorin.">Bullous allergic hypersensitivity to bed bug bites mediated by IgE against salivary nitrophorin.</a> J. invest. entomol. 126, 91-96 (2006).</li><li>Fletcher, C. L., Ardern-Jones, M. R., Hay, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Widespread+bullous+eruption+due+to+multiple+bed+bug+bites.">Widespread bullous eruption due to multiple bed bug bites.</a> Clin. Exp. Dermatol. 27, 74-75 (2002).</li><li>Pritchard, M. J., Hwang, S. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Severe+anemia+from+bedbugs.">Severe anemia from bedbugs.</a> Can. Med. Assoc. J. 181, 287-288 (2009).</li><li>Goddard, J., de Shazo, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Psychological+effects+of+bed+bug+attacks+(Cimex+lectularius+L).">Psychological effects of bed bug attacks (Cimex lectularius L).</a> Am. J. Med. 125, 101-103 (2012).</li><li>Harlan, H. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bed+bugs+101:+the+basics+of+Cimex+lectularius.">Bed bugs 101: the basics of Cimex lectularius.</a> Am. Entomol. 52, 99-101 (2006).</li><li>Pinto, L. J., Cooper, R., Kraft, S. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Bed Bug Handbook: The Complete Guide to Bed Bugs and Their Control. , (2007).</li><li>Toloza, A. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differential+patterns+of+insecticide+resistance+in+eggs+and+first+instars+of+Triatoma+infestans+(Hemiptera:+Reduviidae)+from+Argentina+and+Bolivia.">Differential patterns of insecticide resistance in eggs and first instars of Triatoma infestans (Hemiptera: Reduviidae) from Argentina and Bolivia.</a> J. Med. Entomol. 45, 421-426 (2008).</li><li>Cueto, G. M., Zerba, E. N., Picollo, M. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evidence+of+pyrethroid+resistance+in+eggs+of+Pediculus+humanus+capitis+(Phthiraptera:+Pediculidae)+from+Argentina.">Evidence of pyrethroid resistance in eggs of Pediculus humanus capitis (Phthiraptera: Pediculidae) from Argentina.</a> J. Med. Entomol. 45, 693-697 (2008).</li><li>Ho, S. H., Goh, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Deltamethrin+as+a+potential+ovicidal+pyrethroid+against+Plutella+xylostella+L.">Deltamethrin as a potential ovicidal pyrethroid against Plutella xylostella L.</a> Toxicol. let. 22, 161-164 (1984).</li><li>Bell, C. H., Hole, B. D., Evans, P. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+occurrence+of+resistance+to+phosphine+in+adult+and+egg+stages+of+strains+of+Rhyzopertha+dominica+(F.)(Coleoptera:+Bostrichidae).">The occurrence of resistance to phosphine in adult and egg stages of strains of Rhyzopertha dominica (F.)(Coleoptera: Bostrichidae).</a> J. Stored Prod. Res. 13, 91-94 (1977).</li><li>Campbell, B. E., Miller, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Insecticide+Resistance+in+Eggs+and+First+Instars+of+the+Bed+Bug,+Cimex+lectularius+(Hemiptera:+Cimicidae).">Insecticide Resistance in Eggs and First Instars of the Bed Bug, Cimex lectularius (Hemiptera: Cimicidae).</a> Insects. 6, 122-132 (2015).</li><li>Price, L. A., Mills, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+toxicity+of+phosphine+to+the+immature+stages+of+resistant+and+susceptible+strains+of+some+common+stored+product+beetles,+and+implications+for+their+control.">The toxicity of phosphine to the immature stages of resistant and susceptible strains of some common stored product beetles, and implications for their control.</a> J. Stored Prod. Res. 24, 51-59 (1988).</li><li>Robertson, J. L., Preisler, H. K., Russel, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> PoloPlus: Probit and Logit Analysis User's Guide. , (2003).</li><li>Montes, C., Cuadrillero, C., Vilella, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Maintenance+of+a+laboratory+colony+of+Cimex+lectularius+(Hemiptera:+Cimicidae)+using+an+artificial+feeding+technique.">Maintenance of a laboratory colony of Cimex lectularius (Hemiptera: Cimicidae) using an artificial feeding technique.</a> J. Med. Entomol. 39, 675-679 (2002).</li><li>Brogdon, W. G., McAllister, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simplification+of+adult+mosquito+bioassays+through+use+of+time-mortality+determinations+in+glass+bottles.">Simplification of adult mosquito bioassays through use of time-mortality determinations in glass bottles.</a> J. Am. Mosq. Control. Assoc. 14, 159-164 (1998).</li><li>Katarzyna, K., Saddler, A., Koella, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+age+and+larval+nutrition+on+phenotypic+expression+of+insecticide-resistance+in+Anopheles+mosquitoes.">Effects of age and larval nutrition on phenotypic expression of insecticide-resistance in Anopheles mosquitoes.</a> PLoS One. 8 (3), (2013).</li><li>Outram, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Factors+affecting+the+resistance+of+insect+eggs+to+sulphuryl+fluoride-II:+the+distribution+of+sulphuryl-35+S+fluoride+in+insect+eggs+after+fumigation.">Factors affecting the resistance of insect eggs to sulphuryl fluoride-II: the distribution of sulphuryl-35 S fluoride in insect eggs after fumigation.</a> J. Stored. Prod. Res. 3, 353-358 (1967).</li></ol>

A critical step in this assay is to ensure that no eggs that are removed from a surface are damaged prior to the assay. Many insects cement their eggs to a substrate, therefore, a preliminary test may be needed to ensure that removal does not cause mortality. This test can be conducted with several replications of a treated group (bed bugs removed from filter paper) compared to a control group (bed bugs not removed). Similar low rates of mortality (or no mortality) between the treated and control group will ensure that ...

Bed bugs zijn een belangrijke stedelijke plaag die bloedverlies, huidirritaties, slapeloosheid, depressie en angst bij de humane gastheer 1, 2, 3, 4, 5, 6 kunnen veroorzaken. De kosten van de verwijdering en het regelen van bed bugs zijn hoog en vaak vereisen meerdere bezoeken aan een huis door een ongediertebestrijding bedrijf 7. Meerdere bezoeken zijn meestal verplicht vanwege de cryptische gedrag van bed bugs en de problemen in verband met hen te doden. Vooral bed luizeneieren moeilijk te controleren vanwege hun kleine afmetingen en de bescherming van het embryo van de eierschaal. Momenteel is een gangbare praktijk voor veel ongediertebestrijding bedrijven in de Verenigde Staten is om een ​​huis voor bed bugs met een chemisch insecticide te behandelen. Het is bekenddat de eieren moeilijk te controleren zijn zo veel bedrijven twee weken tijd voor herhalingsbehandelingen 8 uitgevoerd. Hiermee bed luizeneieren voldoende tijd om uit te komen, zodat het eerste instar-stadium zal ontstaan ​​en ogenschijnlijk makkelijker te doden met insecticiden. Er is echter een gebrek aan studies evalueren van de werkzaamheid van insecticiden tegen bedmijt eieren en eerste stadia. Insecteneieren zijn gedocumenteerd de moeilijkste levensfase te beheersen stedelijke insectenplagen, behalve bed bugs zijn, naast vele landbouwongedierte. De meeste van deze problemen zijn toegeschreven aan de schalen, terwijl een paar studies insecticide resistentie gemeld. De weerstand in het ei stadium is gedocumenteerd in Triatoma infestans 9, Pediculus humanus capitis 10, Plutella xylostella 11, Rhyzopertha Dominica 12, <em&gt; Cimex lectularius 13, en meerdere opgeslagen product kevers (dwz Oryzaephilus surinamensis, Tribolium castaneum, Cryptolestes ferrugineus en Rhyzopertha Dominica). 14 De resistentie van de eistadium en onvolwassen stadia, en complicaties van insecticide penetratie door de eierschaal, vereist de noodzaak insecticide werkzaamheid bioassays tegen deze levensstadia. Dit protocol wordt stap-voor-stap procedure voor het bepalen van de werkzaamheid van insecticiden in het ei en eerste instar fase van het gemeenschappelijk huismijten, Cimex lectularius. Beide protocollen concentratie-respons assays voor kwantificering van LC 50 waarden toe. Concentratie-respons testen worden vaak gebruikt voor toxicologisch onderzoek, maar dit protocol is aangepast voor het eenvoudig te behandelen groepen van bed bug eieren en de eerste stadia. Deze assays kunnen worden aangepastvoor eieren verschillende insectensoorten en onvolwassen levensfasen.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="1067">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Petri dishes</td>
			<td>Fisher Scientific Inc.</td>
			<td>08-757-105</td>
			<td>Plastic</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Filter paper</td>
			<td>Whatman</td>
			<td>1001-042</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Featherweight forceps</td>
			<td>Fisher Scientific Inc.</td>
			<td align="right">4750</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Temprid SC (imidacloprid/bifenthrin)</td>
			<td>Bayer CropScience</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Transport GHP (acetamiprid/bifenthrin)</td>
			<td>FMC Corp.</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge tube</td>
			<td></td>
			<td>06-443-18</td>
			<td>50 mL; flat-top threaded</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fine mesh</td>
			<td></td>
			<td>7250C</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>KimWipe</td>
			<td></td>
			<td>06-666A</td>
			<td>11 cm X 21 cm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Small paint brush</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Any small paint brush</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hardboard panels</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Composite wood or tile would be sufficient from a home improvement store</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Metal weights</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Any type of metal screw that will hold the weight of the Petri dish down onto a surface</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a method for evaluating insecticide efficacy against bed bug, cimex lectularius, eggs and first instars

Standard toxiciteit evaluaties van insecticiden tegen schadelijke insecten worden voornamelijk uitgevoerd op volwassen insecten. Evaluatie op basis van een dosis-respons of concentratie-respons curve, de sterfte toeneemt naarmate de dosis of concentratie van een insecticide wordt verhoogd. Standaard letale concentratie (LC50) en letale dosis (LD50) tests die leiden tot 50% mortaliteit van een testpopulatie kan een uitdaging voor de evaluatie toxiciteit van insecticiden tegen insecten levensstadia niet voor volwassenen, zoals eieren en vroege instar of nimfenstadia . Echter, deze informatie is essentieel voor het begrijpen van insecticide werkzaamheid in alle bed bug levensfasen, die de controle en behandeling inspanningen beïnvloedt. Dit protocol maakt gebruik van een standaard dompelen bioassay aangepast voor bed bug eieren en een contact insecticide-test voor de behandeling van nymphal eerste stadia. Deze assays produceren een concentratie-respons curve verder kwantificeren LC 50 waarden voor insecticide evaluaties.

De eieren werden ondergedompeld in 5 verschillende concentraties van imidacloprid / β-cyfluthrin (ul / ml). De eerste stadia werden op behandelde oppervlakken van vijf verschillende concentraties van imidacloprid / β-cyfluthrin (Figuur 2) geplaatst. We gebruikten drie verschillende populaties van C. lectularius: Harlan, Richmond, en epicentrum (tabel 1). The Harlan stam...

Watch this Scientific Journal Video about A Method for Evaluating Insecticide Efficacy against Bed Bug,  Cimex lectularius, Eggs and First Instars at JoVE.com

A Method for Evaluating Insecticide Efficacy against Bed Bug,  Cimex lectularius, Eggs and First Instars

Insecticide evaluaties zijn vaak gericht tegen volwassen insecten, in plaats van onvolwassen stadia. Hier presenteren we een protocol voor het evalueren van insecticiden tegen bed bug eieren met een vergelijking met de eerste nimfenstadium bedwants podium. Deze protocollen kunnen worden aangepast voor andere insecten insecticide werkzaamheid in niet-volwassen levensstadia evalueren.

Een methode voor het evalueren van Insecticide werkzaamheid tegen Bed Bug,<em&gt; Cimex lectularius</em&gt;, Eieren en First stadia

Standard toxicity evaluations of insecticides against insect pests are primarily conducted on adult insects. Evaluations are based on a dose-response or ...

Research

JoVE Journal

Environment

A Method for Evaluating Insecticide Efficacy against Bed Bug, Cimex lectularius, Eggs and First Instars

A Rapid and Efficient Method for Assessing Pathogenicity of Ustilago maydis on Maize and Teosinte Lines

A Rapid and Efficient Method for Assessing Pathogenicity of Ustilago maydis on Maize and Teosinte Lines

Een snelle en efficiënte methode voor het beoordelen van pathogeniteit van Ustilago maydis op maïs- en teosintelijnen

Maize is a major cereal crop worldwide. However, susceptibility to biotrophic pathogens is the primary constraint to increasing productivity. U. maydis is ...

A Simple Method for Automated Solid Phase Extraction of Water Samples for Immunological Analysis of Small Pollutants

Een eenvoudige methode voor Automated Solid Phase Extraction van watermonsters voor immunologische Analyse van Kleine verontreinigende stoffen

A new method for solid phase extraction (SPE) of environmental water samples is proposed. The developed prototype is cost-efficient and user friendly, and ...

Use of a Battery of Chemical and Ecotoxicological Methods for the Assessment of the Efficacy of Wastewater Treatment Processes to Remove Estrogenic Potency

Gebruik van een batterij van chemische en ecotoxicologische methoden voor de beoordeling van de werkzaamheid van Afvalwaterbehandeling processen te verwijderen Estrogenic Potentie

Endocrine Disrupting Compounds pose a substantial risk to the aquatic environment. Ethinylestradiol (EE2) and estrone (E1) have recently been included in ...

A Gusseted Thermogradient Table to Control Soil Temperatures for Evaluating Plant Growth and Monitoring Soil Processes

Een Gusseted Thermogradient Tabel naar grondtemperaturen controle voor het evalueren van Plant Groei en Monitoring bodemprocessen

Thermogradient tables were first developed in the 1950s primarily to test seed germination over a range of temperatures simultaneously without using a ...

Reliable Method for Assessing Seed Germination, Dormancy, and Mortality under Field Conditions

Betrouwbare methode voor het beoordelen van zaadkieming, zaadrust en Sterfte onder veldomstandigheden

We describe techniques for approximating seed bank dynamics over time using Helianthus annuus as an example study species. Strips of permeable polyester ...

A Flow-through Exposure System for Evaluating Suspended Sediments Effects on Aquatic Life

Een flow-through Exposure System voor het evalueren van sedimenten in suspensie Effecten op Aquatic Life

This paper describes the Fish Larvae and Egg Exposure System (FLEES). The flow-through exposure system is used to investigate the effects of suspended ...

A Lipid Extraction and Analysis Method for Characterizing Soil Microbes in Experiments with Many Samples

Een methode voor de extractie en analyse van lipiden voor het karakteriseren van bodemmicrobollen in experimenten met veel monsters

Microbial communities are important drivers and regulators of ecosystem processes. To understand how management of ecosystems may affect microbial ...

Image-based Lagrangian Particle Tracking in Bed-load Experiments

Image analysis has been increasingly used for the measurement of river flows due to its capabilities to furnish detailed quantitative depictions at a ...

A Novel Method for the Pentosan Analysis Present in Jute Biomass and Its Conversion into Sugar Monomers Using Acidic Ionic Liquid

Een nieuwe methode voor de analyse van de Pentosan aanwezig in Jute biomassa en de omzetting in suiker monomeren met zure Ionische vloeistof

Recently, ionic liquids (ILs) are used for biomass valorization into valuable chemicals because of their remarkable properties such as thermal stability, ...

Optimized Procedure for Determining the Adsorption of Phosphonates onto Granular Ferric Hydroxide using a Miniaturized Phosphorus Determination Method

Geoptimaliseerde Procedure voor de bepaling van de adsorptie van fosfonaten op granulaire Ferric Hydroxide met behulp van een methode fosfor sleutelbepaling verkleind

This paper introduces a procedure to investigate the adsorption of phosphonates onto iron-containing filter materials, particularly granular ferric ...