Name: rapid deletion production in fungi via agrobacterium mediated transformation of oscar deletion constructs
Uploaded: 2017-06-12T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Rapid Deletion Production in Fungi via Agrobacterium Mediated Transformation of OSCAR Deletion Constructs at JoVE.com

Yazarlar, Fusarium verticillioiodes&#39;de OSCAR mutantları üretmek için yaptıkları çalışmalar için aşağıdaki lisans ve lise öğrencilerine teşekkür ederler : Anjellica Miller, Athar Naseer, Xiu Lin, Katelyn Woodburry, Chelsea Patterson, Kathleen Robertson, Krystina Bradley, Ashton Rogers, Alexis McKensie, Manny Hernandez , Ashle Crepsac, Jeff Delong, Christie Burre, Christie Burre, Daniel O&#39;Meara, Lauren (Victoria) Cook, Jake Goodman, Sampriti De, Oge Okoye, Alyssa Beckstead, Garrett Hibbs, Nick Goldstein, Caroline Twum , Chris Benson, Louis Stokes, Jane Hulse, Jasim Mohammed, James Loggins, Kelli Russell, Gre&#39;Nisha Jones, Kristin Sheaffer, Mariam Hammady, Ava Wilson, Katrina Bazemore, Toney Harper, Karlin McGhee, Mohmed Momin, Rima Momin , Thi Ngoc Le ve Angel Pham.

1. Gen Flanlarının PCR Amplifikasyonu için Primer Tasarım <ol><li> Açık okuma çerçevesi (ORF) de dahil olmak üzere ilgili genin (GOI) genomik bölgesini ve diğer taraftan geni çevreleyen en az 2 kb&#39;yi, FungiDB&#39;den veya diğer genomik veri kaynağından gelen bir kelime işlem dosyasına indirin. </li><li> Silme ve etiketi başlatma ve durdurma kodonları için amaçlanan ORF&#39;yi vurgulayın. </li><li> İndirilen sekans içinde bitişik ORF&#39;leri belirleyin ve vurgulayın. </li><li> 1 k...

<ol>
	<li>Paz, Z., Garc&#237;a-Pedrajas, M. D., Andrews, D. L., Klosterman, S. J., Baeza-Monta&#241;ez, L., Gold, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=One+step+construction+of+Agrobacterium-Recombination-ready-plasmids+(OSCAR),+an+efficient+and+robust+tool+for+ATMT+based+gene+deletion+construction+in+fungi.">One step construction of Agrobacterium-Recombination-ready-plasmids (OSCAR), an efficient and robust tool for ATMT based gene deletion construction in fungi.</a> Fungal Genet Biol. 48 (7), 677-684 (2011).</li><li>Gibson, D. G., Young, L., Chuang, R. Y., Venter, J. C., Hutchison, C. A., Smith, H. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Enzymatic+assembly+of+DNA+molecules+up+to+several+hundred+kilobases.">Enzymatic assembly of DNA molecules up to several hundred kilobases.</a> Nat Methods. 6 (5), 343-345 (2009).</li><li>Klosterman, S. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparative+genomics+yields+insights+into+niche+adaptation+of+plant+vascular+wilt+pathogens.">Comparative genomics yields insights into niche adaptation of plant vascular wilt pathogens.</a> PLoS Pathog. 7 (7), (2011).</li><li>Xue, C., Wu, D., Condon, B. J., Bi, Q., Wang, W., Turgeon, B. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Efficient+gene+knockout+in+the+maize+pathogen+Setosphaeria+turcica+using+Agrobacterium+tumefaciens-mediated+transformation.">Efficient gene knockout in the maize pathogen Setosphaeria turcica using Agrobacterium tumefaciens-mediated transformation.</a> Phytopathology. 103 (6), 641-647 (2013).</li><li>Xu, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+high-throughput+gene+disruption+methodology+for+the+entomopathogenic+fungus+Metarhizium+robertsii.">A high-throughput gene disruption methodology for the entomopathogenic fungus Metarhizium robertsii.</a> PloS One. 9 (9), (2014).</li><li>Crutcher, F. K., Liu, J., Puckhaber, L. S., Stipanovic, R. D., Bell, A. A., Nichols, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=FUBT,+a+putative+MFS+transporter,+promotes+secretion+of+fusaric+acid+in+the+cotton+pathogen+Fusarium+oxysporum+f.+sp.+vasinfectum.">FUBT, a putative MFS transporter, promotes secretion of fusaric acid in the cotton pathogen Fusarium oxysporum f. sp. vasinfectum.</a> Microbiology. 161, 875-883 (2015).</li><li>Yu, X., Wang, Y., Pan, J., Wei, D., Zhu, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High+frequency+of+homologous+gene+disruption+by+single-stranded+DNA+in+the+taxol-producing+fungus+Pestalotiopsis+microspora.">High frequency of homologous gene disruption by single-stranded DNA in the taxol-producing fungus Pestalotiopsis microspora.</a> Ann Microbiol. 65 (4), 2151-2160 (2015).</li><li>Korn, M., Schmidpeter, J., Dahl, M., M&#252;ller, S., Voll, L. M., Koch, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Genetic+Screen+for+Pathogenicity+Genes+in+the+Hemibiotrophic+Fungus+Colletotrichum+higginsianum+Identifies+the+Plasma+Membrane+Proton+Pump+Pma2+Required+for+Host+Penetration.">A Genetic Screen for Pathogenicity Genes in the Hemibiotrophic Fungus Colletotrichum higginsianum Identifies the Plasma Membrane Proton Pump Pma2 Required for Host Penetration.</a> PloS One. 10 (5), e0125960 (2015).</li><li>Chettri, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Regulation of dothistromin toxin biosynthesis by the pine needle pathogen Dothistroma septosporum: a thesis presented in the partial fulfilment of the requirements for the degree of Doctor of Philosophy (PhD) in Genetics at Massey University, Manawatu, New Zealand . , (2014).</li><li>Chen Zhou, ., Yujun Yang, ., Jong, A. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mini-prep+in+ten+minutes.">Mini-prep in ten minutes.</a> Biotechniques. 8 (2), 172 (1990).</li><li>Sanger, F., Nicklen, S., Coulson, A. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=DNA+sequencing+with+chain-terminating+inhibitors.">DNA sequencing with chain-terminating inhibitors.</a> P Natl Acad SciUSA. 74 (12), 5463-5467 (1977).</li><li>Khang, C. H., Park, S. Y., Rho, H. S., Lee, Y. H., Kang, S., Wang, K. a. n. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Filamentous+fungi+(Magnaporthe+grisea+and+Fusarium+oxysporum).">Filamentous fungi (Magnaporthe grisea and Fusarium oxysporum).</a> Agrobacterium Protocols. 2, 403-420 (2007).</li><li>Zhang, Y. J., Zhang, S., Liu, X. Z., Wang Wen, H. A., M, <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+simple+method+of+genomic+DNA+extraction+suitable+for+analysis+of+bulk+fungal+strains.">A simple method of genomic DNA extraction suitable for analysis of bulk fungal strains.</a> Lett Appl Microbiol. 51 (1), 114-118 (2010).</li><li>Pluthero, F. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rapid+purification+of+high-activity+Taq+DNA+polymerase.">Rapid purification of high-activity Taq DNA polymerase.</a> Nucleic Acids Res. 21 (20), 4850-4851 (1993).</li><li>McCluskey, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Boosting+Research+and+Industry+by+Providing+Extensive+Resources+for+Fungal+Research.">Boosting Research and Industry by Providing Extensive Resources for Fungal Research.</a> Gene Expression Systems in Fungi: Advancements and Applications. , 361-384 (2016).</li></ol>

Bir Adım Agrobacterium Yapısı -Rekombinasyona hazır plazmid (OSCAR), gittikçe artan sayıda Ascomycota mantarları ile başarıyla kullanılmıştır. Yöntem, Basidiomycota&#39;ya ve diğer fungal filumlardan (seçilebilir markör genleri sürükleyen uygun promotörler ile birlikte) olan türlere, Agrobacterium aracılı transformasyon ve homolog rekombinasyonun mümkün olduğunu varsayarak kolayca uygulanabilir olmalıdır. Anti-mantar bileşiğinin seçeneklerini çeşitlendirmek ve çift ve ...

Genetik diseksiyon, bireylerin veya gen kombinasyonlarının fonksiyonel önemini belirlemek için güçlü bir metodolojidir. Spesifik genlerin rolünü anlamak için standart bir yaklaşım, başka herhangi bir gende değiştirilmemiş tek gen mutantlarının üretilmesidir. En güçlü ve en az potansiyel olarak karıştırıcı yaklaşım, başka bir gen fonksiyonuna zarar vermeden, ilgi alanının açık okuma çerçevesinin (GOI ORF) eksiksiz ve kesin bir şekilde silinmesidir. Silme plasmidinin üretilmesi için standart ligasyon yaklaşımları çoklu adımları gerektirdiğinden, OSCAR 1 için rasyonel , in vitro daha hızlı bir yaklaşım üretmektir. Şekil 1 OSCAR yaklaşımındaki montaj sürecini göstermektedir. Burada açıklanan yöntem, bireysel gen silme vektörlerinin hızlı yapımını, tekli çok parçalı bir reaksiyonda, sonraki Agrobacterium tumefaciens aracılı transfo ile kombinasyon halinde birleştirmenin avantajına sahiptirRmation (ATMT). OSCAR çok hızlıdır ve maya 2&#39;de Gibson grubunun kullanımı gibi diğer stratejilerle iyi bir karşılaştırma yapmaktadır. OSCAR yöntemi, birkaç Ascomycota mantar türü ile başarıyla kullanılmıştır. Bu türler şunları içerir: Fusarium verticillioides (yayımlanmamış), Verticillium dahliae 3 , Setosphaeria turcica 4 , Metarhizium robertsii 5 , Fusarium oxysporum f. sp. Vasinfectum 6 , Pestalotiopsis microspora 7 , Colletotrichum higginsianum 8 ve Dothistroma septosporum 9 ve Sarocladium zeae (yayınlanmamış) . Bu protokol, primer tasarımı, flank PCR amplifikasyonu, OSCAR BP reaksiyonu, silme yapısı yapısı onayı, transformat gibi yöntem için adım adım talimat sağlarİyonunu Agrobacterium&#39;un yapısı ile, ardından da silme konstruktunun mantar hücrelerine ATMT&#39;ye dayalı olarak aktarılmasını ve nihayet mantar delesyon mutantlarını ektopik olarak entegre edilmiş silme yapılarıyla olanlardan ayırt eder.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>FungiDB</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Database/ http://fungidb.org/fungidb/</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>IDT PrimerQuest</td>
			<td>IDT</td>
			<td></td>
			<td>Primer design online software/ http://www.idtdna.com/Primerquest/Home/Index</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microsoft Word</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Sequence file manipulation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Low Na LB Spec 100 medium</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>E. coli transformant selection, composition: 1% tryptone, 0.05% NaCl, 0.5% yeast extract, 1.5 % agar if for solid medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Co-cultivation medium</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>ATMT transformation induction (Reference 12)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Aspergillus minimal medium with Hygromycin</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Fungal transformant selection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PDA medium</td>
			<td>Acumedia</td>
			<td>7149A</td>
			<td>Single spore slant tubes</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PDA-Hyg-Kan medium</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Fungal ransformant isolation, PDA containing 150 &#956;g/ml hygromycin B and 100 &#956;g/ml Kanamycin;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass beads</td>
			<td>Genlantis</td>
			<td>C400100</td>
			<td>Plate spreading</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nitrocellulose filters (47mm)</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>09-719-555</td>
			<td>Co-culturing for ATMT</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Various centifuge tubes</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>multiple preps</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petri plates (various)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Culturing of bacteria and Fungi</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pA-Hyg OSCAR</td>
			<td>Addgene</td>
			<td>29640</td>
			<td>Selectable marker vector</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pOSCAR</td>
			<td>Addgene</td>
			<td>29639</td>
			<td>Assembly vector</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DH5a One Shot Competent E. coli cells</td>
			<td>Life Technologies&#160;</td>
			<td>12297-016</td>
			<td>BP reaction transformation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ccdB survival E. coli cells</td>
			<td>Life Technologies&#160;</td>
			<td>A10460</td>
			<td>Maintenance of pOSCAR</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Wooden transfer sticks</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Colony streaking</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Toothpicks</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Colony picking</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microcentrifuge</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Pelleting Bacteria etc</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Preparative centrifuge</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Fungal spore collection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dissecting microscope</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Single spore isolation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Automated Cell Counter</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Spore suspension calculation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Compound microscope</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Hemocytometer cell counting</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>QIAquick PCR Purification Kit&#160;</td>
			<td>Qiagen</td>
			<td>28104</td>
			<td>PCR gene flank produict purification</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TaKaRa LA Taq&#160;</td>
			<td>Takara Bio USA</td>
			<td>RR002A</td>
			<td>Hi Fidelity taq polymerase for OSCAR flank generation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hygromycin B</td>
			<td>InvivoGen</td>
			<td>ant-hg-5</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Spectinomycin</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>22189-32-8</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cefotaxim&#160;</td>
			<td>TCI America</td>
			<td>C2224</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Moxalactam&#160;</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>43963</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GelRed</td>
			<td>&#160;Phenix Research Products</td>
			<td>RGB-4103</td>
			<td>Post staining agarose gels</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Qiagen QIAquick PCR Purification Kit (Cat. No. 28104)&#160;</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>(OneShot_ Mach1TM T1R or One Shot_ OmniMAX&#8482; 2 T1R from Invitrogen)&#160;</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>C862003</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gateway BP Clonase II Enzyme mix</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>11789020</td>
			<td>Used to assemble deletion construct in pOSAR</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PrimerQuest tool</td>
			<td>IDT&#160;</td>
			<td></td>
			<td>Used in step 1.4; available on http://www.idtdna.com/Primerquest/Home/Index</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

rapid deletion production in fungi via agrobacterium mediated transformation of oscar deletion constructs

Gereksinim genini geri kalanını değiştirmeden kesin bir şekilde çıkarmak, canlıdaki organizmada belirli bir genin işlevini belirlemek için ideal bir ürün sağlar. Bu protokolde, hassas ve hızlı silme plazmid konstrüksiyonu OSCAR yöntemi anlatılmıştır. OSCAR, ilgilenilen genin saflaştırılmış PCR ile güçlendirilmiş 5 &#39;ve 3&#39; yanları ve pA-Hyg OSCAR (işaretleyici vektör) ve pOSCAR (birleştirme grubu) olmak üzere tek bir rekombinaz reaksiyonunun gerçekleştirildiği klonlama sistemine dayanmaktadır. vektör). Doğru monte edilen silme vektörünün doğrulanması, kısıtlama sindirim haritalaması ve bunu takiben sıralama ile gerçekleştirilir. Agrobacterium tumefaciens daha sonra silme yapısının fungal sporlara (ATMT olarak anılacaktır) yönlendirilmesine aracılık etmek için kullanılır. Son olarak, silme yapısının homolog veya homolog olmayan rekombinasyon ile entegre edilip edilmediğini belirlemek için bir PCR testi tarif edilmiştir, bu, gen silinmesini veyaSırasıyla ektopik entegrasyon. Bu yaklaşım Verticillium dahliae&#39;de ve Fusarium verticillioides&#39;de diğer türler arasında çok sayıda genin silinmesi için başarıyla kullanılmaktadır .

Tek bir reaksiyonda OSCAR yöntemi, seçilebilir işaretleyici kaseti çevreleyen silinilecek hedef genin yanlarını içeren bir plazmid üretir. OSCAR kullanarak silme yapılarının üretilmesi çok etkilidir. Bununla birlikte, sistem, bazı parçacıkları içermeyen kısmi yapılar (iki gen kenarı ve seçilebilir işaretleyici) üretebilir. Genellikle, E. coli transformantlarının çoğunluğu doğru OSCAR yapısını içerir. Örneğin, Şekil 2 , Ve...

Watch this Scientific Journal Video about Rapid Deletion Production in Fungi via Agrobacterium Mediated Transformation of OSCAR Deletion Constructs at JoVE.com

Rapid Deletion Production in Fungi via Agrobacterium Mediated Transformation of OSCAR Deletion Constructs

Homolog rekombinasyon yoluyla üretilen gen silme mutantları, gen fonksiyonu çalışmaları için altın standarttır. Silme yapılarının hızlı oluşturulması için OSCAR (Agrobacterium-Rekombinasyona hazır plasmidler&#39;in Bir Adımlı Yapısı) yöntemi anlatılmıştır. Agrobacterium aracılı fungal transformasyon izlenir. Son olarak, fungal transformantlarda gen çıkarılmalarının PCR tabanlı onay yöntemi.

Yoluyla mantarlarda hızlı Silme Üretimi<em&gt; Agrobacterium</em&gt; OSCAR Silme Yapılarının Aracı Dönüştürülmesi

Precise deletion of gene(s) of interest, while leaving the rest of the genome unchanged, provides the ideal product to determine that particular ...

Research

JoVE Journal

Genetics

Rapid Deletion Production in Fungi via Agrobacterium Mediated Transformation of OSCAR Deletion Constructs

Rearing and Double-stranded RNA-mediated Gene Knockdown in the Hide Beetle, Dermestes maculatus

Rearing and Double-stranded RNA-mediated Gene Knockdown in the Hide Beetle, Dermestes maculatus

Yetiştirme ve Gizle böcek RNA aracılı gen demonte çift sarmallı,<em&gt; Dermestes maculatus</em

Advances in genomics have raised the possibility of probing biodiversity at an unprecedented scale. However, sequence alone will not be informative ...

CRISPR/Cas9-mediated Targeted Integration In Vivo Using a Homology-mediated End Joining-based Strategy

CRISPR/Cas9-mediated Targeted Integration In Vivo Using a Homology-mediated End Joining-based Strategy

Bir bitiş homoloji-aracılı katılmadan tabanlı strateji kullanarak hedeflenen Integration CRISPR/Cas9-aracılı Vivo içinde

As a promising genome editing platform, the CRISPR/Cas9 system has great potential for efficient genetic manipulation, especially for targeted integration ...

A Protocol for the Production of Integrase-deficient Lentiviral Vectors for CRISPR/Cas9-mediated Gene Knockout in Dividing Cells

Integrase-eksik Lentiviral vektörler üretimi için CRISPR/Cas9-aracılı Gene hücre bölünmesi içinde nakavt için bir iletişim kuralı

Lentiviral vectors are an ideal choice for delivering gene-editing components to cells due to their capacity for stably transducing a broad range of cells ...

Adapting 3' Rapid Amplification of CDNA Ends to Map Transcripts in Cancer

3' adapte CDNA hızlı amplifikasyon transkript kanser eşlemek için sona erer

Maturation of eukaryotic mRNAs involves 3&#39; end formation, which involves the addition of a poly(A) tail. In order to map the 3&#39; end of a gene, the ...

CRISPR-Mediated Reorganization of Chromatin Loop Structure

Kromatin döngü yapısı yeniden yapılanma CRISPR-aracılı

Recent studies have clearly shown that long-range, three-dimensional chromatin looping interactions play a significant role in the regulation of gene ...

Lentiviral Mediated Production of Transgenic Mice: A Simple and Highly Efficient Method for Direct Study of Founders

Lentiviral aracılı transgenik fareler üretimi: doğrudan eğitim kurucuları basit ve son derece etkili bir yöntem

For almost 40 years, pronuclear DNA injection represents the standard method to generate transgenic mice with random integration of transgenes. Such a ...

Plant Growth and Agrobacterium-mediated Floral-dip Transformation of the Extremophyte Schrenkiella parvula

Plant Growth and Agrobacterium-mediated Floral-dip Transformation of the Extremophyte Schrenkiella parvula

Bitki büyüme ve Floral daldırma dönüşümün Agrobacterium aracılı Extremophyte Schrenkiella parvula

Schrenkiella parvula is an extremophyte adapted to various abiotic stresses, including multiple ion toxicity stresses. Despite high-quality genomic ...

Tomato Root Transformation Followed by Inoculation with Ralstonia Solanacearum for Straightforward Genetic Analysis of Bacterial Wilt Disease

Tomato Root Transformation Followed by Inoculation with Ralstonia Solanacearum for Straightforward Genetic Analysis of Bacterial Wilt Disease

Bakteriyel Solgunluk Hastalığının Basit Genetik Analizi için Ralstonia Solanacearum ile Aşılama Takip Domates Kökü Dönüşümü

Ralstonia solanacearum is a devastating soil borne vascular pathogen that can infect a large range of plant species, causing an important threat to ...

Quantification of Plasmid-Mediated Antibiotic Resistance in an Experimental Evolution Approach

Deneysel Evrim Yaklaşımında Plazmid Aracılı Antibiyotik Direncinin Ölçülmesi

Plasmids play a major role in microbial ecology and evolution as vehicles of lateral gene transfer and reservoirs of accessory gene functions in microbial ...