Agradecemos Molly permanece para diluição e pesticidas assistência formulação. Agradecemos também Troy Anderson para orientação análise de probidade e Zachary Adelman de assistência com design experimental. Esta pesquisa foi parcialmente apoiado por uma concessão Entomological Foundation e por fundos de bolsas Virginia Controle de Pragas.

NOTA: Este protocolo inclui dois ensaios de insecticida para tratar separadamente os ovos de percevejos e primeiros estádios. Ambos os protocolos foram realizados utilizando as mesmas insecticidas, no entanto, os protocolos tiveram que ser adaptadas para garantir a exposição insecticida e para manipular facilmente as amostras. Ensaio 1. Egg Dipping Inseticida <ol><li> Puxe acasaladas, bem alimentados adultos do sexo feminino percevejos de uma colónia e coloque as fêmeas (5-10) em uma ...

<ol>
	<li>Sabou, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bed+bugs+reproductive+life+cycle+in+the+clothes+of+a+patient+suffering+from+Alzheimer's+disease+results+in+iron+deficiency+anemia.">Bed bugs reproductive life cycle in the clothes of a patient suffering from Alzheimer's disease results in iron deficiency anemia.</a> Parasite. 20, (2013).</li><li>Reinhardt, K., Kempke, D., Naylor, R. A., Siva-Jothy, M. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sensitivity+to+bites+by+the+bedbug,+Cimex+lectularius.">Sensitivity to bites by the bedbug, Cimex lectularius.</a> Med. Vet. Entomol. 23, 163-166 (2009).</li><li>Leverkus, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bullous+allergic+hypersensitivity+to+bed+bug+bites+mediated+by+IgE+against+salivary+nitrophorin.">Bullous allergic hypersensitivity to bed bug bites mediated by IgE against salivary nitrophorin.</a> J. invest. entomol. 126, 91-96 (2006).</li><li>Fletcher, C. L., Ardern-Jones, M. R., Hay, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Widespread+bullous+eruption+due+to+multiple+bed+bug+bites.">Widespread bullous eruption due to multiple bed bug bites.</a> Clin. Exp. Dermatol. 27, 74-75 (2002).</li><li>Pritchard, M. J., Hwang, S. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Severe+anemia+from+bedbugs.">Severe anemia from bedbugs.</a> Can. Med. Assoc. J. 181, 287-288 (2009).</li><li>Goddard, J., de Shazo, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Psychological+effects+of+bed+bug+attacks+(Cimex+lectularius+L).">Psychological effects of bed bug attacks (Cimex lectularius L).</a> Am. J. Med. 125, 101-103 (2012).</li><li>Harlan, H. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bed+bugs+101:+the+basics+of+Cimex+lectularius.">Bed bugs 101: the basics of Cimex lectularius.</a> Am. Entomol. 52, 99-101 (2006).</li><li>Pinto, L. J., Cooper, R., Kraft, S. 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H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+occurrence+of+resistance+to+phosphine+in+adult+and+egg+stages+of+strains+of+Rhyzopertha+dominica+(F.)(Coleoptera:+Bostrichidae).">The occurrence of resistance to phosphine in adult and egg stages of strains of Rhyzopertha dominica (F.)(Coleoptera: Bostrichidae).</a> J. Stored Prod. Res. 13, 91-94 (1977).</li><li>Campbell, B. E., Miller, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Insecticide+Resistance+in+Eggs+and+First+Instars+of+the+Bed+Bug,+Cimex+lectularius+(Hemiptera:+Cimicidae).">Insecticide Resistance in Eggs and First Instars of the Bed Bug, Cimex lectularius (Hemiptera: Cimicidae).</a> Insects. 6, 122-132 (2015).</li><li>Price, L. A., Mills, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+toxicity+of+phosphine+to+the+immature+stages+of+resistant+and+susceptible+strains+of+some+common+stored+product+beetles,+and+implications+for+their+control.">The toxicity of phosphine to the immature stages of resistant and susceptible strains of some common stored product beetles, and implications for their control.</a> J. Stored Prod. Res. 24, 51-59 (1988).</li><li>Robertson, J. L., Preisler, H. K., Russel, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> PoloPlus: Probit and Logit Analysis User's Guide. , (2003).</li><li>Montes, C., Cuadrillero, C., Vilella, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Maintenance+of+a+laboratory+colony+of+Cimex+lectularius+(Hemiptera:+Cimicidae)+using+an+artificial+feeding+technique.">Maintenance of a laboratory colony of Cimex lectularius (Hemiptera: Cimicidae) using an artificial feeding technique.</a> J. Med. Entomol. 39, 675-679 (2002).</li><li>Brogdon, W. G., McAllister, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simplification+of+adult+mosquito+bioassays+through+use+of+time-mortality+determinations+in+glass+bottles.">Simplification of adult mosquito bioassays through use of time-mortality determinations in glass bottles.</a> J. Am. Mosq. Control. Assoc. 14, 159-164 (1998).</li><li>Katarzyna, K., Saddler, A., Koella, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+age+and+larval+nutrition+on+phenotypic+expression+of+insecticide-resistance+in+Anopheles+mosquitoes.">Effects of age and larval nutrition on phenotypic expression of insecticide-resistance in Anopheles mosquitoes.</a> PLoS One. 8 (3), (2013).</li><li>Outram, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Factors+affecting+the+resistance+of+insect+eggs+to+sulphuryl+fluoride-II:+the+distribution+of+sulphuryl-35+S+fluoride+in+insect+eggs+after+fumigation.">Factors affecting the resistance of insect eggs to sulphuryl fluoride-II: the distribution of sulphuryl-35 S fluoride in insect eggs after fumigation.</a> J. Stored. Prod. Res. 3, 353-358 (1967).</li></ol>

A critical step in this assay is to ensure that no eggs that are removed from a surface are damaged prior to the assay. Many insects cement their eggs to a substrate, therefore, a preliminary test may be needed to ensure that removal does not cause mortality. This test can be conducted with several replications of a treated group (bed bugs removed from filter paper) compared to a control group (bed bugs not removed). Similar low rates of mortality (or no mortality) between the treated and control group will ensure that ...

Percevejos são uma praga urbana significativo que pode causar perda de sangue, irritações da pele, insônia, depressão e ansiedade em seus hospedeiros humanos 1, 2, 3, 4, 5, 6. Os custos de eliminação e controle de percevejos são altos e muitas vezes requerem múltiplas visitas a uma casa por uma empresa de controle de pragas 7. Várias visitas são geralmente necessários por causa do comportamento críptico de percevejos e as dificuldades associadas a matá-los. Em particular, os ovos de percevejos são difíceis de controlar por causa de seu pequeno tamanho e à protecção do embrião com a casca de ovo. Atualmente, uma prática comum para muitas empresas de controle de pragas em todo os Estados Unidos é tratar uma casa para percevejos usando um inseticida químico. É bem conhecidoque os ovos são difíceis de controlar, por isso muitas empresas têm implementado um prazo de duas semanas para re-tratamentos 8. Isso permite que os ovos de percevejos tempo suficiente para chocar, de modo que o primeiro instar surgirão e supostamente mais fácil de matar com inseticidas. No entanto, há uma escassez de estudos que avaliam a eficácia de inseticidas líquidos contra ovos de percevejos e primeiros estádios. ovos de insectos têm sido documentada para ser o estágio de vida mais difícil de controlar pragas de insectos em urbanos, com excepção dos percevejos, para além de muitas pragas agrícolas. A maioria destas dificuldades têm sido atribuídas a casca do ovo, enquanto alguns estudos têm relatado resistência a inseticidas. A resistência na fase de ovo tem sido documentada em Triatoma infestans 9, Pediculus humanus capitis 10, Plutella xylostella 11, Rhyzopertha dominica 12, <em&gt; Cimex lectularius 13, e vários besouros produtos armazenados (ou seja Oryzaephilus surinamensis, Tribolium castaneum, Cryptolestes ferrugineus e Rhyzopertha dominica). 14 O desenvolvimento de resistência na fase de ovo e estágios imaturos, bem como complicações associadas com insecticida penetração através da casca do ovo, exige a necessidade de bioensaios de eficácia insecticida contra estas fases da vida. Este protocolo prevê um procedimento passo-a-passo para determinar a eficiência de inseticidas no ovo e primeiro instar fase de percevejos comuns, Cimex lectularius. Ambos estes protocolos são ensaios de resposta à concentração para permitir a quantificação dos valores de LC 50. ensaios de concentração-resposta são comumente usados ​​para estudos toxicológicos, no entanto, este protocolo foi adaptado para facilmente tratar grupos de ovos de percevejos e primeiros estádios. Estes ensaios podem ser adaptadospara os ovos de várias das espécies de insetos e fases da vida imaturas.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="1067">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Petri dishes</td>
			<td>Fisher Scientific Inc.</td>
			<td>08-757-105</td>
			<td>Plastic</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Filter paper</td>
			<td>Whatman</td>
			<td>1001-042</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Featherweight forceps</td>
			<td>Fisher Scientific Inc.</td>
			<td align="right">4750</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Temprid SC (imidacloprid/bifenthrin)</td>
			<td>Bayer CropScience</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Transport GHP (acetamiprid/bifenthrin)</td>
			<td>FMC Corp.</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge tube</td>
			<td></td>
			<td>06-443-18</td>
			<td>50 mL; flat-top threaded</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fine mesh</td>
			<td></td>
			<td>7250C</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>KimWipe</td>
			<td></td>
			<td>06-666A</td>
			<td>11 cm X 21 cm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Small paint brush</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Any small paint brush</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hardboard panels</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Composite wood or tile would be sufficient from a home improvement store</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Metal weights</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Any type of metal screw that will hold the weight of the Petri dish down onto a surface</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a method for evaluating insecticide efficacy against bed bug, cimex lectularius, eggs and first instars

avaliações de toxicidade padrão de inseticidas contra pragas de insetos são realizados principalmente em insetos adultos. As avaliações baseiam-se em uma dose-resposta ou a curva de resposta à concentração, em que a mortalidade aumenta à medida que a dose ou concentração de um insecticida é aumentada. Concentração padrão letal (LC 50) e dose letal (LD 50) testes que resultam em mortalidade de 50% de uma população de teste pode ser um desafio para avaliação da toxicidade de inseticidas contra não-adultos fases da vida de insetos, como ovos e instar cedo ou estágios de ninfa . No entanto, esta informação é essencial para compreender a eficácia inseticida em todas as fases da vida de percevejos, o que afeta os esforços de controle e tratamento. Este protocolo usa um bioensaio de imersão padrão modificado para ovos de percevejos e um ensaio de insecticida de contacto para o tratamento de ninfa primeiros estádios. Estes ensaios de produzir uma curva de concentração-resposta para a quantificação de LC 50 valores para as avaliações insecticidas.

Os ovos foram imersas em 5 diferentes concentrações de imidacloprid / β-ciflutrina (uL / mL). Os primeiros instares foram colocados sobre superfícies tratadas de cinco concentrações diferentes de imidacloprid / β-ciflutrina (Figura 2). Foram utilizados três diferentes populações de C. lectularius: Harlan, Richmond, e épico Center (Tabela 1). A cepa Harlan é su...

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A Method for Evaluating Insecticide Efficacy against Bed Bug,  Cimex lectularius, Eggs and First Instars

avaliações de inseticidas são muitas vezes alvo contra insetos adultos, em vez de estágios imaturos. Aqui, apresentamos um protocolo para avaliar inseticidas contra ovos de percevejos com uma comparação à primeira fase de percevejos de ninfa. Estes protocolos pode ser modificada para outros insetos para avaliar a eficácia do inseticida nas fases da vida não-adultos.

Um método para avaliar Inseticida Eficácia contra Bed Bug,<em&gt; Cimex lectularius</em&gt;, Ovos e primeiros estádios

Standard toxicity evaluations of insecticides against insect pests are primarily conducted on adult insects. Evaluations are based on a dose-response or ...

Research

JoVE Journal

Environment

A Method for Evaluating Insecticide Efficacy against Bed Bug, Cimex lectularius, Eggs and First Instars

A Rapid and Efficient Method for Assessing Pathogenicity of Ustilago maydis on Maize and Teosinte Lines

A Rapid and Efficient Method for Assessing Pathogenicity of Ustilago maydis on Maize and Teosinte Lines

Um método rápido e eficiente para avaliar a patogenicidade dos maydis ustilago nas linhas de milho e teosinte

Maize is a major cereal crop worldwide. However, susceptibility to biotrophic pathogens is the primary constraint to increasing productivity. U. maydis is ...

Ambiente

A Simple Method for Automated Solid Phase Extraction of Water Samples for Immunological Analysis of Small Pollutants

Um método simples para a extração automatizada de fase sólida das amostras de água para análise imunológica de Pequenas Poluentes

A new method for solid phase extraction (SPE) of environmental water samples is proposed. The developed prototype is cost-efficient and user friendly, and ...

Use of a Battery of Chemical and Ecotoxicological Methods for the Assessment of the Efficacy of Wastewater Treatment Processes to Remove Estrogenic Potency

O uso de uma bateria de métodos químicos e ecotoxicológicos para a avaliação da eficácia dos Processos de Tratamento de Águas Residuais remover estrogénica Potência

Endocrine Disrupting Compounds pose a substantial risk to the aquatic environment. Ethinylestradiol (EE2) and estrone (E1) have recently been included in ...

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A Tabela Gusseted Thermogradient para controlar a temperatura do solo para avaliar o crescimento da planta e monitoramento de processos do solo

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