Vi tackar Molly trofast för utspädning och bekämpningsmedel formulering hjälp. Vi vill också tacka Troy Anderson för probitanalys vägledning och Zachary Adelman för hjälp med experimentell design. Denna forskning har delvis stöd av en Entomological Foundation tilldelning och Virginia växtskydd stipendiefonder.

OBS: Detta protokoll omfattar två insekts analyser för separat behandling bed bug ägg och första instars. Båda protokollen genomfördes med användning av samma insekticider, hade dock de protokoll som ska anpassas för att säkerställa insekts exponering och enkelt manipulera proverna. 1. Ägg Dipping Insekticid Assay <ol><li> Dra parat, välnärda vuxna kvinnliga vägglöss från en koloni och placera kvinnor (5-10) i en petriskål med filterpapper. Har minst tio replikat för att ...

<ol>
	<li>Sabou, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bed+bugs+reproductive+life+cycle+in+the+clothes+of+a+patient+suffering+from+Alzheimer's+disease+results+in+iron+deficiency+anemia.">Bed bugs reproductive life cycle in the clothes of a patient suffering from Alzheimer's disease results in iron deficiency anemia.</a> Parasite. 20, (2013).</li><li>Reinhardt, K., Kempke, D., Naylor, R. A., Siva-Jothy, M. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sensitivity+to+bites+by+the+bedbug,+Cimex+lectularius.">Sensitivity to bites by the bedbug, Cimex lectularius.</a> Med. Vet. Entomol. 23, 163-166 (2009).</li><li>Leverkus, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bullous+allergic+hypersensitivity+to+bed+bug+bites+mediated+by+IgE+against+salivary+nitrophorin.">Bullous allergic hypersensitivity to bed bug bites mediated by IgE against salivary nitrophorin.</a> J. invest. entomol. 126, 91-96 (2006).</li><li>Fletcher, C. L., Ardern-Jones, M. R., Hay, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Widespread+bullous+eruption+due+to+multiple+bed+bug+bites.">Widespread bullous eruption due to multiple bed bug bites.</a> Clin. Exp. Dermatol. 27, 74-75 (2002).</li><li>Pritchard, M. J., Hwang, S. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Severe+anemia+from+bedbugs.">Severe anemia from bedbugs.</a> Can. Med. Assoc. J. 181, 287-288 (2009).</li><li>Goddard, J., de Shazo, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Psychological+effects+of+bed+bug+attacks+(Cimex+lectularius+L).">Psychological effects of bed bug attacks (Cimex lectularius L).</a> Am. J. Med. 125, 101-103 (2012).</li><li>Harlan, H. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bed+bugs+101:+the+basics+of+Cimex+lectularius.">Bed bugs 101: the basics of Cimex lectularius.</a> Am. Entomol. 52, 99-101 (2006).</li><li>Pinto, L. J., Cooper, R., Kraft, S. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Bed Bug Handbook: The Complete Guide to Bed Bugs and Their Control. , (2007).</li><li>Toloza, A. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differential+patterns+of+insecticide+resistance+in+eggs+and+first+instars+of+Triatoma+infestans+(Hemiptera:+Reduviidae)+from+Argentina+and+Bolivia.">Differential patterns of insecticide resistance in eggs and first instars of Triatoma infestans (Hemiptera: Reduviidae) from Argentina and Bolivia.</a> J. Med. Entomol. 45, 421-426 (2008).</li><li>Cueto, G. M., Zerba, E. N., Picollo, M. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evidence+of+pyrethroid+resistance+in+eggs+of+Pediculus+humanus+capitis+(Phthiraptera:+Pediculidae)+from+Argentina.">Evidence of pyrethroid resistance in eggs of Pediculus humanus capitis (Phthiraptera: Pediculidae) from Argentina.</a> J. Med. Entomol. 45, 693-697 (2008).</li><li>Ho, S. H., Goh, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Deltamethrin+as+a+potential+ovicidal+pyrethroid+against+Plutella+xylostella+L.">Deltamethrin as a potential ovicidal pyrethroid against Plutella xylostella L.</a> Toxicol. let. 22, 161-164 (1984).</li><li>Bell, C. H., Hole, B. D., Evans, P. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+occurrence+of+resistance+to+phosphine+in+adult+and+egg+stages+of+strains+of+Rhyzopertha+dominica+(F.)(Coleoptera:+Bostrichidae).">The occurrence of resistance to phosphine in adult and egg stages of strains of Rhyzopertha dominica (F.)(Coleoptera: Bostrichidae).</a> J. Stored Prod. Res. 13, 91-94 (1977).</li><li>Campbell, B. E., Miller, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Insecticide+Resistance+in+Eggs+and+First+Instars+of+the+Bed+Bug,+Cimex+lectularius+(Hemiptera:+Cimicidae).">Insecticide Resistance in Eggs and First Instars of the Bed Bug, Cimex lectularius (Hemiptera: Cimicidae).</a> Insects. 6, 122-132 (2015).</li><li>Price, L. A., Mills, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+toxicity+of+phosphine+to+the+immature+stages+of+resistant+and+susceptible+strains+of+some+common+stored+product+beetles,+and+implications+for+their+control.">The toxicity of phosphine to the immature stages of resistant and susceptible strains of some common stored product beetles, and implications for their control.</a> J. Stored Prod. Res. 24, 51-59 (1988).</li><li>Robertson, J. L., Preisler, H. K., Russel, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> PoloPlus: Probit and Logit Analysis User's Guide. , (2003).</li><li>Montes, C., Cuadrillero, C., Vilella, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Maintenance+of+a+laboratory+colony+of+Cimex+lectularius+(Hemiptera:+Cimicidae)+using+an+artificial+feeding+technique.">Maintenance of a laboratory colony of Cimex lectularius (Hemiptera: Cimicidae) using an artificial feeding technique.</a> J. Med. Entomol. 39, 675-679 (2002).</li><li>Brogdon, W. G., McAllister, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simplification+of+adult+mosquito+bioassays+through+use+of+time-mortality+determinations+in+glass+bottles.">Simplification of adult mosquito bioassays through use of time-mortality determinations in glass bottles.</a> J. Am. Mosq. Control. Assoc. 14, 159-164 (1998).</li><li>Katarzyna, K., Saddler, A., Koella, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+age+and+larval+nutrition+on+phenotypic+expression+of+insecticide-resistance+in+Anopheles+mosquitoes.">Effects of age and larval nutrition on phenotypic expression of insecticide-resistance in Anopheles mosquitoes.</a> PLoS One. 8 (3), (2013).</li><li>Outram, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Factors+affecting+the+resistance+of+insect+eggs+to+sulphuryl+fluoride-II:+the+distribution+of+sulphuryl-35+S+fluoride+in+insect+eggs+after+fumigation.">Factors affecting the resistance of insect eggs to sulphuryl fluoride-II: the distribution of sulphuryl-35 S fluoride in insect eggs after fumigation.</a> J. Stored. Prod. Res. 3, 353-358 (1967).</li></ol>

A critical step in this assay is to ensure that no eggs that are removed from a surface are damaged prior to the assay. Many insects cement their eggs to a substrate, therefore, a preliminary test may be needed to ensure that removal does not cause mortality. This test can be conducted with several replications of a treated group (bed bugs removed from filter paper) compared to a control group (bed bugs not removed). Similar low rates of mortality (or no mortality) between the treated and control group will ensure that ...

Vägglöss är en viktig urban skadedjur som kan orsaka blodförlust, hudirritationer, sömnlöshet, depression och ångest i sina mänskliga värdar 1, 2, 3, 4, 5, 6. Kostnaderna för att eliminera och kontrollera vägglöss är höga och ofta kräver flera besök till ett hem med en skadedjursbekämpning företag 7. Flera besök krävs vanligtvis på grund av den kryptiska beteende vägglöss och de svårigheter som är förknippade med att döda dem. I synnerhet, bed bug ägg är svår att kontrollera på grund av deras ringa storlek och skydd av embryot genom äggskalet. För närvarande är en vanlig metod för många skadedjursbekämpning företag i hela USA för att behandla ett hem för vägglöss genom kemiska insektsmedel. Det är väl käntatt äggen är svåra att kontrollera, har så många företag genomfört en två veckors tid för upprepade behandlingar 8. Detta tillåter bed bug ägg tillräckligt med tid att kläckas, så att den första instar kommer att dyka upp och purportedly vara lättare att döda med insekticider. Det finns dock en brist på studier som utvärderar effekten av flytande insekticider mot sängen bug ägg och första instars. Insektägg har dokumenterats att vara den svåraste livsfas att styra i stads skadeinsekter, annat än vägglöss, förutom många skadedjur inom jordbruket. De flesta av dessa svårigheter har tillskrivits äggskal, medan ett fåtal studier har rapporterat insektsresistens. Motstånd i ägget steget har dokumenterats i Triatoma infestans 9, Pediculus humanus capitis 10, Plutella xylostella 11, Rhyzopertha dominica 12, <em&gt; Cimex lectularius 13, och ett flertal lagrade produkt skalbaggar (dvs sågtandad plattbagge, Tribolium castaneum, cryptolestes ferrugineus och Rhyzopertha dominica). 14 resistensutveckling hos ägget stadiet och omogna stadier, samt komplikationer i samband med insekts penetrering genom äggskal, nödvändiggör behovet av insekts effekt bioanalyser mot dessa livsstadier. Detta protokoll ger en steg-för-steg metod för att bestämma effekten av insekticider i ägget och första stadiet stadiet av gemensamma vägglöss, lectularius Cimex. Båda dessa protokoll är koncentration-respons-analyser för att medge kvantifiering av LC 50-värden. Koncentration-responsanalyser används ofta för toxikologiska studier, men detta protokoll har anpassats för att enkelt behandla grupper av säng bug ägg och första instars. Dessa analyser kan anpassasför olika insektsarter ägg och omogna stadier i livet.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="1067">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Petri dishes</td>
			<td>Fisher Scientific Inc.</td>
			<td>08-757-105</td>
			<td>Plastic</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Filter paper</td>
			<td>Whatman</td>
			<td>1001-042</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Featherweight forceps</td>
			<td>Fisher Scientific Inc.</td>
			<td align="right">4750</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Temprid SC (imidacloprid/bifenthrin)</td>
			<td>Bayer CropScience</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Transport GHP (acetamiprid/bifenthrin)</td>
			<td>FMC Corp.</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge tube</td>
			<td></td>
			<td>06-443-18</td>
			<td>50 mL; flat-top threaded</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fine mesh</td>
			<td></td>
			<td>7250C</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>KimWipe</td>
			<td></td>
			<td>06-666A</td>
			<td>11 cm X 21 cm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Small paint brush</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Any small paint brush</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hardboard panels</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Composite wood or tile would be sufficient from a home improvement store</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Metal weights</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Any type of metal screw that will hold the weight of the Petri dish down onto a surface</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a method for evaluating insecticide efficacy against bed bug, cimex lectularius, eggs and first instars

Standardtoxicitets utvärderingar av insekticider mot skadeinsekter i första hand genomförs på vuxna insekter. Utvärderingarna är baserade på en dos-respons eller koncentration-respons-kurva, där dödligheten ökar allteftersom dosen eller koncentrationen av en insekticid ökas. Standard dödlig koncentration (LC 50) och letal dos (LD 50) tester som resulterar i 50% dödlighet av en testpopulation kan vara en utmaning för utvärdering av toxiciteten av insekticider mot icke-vuxna insektslivsstadier, såsom ägg och tidigt stadiet eller nymphal stadier . Men är denna information som är nödvändig för att förstå insekts effekt i alla bed bug levnadsstadier, vilket påverkar kontroll- och behandlingsarbetet. Detta protokoll använder en standard doppa bioanalys modifierats för säng bug ägg och en kontakt insektsbekämpning analys för behandling av nymphal första instars. Dessa analyser producera en koncentration-svarskurva för att ytterligare kvantifiera LC 50-värden för insekts utvärderingar.

Äggen doppades i 5 olika koncentrationer av imidakloprid / β-cyflutrin (| il / ml). De första instars placerades på behandlade ytor av fem olika koncentrationer av imidakloprid / β-cyflutrin (Figur 2). Vi använde tre olika populationer av C. lectularius: Harlan, Richmond, och Epic Center (tabell 1). The Harlan stammen är känslig för pyretroidinsekticider och för...

Watch this Scientific Journal Video about A Method for Evaluating Insecticide Efficacy against Bed Bug,  Cimex lectularius, Eggs and First Instars at JoVE.com

A Method for Evaluating Insecticide Efficacy against Bed Bug,  Cimex lectularius, Eggs and First Instars

Insekts utvärderingar ofta riktade mot vuxna insekter, snarare än omogna stadier. Här presenterar vi ett protokoll för utvärdering av insekticider mot sängen bug ägg med en jämförelse med den första nymphal bed bug skede. Dessa protokoll kan justeras för andra insekter för att utvärdera insekts effekt i icke-vuxna levnadsstadier.

En metod för att utvärdera Insekts Effekt mot Bed Bug,<em&gt; Cimex lectularius</em&gt;, Ägg och First instars

Standard toxicity evaluations of insecticides against insect pests are primarily conducted on adult insects. Evaluations are based on a dose-response or ...

Research

JoVE Journal

Environment

A Method for Evaluating Insecticide Efficacy against Bed Bug, Cimex lectularius, Eggs and First Instars

A Rapid and Efficient Method for Assessing Pathogenicity of Ustilago maydis on Maize and Teosinte Lines

A Rapid and Efficient Method for Assessing Pathogenicity of Ustilago maydis on Maize and Teosinte Lines

En snabb och effektiv metod för att bedöma patogenicitet hos Ustilago maydis på majs- och teosintelinjer

Maize is a major cereal crop worldwide. However, susceptibility to biotrophic pathogens is the primary constraint to increasing productivity. U. maydis is ...

A Simple Method for Automated Solid Phase Extraction of Water Samples for Immunological Analysis of Small Pollutants

En enkel metod för Automated Fastfasextraktion av vattenprover för immunologisk analys av små föroreningar

A new method for solid phase extraction (SPE) of environmental water samples is proposed. The developed prototype is cost-efficient and user friendly, and ...

Use of a Battery of Chemical and Ecotoxicological Methods for the Assessment of the Efficacy of Wastewater Treatment Processes to Remove Estrogenic Potency

Användning av ett batteri av kemiska och ekotoxikologiska metoder för bedömning av effekten av rening av avloppsvatten för att ta bort östrogena potens

Endocrine Disrupting Compounds pose a substantial risk to the aquatic environment. Ethinylestradiol (EE2) and estrone (E1) have recently been included in ...

A Gusseted Thermogradient Table to Control Soil Temperatures for Evaluating Plant Growth and Monitoring Soil Processes

En invikta Thermogradient tabell att kontrollera Jord Temperaturer för att utvärdera Växternas tillväxt och övervakning mark

Thermogradient tables were first developed in the 1950s primarily to test seed germination over a range of temperatures simultaneously without using a ...

Reliable Method for Assessing Seed Germination, Dormancy, and Mortality under Field Conditions

Tillförlitlig metod för att bedöma frögroning, Vilande och Mortalitet under fältbetingelser

We describe techniques for approximating seed bank dynamics over time using Helianthus annuus as an example study species. Strips of permeable polyester ...

A Flow-through Exposure System for Evaluating Suspended Sediments Effects on Aquatic Life

En genomströmningsExponerings system för att utvärdera suspenderat sediment Effekter på Vatten- liv

This paper describes the Fish Larvae and Egg Exposure System (FLEES). The flow-through exposure system is used to investigate the effects of suspended ...

A Lipid Extraction and Analysis Method for Characterizing Soil Microbes in Experiments with Many Samples

En lipid extraktions- och analysmetod för karakterisering av markmikrober i experiment med många prov

Microbial communities are important drivers and regulators of ecosystem processes. To understand how management of ecosystems may affect microbial ...

Image-based Lagrangian Particle Tracking in Bed-load Experiments

Bildbaserad Lagrangian Particle Tracking i Bed-load Experiments

Image analysis has been increasingly used for the measurement of river flows due to its capabilities to furnish detailed quantitative depictions at a ...

A Novel Method for the Pentosan Analysis Present in Jute Biomass and Its Conversion into Sugar Monomers Using Acidic Ionic Liquid

En ny metod för Pentosan analys i Jute biomassa och dess omvandling till socker monomerer med sura jonisk vätska

Recently, ionic liquids (ILs) are used for biomass valorization into valuable chemicals because of their remarkable properties such as thermal stability, ...

Optimized Procedure for Determining the Adsorption of Phosphonates onto Granular Ferric Hydroxide using a Miniaturized Phosphorus Determination Method

Optimerad förfarandet för bestämning av Adsorption av fosfonater på granulat järnklorid hydroxid metoden en miniatyriserade fosfor bestämning

This paper introduces a procedure to investigate the adsorption of phosphonates onto iron-containing filter materials, particularly granular ferric ...