Name: isolation of mouse endometrial epithelial and stromal cells for in vitro decidualization
Uploaded: 2017-03-02T13:00:00
Duration: 8 min 37 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Isolation of Mouse Endometrial Epithelial and Stromal Cells for In Vitro Decidualization at JoVE.com

עבודה זו נתמכה על ידי תרומות של הקרן למחקר-פלנדריה (FWO G.0856.13N) ומועצת המחקר של KU Leuven (OT / 13/113). KDC ממומן על ידי בלגיה FWO. AH ממומנת על ידי OT / 13/113. ברצוננו להודות מתקן Core תא הדמיה של KU Leuven (http://gbiomed.kuleuven.be/english/corefacilities/microscopy/cic/cic.htm) לשימושם של המיקרוסקופ confocal.

<ol>
	<li>Cummings, A. M., Yochim, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differentiation+of+the+uterus+in+preparation+for+gestation:+a+model+for+the+action+of+progesterone.">Differentiation of the uterus in preparation for gestation: a model for the action of progesterone.</a> J Theor Biol. 106 (3), 353-374 (1984).</li><li>Jabbour, H. N., Kelly, R. W., Fraser, H. M., Critchley, H. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endocrine+regulation+of+menstruation.">Endocrine regulation of menstruation.</a> Endocr Rev. 27 (1), 17-46 (2006).</li><li>Wang, X., Matsumoto, H., Zhao, X., Das, S. K., Paria, B. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Embryonic+signals+direct+the+formation+of+tight+junctional+permeability+barrier+in+the+decidualizing+stroma+during+embryo+implantation.">Embryonic signals direct the formation of tight junctional permeability barrier in the decidualizing stroma during embryo implantation.</a> J Cell Sci. 117 (Pt 1), 53-62 (2004).</li><li>Zygmunt, M., Herr, F., Munstedt, K., Lang, U., Liang, O. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Angiogenesis+and+vasculogenesis+in+pregnancy.">Angiogenesis and vasculogenesis in pregnancy.</a> Eur J Obstet Gynecol Reprod Biol. 110 Suppl 1, S10-S18 (2003).</li><li>Power, M. L., Schulkin, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> The evolution of the human placenta. , (2012).</li><li>Finn, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+initiation+of+the+decidual+cell+reaction+in+the+uterus+of+the+aged+mouse.">The initiation of the decidual cell reaction in the uterus of the aged mouse.</a> J Reprod Fertil. 11 (3), 423-428 (1966).</li><li>Grant, K. S., Wira, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+mouse+uterine+stromal+cells+on+epithelial+cell+transepithelial+resistance+(TER)+and+TNFalpha+and+TGFbeta+release+in+culture.">Effect of mouse uterine stromal cells on epithelial cell transepithelial resistance (TER) and TNFalpha and TGFbeta release in culture.</a> Biol Reprod. 69 (3), 1091-1098 (2003).</li><li>De Clercq, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+expression+of+transient+receptor+potential+channels+in+human+endometrial+stromal+cells+during+the+luteal+phase+of+the+menstrual+cycle.">Functional expression of transient receptor potential channels in human endometrial stromal cells during the luteal phase of the menstrual cycle.</a> Hum Reprod. 30 (6), 1421-1436 (2015).</li><li>Pieper, F. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regulation+of+vimentin+expression+in+cultured+epithelial+cells.">Regulation of vimentin expression in cultured epithelial cells.</a> Eur J Biochem. 210 (2), 509-519 (1992).</li><li>Greaves, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+mouse+model+of+endometriosis+mimics+human+phenotype+and+reveals+insights+into+the+inflammatory+contribution+of+shed+endometrium.">A novel mouse model of endometriosis mimics human phenotype and reveals insights into the inflammatory contribution of shed endometrium.</a> Am J Pathol. 184 (7), 1930-1939 (2014).</li><li>Pierro, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stromal-epithelial+interactions+modulate+estrogen+responsiveness+in+normal+human+endometrium.">Stromal-epithelial interactions modulate estrogen responsiveness in normal human endometrium.</a> Biol Reprod. 64 (3), 831-838 (2001).</li><li>Kim, M. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Progesterone-dependent+release+of+transforming+growth+factor-beta1+from+epithelial+cells+enhances+the+endometrial+decidualization+by+turning+on+the+Smad+signalling+in+stromal+cells.">Progesterone-dependent release of transforming growth factor-beta1 from epithelial cells enhances the endometrial decidualization by turning on the Smad signalling in stromal cells.</a> Mol Hum Reprod. 11 (11), 801-808 (2005).</li><li>Chen, J. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Coculturing+human+endometrial+epithelial+cells+and+stromal+fibroblasts+alters+cell-specific+gene+expression+and+cytokine+production.">Coculturing human endometrial epithelial cells and stromal fibroblasts alters cell-specific gene expression and cytokine production.</a> Fertil Steril. 100 (4), 1132-1143 (2013).</li><li>Renaud, J., Martinoli, M. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+an+Insert+Co-culture+System+of+Two+Cellular+Types+in+the+Absence+of+Cell-Cell+Contact.">Development of an Insert Co-culture System of Two Cellular Types in the Absence of Cell-Cell Contact.</a> J Vis Exp. (113), (2016).</li><li>Arnold, J. T., Kaufman, D. G., Seppala, M., Lessey, B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endometrial+stromal+cells+regulate+epithelial+cell+growth+in+vitro:+a+new+co-culture+model.">Endometrial stromal cells regulate epithelial cell growth in vitro: a new co-culture model.</a> Hum Reprod. 16 (5), 836-845 (2001).</li><li>Park, D. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+well-defined+in+vitro+three-dimensional+culture+of+human+endometrium+and+its+applicability+to+endometrial+cancer+invasion.">A well-defined in vitro three-dimensional culture of human endometrium and its applicability to endometrial cancer invasion.</a> Cancer Lett. 195 (2), 185-192 (2003).</li></ol>

החוקרים אין לי מה לחשוף.

Decidualization הוא הבידול תלוי פרוגסטרון של תאי סטרומה רירית רחם לתאי decidual עגולים והסתרתו. ב אדם, תהליך זה מתרחש באופן ספונטני במהלך שלב הלוטאלי של המחזור והוא יזם בתאים סטרומה סביב תאי כלי הדם כדי ליצור את predecidua. עם זאת, במכרסמים, הנוכחות של הבלסטוציסט היא הכרחית כדי לגרום decidualization. העובדה decidualization מתרחשת רק לאחר מגע עם תאי אפיתל רירית הרחם מרמז כי גורמים חשובים מופרשים על ידי תאי אפיתל לגרום decidualization ב stroma הבסיסית. למרות ההבדל הזה התנעת decidualization ראויה להכרה, העובדה decidualization אדם הופך להיות יותר חזק על השתלת עובר עולה כי מנגנונים דומים יכולים להיות מעורבים. במבחנה בתרביות תאים משמשים לעתים קרובות כדי לחקור את ההשפעה של מולקולות ספציפיות בתהליך decidualization.עם זאת, הזמינות והכמות של רקמה אנושית שניתן לגבות מוגבלת לעתים קרובות ומלווים וריאציות, למשל, מחזור שלב, מספר ההריונות ונוכחות של מחלות גינקולוגיות כמו אנדומטריוזיס או אדנומיוזיס. רבים של בעיות אלה ניתן למנוע על ידי שימוש ברקמה בעכברים כי הוא נגיש ושלב במחזור עצמאית. יתרון חזק נוסף של שימוש רקמות בעכברים הוא ההזדמנות להשתמש מכרסמים מהונדסים גנטי ואפשרות ההתקנה מספר רב של ניסויים. כרגע, פרוטוקולי בידוד שונים תוארו בספרות עם שונות גבוהות בעידן של החיות והתקופה בשלב הייחום ברגע השימוש. מחקר זה מציג שיטה חדשה תרבויות-שיתוף רירית הרחם העיקרי של סטרומה ותאי אפיתל שבו היתרון צולמה של מחזור הייחום מתוקנן זריקה יומית של אסטרוגן לפני הבידוד. יתר על כן, אסטרוגן הוא known לגרום התפשטות בתאי אפיתל סטרומה אשר מגדילה עוד יותר את התשואה לכל בידוד. פרוטוקול הבידוד המתואר במאמר זה התבסס על ואח גרנט. 7, לעומת זאת, צעדים אופטימיזציה נוספים נכללו כדי להגדיל את התשואה, טוהר, ואת הכדאיות של תרביות תאים השונות. ראשית, HBSS תמיד משלים עם אנטיביוטיקה כדי למנוע זיהום של התרבות העיקרית. במהלך הבידוד של MEEC, עיבוד טמפרטורה נעשה (15 דקות ב 37 מעלות צלזיוס) כדי להגדיל את היבול של תאי אפיתל במהלך העיכול הראשון. הבא, צעד נוסף נכלל למתן הפעילות האנזימטית לאחר עיכול טריפסין על ידי הוספת בינוני המכיל FBS לעכב את פעילותו. יתר על כן, MEECs הועבר דרך פילטר של שבו הרשת הייתה גדולה יותר מה שמתואר בדרך כלל (100 מיקרומטר) כפי שהם באים בדרך כלל באשכולות ויריעות תא. יתר על כן, זיהום על ידי תאי סטרומה הופחת על ידי ביצוע רחבצעד itional שבו MEECs ו MESCs הופרדו מבוסס על שקיעה הכבידה. לבסוף, MEECs היו זורעים על coverslips מצופה קולגן להגדיל את הקובץ המצורף של תאים coverslips זכוכית, כפי שהתברר כי מצורף coverslips זכוכית ללא ציפוי או PLL מצופה היה מספיק. במהלך הבידוד של MESCs, collagenase (1 מ&quot;ג / מ&quot;ל) נוספה כדי לשפר את העיכול. יתר על כן, צעד עיכול זה בוצע בשני עותקים, כדי למנוע זיהום של MEECs נותר. כל פעולות נוספות הבאות הביאו תרבויות טהורות ובת קיימא של אוכלוסיות תאים הומוגנית. טוהר אוכלוסיית התא הוערך עם immunostaining ו qRT-PCR באמצעות vimentin כסמן סטרומה cytokeratin כסמן אפיתל. מובן כי דפוס ביטוי הפוך של vimentin ו cytokeratin נצפה MEEC ו המסקלין. עם זאת, ניתן להבחין כי הביטוי mRNA היחסי של vimentin ו cytokeratin דומה בתרבויות MEEC. similתוצאות ar מתפרסמות על ידי קבוצות מחקר אחרות, שבו תאי אפיתל בביטוי vimentin לרכוש תרבות 9. מה שחשוב יותר הוא ההבדל ביטוי חלבון בין vimentin ו cytokeratin כמו נצפתה stainings immunohistological של אוכלוסיות תאים שונות. immunostaining הזוגי הראה כי EECS היה חיובי עבור cytokeratin ו- ESC היה חיובי עבור vimentin. שימוש סמנים אלה immunostaining הוא שיטה הוקמה standardly משמש כדי לציין את סוגי התאים 10. למרות הרבה מחקר שבוצע על decidualization של המסקלין, אפשרי עדיין כי הנוכחות של תאי אפיתל מודל זה עשויה לשנות את התוצאות של decidualization. ראשית, הוכח שאם MEEC לגדול בשכבה בנוכחות בינוני המסקלין ממוזג או בסביבה שיתוף תרבות, בשכבה יש התנגדות חשמלית משופרת אפיתל תאי transepithelial (TEER), כתוצאה מגורמים המופרשים המסקלין 7. יתר על כן, פיירו et al. 11 סיפקו הוכחות לכך התפשטות אפיתל, מושפע 17β-אסטרדיול, עשוי להיות מתווכת על ידי גורמים המופרשים מתאי סטרומה, ולחילופין, תאי אפיתל יכול לשחרר גורמים לווסת סטרומה decidualization 12, 13. בסך הכל, זה ברור שסביבת שיתוף התרבות-סטרומה אפיתל מספקת מצב פיסיולוגי יותר המאפשר אינטראקציה ותקשורת paracrine. השיטה של culturing שני סוגי תאים שונים באמצעות מערכת שיתוף תרבות כנס שתוארה קודם לכן 14, 15 ו הותאמה לשימוש של תאים ראשוניים בעכברים. על ידי זיהוי של רמות ה- mRNA פרולקטין בתור מחוץ לקרוא decidualization, הטכניקה המתוארת יש לקריאה מתוך לשחזור מאוד עבור decidualization זמין ולאפשרזה ובכך בחקר היחסים אפיתל סטרומה במהלך decidualization. אותות paracrine בתיווך מן MEEC עשויים לשנות את היקף decidualization בתאים סטרומה. יתר על כן, המודל מאפשר אפנון ספציפי של הצד אפיתל ללא ישירות המשפיע על תאי סטרומה. לכן, זו התרבות המשותפת של MEEC ו המסקלין מציעה כלי מושלם כדי להעריך את ההשפעה של הורמונים, ציטוקינים, וכו &#39;על תאי אפיתל עם מחוץ לקרוא על decidualization סטרומה. יתרון נוסף של מערכת שיתוף תרבות זו הוא שהיא מאפשרת לחוקרים לחקור את מעורבותם של חלבון מסוים של תהליך decidualization כלשהי באחד משני אפיתל או תא סטרומה באמצעות תאים מבודדים מבעלי חיים מהונדסים. יתר על כן, טכניקה זו תהיה מועילה מאוד לחקור דבקה הבלסטוציסט להעריך האם גורמי paracrine מופרש מתא אפיתל בנוכחות של הבלסטוציסט מספיקים כדי לגרום decidualization של סטרומה הבסיסיתתאים. צעד חשוב הפלישה trophoblast בקורלציה השפלה מטריקס, אשר מתווכת על ידי פעולה של אנזימים פרוטאוליטים. הטכניקה המוצעת ניתן ליישם מודל במבחנה לחקור את ההצטלבות בין הבלסטוציסט, לתאי האפיתל ואת stroma תומך. עם זאת, כרגע מעט מאוד ידוע על מקורם של תאי אפיתל אשר יכול להיות גם לומינל כפי בלוטות. לכן, אפיון נוסף של הפרופיל הגנטי והמולקולרי של תאי אפיתל נדרש. בנוסף, השיטה המתוארת היא מוגבלת הידע הזמין על הקיטוב של תאי אפיתל. כרגע, הקיטוב של תאי אפיתל לא נלקח בחשבון. עם זאת, ההבדלים בביטוי של חלבונים בממברנה מתוארים ממברנות apical ואת הבסיס. הקיטוב לא ראוי של שכבת האפיתל יכול להשפיע על האינטראקציה paracrine בין epitheliאל ותאי סטרומה. עם זאת, שיטות להשיג תאי אפיתל מקוטבים התואר ויכולות להיכלל הטכניקה המתוארת 15, 16. בסך הכל, הפרוטוקול המתואר מציע טכניקת בהצלחה להקים בתרביות תאים ראשוניות של אפיתל עכבר רירית רחם ותאי סטרומה. טכניקה זו גורמת בתרביות תאים טהורות כפי שאושרה על ידי qRT-PCR ו immunostaining של vimentin ו cytokeratin. בסופו של דבר, גידול אפיתל סטרומה שיתוף תרבות הוצגה המאפשר חקירת אותות paracrine בתיווך או MEEC ו / או המסקלין בתהליך decidualization.

רירית הרחם האנושית הוא הציפוי הפנימי של הרחם עובר מחזורים חודשיים של התמוטטות ותיקון כהכנת הריונות אפשריים. הוא מורכב בשכבה אחת של תאי אפיתל המצפים את לומן הרחם ואת stroma הבסיסית אשר משתנה עובי פי תנודות של אסטרוגן הורמונים בשחלות ופרוגסטרון. בשלב הלוטאלי, עלייתו פרוגסטרון postovulatory תהיה להשרות התמיינות של תאי סטרומה רירית רחם אל, תאי decidual עגולים גדולים, תהליך הנקרא decidualization 1, 2. ב אדם, תופעה זו מתרחשת באופן ספונטני כדי ליצור את predecidua, אבל הופך בולט יותר על השתלת העובר. תוצאה תפקודית של decidualization היא שהרחם זמני הופך פתוח השתלה עוברת. מרווח זה מסומן כמו &quot;החלון של השתלה&quot;. במהלך התקופה המוקדמת של השתלה עוברת, דואר decidualizedתאי ndometrial סטרומה סביב עובר ההשתלה יספקו מחסום למנוע המעבר של חומרים מזיקים לעובר 3. במהלך הריון, decidua זו תספק חומרי הזנה עבור העובר המתפתח לפני placentation שקרה, ובהמשך תהווה את החלק האימהי של השליה 4. שיקולים אתיים ומעשיים להגביל את העיצוב של מחקרים בבני אדם כדי לחקור את תהליך decidualization ו יש הנחיות השימוש במודלים של בעלי חיים. להיות חבר בקבוצת placentation hemochorial, האנדומטריום של מכרסמים יעבור גם decidualization לפני placentation 5. במכרסמים, לעומת זאת, תחילת תהליך decidualization תלוי בנוכחות של blastocysts לומן הרחם, המציין כי גירוי נוסף יש צורך יפעיל את התגובות decidual 6. זה מתווה תקשורת מורכבת שבין הדואר רירית רחם אפיתל תאים שיש קשר ישיר עם הבלסטוציסט, ואת בתאי סטרומה הבסיסיים. אף על פי כן, decidualization יכול להיגרם באופן מלאכותי באמצעות גירויים כמו גירוד מכאני או ההחדרה של שמן רחם דרוך הורמונלית. למרות שמחקרי in vivo באמצעות מודלי decidualization מלאכותיים אפשרו לנו לשפר את תובנה שלנו בתהליך האיתות המורכב של decidualization, המחקרים מעמיקים מכניסטית, למשל, חקירת התקשורת ההכרחית בין תאי אפיתל סטרומה, מוגבלת. לכן, במבחנה מחקרים decidualization ניתן להשתמש כדי לתפעל מסלולים חשובים וללמוד תהליכים בסיסיים. לשם כך, תרביות תאי סטרומה רירית רחם עיקריות ניתן להגדיר מ רירית רחם אדם או מכרסמים. העסקת מכרסמים מסכימה השימוש בבעלי חיים מהונדסים גנטית כדי לחקור את התפקיד של חלבון מסוים של עניין בתהליך decidualization. עם זאת, לא בוגר, prepuberעכברי ty משמשים לעתים קרובות כדי למנוע סיבוכים של מחזור הייחום, בעוד שבמקרים אחרים uteri נאסף מכל שלבי מחזור הייחום, שתוצאתה ההטרוגניות התרבויות. יתר על כן, בתהליך של decidualization נחקר פרוטוקולים שונים, למשל, על ידי (i) הורמונים וישלימו (אסטרוגן, פרוגסטרון או monophosphate אדנוזין המחזורי (cAMP)) למדיום culturing, או על ידי (ii) בידוד של תאי decidual מעכברים בבית יום 4.5 של (פסאודו) הריון, אשר הביקוש להם צורך נוסף לבדיקת תקע וזכרים שעוקרים. מגבלות אלו האחרונות ממחישות את הצורך של שיטה סטנדרטית ללמוד decidualization במבחנה. במחקר זה, מודל פיסיולוגי לבחון במבחנת decidualization החל מבוגר, שאינם (פסאודו) עכברות הרות יוצגו. בשיטה זו, זריקה יומית של 17β-אסטרדיול (E2) תניע תרבות תאים של רירית רחם, ותוצאה היא תשואה מוגברת של הומוגנית pאוכלוסיות תאי יור. יתר על כן, השימוש של מערכת coculturing מאפשר לימוד של crosstalk-סטרומה אפיתל היכולת לתפעל את תהליך decidualization ברמות שונות.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>ThinCert Tissue culture insert for 24 well plates; 1 &#181;m pore size; transparant</td>
			<td>Greiner Bio-one</td>
			<td>662610</td>
			<td>Inserts are also provided for other multiwell plates and/or other pore sizes. Other suppliers: Merck Millipore. 
			https://shop.gbo.com/en/row/articles/catalogue/article/0110_0110_0090_0030/13408/&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nunc Cell culture treated 24 well plates</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>142475</td>
			<td> http://www.thermofisher.com/order/catalog/product/142475&#160; </td>
		</tr>
		<tr>
			<td>8-Bromoadenosine 3&#8242;,5&#8242;-cyclic monophosphate sodium salt</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>B7880</td>
			<td>Prepare a stock solution of 100 mM in Milli Q water. Store aliquots at -20 &#176;C. http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigma/b7880?lang=en&#38;region=BE&#160; </td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medroxyprogesterone 17-acetate</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>M1629</td>
			<td>Prepare a stock solution of 250 &#181;M in ethanol. Store aliquots at -20 &#176;C. http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigma/m1629?lang=en&#38;region=BE&#160; </td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Arachis oil</td>
			<td>Supermarket</td>
			<td></td>
			<td>Standard cooking arachis oil that can be found in every supermarket is used </td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PrestoBlue cell viability reagent</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>A13261</td>
			<td> https://www.thermofisher.com/order/catalog/product/A13261?ICID=cvc-prestoblue-c1t1&#160; </td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HBSS 1x, no calcium, no magnesium, no phenol red</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>14175-046</td>
			<td>Store in fridge as long as possible. Use cold HBSS+ during the protocol. https://www.thermofisher.com/order/catalog/product/14175046&#160; </td>
		</tr>
		<tr>
			<td>17-&#946; Estradiol</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>E8875</td>
			<td>Prepare a stock solution of 1mg/ml in EtOH before diluting in arachis oil (1:1000). http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigma/e8875?lang=en&#38;region=BE&#160; </td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell medium filter Stericup, 0.22 &#181;m, polyethersulfone, 500 mL, radio-sterilized</td>
			<td>Merck Millipore</td>
			<td>SCGPU05RE</td>
			<td> http://www.merckmillipore.com/BE/en/product/Stericup-GP%2C-0.22%C2%A0%C2%B5m%2C-polyethersulfone%2C-500%C2%A0mL%2C-radio-sterilized,MM_NF-SCGPU05RE&#160; </td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin-Streptomycin (5,000 U/mL)</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>15070-063</td>
			<td> https://www.thermofisher.com/order/catalog/product/15070063?ICID=search-15070-063&#160;&#160;&#160;&#160; </td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM/F12, phenol red, L-glutamine, HEPES</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>11330-032</td>
			<td> https://www.thermofisher.com/order/catalog/product/11330057?ICID=search-11330-057&#160; </td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal Bovine Serum, qualified, heat inactivated, E.U.-approved, South America Origin</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>10500-056</td>
			<td> https://www.thermofisher.com/order/catalog/product/10500064?ICID=search-10500-064&#160; </td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Amphotericin B</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>15290-018</td>
			<td> https://www.thermofisher.com/order/catalog/product/15290018?ICID=search-15290-018&#160; </td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gentamicin (50mg/ml)</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>15750-037</td>
			<td> https://www.thermofisher.com/order/catalog/product/15750037?ICID=search-15750-037&#160; </td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM, low glucose, pyruvate, no glutamine, no phenol red</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>D5921</td>
			<td> http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigma/d5921?lang=en&#38;region=BE&#160; </td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MCDB-105</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>M6395</td>
			<td>Dilute in Milli Q water, adjust pH to 7 with NaOH and filter before use. Store in the dark. http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigma/m6395?lang=en&#38;region=BE&#160; </td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Insulin from bovine pancreas</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>I1882</td>
			<td> http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigma/i1882?lang=en&#38;region=BE&#160; </td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Coverslips, glass, 18 mm &#216;</td>
			<td>Glaswarenfabrik Karl Hecht</td>
			<td>1001/18</td>
			<td> http://www.hecht-assistent.de/187/?L=1&#38;tx_rmproducts_pi1[g]=937&#38;tx_rmproducts_pi1[p]=3504&#38;tx_rmproducts_pi1[v]=20088&#38;cHash=abd12065683fe74b00eaa5e562824d06&#160; </td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Poly-L-lysine</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>P2636</td>
			<td> http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigma/p2636?lang=en&#38;region=BE&#160; </td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collagenase type IA from Clostridium histolyticum</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>C2674</td>
			<td> http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigma/c2674?lang=en&#38;region=BE&#160; </td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DPBS, no calcium, no magnesium</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>14190-094</td>
			<td> https://www.thermofisher.com/order/catalog/product/14190094?ICID=search-14190-094&#160; </td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin from bovine pancreas</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>T7409</td>
			<td> http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigma/t7409?lang=en&#38;region=BE&#160; </td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin-EDTA (0.05%), phenol red</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>25300-054</td>
			<td>Warm to room temperature before use. https://www.thermofisher.com/order/catalog/product/25300054?ICID=search-25300-054&#160; </td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell strainer, 40 &#181;m mesh, disposable</td>
			<td>BD Falcon</td>
			<td>352340</td>
			<td> https://www.fishersci.com/shop/products/falcon-cell-strainers-4/p-48680&#160; </td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell strainer, 100 &#181;m mesh, disposable</td>
			<td>BD Falcon</td>
			<td>352360</td>
			<td> https://www.fishersci.com/shop/products/falcon-cell-strainers-4/p-48680&#160; </td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Millex-GP Syringe Filter Unit, 0.22&#160;&#181;m, polyethersulfone, 33&#160;mm, gamma sterilized</td>
			<td>Merck Millipore</td>
			<td>SLGP033RS</td>
			<td> https://www.merckmillipore.com/BE/en/product/Millex-GP-Syringe-Filter-Unit%2C-0.22%C2%A0%C2%B5m%2C-polyethersulfone%2C-33%C2%A0mm%2C-gamma-sterilized,MM_NF-SLGP033RS?bd=1&#160; </td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acetic acid (glacial) 100%</td>
			<td>Merck Millipore</td>
			<td>1.00063</td>
			<td> https://www.merckmillipore.com/BE/en/product/Acetic-acid-%28glacial%29-100%25,MDA_CHEM-100063&#160; </td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collagen I</td>
			<td>Corning&#160;</td>
			<td>354236</td>
			<td>From rat tail. https://catalog2.corning.com/LifeSciences/en-BR/Shopping/ProductDetails.aspx?categoryname=&#38;productid=354236%28Lifesciences%29#&#160; </td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pancreatin from porcine pancreas</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>P3292</td>
			<td> http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigma/p3292?lang=en&#38;region=BE&#160; </td>
		</tr>
		<tr>
			<td>35 mm Tissue Culture Dishes, Polystyrene, Sterile</td>
			<td>BD Falcon</td>
			<td>353001</td>
			<td> https://us.vwr.com/store/catalog/product.jsp?product_id=4675630&#160; </td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol absolute AnalaR NORMAPUR ACS, Reag. Ph. Eur. analytical reagent</td>
			<td>VWR Chemicals</td>
			<td>20821296</td>
			<td> https://uk.vwr.com/store/catalog/product.jsp?catalog_number=20821.310DP&#160; </td>
		</tr>
		<tr>
			<td>monoclonal rabbit anti-human vimentin (D21H3)&#160;</td>
			<td>Cell Signalling Tech</td>
			<td>#5741</td>
			<td>use 1/500. http://www.cellsignal.com/products/primary-antibodies/vimentin-d21h3-xp-rabbit-mab/5741 </td>
		</tr>
		<tr>
			<td>monoclonal mouse anti-human pan cytokeratin&#160;</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>C2562</td>
			<td>use 1/1000. http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigma/c2562?lang=en&#38;region=BE&#160; </td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Paraformaldehyde Solution, 4% in PBS</td>
			<td>Affymetrix</td>
			<td>19943</td>
			<td> http://www.affymetrix.com/catalog/130621/USB/Paraformaldehyde+Solution+4+percent+in+PBS#1_1&#160; </td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Triton X-100</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>X100</td>
			<td> http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/SIAL/X100?lang=en&#38;region=BE&#38;gclid=Cj0KEQjwhN-6BRCJsePgxru9iIwBEiQAI8rq879lESeuIU4N4AEQRLNEXj4f8z65KkD-q8Xr35sQDRgaAp-k8P8HAQ&#160; </td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Goat serum</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>G9023</td>
			<td> http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigma/g9023?lang=en&#38;region=BE&#160; </td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Goat anti-rabbit Alexa Fluor 488</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>A-11034</td>
			<td> http://www.thermofisher.com/order/genome-database/searchResults?query=488&#38;resultPage=1&#38;resultsPerPage=15&#38;autocomplete=&#38;searchMode=keyword&#38;productTypeSelect=antibody&#38;targetTypeSelect=antibody_secondary&#38;species=ltechall&#38;keyword=488#filters=genericsort2:\%22Capra%20hircus\%22;;generic6:^\%22Oryctolagus%20cuniculus\%22$;;conjugates:^\%22Alexa%20Fluor&#38;reg;%20488\%22$;; </td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Goat anti-mouse Alexa Fluor 594</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>A-11032</td>
			<td> http://www.thermofisher.com/order/genome-database/searchResults?query=594&#38;resultPage=1&#38;resultsPerPage=15&#38;autocomplete=&#38;priorSearchTerms=&#38;searchMode=keyword&#38;productTypeSelect=antibody&#38;targetTypeSelect=antibody_secondary&#38;species=ltechall&#38;keyword=594#filters=genericsort2:\%22Capra%20hircus\%22;;generic6:^\%22Mus%20musculus\%22$;;&#160; </td>
		</tr>
		<tr>
			<td>VECTASHIELD mounting medium with DAPI</td>
			<td>Vector Laboratories</td>
			<td>H-1200</td>
			<td> http://vectorlabs.com/vectashield-mounting-medium-with-dapi.html&#160; </td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DPBS, with calcium and magnesium</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>14040174</td>
			<td> https://www.thermofisher.com/order/catalog/product/14040133&#160; </td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

isolation of mouse endometrial epithelial and stromal cells for in vitro decidualization

Decidualization הוא תהליך התמיינות תלוי פרוגסטרון של תאי סטרומה רירית רחם הוא תנאי הכרחי להשתלת עובר מוצלחת. למרות מאמצים רבים נעשו כדי לחשוף את המנגנון הבסיסי של decidualization, האיתות המדויקת בין תאי אפיתל כי נמצאים בקשר עם העובר ואת בתאי סטרומה הבסיסיים נותרה הבינה היטב. לכן, לומד decidualization באופן שלוקח הוא אפיתל ותאי סטרומה בחשבון יכול לשפר את הידע שלנו לגבי הפרטים המולקולריים של decidualization. לשם כך, במודלים vivo של decidualization מלאכותית פיזיולוגית הרלוונטי ביותר; עם זאת, מניפולציה של תקשורת בין תאית מוגבלת. נכון לעכשיו, בתרבויות במבחנה של תאי סטרומה רירית רחם נמצא בשימוש כדי לחקור את האפנון של decidualization ידי מספר מולקולות איתות. כמקובל, תאי סטרומה אדם או עכבר רירית רחם הםמְשׁוּמָשׁ. עם זאת, את הזמינות של דגימות אנושיות לעתים קרובות מאוד מוגבלת. יתר על כן, השימוש ברקמות murine מלווה במגוון בשיטת culturing. מחקר זה מציג שיטה תוקפת סטנדרטית להשיג תא רירית רחם אפיתל טהור (EEC) ו- Cell סטרומה (ESC) תרבויות באמצעות עכברים שלמים מבוגרים שטופלו באסטרוגן במשך שלושה ימים רצופים. הפרוטוקול הוא מותאם כדי לשפר את התשואה, כדאיות, וטוהר של התאים הוארך נוסף על מנת ללמוד decidualization בתוך coculture של EEC ו- ESC. מודל זה עשוי להיות מתאים כדי לנצל את החשיבות של שני סוגי תאים decidualization וכדי להעריך את התרומה של מולקולות איתות משמעותי המופרשים EEC או ESC במהלך תקשורת בין תאית.

סקירה כללית של פרוטוקול איור 1 א ממחיש סקירה כללית של הפרוטוקול. זריקה יומית של E2 (100 ng) במשך שלושה ימים רצופים שמשה לסנכרן החיות ולתקנן את השלב של מחזור הייחום. מחזור הייחום ניתן להעריך על ידי lavages בנרתיק מחולק proestrus, ייחום, diestrus והפאזה metestrus. שלב המחזור יכול להיקבע בהתאם ליחס של תאי desquamated ב השטיפה, אשר חשופים לשינויים הורמונליים. הגדלת רמות של אסטרוגן תגרום החיות להתפתח לשלב ייחום. בשלב זה ניתן לאתר בקלות על ידי נוכחות של תאי אפיתל cornified בלעדי והיעדר לויקוציטים (איור 1B). ביום 4, uteri של חיות שנמצאות בשלב ייחום נאספים MEEC ו המסקלין מבודדים (תרשים 1C). ג Decidualizationלהיגרם על ידי הוספת 0.5 מ&quot;מ cAMP ו -1 מיקרומטר MPA למדיום FBS 2% במהלך תקופת הדגירה של 5 ד. בקרת איכות של תרבויות MEEC ו המסקלין טוהר בתרביות תאים ראשוניים ניתן להעריך על ידי ההבדל ביטוי vimentin ו cytokeratin. Vimentin הוא סיבי ביניים אשר באה לידי ביטוי בתאים mesenchymal, ומכאן בתאי סטרומה רירית הרחם. Cytokeratin הוא סיבי ביניים נמצא שלד התא של רקמות אפיתל. איור 2 א מראה את רמת ביטוי mRNA של vimentin ו cytokeratin ב MEEC ו המסקלין הוערכה באמצעות qRT-PCR. רמות vimentin עשירות המסקלין ודלות MEEC (2.2x גבוה, p &lt;0.001), בעוד שרמות cytokeratin עשירות MEEC ודל המסקלין (36x גבוה, p &lt;0.001). Vimentin / צביעה כפולה cytokeratin בוצעה וציינה כי תאי סטרומה להביע vimentin ואילו epitתאים helial להביע cytokeratin (תרשים 2B, C). העדר נוגדן ראשוני שימש כביקורת שלילית עבור immunostaining (איור 2 ד, ה). stainings immunohistological אלה מראים כי הן בתרביות תאים של רירית הרחם (MEEC ו המסקלין) יש טוהר של עד 90%. Decidualization ב MEEC / המסקלין cocultures לאחר בידוד, עכבר תאי רירית רחם סטרומה היו זורעים במערכת שיתוף התרבות לחקות את הסביבה של רירית הרחם. תאים בתרבית עד לתאי האפיתל נוצרו בשכבה של כנס תרבית תאים (ערכי TEER של 800 - 1,000 / טוב), ואת בתאי סטרומה הגיעו למצב תת ומחוברות. Decidualization הושר תאי סטרומה עם היישום של 0.5 המ&quot;מ cAMP ו -1 מיקרומטר MPA. לאחר חמישה ימים של דגירה, רמות ה- mRNA פרולקטין הוערכו בתאים סטרומה ידי qRT-PCR משום אינדיקציה decidualization (איור 3 א). רמות הפרולקטין היו מבוטאות בכמות גבוהה בתאים נתונים ההורמונים nondetectable בתאים מודגרות עם מדיום הביקורת (p &lt;0.01). מאחר ותאי אפיתל קשים לדמיין בתוך מוסיף תרבית תאים, assay כדאית בוצעה מייד לאחר תקופת הדגירה של חמישה ימים (איור 3 ב). שילוב של מדיום גידול רגיל ריאגנט כדאיות נוסף הבארות וטופח במשך תקופה של 8 מינימאלי - h 12. מעבר צבע מכחול ורוד בהיר הצביע על הנוכחות של תאי אפיתל קיימא. ראוי לציין, כי שינוי הצבע יתרחש רק כאשר תאי קיימא נוכחים. <img alt="איור 1" src="/files/ftp_upload/55168/55168fig1.jpg" /> איור 1: סקירה כללית של הפרוטוקול. (א) תכנית של פרוטוקול הבידוד מתחילה עם שלושימים רצופים של זריקות אסטרוגן. ביום 3, צריכות להיות מוכנות את ההכנות הדרושות. ביום 4, שלב ייחום מוערך (מסומן על ידי כוכב) על ידי ביצוע שטיפה וגינלית. המסקלין ו MEEC מבודדים באמצעות צעדי עיכול שונים. ביום 6, או כאשר תאים הם ומחובר, יכול להיגרם decidualization במערכת שיתוף התרבות ידי הוספת cAMP ו MPA הבינוני תקופת דגירה של חמישה ימים (יום 6 - 11). (ב) תמונה מייצגת של השלב ייחום מאופיין בנוכחות של תאים cornified אפיתל של שטיפה וגינלית (בהגדלה 10X). (C) תמונה מייצגת של המסקלין ו MEEC (בהגדלה 20X, סרגל קנה מידה: 100 מיקרומטר). <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/55168/55168fig1large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.</a> <img alt="איור 2" src="/files/ftp_upload/55168/55168fig2.jpg" /> <stron<html> g&gt; איור 2: Immunostaining וכמותי RT-PCR עבור vimentin ו Cytokeratin ב MEEC ו המסקלין. (א) רמות RNA שליח ביטוי vimentin ו cytokeratin כדי לציין את הטוהר של תרבויות. רמות RNA כומתו יחסית לממוצע הגיאומטרי של גנים משק ACTB ו TBP. נתונים הוצגו כממוצע ± SEM. Vimentin / צביעה כפולה cytokeratin על תרבויות המסקלין (B) ותרבויות MEEC (C). הכנס ב משמאל מראה נוף בהגדלה 63X. בקרה שלילית עם נוגדן ראשוני השמיט עבור המסקלין (ד) ו MEEC (E) (סרגל קנה מידה: 50 מיקרומטר). ***: P &lt;0.001 עם ANOVA דו כיוונית עם תיקון Bonferroni למבחנים מרובים. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/55168/55168fig2large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.</a> EP-together.within-page = &quot;1&quot;&gt; <img alt="איור 3" src="/files/ftp_upload/55168/55168fig3.jpg" /> איור 3: תיקוף Decidualization באמצעות RT-PCR. (א) רמות mRNA ביטוי פרולקטין בתאי סטרומה להעריך decidualization. רמות RNA כומתו יחסית לממוצע הגיאומטרי של גנים משק PGK1 ו TBP. השינוי לקפל בתאים בתרבית בשליטה או בינוני decidual מוצג ממוצע ± SEM. (ב) תמונות להמחשה של תאי סטרומה לפני (למעלה) ואחרי גירוי decidualization (למטה). את הכנס מימין ממחיש בהגדלה של תא סטרומה decidualized. Decidualization מאופיין בנוכחות של תאים multinucleated, שמסומן על ידי חיצים שחורים. (ג) נציג תמונות של הערכה של כדאיות התא האפיתל את הכנס לאחר assay. התמונות צולמו מיד לאחר מתן של מגיב הכדאיות (Prestoblue) (0 ח) ואת following הבוקר (אונ). **: P &lt;0.01 עם מאן-ויטני מבחן U. ON: לילה. סרגל קנה מידה: 100 מיקרומטר. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/55168/55168fig3large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.</a>

Watch this Scientific Journal Video about Isolation of Mouse Endometrial Epithelial and Stromal Cells for In Vitro Decidualization at JoVE.com

Isolation of Mouse Endometrial Epithelial and Stromal Cells for In Vitro Decidualization

מחקר זה מציג שיטה סטנדרטית ומאומתים עבור בידוד והתרבות של סטרומה רירית הרחם העכבר העיקרי ותאי אפיתל, אשר ניתן להשתמש בהם במערכת coculture ללמוד decidualization במבחנה.

בידוד של עכבר רירית הרחם אפיתל סטרומה תאים עבור<em&gt; במבחנה</em&gt; Decidualization

Decidualization is a progesterone-dependent differentiation process of endometrial stromal cells and is a prerequisite for successful embryo implantation. ...

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Isolation of Mouse Endometrial Epithelial and Stromal Cells for In Vitro Decidualization

Isolation and Enrichment of Human Adipose-derived Stromal Cells for Enhanced Osteogenesis

בידוד וההעשרה של אדם שומן המופק מתאי סטרומה לOsteogenesis משופר

Bone marrow-derived mesenchymal stromal cells (BM-MSCs) are considered the gold standard for stem cell-based tissue engineering applications. However, the ...

Isolation and Expansion of Mesenchymal Stem/Stromal Cells Derived from Human Placenta Tissue

בידוד הרחבת גזע mesenchymal / תאי סטרומה נגזרו רקמה אנושית שליה

Mesenchymal stem/stromal cells (MSC) are promising candidates for use in cell-based therapies. In most cases, therapeutic response appears to be cell-dose ...

Rapid Isolation of BMPR-IB+ Adipose-Derived Stromal Cells for Use in a Calvarial Defect Healing Model

בידוד מהיר של BMPR-IB + השומן שמקורם בתאי סטרומה לשימוש במודל ריפוי פגם calvarial

Invasive cancers, major injuries, and infection can cause bone defects that are too large to be reconstructed with preexisting bone from the patient's own ...

Isolation and Characterization of Mesenchymal Stromal Cells from Human Umbilical Cord and Fetal Placenta

בידוד ואפיון של תאי סטרומה mesenchymal מן טבורי אדם העובר שליה

The human umbilical cord (UC) and placenta are non-invasive, primitive and abundant sources of mesenchymal stromal cells (MSCs) that have increasingly ...

In Vitro Growth of Mouse Preantral Follicles Under Simulated Microgravity

In Vitro Growth of Mouse Preantral Follicles Under Simulated Microgravity

במבחנה צמיחה של העכבר זקיקים Preantral תחת Microgravity מדומה

14 day-old mouse ovarian tissue and preantral follicles isolated from same-aged mice were incubated in a simulated microgravity culture system. We ...

Isolation, Culture, and Differentiation of Bone Marrow Stromal Cells and Osteoclast Progenitors from Mice

בידוד, תרבות, התמיינות של תאי סטרומה מח עצם ו אוסטאוקלסט אבות של עכברים

Bone marrow stromal cells (BMSCs) constitute a cell population routinely used as a representation of mesenchymal stem cells in vitro. They reside within ...

Isolation and Characterization of Cardiac Mesenchymal Stromal Cells from Endomyocardial Bioptic Samples of Arrhythmogenic Cardiomyopathy Patients

בידוד ואפיון של תאי סטרומה Mesenchymal לב מדגימות Bioptic Endomyocardial של שריר הלב Arrhythmogenic חולים

A normal adult heart is composed of several different cell types, among which cardiac mesenchymal stromal cells represent an abundant population. The ...

Isolation of Human Endometrial Stromal Cells for In Vitro Decidualization

Isolation of Human Endometrial Stromal Cells for In Vitro Decidualization

לבידוד של תאי סטרומה רירית הרחם אדם במבחנה Decidualization

The differentiation of human endometrial stromal cells (HESC) from fibroblast-like appearance into secretory decidua is a transformation required for ...

In Vitro Generation of Somite Derivatives from Human Induced Pluripotent Stem Cells

בדור חוץ גופית של Somite נגזרים מן האדם המושרה בתאי גזע Pluripotent

In response to signals such as WNTs, bone morphogenetic proteins (BMPs), and sonic hedgehog (SHH) secreted from surrounding tissues, somites (SMs) give ...

Generation of Multicellular Human Primary Endometrial Organoids

הדור של אורגנואידים האדם העיקרי של רירית הרחם

The human endometrium is one of the most hormonally responsive tissues in the body and is essential for the establishment of pregnancy. This tissue can ...