Name: analyzing synaptic modulation of drosophila melanogaster photoreceptors after exposure to prolonged light
Uploaded: 2017-02-10T14:00:00
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हम पांडुलिपि पर उपयोगी सुधार, विचार विमर्श और टिप्पणियों के लिए टी Stürner के लिए आभारी हैं; मक्खी शेयरों को उपलब्ध कराने के लिए SL Zipursky; इमेज प्रोसेसिंग के प्रदर्शन के लिए एम Schölling। छवि विश्लेषण के भाग ए Kakita की प्रयोगशाला में किया गया था। यह काम शुरू हुआ अनुसंधान के लिए विदेश में अलेक्जेंडर वॉन हम्बोल्ट फाउंडेशन और JSPS फैलोशिप (एएस), JSPS अध्येताओं (एसएच एस।), ग्रांट-इन-एड (24800024), अभिनव क्षेत्रों पर (25110713), Mochida द्वारा समर्थित किया गया ताकेदा, Inamori, दाइची सैंक्यो-, Toray मूलाधार (टीएस), DZNE केंद्रीय वित्त पोषण (जीटी) और DZNE प्रकाश माइक्रोस्कोपी सुविधा (मुख्यमंत्री)।

प्रयोगात्मक प्रक्रियाओं इस प्रोटोकॉल में वर्णित विशेष रूप से ड्रोसोफिला के साथ काम शामिल है और जर्मनी और जापान में पशु कल्याण कानूनों के अधीन नहीं हैं। 1. प्रकाश जोखिम की स्थिति <ol><li> मक्?...

<ol>
	<li>Alabi, A. A., Tsien, R. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synaptic+Vesicle+Pools+and+Dynamics.">Synaptic Vesicle Pools and Dynamics.</a> Cold Spring Harbor Perspectives in Biology. 4 (8), (2012).</li><li>Couteaux, R., Pecot-Dechavassine, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=[Synaptic+vesicles+and+pouches+at+the+level+of+&amp;#34;active+zones&amp;#34;+of+the+neuromuscular+junction].">[Synaptic vesicles and pouches at the level of &amp;#34;active zones&amp;#34; of the neuromuscular junction].</a> C R Acad Sci Hebd Seances Acad Sci D. 271 (25), 2346-2349 (1970).</li><li>Schoch, S., Gundelfinger, E. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+organization+of+the+presynaptic+active+zone.">Molecular organization of the presynaptic active zone.</a> Cell and Tissue Research. 326 (2), 379-391 (2006).</li><li>Sudhof, T. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Presynaptic+Active+Zone.">The Presynaptic Active Zone.</a> Neuron. 75 (1), 11-25 (2012).</li><li>Owald, D., Sigrist, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assembling+the+presynaptic+active+zone.">Assembling the presynaptic active zone.</a> Curr Opin Neurobiol. 19 (3), 311-318 (2009).</li><li>Lazarevic, V., Schone, C., Heine, M., Gundelfinger, E. D., Fejtova, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Extensive+remodeling+of+the+presynaptic+cytomatrix+upon+homeostatic+adaptation+to+network+activity+silencing.">Extensive remodeling of the presynaptic cytomatrix upon homeostatic adaptation to network activity silencing.</a> J Neurosci. 31 (28), 10189-10200 (2011).</li><li>Matz, J., Gilyan, A., Kolar, A., McCarvill, T., Krueger, S. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rapid+structural+alterations+of+the+active+zone+lead+to+sustained+changes+in+neurotransmitter+release.">Rapid structural alterations of the active zone lead to sustained changes in neurotransmitter release.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 107 (19), 8836-8841 (2010).</li><li>Spangler, S. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Liprin-alpha2+promotes+the+presynaptic+recruitment+and+turnover+of+RIM1/CASK+to+facilitate+synaptic+transmission.">Liprin-alpha2 promotes the presynaptic recruitment and turnover of RIM1/CASK to facilitate synaptic transmission.</a> J Cell Biol. 201 (6), 915-928 (2013).</li><li>Sugie, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+Remodeling+of+the+Presynaptic+Active+Zone+of+Drosophila+Photoreceptors+via+Activity-Dependent+Feedback.">Molecular Remodeling of the Presynaptic Active Zone of Drosophila Photoreceptors via Activity-Dependent Feedback.</a> Neuron. 86 (3), 711-725 (2015).</li><li>Sigrist, S. J., Schmitz, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Structural+and+functional+plasticity+of+the+cytoplasmic+active+zone.">Structural and functional plasticity of the cytoplasmic active zone.</a> Curr Opin Neurobiol. 21 (1), 144-150 (2011).</li><li>Kittel, R. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Active+zone+assembly+and+synaptic+release.">Active zone assembly and synaptic release.</a> Biochem Soc Trans. 34 (Pt 5), 939-941 (2006).</li><li>Kittel, R. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bruchpilot+promotes+active+zone+assembly,+Ca2++channel+clustering,+and+vesicle+release.">Bruchpilot promotes active zone assembly, Ca2+ channel clustering, and vesicle release.</a> Science. 312 (5776), 1051-1054 (2006).</li><li>Hallermann, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Naked+dense+bodies+provoke+depression.">Naked dense bodies provoke depression.</a> J Neurosci. 30 (43), 14340-14345 (2010).</li><li>Wagh, D. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bruchpilot,+a+protein+with+homology+to+ELKS/CAST,+is+required+for+structural+integrity+and+function+of+synaptic+active+zones+in+Drosophila.">Bruchpilot, a protein with homology to ELKS/CAST, is required for structural integrity and function of synaptic active zones in Drosophila.</a> Neuron. 49 (6), 833-844 (2006).</li><li>Chen, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell-type-specific+labeling+of+synapses+in+vivo+through+synaptic+tagging+with+recombination.">Cell-type-specific labeling of synapses in vivo through synaptic tagging with recombination.</a> Neuron. 81 (2), 280-293 (2014).</li><li>Andlauer, T. F., Sigrist, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitative+analysis+of+Drosophila+larval+neuromuscular+junction+morphology.">Quantitative analysis of Drosophila larval neuromuscular junction morphology.</a> Cold Spring Harb Protoc. 2012 (4), 490-493 (2012).</li><li>Ippolito, D. M., Eroglu, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantifying+synapses:+an+immunocytochemistry-based+assay+to+quantify+synapse+number.">Quantifying synapses: an immunocytochemistry-based assay to quantify synapse number.</a> J Vis Exp. (45), (2010).</li><li>Schmitz, S. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Automated+analysis+of+neuronal+morphology,+synapse+number+and+synaptic+recruitment.">Automated analysis of neuronal morphology, synapse number and synaptic recruitment.</a> J Neurosci Methods. 195 (2), 185-193 (2011).</li><li>Danielson, E., Lee, S. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=SynPAnal:+software+for+rapid+quantification+of+the+density+and+intensity+of+protein+puncta+from+fluorescence+microscopy+images+of+neurons.">SynPAnal: software for rapid quantification of the density and intensity of protein puncta from fluorescence microscopy images of neurons.</a> PLoS One. 9 (12), e115298 (2014).</li><li>Sanders, J., Singh, A., Sterne, G., Ye, B., Zhou, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Learning-guided+automatic+three+dimensional+synapse+quantification+for+drosophila+neurons.">Learning-guided automatic three dimensional synapse quantification for drosophila neurons.</a> BMC Bioinformatics. 16, 177 (2015).</li><li>Peng, H., Ruan, Z., Atasoy, D., Sternson, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Automatic+reconstruction+of+3D+neuron+structures+using+a+graph-augmented+deformable+model.">Automatic reconstruction of 3D neuron structures using a graph-augmented deformable model.</a> Bioinformatics. 26 (12), i38-i46 (2010).</li><li>Sturt, B. L., Bamber, B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Automated+quantification+of+synaptic+fluorescence+in+C.+elegans.">Automated quantification of synaptic fluorescence in C. elegans.</a> J Vis Exp. (66), (2012).</li><li>Kremer, M. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Structural+long-term+changes+at+mushroom+body+input+synapses.">Structural long-term changes at mushroom body input synapses.</a> Curr Biol. 20 (21), 1938-1944 (2010).</li><li>Mosca, T. J., Luo, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synaptic+organization+of+the+Drosophila+antennal+lobe+and+its+regulation+by+the+Teneurins.">Synaptic organization of the Drosophila antennal lobe and its regulation by the Teneurins.</a> Elife. 3, e03726 (2014).</li><li>Wu, J. S., Luo, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+protocol+for+dissecting+Drosophila+melanogaster+brains+for+live+imaging+or+immunostaining.">A protocol for dissecting Drosophila melanogaster brains for live imaging or immunostaining.</a> Nat Protoc. 1 (4), 2110-2115 (2006).</li><li>Fischbach, K. F., Dittrich, A. P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Optic+Lobe+of+Drosophila-Melanogaster+.1+A+Golgi+Analysis+of+Wild-Type+Structure.">The Optic Lobe of Drosophila-Melanogaster .1 A Golgi Analysis of Wild-Type Structure.</a> Cell and Tissue Research. 258 (3), 441-475 (1989).</li><li>Berger-Muller, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessing+the+role+of+cell-surface+molecules+in+central+synaptogenesis+in+the+Drosophila+visual+system.">Assessing the role of cell-surface molecules in central synaptogenesis in the Drosophila visual system.</a> PLoS One. 8 (12), e83732 (2013).</li><li>Fouquet, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Maturation+of+active+zone+assembly+by+Drosophila+Bruchpilot.">Maturation of active zone assembly by Drosophila Bruchpilot.</a> J Cell Biol. 186 (1), 129-145 (2009).</li><li>Ke, M. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Super-Resolution+Mapping+of+Neuronal+Circuitry+With+an+Index-Optimized+Clearing+Agent.">Super-Resolution Mapping of Neuronal Circuitry With an Index-Optimized Clearing Agent.</a> Cell Rep. 14 (11), 2718-2732 (2016).</li><li>Ehmann, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitative+super-resolution+imaging+of+Bruchpilot+distinguishes+active+zone+states.">Quantitative super-resolution imaging of Bruchpilot distinguishes active zone states.</a> Nat Commun. 5, 4650 (2014).</li></ol>

इस अध्ययन में, हम कैसे एक समान प्रकाश की तीव्रता को मक्खियों को बेनकाब करने के लिए प्रकाश की स्थिति तैयार करने के लिए दिखाया। हम न केवल एक synaptic मार्कर puncta की संख्या मात्रा निर्धारित है लेकिन यह भी स्थानिक ?...

<html> synaptic समारोह के मॉडुलन तंत्रिका तंत्र की उल्लेखनीय क्षमता ठीक जवाब या पर्यावरण उत्तेजनाओं को बदलने के लिए अनुकूल करने के लिए योगदान देता है। प्रेस्य्नाप्तिक पुटिका रिहाई संभावना समायोजन अन्तर्ग्रथनी शक्ति 1 को नियंत्रित करने का एक तरीका है। Synaptic पुटिका रिहाई सक्रिय क्षेत्र (AZ), प्रीसानेप्टिक झिल्ली 2 की एक विशेष क्षेत्र में जगह लेता है। AZ विशिष्ट प्रोटीन 3 के एक कैसेट, 4 की विशेषता है। अधिकांश AZ विधानसभा के लिए योगदान दे प्रोटीन अत्यधिक नेमाटोड, कीड़े और स्तनधारियों 5 में संरक्षित कर रहे हैं। हाल के अध्ययनों से संकेत मिलता है कि neuronal गतिविधि के स्तर AZ, जो बदले में दोनों इन विट्रो और इन विवो 6, 7 में कार्यात्मक उत्पादन के नियमन के लिए योगदान की आणविक संरचना को नियंत्रित करता है&gt; 8। हम पहले से पाया गया कि फोटोरिसेप्टर Azs प्राकृतिक परिवेश प्रकाश 9 को लंबे समय तक निवेश करने के बाद ड्रोसोफिला में आणविक remodeling गुजरना। इस हालत में, हमने देखा है कि Bruchpilot (बीआरपी) पॉजिटिव Azs की संख्या फोटोरिसेप्टर axons में कम हो गया था। बीआरपी / कास्ट / ELKS परिवार प्रोटीन कशेरुकी और अकशेरुकी synapses 10 में Azs के मौलिक इमारत ब्लॉकों हैं। ड्रोसोफिला brp म्यूटेंट में, पैदा पुटिका रिहाई 11 को दबा दिया जाता है, 12। 17 सी टर्मिनल बीआरपी के अमीनो एसिड के अवशेष ड्रोसोफिला neuromuscular जंक्शन (NMJ) 13, 14 पर synaptic पुटिका क्लस्टरिंग के लिए आवश्यक हैं। इन अध्ययनों AZ संगठन और समारोह में इस अणु की केंद्रीय भूमिका का प्रदर्शन किया। एक हाल ही में विकसित आनुवंशिक उपकरण, पुनर्संयोजन (स्टार), बीआरपी के साथ synaptic टैगिंग के साथविशेष प्रकार की कोशिकाओं में vivo में मनाया जा सकता है, अंतर्जात अभिव्यक्ति के स्तर पर और एक भी अन्तर्ग्रथन संकल्प 15 पर। इस उपकरण के लिए यह संभव मात्रात्मक जटिल केंद्रीय तंत्रिका तंत्र में synapses के अंतर्जात गतिशीलता का मूल्यांकन करने के लिए बनाता है। वहाँ confocal माइक्रोस्कोपी से प्राप्त आंकड़ों के आधार पर अन्तर्ग्रथन quantifications सहित कई अध्ययन किए गए हैं। Synaptic परिवर्तन लंबाई, क्षेत्र, मात्रा, घनत्व को मापने और अत्याधुनिक सॉफ्टवेयर अनुप्रयोगों के आधार पर संख्या की गणना के द्वारा मूल्यांकन किया गया है। उदाहरण के लिए, फ्रीवेयर ImageJ कुल synaptic क्षेत्र और ड्रोसोफिला NMJ 16 पर synaptic घनत्व उपायों के लिए एक मात्रा का ठहराव तरीका प्रदान करता है। पूर्व और पोस्टअन्तर्ग्रथनी मार्कर की colocalization साइटों की संख्या प्लगइन &quot;puncta विश्लेषक&quot; ImageJ सॉफ्टवेयर प्लेटफार्म 17 पर उपलब्ध का उपयोग मात्रा की है। वैकल्पिक रूप से, एक बहु-बराबरadigm संख्यात्मक अभिकलन वातावरण आधारित कार्यक्रम, Synapse डिटेक्टर (synd), स्वचालित रूप से एक फ्लोरोसेंट मार्कर के साथ लेबल न्यूरॉन्स की dendrites ट्रेस कर सकते हैं, और उसके बाद सेल शरीर में 18 से दूरी के एक समारोह के रूप में synaptic प्रोटीन का स्तर quantifies। सॉफ्टवेयर Synaptic puncta विश्लेषण (SynPAnal), confocal या फ्लोरोसेंट माइक्रोस्कोपी से अर्जित न्यूरॉन्स की 2 डी छवियों का तेजी से विश्लेषण के लिए डिजाइन किया गया है। इस सॉफ्टवेयर का प्राथमिक कार्य घनत्व और प्रोटीन puncta 19 की तीव्रता का स्वत: और तेजी मात्रा का ठहराव है। हाल ही में, एक स्वचालित सीखने आधारित अन्तर्ग्रथन का पता लगाने एल्गोरिथ्म 3 डी 20 में synaptic नंबर की मात्रा का ठहराव के लिए उत्पन्न किया गया है, 3 डी दृश्य की मदद से विश्लेषण (Vaa3D) सॉफ्टवेयर 21 का लाभ ले। वाणिज्यिक छवि विश्लेषण सॉफ्टवेयर भी synaptic quantifications के लिए शक्तिशाली उपकरण हैं। उदाहरण के लिए, fluorescentlyलेबल न्यूरोट्रांसमीटर रिसेप्टर्स या एक प्रेस्य्नाप्तिक AZ घटक सी में एकल अन्तर्ग्रथन संकल्प एलिगेंस 22 या ड्रोसोफिला घ्राण प्रणाली 23, 24, synapses के सैकड़ों की इजाजत देने के लिए तेजी से एक भी नमूना भीतर होती जा करने के साथ तीन आयामों में मात्रा निर्धारित किया गया है। यहाँ, हम एक अनुकूलित छवि विश्लेषण सॉफ्टवेयर द्वारा एक तरीका मौजूद है प्लग में एक बहु-प्रतिमान संख्यात्मक अभिकलन वातावरण है कि उनकी संख्या, वितरण और आणविक घटकों के संवर्धन के स्तर सहित Azs के अर्द्ध स्वचालित रूप से कई पहलुओं, विश्लेषण करने के लिए अनुमति देता है में लागू AZ। इस प्रकार, इस जटिल विश्लेषण विभिन्न पर्यावरणीय परिस्थितियों में अक्षतंतु टर्मिनलों में synaptic घटकों की गतिशीलता का मूल्यांकन करने के लिए हमें की अनुमति दी। हम वयस्क मक्खी फोटोरिसेप्टर के उत्पादन synapses पर प्रकाश जोखिम के प्रभाव की जांच की। प्रक्रिया तीन चरणों में किया जाता है: 1)प्रकाश जोखिम, 2) विच्छेदन, immunohistochemistry और confocal इमेजिंग, और 3) छवि विश्लेषण के लिए तैयार करना।

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Vial</td>
			<td>Hightech, Japan</td>
			<td>MKC-20</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Plug</td>
			<td>Thermo Fisher Sciehtific, USA</td>
			<td>AS-275</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Customized transparent rack made of acrylic resin&#160;</td>
			<td>Shin-Shin Corporation, Japan</td>
			<td></td>
			<td>a height of 41 cm, a base of 21 cm, a thickness of 4 cm and a height of 13 cm for each step</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cool incubator</td>
			<td>MITSUBISHI ELECTRIC, Japan</td>
			<td>CN-40A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LED panel</td>
			<td>MISUMI, Japan</td>
			<td>LEDXC170-W</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Digital light meter</td>
			<td>CEM</td>
			<td>DT-1301</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fly pad</td>
			<td>Tokken, Japan</td>
			<td>TK-HA03-S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petri dish (35 x 10 mm)</td>
			<td>Greiner Bio-One International, Germany</td>
			<td>627102</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PBS tablet</td>
			<td>Takara, Japan</td>
			<td>T900</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Triton X-100</td>
			<td>Wako, Japan</td>
			<td>160-24751</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dumont #5 Forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>11251-20</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1.5 ml tube</td>
			<td>Sarstedt, Germany</td>
			<td>A. 152X</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Formaldehyde 16%</td>
			<td>NEM, Japan</td>
			<td>3152</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pipetman P-200</td>
			<td>Gilson</td>
			<td>F123601&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pipetman P-20</td>
			<td>Gilson</td>
			<td>F123600</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pipetman P-2</td>
			<td>Gilson</td>
			<td>F144801</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>anti-chaoptin antibody</td>
			<td>DSHB</td>
			<td>24B10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alexa568-conjugated anti-mouse antibody</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>A-11031</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>VECTASHIELD Mounting Medium</td>
			<td>Vector Laboratories, Inc.</td>
			<td>H-1000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscope slide (76 x 26 mm)</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific Gerhard Menzel B.V. &#38; Co. KG, Germany</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Coverslip (18 x 18 mm, 0.17 mm)</td>
			<td>Zeiss, Germany</td>
			<td>474030-9000-000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Industrial Microscopes</td>
			<td>Olympus, Japan</td>
			<td>SZ61-C-SET</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereo Microscope Lighting</td>
			<td>Olympus, Japan</td>
			<td>KL 1600 LED</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>confocal microscopy</td>
			<td>Zeiss, Germany</td>
			<td>LSM780</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Imaris</td>
			<td>Bitplane, Switzerland</td>
			<td></td>
			<td>Version 7.6.4 or above</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Matlab</td>
			<td>The MathWorks, Inc., USA</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Excel for Mac&#160;</td>
			<td>Microsoft</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

analyzing synaptic modulation of drosophila melanogaster photoreceptors after exposure to prolonged light

तंत्रिका तंत्र अनुकूल और विभिन्न उत्तेजनाओं को प्रतिक्रिया करने में उल्लेखनीय क्षमता है। यह तंत्रिका समायोजन काफी हद तक synaptic स्तर पर प्लास्टिसिटी के माध्यम से हासिल की है। सक्रिय क्षेत्र (AZ) प्रीसानेप्टिक झिल्ली कि न्यूरोट्रांसमीटर रिलीज मध्यस्थता और पाड़ प्रोटीन की एक घने संग्रह से बना है पर क्षेत्र है। ड्रोसोफिला मेलानोगास्टर की Azs (ड्रोसोफिला) फोटोरिसेप्टर प्राकृतिक परिवेश प्रकाश करने के लिए लंबे समय तक निवेश करने के बाद आणविक remodeling गुजरना। इस प्रकार neuronal गतिविधि के स्तर AZ की आणविक संरचना को पुनर्व्यवस्थित करने और कार्यात्मक उत्पादन के नियमन में योगदान कर सकते हैं। Immunohistochemistry को प्रकाश जोखिम सेट-अप तैयार करने से शुरू, इस प्रोटोकॉल विवरण कैसे नंबर, स्थानिक वितरण, और delocalization ड्रोसोफिला फोटोरिसेप्टर में Azs पर synaptic अणुओं के स्तर यों की। छवि विश्लेषण sof का प्रयोगtware, GFP जुड़े हुए AZ घटक Bruchpilot के समूहों प्रत्येक R8 फोटोरिसेप्टर (R8) अक्षतंतु टर्मिनल के लिए पहचान की गई। पता चला Bruchpilot स्पॉट स्वचालित रूप से अलग-अलग R8 एक्सोन को सौंपा गया। अक्षतंतु साथ मौके आवृत्ति के वितरण की गणना करने के लिए, हम एक स्वनिर्धारित सॉफ्टवेयर प्लगइन लागू किया है। प्रत्येक अक्षतंतु के शुरू बिंदु और अंत बिंदु मैन्युअल में परिभाषित किया गया है और प्रत्येक Bruchpilot मौके की स्थिति के शुरू और अंत बिंदु के बीच लाइन को जोड़ने पर पेश किया गया था। Bruchpilot समूहों की संख्या के अलावा, हम भी समूहों के भीतर Bruchpilot-GFP के delocalization स्तर मात्रा। इन मापों विस्तार विभिन्न पर्यावरणीय परिस्थितियों में एक न्यूरॉन में spatially हल synaptic गतिशीलता उत्तेजनाओं को प्रतिबिंबित।

ड्रोसोफिला के यौगिक आंख शामिल ~ 780 ommatidia, (R1-8) फोटोरिसेप्टर के प्रत्येक युक्त आठ प्रकार के। R7 और R8 परियोजना के दूसरे ऑप्टिक नाड़ीग्रन्थि, मज्जा, जहां वे परतों M6 और एम 3, क्रमश: 26 में synapses क?...

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Analyzing Synaptic Modulation of Drosophila melanogaster Photoreceptors after Exposure to Prolonged Light

यहाँ हम कैसे नंबर और ड्रोसोफिला मेलानोगास्टर फोटोरिसेप्टर में synaptic सक्रिय क्षेत्रों के स्थानिक वितरण यों को दिखाने के लिए, एक आनुवंशिक रूप से इनकोडिंग आणविक मार्कर के साथ प्रकाश डाला, और प्रकाश के लिए लंबे समय तक निवेश करने के बाद उनके मॉडुलन।

के Synaptic मॉड्यूलेशन का विश्लेषण<em&gt; ड्रोसोफिला मेलानोगास्टर</em&gt; लंबे समय तक प्रकाश के संपर्क के बाद फोटोरिसेप्टर

The nervous system has the remarkable ability to adapt and respond to various stimuli. This neural adjustment is largely achieved through plasticity at ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Analyzing Synaptic Modulation of Drosophila melanogaster Photoreceptors after Exposure to Prolonged Light

In vivo Visualization of Synaptic Vesicles Within Drosophila Larval Segmental Axons

In vivo Visualization of Synaptic Vesicles Within Drosophila Larval Segmental Axons

ड्रोसोफिला लारवल कमानी axons के भीतर Synaptic vesicles के vivo विज़ुअलाइज़ेशन

Elucidating the mechanisms of axonal transport has shown to be very important in determining how defects in long distance transport affect different ...

Optogenetic Stimulation of Escape Behavior in Drosophila melanogaster

Optogenetic Stimulation of Escape Behavior in Drosophila melanogaster

Optogenetic भागने व्यवहार की उत्तेजना<em&gt; ड्रोसोफिला मेलानोगास्टर</em

A  growing number of genetically encoded tools are becoming available that allow non-invasive  manipulation of the neural activity of specific neurons in ...

Determination of the Spontaneous Locomotor Activity in Drosophila melanogaster

Determination of the Spontaneous Locomotor Activity in Drosophila melanogaster

में सहज हरकत गतिविधि का निर्धारण<em&gt; ड्रोसोफिला मेलानोगास्टर</em

Drosophila melanogaster has been used as an excellent model organism to study environmental and genetic manipulations that affect behavior. One such ...

Conditions Affecting Social Space in Drosophila melanogaster

Conditions Affecting Social Space in Drosophila melanogaster

में सामाजिक अंतरिक्ष प्रभावित करने की स्थिति<em&gt; ड्रोसोफिला मेलानोगास्टर</em

The social space assay described here can be used to quantify social interactions of Drosophila melanogaster &#8212; or other small insects &#8212; in a ...

High Throughput Assay to Examine Egg-Laying Preferences of Individual Drosophila melanogaster

High Throughput Assay to Examine Egg-Laying Preferences of Individual Drosophila melanogaster

उच्च throughput परख की जांच करने के लिए व्यक्ति की अंडे बिछाने प्राथमिकताएं<em&gt; ड्रोसोफिला मेलानोगास्टर</em

Recently, egg-laying preference of Drosophila has emerged as a genetically tractable model to study the neural basis of simple decision-making processes. ...

Electrophysiological Method for Recording Intracellular Voltage Responses of Drosophila Photoreceptors and Interneurons to Light Stimuli In Vivo

Electrophysiological Method for Recording Intracellular Voltage Responses of Drosophila Photoreceptors and Interneurons to Light Stimuli In Vivo

की प्रतिक्रिया रिकॉर्डिंग Intracellular वोल्टेज के लिए electrophysiological विधि<em&gt; ड्रोसोफिला</em&gt; फोटोरिसेप्टर और लाइट उत्तेजनाओं को इन्तेर्नयूरोंस<em&gt; Vivo</em

Voltage responses of insect photoreceptors and visual interneurons can be accurately recorded with conventional sharp microelectrodes. The method ...

Electrophysiological Method for Whole-cell Voltage Clamp Recordings from Drosophila Photoreceptors

Electrophysiological Method for Whole-cell Voltage Clamp Recordings from Drosophila Photoreceptors

से पूरे सेल वोल्ट क्लैंप रिकॉर्डिंग के लिए इलेक्ट्रोफिजियोलॉजिकल विधि<em&gt; ड्रोसोफिला</em&gt; फोटोरिसेप्टर

Whole-cell voltage clamp recordings from Drosophila melanogaster photoreceptors have revolutionized the field of invertebrate visual transduction, ...

Desensitization and Recovery of Crayfish Photoreceptors Upon Delivery of a Light Stimulus

प्रकाश उत्तेजना के वितरण पर क्रेफ़िश फोटोरिसेप्टर्स की असंवेदनशीलता और वसूली

A method to study desensitization and recovery of crayfish photoreceptors is presented. We performed intracellular electrical recordings of photoreceptor ...

Monitoring Cell-to-cell Transmission of Prion-like Protein Aggregates in Drosophila Melanogaster

Monitoring Cell-to-cell Transmission of Prion-like Protein Aggregates in Drosophila Melanogaster

Drosophila Melanogaster में Prion-जैसे प्रोटीन समुच्चय के सेल-टू-सेल ट्रांसमिशन का निरीक्षण

Protein aggregation is a central feature of most neurodegenerative diseases, including Alzheimer&#39;s disease (AD), Parkinson&#39;s disease (PD), ...

Metabolic Analysis of Drosophila melanogaster Larval and Adult Brains

Metabolic Analysis of Drosophila melanogaster Larval and Adult Brains

Drosophila melanogaster लार्वा और वयस्क दिमाग का चयापचय विश्लेषण

This protocol describes a method for measuring the metabolism in Drosophila melanogaster larval and adult brains. Quantifying metabolism in whole organs ...