Name: murine full-thickness skin transplantation
Uploaded: 2017-01-02T15:00:00
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この作品は、NIHの助成金R01AI077610によって賄われていました。

すべての手順は、国立衛生研究所の実験動物の管理と使用に関する指針（NIH）に従って行ったし、ジョンズ・ホプキンス大学動物実験委員会（JHUACUC）によって承認されました。具体的な手順は、承認されたACUCプロトコルMO13M292とMO13M370下で行いました。 1.ドナー皮膚の収穫<ol><li>イソフルラン（ - マウスコーンを介して、2％、4％で誘導気化器、1でのメンテナンス）で?...

<ol>
	<li>Furtmuller, G. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Orthotopic+Hind+Limb+Transplantation+in+the+Mouse.">Orthotopic Hind Limb Transplantation in the Mouse.</a> J Vis Exp. , (2016).</li><li>Oh, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Novel+Microsurgical+Model+for+Heterotopic,+En+Bloc+Chest+Wall,+Thymus,+and+Heart+Transplantation+in+Mice.">A Novel Microsurgical Model for Heterotopic, En Bloc Chest Wall, Thymus, and Heart Transplantation in Mice.</a> J Vis Exp. , (2016).</li><li>Oberhuber, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+cervical+heart+transplantation+model+using+a+modified+cuff+technique.">Murine cervical heart transplantation model using a modified cuff technique.</a> J Vis Exp. , e50753 (2014).</li><li>Jones, T. R., Shirasugi, N., Adams, A. B., Pearson, T. C., Larsen, C. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intravital+microscopy+identifies+selectins+that+regulate+T+cell+traffic+into+allografts.">Intravital microscopy identifies selectins that regulate T cell traffic into allografts.</a> J Clin Invest. 112, 1714-1723 (2003).</li><li>Celli, S., Albert, M. L., Bousso, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Visualizing+the+innate+and+adaptive+immune+responses+underlying+allograft+rejection+by+two-photon+microscopy.">Visualizing the innate and adaptive immune responses underlying allograft rejection by two-photon microscopy.</a> Nat Med. 17, 744-749 (2011).</li><li>Medawar, P. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+behaviour+and+fate+of+skin+autografts+and+skin+homografts+in+rabbits:+A+report+to+the+War+Wounds+Committee+of+the+Medical+Research+Council.">The behaviour and fate of skin autografts and skin homografts in rabbits: A report to the War Wounds Committee of the Medical Research Council.</a> J Anat. 78, 176-199 (1944).</li><li>Billingham, R. E., Brent, L., Medawar, P. B., Sparrow, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitative+studies+on+tissue+transplantation+immunity.+I.+The+survival+times+of+skin+homografts+exchanged+between+members+of+different+inbred+strains+of+mice.">Quantitative studies on tissue transplantation immunity. I. The survival times of skin homografts exchanged between members of different inbred strains of mice.</a> Proc R Soc Lond B Biol Sci. 143, 43-58 (1954).</li><li>Garrod, K. R., Cahalan, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+skin+transplantation.">Murine skin transplantation.</a> J Vis Exp. , (2008).</li><li>Schmaler, M., Broggi, M. A., Rossi, S. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transplantation+of+tail+skin+to+study+allogeneic+CD4+T+cell+responses+in+mice.">Transplantation of tail skin to study allogeneic CD4 T cell responses in mice.</a> J Vis Exp. , e51724 (2014).</li><li>Bergstresser, P. R., Toews, G. B., Gilliam, J. N., Streilein, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Unusual+numbers+and+distribution+of+Langerhans+cells+in+skin+with+unique+immunologic+properties.">Unusual numbers and distribution of Langerhans cells in skin with unique immunologic properties.</a> J Invest Dermatol. 74, 312-314 (1980).</li><li>Chen, H. D., Silvers, W. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Influence+of+Langerhans+cells+on+the+survival+of+H-Y+incompatible+skin+grafts+in+rats.">Influence of Langerhans cells on the survival of H-Y incompatible skin grafts in rats.</a> J Invest Dermatol. 81, 20-23 (1983).</li><li>Chong, A. S., Alegre, M. L., Miller, M. L., Fairchild, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lessons+and+limits+of+mouse+models.">Lessons and limits of mouse models.</a> Cold Spring Harb Perspect Med. 3, a015495 (2013).</li><li>Mayumi, H., Nomoto, K., Good, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+surgical+technique+for+experimental+free+skin+grafting+in+mice.">A surgical technique for experimental free skin grafting in mice.</a> Jpn J Surg. 18, 548-557 (1988).</li><li>McFarland, H. I., Rosenberg, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Skin+allograft+rejection.">Skin allograft rejection.</a> Curr Protoc Immunol. Chapter 4, (2009).</li><li>Lee, C. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preventing+Allograft+Rejection+by+Targeting+Immune+Metabolism.">Preventing Allograft Rejection by Targeting Immune Metabolism.</a> Cell reports. 13, 760-770 (2015).</li><li>Pollizzi, K. N., Powell, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Integrating+canonical+and+metabolic+signalling+programmes+in+the+regulation+of+T+cell+responses.">Integrating canonical and metabolic signalling programmes in the regulation of T cell responses.</a> Nat Rev Immunol. 14, 435-446 (2014).</li><li>Pearce, E. L., Poffenberger, M. C., Chang, C. H., Jones, R. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fueling+immunity:+insights+into+metabolism+and+lymphocyte+function.">Fueling immunity: insights into metabolism and lymphocyte function.</a> Science. 342, 1242454 (2013).</li></ol>

メダウォアによるその導入されて以来、最初のヒトの研究で、その後、ウサギおよびマウスで、皮膚移植、同種免疫応答6,7の研究のための貴重なモデルとなっています。この原稿では、上下の背中の皮膚を用いた大規模な、非血管新生化、全層皮膚移植のモデルを提示します。移植組織の供給源として、マウスの尾の皮膚又は耳の皮膚を使用することを含む様々な代替方法は、8,9...

臓器移植は、末期の臓器不全を有する患者のための選択の治療法である、と結果は外科的手順および免疫抑制プロトコルの進歩と飛躍的に向上しています。しかし、長期的な免疫抑制は、重大な副作用に関連付けられている、と寛容を促進する新たな戦略の開発は、現代の移植研究の目標のままです。 多数の動物モデルが、移植片拒絶反応を予防するため、長期的な耐性1-3を促進するための接近同種移植片拒絶反応のメカニズムを研究するために、および免疫抑制を試験するために、移植における基礎研究のために開発されています。マウスモデルは、原因、診断と治療用抗体の排他的で広大な可用性と明確に定義された近交系およびトランスジェニック株と免疫学研究の主力となっています。皮膚移植は特別な顕微スキルや缶を必要としない簡単な手順であります簡単に術後監視されます。まとめると、マウスの皮膚移植は、移植片拒絶4,5中の抗原送達、細胞輸送、および組織破壊を含む同種免疫応答に関与する多くの側面を研究するための例外的なツールとなっています。 ここでは、マウスモデルを用いた全層皮膚移植のためのステップバイステップの手順を示し、我々は移植皮膚の生着の成功のために必要な重要な手順を説明します。

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="923">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:247px;">Straight micro forceps&#160;</td>
			<td style="width:125px;">Sigma</td>
			<td style="width:136px;">F4017</td>
			<td style="width:415px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:247px;">Curved micro forceps&#160;</td>
			<td style="width:125px;">Aesculap</td>
			<td style="width:136px;">BD333R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:247px;">Curved Stevens tenotomy scissors&#160;</td>
			<td style="width:125px;">Aesculap</td>
			<td style="width:136px;">BC905R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:247px;">Mayo dissecting&#160; scissors</td>
			<td style="width:125px;">Sigma</td>
			<td style="width:136px;">S3146</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:247px;">Micro needle holder</td>
			<td style="width:125px;">Aesculap</td>
			<td style="width:136px;">BM563R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:247px;">Sterile gauze</td>
			<td style="width:125px;">Covidien</td>
			<td style="width:136px;">441218</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:247px;">6-0 Nylon suture&#160;</td>
			<td style="width:125px;">MWI</td>
			<td style="width:136px;">31849</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:247px;">Plastic Strips Band-Aid</td>
			<td style="width:125px;">Johnson &#38; Johnson</td>
			<td style="width:136px;"></td>
			<td>Obtained from pharmacy</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:247px;">10 cm Petri dish</td>
			<td style="width:125px;">Fisherbrand</td>
			<td style="width:136px;">FB0875712</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:247px;">PBS</td>
			<td style="width:125px;">Quality Biological</td>
			<td style="width:136px;">119069131</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:247px;">Buprenorphine</td>
			<td style="width:125px;"></td>
			<td style="width:136px;"></td>
			<td>DEA Number required; Obtained from hospital pharmacy</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:247px;">Enrofloxacin</td>
			<td style="width:125px;">Bayer Health Care</td>
			<td style="width:136px;">186599</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

murine full-thickness skin transplantation

マウスの全層皮膚移植は、同種免疫反応および移植片拒絶を研究するためのインビボモデルで十分に確立されています。ヒトへのその限られた用途にもかかわらず、マウスでは皮膚移植が広く移植研究のために採用されています。手順は、学び、実行することが容易であり、それは繊細な顕微技術も広範囲の訓練を必要としません。また、このモデルにおける移植片拒絶は、非常に再現性の免疫反応で発生しやすい直接検査や触診によって監視されます。また、ドナーをマッチさせた、またはサードパーティの皮膚移植片を有する二次皮膚移植はドナー特異的寛容を評価するための代替と合併症のない方法として、より複雑な移植モデル上で実行することができます。合併症は低く、一般的に手順の後、麻酔の過剰摂取や呼吸困難に限定されています。移植の失敗は、他の一方で、GRの準備不足の結果として、一般的に発生します移植床における後方、不正確な位置決め、または包帯の不適切な配置。この記事では、我々は、マウスの全層皮膚移植のためのプロトコルを提示し、成功した手順のために必要な重要な手順を説明します。

レシピエントマウスに包帯の配置は、手順の重要なステップです。皮膚移植は、肩、腰、及び背骨（ 図1）との間で、受信者の胴体上に配置されます。包帯は、折り畳まれたガーゼと2プラスチック絆創膏の組み合わせで作られています。レシピエントマウスは、包帯の中心にガーゼの上にダウン移植片で配置されています。 2つの湾曲マイクロ鉗子を用い...

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Murine Full-thickness Skin Transplantation

マウス全層皮膚移植は同種免疫設定で拒絶反応を研究するために、十分に確立されたモデルです。 &gt; C57BL / 6全層皮膚移植 - ここでは、BALB / cと実行に関与し、各ステップのチュートリアルを提供しています。

マウス全層皮膚移植

Murine full-thickness skin transplantation is a well-established in vivo model to study alloimmune response and graft rejection. Despite its limited ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Murine Model of CD40-activation of B cells

B細胞のCD40 -活性化のモデルマウス

Research on B cells has shown that CD40 activation improves their antigen presentation capacity. When stimulated with interleukin-4 and CD40 ligand ...

Granulocyte-dependent Autoantibody-induced Skin Blistering

顆粒球に依存する自己抗体誘発皮膚水疱形成

Autoimmune phenomena occur in healthy individuals, but when self-tolerance fails, the autoimmune response may result in specific pathology. According to ...

Transplantation of Tail Skin to Study Allogeneic CD4 T Cell Responses in Mice

マウスにおける同種のCD4 T細胞応答を研究する尾皮膚の移植

The study of T cell responses and their consequences during allo-antigen recognition requires a model that enables one to distinguish between donor and ...

Isolation and Transplantation of Different Aged Murine Thymic Grafts.

単離と異なる高齢マウス胸腺移植片の移植。

The mechanisms that regulate the efficacy of thymic selection remain ill-defined. The method presented here allows in vivo analyses of the development and ...

A CFSE-based Assay to Study the Migration of Murine Skin Dendritic Cells into Draining Lymph Nodes During Infection with Mycobacterium bovis Bacille Calmette-Gu&#233;rin

A CFSE-based Assay to Study the Migration of Murine Skin Dendritic Cells into Draining Lymph Nodes During Infection with Mycobacterium bovis Bacille Calmette-GuÃƒÆ’Ã†'Ãƒâ€šÃ‚Â©rin

での感染の間に流入領域リンパ節へのマウスの皮膚樹状細胞の移動を研究するためにCFSEベースアッセイ<em&gt;マイコバクテリウム・ボビス</em&gt;カルメット - ゲラン

Dendritic cells (DCs) are important for initiating immune responses, in part through their ability to acquire and shuttle antigen to the draining lymph ...

In Vitro and In Vivo Assessment of T, B and Myeloid Cells Suppressive Activity and Humoral Responses from Transplant Recipients

In Vitro and In Vivo Assessment of T, B and Myeloid Cells Suppressive Activity and Humoral Responses from Transplant Recipients

体外と体内の T, B, 骨髄細胞の抑制活性と移植から体液性応答の評価

The main concern in transplantation is to achieve specific tolerance through induction of regulatory cells. The understanding of tolerance mechanisms ...

Using Robotic Systems to Process and Embed Colonic Murine Samples for Histological Analyses

ロボット システムを使用して処理し、組織学的解析のため大腸マウス サンプルを埋め込む

The understanding of human diseases has been greatly expanded thanks to the study of animal models. Nonetheless, histopathological evaluation of ...

Renal Subcapsular Transplantation of 2'-Deoxyguanosine-Treated Murine Embryonic Thymus in Nude Mice

ヌードマウスにおける2'-デオキシグアノシン処理マウス胚性胸腺の腎サブカプセル移植

The thymus is an important central immune organ, which plays an essential role in the development and differentiation of T cells. Thymus transplantation ...

Isolation of Lamina Propria Mononuclear Cells from Murine Colon Using Collagenase E

コラゲナーゼEを用いてマウスコロンからのラミナプロプリア単核細胞の単核細胞の単核細胞の単核細胞の単核細胞の単核細胞の単核細胞の単核細胞の単核細胞の単核細胞の単核細胞

The intestine is the home to the largest number of immune cells in the body. The small and large intestinal immune systems police exposure to exogenous ...

Optimization of the Cuff Technique for Murine Heart Transplantation

マウスの心臓移植のためのカフ技術の最適化

Murine cardiac transplantation has been performed for more than 40 years. With advancements in microsurgery, certain new techniques have been used to ...