Name: a mouse model of fatigue induced by peripheral irradiation
Uploaded: 2017-03-17T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Mouse Model of Fatigue Induced by Peripheral Irradiation at JoVE.com

Författarna vill tacka Michele Allen av National Heart, Lung, and Blood Institute (NHLBI) av National Institutes of Health (NIH) för generöst dela sin expertis i murina fenotypning metoder och för hennes pågående tekniskt stöd, liksom för Timothy Hunt av NHLBI för att hjälpa oss att utveckla skärmanordningen. Denna studie stöds av Avdelningen för Intramural forskning av National Institute of Nursing Research av NIH, och en del av validerings prov stöds av ett bidrag från Oncology Nursing Society Foundation.

Etik Statement: Denna studie har godkänts av National Institutes of Health (NIH) Djurvård och användning kommittén. Alla utredare som deltar i djurhantering och mätning av studieresultat var ordentligt utbildade av NIH Office of Animal Care och användning och National Heart, Lung, and Blood Institute Murin Fenotypning kärnan. Alla aspekter av djurförsök, bostäder och miljöförhållanden som användes i denna studie var i enlighet med Guide för vård och användning av försöksdjur 11.</sup...

<ol>
	<li>Minton, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cancer-related+fatigue+and+its+impact+on+functioning.">Cancer-related fatigue and its impact on functioning.</a> Cancer. 119, 2124-2130 (2013).</li><li>Bower, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cancer-related+fatigue--mechanisms,+risk+factors,+and+treatments.">Cancer-related fatigue--mechanisms, risk factors, and treatments.</a> Nat Rev Clin Oncol. 11 (10), 597-609 (2014).</li><li>Saligan, L. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+biology+of+cancer-related+fatigue:+a+review+of+the+literature.">The biology of cancer-related fatigue: a review of the literature.</a> Support Care Cancer. 23 (8), 2461-2478 (2015).</li><li>Norden, D. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tumor+growth+increases+neuroinflammation,+fatigue+and+depressive-like+behavior+prior+to+alterations+in+muscle+function.">Tumor growth increases neuroinflammation, fatigue and depressive-like behavior prior to alterations in muscle function.</a> Brain Behav Immun. 43, 76-85 (2015).</li><li>Ray, M. A., Trammell, R. A., Verhulst, S., Ran, S., Toth, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+a+mouse+model+for+assessing+fatigue+during+chemotherapy.">Development of a mouse model for assessing fatigue during chemotherapy.</a> Comp Med. 61 (2), 119-130 (2011).</li><li>Zombeck, J. A., Fey, E. G., Lyng, G. D., Sonis, S. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+clinically+translatable+mouse+model+for+chemotherapy-related+fatigue.">A clinically translatable mouse model for chemotherapy-related fatigue.</a> Comp Med. 63 (6), 491-497 (2013).</li><li>Renner, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+murine+model+of+peripheral+irradiation-induced+fatigue.">A murine model of peripheral irradiation-induced fatigue.</a> Behav Brain Res. 307, 218-226 (2016).</li><li>Van der Meeren, A., Lebaron-Jacobs, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Behavioural+consequences+of+an+8+Gy+total+body+irradiation+in+mice:+Regulation+by+interleukin-4.">Behavioural consequences of an 8 Gy total body irradiation in mice: Regulation by interleukin-4.</a> Canadian Journal of Physiology and Pharmacology. 79 (2), 140-143 (2001).</li><li>York, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+biobehavioral+and+neuroimmune+impact+of+low-dose+ionizing+radiation.">The biobehavioral and neuroimmune impact of low-dose ionizing radiation.</a> Brain Behav Immun. 26 (2), 218-227 (2012).</li><li>Meijer, J. H., Robbers, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Wheel+running+in+the+wild.">Wheel running in the wild.</a> Proc Biol Sci. 281 (1786), (2014).</li><li>. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> The Guide for the Care and Use of Laboratory Animals. , (2011).</li><li>Heredia, L., Torrente, M., Domingo, J. L., Colomina, M. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Individual+housing+and+handling+procedures+modify+anxiety+levels+of+Tg2576+mice+assessed+in+the+zero+maze+test.">Individual housing and handling procedures modify anxiety levels of Tg2576 mice assessed in the zero maze test.</a> Physiol Behav. 107 (2), 187-191 (2012).</li><li>Varty, G. B., Paulus, M. P., Braff, D. L., Geyer, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Environmental+enrichment+and+isolation+rearing+in+the+rat:+effects+on+locomotor+behavior+and+startle+response+plasticity.">Environmental enrichment and isolation rearing in the rat: effects on locomotor behavior and startle response plasticity.</a> Biol Psychiatry. 47 (10), 864-873 (2000).</li><li>Pham, T. M., Brene, S., Baumans, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Behavioral+assessment+of+intermittent+wheel+running+and+individual+housing+in+mice+in+the+laboratory.">Behavioral assessment of intermittent wheel running and individual housing in mice in the laboratory.</a> J Appl Anim Welf Sci. 8 (3), 157-173 (2005).</li><li>Knab, A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Repeatability+of+exercise+behaviors+in+mice.">Repeatability of exercise behaviors in mice.</a> Physiol Behav. 98 (4), 433-440 (2009).</li><li>Novak, C. M., Burghardt, P. R., Levine, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+use+of+a+running+wheel+to+measure+activity+in+rodents:+relationship+to+energy+balance,+general+activity,+and+reward.">The use of a running wheel to measure activity in rodents: relationship to energy balance, general activity, and reward.</a> Neurosci Biobehav Rev. 36 (3), 1001-1014 (2012).</li><li>Mineur, Y. S., Belzung, C., Crusio, W. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+unpredictable+chronic+mild+stress+on+anxiety+and+depression-like+behavior+in+mice.">Effects of unpredictable chronic mild stress on anxiety and depression-like behavior in mice.</a> Behav Brain Res. 175 (1), 43-50 (2006).</li><li>Perhach, J. L., Barry, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stress+responses+of+rats+to+acute+body+or+neck+restraint.">Stress responses of rats to acute body or neck restraint.</a> Physiol Behav. 5 (4), 443-448 (1970).</li><li>Iwakawa, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Different+radiation+susceptibility+among+five+strains+of+mice+detected+by+a+skin+reaction.">Different radiation susceptibility among five strains of mice detected by a skin reaction.</a> J Radiat Res. 44 (1), 7-13 (2003).</li><li>Travis, E. L., Peters, L. J., McNeill, J., Thames, H. D., Karolis, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+dose-rate+on+total+body+irradiation:+lethality+and+pathologic+findings.">Effect of dose-rate on total body irradiation: lethality and pathologic findings.</a> Radiother Oncol. 4 (4), 341-351 (1985).</li><li>Duran-Struuck, R., Dysko, R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Principles+of+bone+marrow+transplantation+(BMT):+providing+optimal+veterinary+and+husbandry+care+to+irradiated+mice+in+BMT+studies.">Principles of bone marrow transplantation (BMT): providing optimal veterinary and husbandry care to irradiated mice in BMT studies.</a> J Am Assoc Lab Anim Sci. 48 (1), 11-22 (2009).</li><li>Duran-Struuck, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differential+susceptibility+of+C57BL/6NCr+and+B6.Cg-Ptprca+mice+to+commensal+bacteria+after+whole+body+irradiation+in+translational+bone+marrow+transplant+studies.">Differential susceptibility of C57BL/6NCr and B6.Cg-Ptprca mice to commensal bacteria after whole body irradiation in translational bone marrow transplant studies.</a> J Transl Med. 6, 10 (2008).</li></ol>

Vi har beskrivit ett protokoll med hjälp av riktad perifer bestrålning för att inducera en minskning av VWRA i möss utan confounding sjuklighet eller dödlighet. Viktigt, gör en enkel skärmanordning bestrålning i detta protokoll för att nå en önskad region konsekvent, imitera strålbehandling emot av patienter med bäckencancer. Till skillnad från befintliga CRF modeller som involverar hjärnan eller helkroppsbestrålning 8, 9, utforskar denna modell ...

Cancerrelaterad trötthet (CRF) är en besvärande och kostsamt tillstånd som ofta drabbar patienter som får cancerbehandling 1. Utmattnings är varken i proportion till den senaste aktiviteten eller lindras genom vila, och det är förenat med ett brett utbud av störningar i samband med humör, motivation, uppmärksamhet och kognition 2. De biologiska orsakerna till CRF är okända, även om det har visat sig i många fall för att korrelera med inflammation och cytokinnivåer, även i vissa fall med hemoglobinnivåer och funktionen hos olika hormonsystem (se et al. Saligan 3 för en genomgång av den biologiska studier av CRF). Kontrollerade studier med användning av djurmodeller är nödvändiga för att förstå beteendet och biologi är associerad med detta komplex tillstånd. Medan tumörrelaterade fyra eller kemoterapi-relaterade 5, 6 fettigue har studerats i gnagarmodeller, kan etiologin av CRF vara behandlingsspecifika. För att undersöka CRF i samband med strålbehandling, har vår grupp nyligen utvecklat en musmodell av strålning-inducerad trötthet 7. Till skillnad från befintliga CRF modeller som involverar hjärnan eller helkroppsbestrålning 8, 9, utforskar denna modell hur en förändring i centralt driven beteende, som trötthet, kan utlösas av ett perifert riktade bestrålning förfarande. Det förfarande som beskrivs här är utformad för att modellera strålbehandling ges till patienter med bäckencancer, använder blyavskärmning att rikta nedre delen av buken / bäckenregionen med bestrålning. Emellertid genom att modifiera blyavskärmning eller dess placering i förhållande till försöksdjur, detta förfarande skulle kunna anpassas för att modellera bestrålning av andra delar av kroppen. Frivillig hjul kör aktivitet (VWRA) används för att mäta trötthet liknande behavior; eftersom det är en frivillig och normalt beteende 10, bör den tillåta samtidig användning av andra beteende och biologiska tester. Vi har funnit att perifer bestrålning är tillräcklig för att minska VWRA i möss utan att förorsaka uppenbar morbiditet 7. Framtida experiment med denna modell kan hjälpa avslöja effekter av perifer strålning på immun och annat biologiskt signalering, samt efterföljande förändringar i det centrala nervsystemet som kan producera brister i samband med CRF.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="1098">
	<tbody>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:255px;">C57BL/6 Mice</td>
			<td style="width:135px;">Charles River</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:591px;">Strain code 027 (http://www.criver.com/products-services/basic-research/find-a-model/c57bl-6n-mouse)</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:255px;">Ketamine HCl</td>
			<td style="width:135px;">Putney</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:591px;">100 mg/ml stock solution</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:255px;">Xylazine HCl</td>
			<td style="width:135px;">Lloyd Laboratories</td>
			<td></td>
			<td style="width:591px;">100 mg/ml stock solution</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:255px;">Rodent Tattoo System</td>
			<td style="width:135px;">AIMS</td>
			<td style="width:119px;">ATS-3</td>
			<td>http://animalid.com/lab-animal-identification-systems/ats-3-general-rodent-tattoo-system</td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:255px;">Lead Shielding Apparatus</td>
			<td style="width:135px;">(custom made)</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:591px;">One-inch thick lead shielding arranged as two boxes with a one-inch thick gap between them for targeted irradiation</td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:255px;">Plexiglass shielding container</td>
			<td style="width:135px;">(custom made)</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:591px;">Plexiglass container filled with styrofoam. Styrofoam cutouts hold the lead shielding in place.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:255px;">GammaCell 40 Exactor</td>
			<td style="width:135px;">Best Theratronics</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>http://www.theratronics.ca/product_gamma40.html</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:255px;">RAD Disk Ultra</td>
			<td style="width:135px;">Best Theratronics</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>http://www.theratronics.ca/product_rad.html</td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;">Mouse Single Activity Wheel Chamber</td>
			<td style="width:135px;">Lafayette Instrument Company</td>
			<td style="width:119px;">#80820</td>
			<td>http://www.lafayetteneuroscience.com/product_detail.asp?itemid=980</td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:255px;">Activity Wheel Counter for Computer Monitoring</td>
			<td style="width:135px;">Lafayette Instrument Company</td>
			<td style="width:119px;">#86061</td>
			<td>http://www.lafayetteneuroscience.com/product_detail.asp?itemid=1052</td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:255px;">Modular Cable for Wheel Counters</td>
			<td style="width:135px;">Lafayette Instrument Company</td>
			<td style="width:119px;">#86051-7</td>
			<td>http://www.lafayetteneuroscience.com/product_detail.asp?itemid=1046</td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:255px;">USB Computer Interface for Activity Wheel Counters</td>
			<td style="width:135px;">Lafayette Instrument Company</td>
			<td style="width:119px;">#86056A</td>
			<td>http://www.lafayetteneuroscience.com/product_detail.asp?itemid=1047</td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:255px;">Activity Wheel Monitor Software</td>
			<td style="width:135px;">Lafayette Instrument Company</td>
			<td style="width:119px;">#86065</td>
			<td>http://www.lafayetteneuroscience.com/product_detail.asp?itemid=1053</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a mouse model of fatigue induced by peripheral irradiation

Cancerrelaterad trötthet (CRF) är en besvärande och kostsamt tillstånd som ofta drabbar patienter som får cancerbehandling, inklusive strålbehandling. Här beskriver vi en metod som använder riktad perifer bestrålning för att inducera trötthet-liknande beteende hos möss. Med lämplig avskärmning riktar bestrålningen nedre delen av buken / bäckenregionen av mus och skonar hjärnan, i ett försök att modellera strålbehandling emot av personer med bäckencancer. Vi levererar en strålningsdos som är tillräcklig för att inducera trötthet-liknande beteende hos möss, mätt genom frivillig hjul kör aktivitet (VWRA), utan att orsaka uppenbar sjuklighet. Eftersom hjulet kör är en normal, frivilligt beteende hos möss, bör dess användning har liten confounding effekt på andra beteendetester eller biologiska åtgärder. Därför kan hjul kör användas som ett möjligt utfall åtgärd förstå beteendemässiga och biologiska korrelat av trötthet. CRF är en komplex sjukdom med täta samarbetemorbidities, och sannolikt har orsaker som rör både cancer och dess olika behandlingar. De metoder som beskrivs i detta dokument är användbara för att undersöka strålningsinducerade förändringar som bidrar till utvecklingen av CRF och mer allmänt, för att utforska de biologiska nätverk som kan förklara utvecklingen och ihållande en perifert utlöst men centralt driven beteende som trötthet .

Tre partier av möss kördes genom det protokoll som beskrivits ovan. Det fanns totalt 16 bluff och 20 bestrålade (2400 cGy, 3 x 800 cGy / dag) möss. Efter tre dagar i rad av strålning, visade det bestrålade gruppen signifikant reducerad VWRA jämfört med placebo (blandade upprepade mätningar ANOVA: huvudsakliga effekten av strålbehandling, F 1,13 = 19,233, p &lt;0,001). Effekten var signifikant för de första sju dagarna efter bestrålning (enkla viktigaste effekterna...

Watch this Scientific Journal Video about A Mouse Model of Fatigue Induced by Peripheral Irradiation at JoVE.com

A Mouse Model of Fatigue Induced by Peripheral Irradiation

Vi beskriver en metod som använder riktad perifer bestrålning för att inducera trötthet-liknande beteende hos möss. Den valda icke-dödlig strålningsdos leder till en veckolång minskning av frivilliga hjul kör aktivitet.

En musmodell av trötthet inducerad av perifera bestrålning

Cancer-related fatigue (CRF) is a distressing and costly condition that often affects patients receiving cancer treatments, including radiation therapy. ...

Research

JoVE Journal

Cancer Research

Fluorescent Orthotopic Mouse Model of Pancreatic Cancer

Fluorescerande Orthotopic musmodell för cancer i bukspottskörteln

Pancreatic cancer remains one of the cancers for which survival has not improved substantially in the last few decades. Only 7% of diagnosed patients will ...

Isolation of Circulating Tumor Cells in an Orthotopic Mouse Model of Colorectal Cancer

Isolering av cirkulerande tumörceller i en ortotopisk musmodell av kolorektal cancer

Despite the advantages of easy applicability and cost-effectiveness, subcutaneous mouse models have severe limitations and do not accurately simulate ...

A Genetically Engineered Mouse Model of Sporadic Colorectal Cancer

En genetiskt konstruerad musmodell av sporadisk kolorektal cancer

Despite the advantages of easy applicability and cost-effectiveness, colorectal cancer mouse models based on tumor cell injection have severe limitations ...

Tumor Engraftment in a Xenograft Mouse Model of Human Mantle Cell Lymphoma

Tumör Engraftment i en Xenograft musmodell av mänskliga mantelcellslymfom

B lymphocytes are key players in immune cell circulation and they mainly home to and reside in lymphoid organs. While normal B cells only proliferate when ...

Development of a Human Preclinical Model of Osteoclastogenesis from Peripheral Blood Monocytes Co-cultured with Breast Cancer Cell Lines

Utveckling av en mänsklig preklinisk modell av Osteoclastogenesis från perifert blod monocyter Co odlade med Breast Cancer cellinjer

The crosstalk between tumor cells and bone cells in the bone microenvironment is crucial to understanding the mechanism of bone metastasis formation. We ...

PET and MRI Guided Irradiation of a Glioblastoma Rat Model Using a Micro-irradiator

PET och MRI guidad bestrålning av en Glioblastoma råtta modell med en mikro-irradiator

For decades, small animal radiation research was mostly performed using fairly crude experimental setups applying simple single-beam techniques without ...

Evaluating the Role of Mitochondrial Function in Cancer-related Fatigue

Utvärdera rollen av mitokondriell funktion i cancerrelaterad trötthet

Fatigue is a common and debilitating condition that affects most cancer patients. To date, fatigue remains poorly characterized with no diagnostic test to ...

Important Endpoints and Proliferative Markers to Assess Small Intestinal Injury and Adaptation using a Mouse Model of Chemotherapy-Induced Mucositis

Viktiga endpoints och proliferativa markörer för att bedöma liten tarm skada och anpassning med hjälp av en musmodell av kemoterapi-inducerad mukosit

Intestinal adaptation is the natural compensatory mechanism that occurs when the bowel is lost due to trauma. The adaptive responses, such as crypt cell ...

An Oncogenic Hepatocyte-Induced Orthotopic Mouse Model of Hepatocellular Cancer Arising in the Setting of Hepatic Inflammation and Fibrosis

En onkogen hepatocyte-inducerad ortotopisk musmodell av Hepatocellulär cancer som uppkommer vid fastställandet av lever inflammation och fibros

The absence of a clinically relevant animal model addressing the typical immune characteristics of hepatocellular cancer (HCC) has significantly impeded ...

A Human Peripheral Blood Mononuclear Cell (PBMC) Engrafted Humanized Xenograft Model for Translational Immuno-oncology (I-O) Research

A Human Peripheral Blood Mononuclear Cell PBMC Engrafted Humanized Xenograft Model for Translational Immuno-oncology I-O Research

En human perifert blod mononukleär cell (PBMC) inympad humaniserad xenograft modell för translationell Immuno-onkologi (I-O) forskning

The discovery and development of immuno-oncology (I-O) therapy in recent years represents a milestone in the treatment of cancer. However, treatment ...