Name: rearing ixodes scapularis, the black-legged tick: feeding immature stages on mice
Uploaded: 2017-05-08T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Rearing Ixodes scapularis, the Black-legged Tick: Feeding Immature Stages on Mice at JoVE.com

The authors acknowledge the help from the staff of Laboratory Animal Medicine, University of Nevada, Reno. MM received funding from Nevada INBRE.

Protokollen (Nummer-00682) beskrevet nedenfor er godkendt af Institutional Animal Care and Use Committee (IACUC) ved University of Nevada Reno og følger retningslinjerne fra University of Nevada, Renos dyreforskningsetiske udvalg. Kort fortalt blev musene bedøvet med isofluran, og en næse-konus blev anvendt til at opretholde kontinuerlige isofluran-niveauer i 20 minutter. En veterinærsalve blev brugt til at forhindre tørring af øjne under anæstesi. Tå nippel blev brugt til at fastslå anæstesieniveauet og vejrt...

<ol>
	<li>Gleim, E. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Factors+associated+with+tick+bites+and+pathogen+prevalence+in+ticks+parasitizing+humans+in+Georgia,+USA.">Factors associated with tick bites and pathogen prevalence in ticks parasitizing humans in Georgia, USA.</a> Parasites &amp;amp; Vectors. 9 (125), 1-13 (2016).</li><li>Krober, T., Guerin, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vitro+feeding+assays+for+hard+ticks.">In vitro feeding assays for hard ticks.</a> Trends Parasitol. 23 (9), 445-449 (2007).</li><li>Kuhnert, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Feeding+of+Hard+Ticks+In+Vitro:+New+Perspectives+for+Rearing+and+for+the+Identification+of+Systemic+Acaricides.">Feeding of Hard Ticks In Vitro: New Perspectives for Rearing and for the Identification of Systemic Acaricides.</a> ALTEX. 13 (2), 76-87 (1996).</li><li>Voigt, W. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vitro+feeding+of+instars+of+the+ixodid+tick+Amblyomma+variegaturn+on+skin+membranes+and+its+application+to+the+transmission+of+Theileria+mutans+and+Cowdria+ruminantium.">In vitro feeding of instars of the ixodid tick Amblyomma variegaturn on skin membranes and its application to the transmission of Theileria mutans and Cowdria ruminantium.</a> Parasitol. 107, 257-263 (1993).</li><li>Gregson, J. D., Smith, C. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ticks.">Ticks.</a> Insect Colonization and Mass Production. , 49-72 (1966).</li><li>Sonenshine, D. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Biology of Ticks. 2, (1993).</li><li>Bouchard, K. R., Wikel, S. K., Marquaedt, W. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Care,+maintenance,+and+experimental+infestation+of+ticks+in+the+laboratory+setting.">Care, maintenance, and experimental infestation of ticks in the laboratory setting.</a> Biology of Disease Vectors. , 705-711 (2005).</li><li>Schumaker, T. S., Barros, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Life+cycle+of+Ornithodoros+(Alectorobius)+talaje.+(Acari:Argasidae)+in+laboratory.">Life cycle of Ornithodoros (Alectorobius) talaje. (Acari:Argasidae) in laboratory.</a> J Med Entomol. 32, 249-254 (1995).</li><li>Banks, C. W., Oliver, J. H., Hopla, C. E., Dotson, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Laboratory+life+cycle+of+Ixodes+woodi+(Acari:Ixodidae).">Laboratory life cycle of Ixodes woodi (Acari:Ixodidae).</a> J. Med. Entomol. 35, 177-179 (1998).</li><li>James, A. M., Oliver, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Feeding+and+host+preference+of+immature+Ixodes+dammini,I.scapularis,and+I.pacificus.(Acari:Ixodidae).">Feeding and host preference of immature Ixodes dammini,I.scapularis,and I.pacificus.(Acari:Ixodidae).</a> J. Med. Entomol. 27, 324-330 (1990).</li></ol>

Kritiske skridt i protokollen Det er vigtigt at have flere niveauer af sikkerhedsforanstaltninger ved opdræt af flåter for at undgå utilsigtet flugt. Brug af klæbebånd og en vandgrav er afgørende for at sikre sikkerhed. Det er vigtigt at holde den bedøvede mus på en varmepude for at holde kroppens temperatur konstant. Vi fandt også, at barbering med musen ikke giver nogen ekstra fordel for kryds vedhæftning. En individuel mus kan opbevares i samme bur i en uge i et udpeget &quot;tick ...

Flåter er obligatoriske hæmatofage ektoparasitter hos hvirveldyr og distribueres over hele verden. I USA er mindst 11 arter af flåter vektorer af patogener af betydning for folkesundheden 1 . Ixodes scapularis er ansvarlig for overførsel af flere patogener, såsom de forårsagende midler af Lyme disease ( Borrelia burgdorferi ) recidiverende feber ( B. miyamotoi), human granulocytisk anaplasmosis ( Anaplasma phagocytophilum ) og babesiosis (Babesia spp.). På trods af vigtigheden af I. scapularis som en sygdomsvektor er det ikke altid muligt at samle disse arachnider i overflod fra naturen til studier i laboratoriet. Derfor er produktion af sunde laboratorieopdræt flåter afgørende for studier af fækbiologi og kryds-patogen-interaktioner. Livscyklusen for alle hårde flåter (familie Ixodidae), herunder I. scapularis, består af æg og tre aktivee stadier: larve, nymfe, og voksne. Hver aktiv fase feeds på et hvirveldyr vært. De komplekse vekselvirkninger, der finder sted mellem flåter og deres værter over flere dage for fastgørelse og fodring er næsten umuligt at kopiere under anvendelse af kunstige foderautomater, og kan ventes at give nok numre af tilført flåter for masse opdræt 2, 3, 4. Derfor er levende mus og kaniner anvendes hyppigst som værter til opdræt umodne (larver og nymfer), og modne stadier (voksne) af flåter, henholdsvis. Kravet om flere værter til blod fodring i hvert udviklingsstadium komplicerer tick opdræt, og er tids- og omkostningsintensiv 5, 6, 7. Fleste tick opdræt protokoller kræver holde mus i en ophængt trådnet gulv bur 7, 8 eller i en cylindrisk caGe af sådanne dimensioner, at dyret ikke kan bevæge sig frit og pleje sig selv 6 , 9 , 10 . Disse cylindriske bure overføres senere til en skoboksbur med et trådgitter. Engorged, fritliggende flåter samles derefter fra vandet nedenunder. Denne metode resulterer imidlertid i udsættelse af fodret flåter for vand forurenet med urin og afføring, der kan øge svampevækst og krydsdødelighed 9 . Derudover øger det muligheden for at tippe undslippe fra vandtruget, såvel som forårsager spænding på mus. For at omgå disse problemer demonstrerer vi her larvalkekødfoder på mus indenfor engangsskure af plastiksko. Denne metode tillader musernes normale opførsel, øger indhyllet tæksgendannelse og nedsætter tærskelødeligheden på grund af forurening.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="865">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Puralube vet ointment</td>
			<td style="width:207px;">Amazon</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:323px;">Available from any Pet store or online store</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Disposable mouse cage</td>
			<td>&#160;Innovive, San Diego, CA&#160;</td>
			<td>MV 2</td>
			<td>Set of bottom and lid</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">White Alpha dri bedding&#160;</td>
			<td>Lab Supply, Fort Worth, TX</td>
			<td>&#160;ALPHA-Dri&#8482;</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

rearing ixodes scapularis, the black-legged tick: feeding immature stages on mice

Ixodes scapularis , vektoren af ​​Lyme-sygdom, er en af ​​de vigtigste sygdomsvektorer i det østlige og det sydvestlige USA. Denne art er en tre vært tick, der kræver et blodmel fra en hvirveldyr vært for hvert udviklingsstadium, og de voksne kvinder kræver et blodmel til reproduktion. Larval flåter vedhæfter deres vært i 3 - 5 dage til fodring og afgivelse af værten, når de er fuldt engorged. Denne afhængighed af flere forskellige værter og den lange vedhæftningstid for engorgement komplicerer krydsopdræt i laboratorieindstillingen. For at forstå krydsbiologi og kryds-patogen interaktioner er produktionen af ​​sunde laboratorieopdræt flåter imidlertid afgørende. Her demonstrerer vi en simpel, omkostningseffektiv protokol til umodne krydsfodring på mus. Vi ændrede de eksisterende protokoller for nedsat stress på mus og øget fiksering af fodringssucces og overlevelse ved at bruge engangsbure uden maskebunde for at undgå kontakt med flåter wiVandet forurenet med mus urin og afføring.

Vi modificeret eksisterende tick opdræt protokoller 6, 10 for forbedret fodring effektivitet og mindre stress på musen vært. Resultaterne viser, at de faste skotøjsæske stil mus bure er velegnede til kryds opdræt. Den hvide strøelse forudsat en god kontrast til nem samling af fodret flåter. De fleste flåter klatrede op ad væggene i beholderne efter fodring og var nemme at samle. Derudover stramme monteret låg af de dis...

Watch this Scientific Journal Video about Rearing Ixodes scapularis, the Black-legged Tick: Feeding Immature Stages on Mice at JoVE.com

Rearing Ixodes scapularis, the Black-legged Tick: Feeding Immature Stages on Mice

Produktionen af ​​sunde laboratorie-opdrættet flåter er afgørende for undersøgelser af kryds biologi, og kryds-patogen interaktioner. Her demonstrerer vi en enkel protokol til umodne kryds fodring, der er omkostningseffektiv og mindre stressende for mus.

opdræt<em&gt; Ixodes scapularis,</em&gt; The Black-legged Tick: Feeding Immature Stages på Mus

Ixodes scapularis, the vector of Lyme disease, is one of the most important disease vectors in the eastern and Midwestern United States. This species is a ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Rearing Ixodes scapularis, the Black-legged Tick: Feeding Immature Stages on Mice

An Orthotopic Model of Serous Ovarian Cancer in Immunocompetent Mice for in vivo Tumor Imaging and Monitoring of Tumor Immune Responses

An Orthotopic Model of Serous Ovarian Cancer in Immunocompetent Mice for in vivo Tumor Imaging and Monitoring of Tumor Immune Responses

Background: Ovarian cancer is generally diagnosed at an advanced stage where the case/fatality ratio is high and thus remains the most lethal of all ...

Methods for Rapid Transfer and Localization of Lyme Disease Pathogens Within the Tick Gut

Lyme disease is caused by infection with the spirochete pathogen Borrelia burgdorferi, which is maintained in nature by a tick-rodent infection cycle 1.  ...

Saliva, Salivary Gland, and Hemolymph Collection from Ixodes scapularis Ticks

Saliva, Salivary Gland, and Hemolymph Collection from Ixodes scapularis Ticks

Spyt, spytkirtel, og hæmolymfe Collection fra Ixodes scapularis Flåter

Ticks are found worldwide and afflict humans with many tick-borne illnesses. Ticks are vectors for pathogens that cause Lyme disease and tick-borne ...

Feeding of Ticks on Animals for Transmission and Xenodiagnosis in Lyme Disease Research

Transmission of the etiologic agent of Lyme disease, Borrelia burgdorferi, occurs by the  attachment and blood feeding of Ixodes species ticks on ...

Measuring Local Anaphylaxis in Mice

Måling Lokale anafylaksi hos mus

Allergic responses are the result of the activation of mast cells and basophils, and the subsequent release of vasoactive and proinflammatory mediators. ...

Generation of Immature, Mature and Tolerogenic Dendritic Cells with Differing Metabolic Phenotypes

Generering af Umodne, Modne og tolerogeniske dendritiske celler med forskellige Metabolic fænotyper

Immune response results from a complex interplay between the antigen non-specific innate immune system and the antigen specific adaptive immune system. ...

Development of a Hepatitis B Virus Reporter System to Monitor the Early Stages of the Replication Cycle

Udvikling af en hepatitis B virus Reporter system til at overvåge tidlige stadier af Replication Cycle

Currently, it is possible to construct recombinant forms of various viruses, such as human immunodeficiency virus 1 (HIV-1) and hepatitis C virus (HCV), ...

Fluorescence-based Neuraminidase Inhibition Assay to Assess the Susceptibility of Influenza Viruses to The Neuraminidase Inhibitor Class of Antivirals

Fluorescensbaseret neuraminidase-inhiberingsassay i vurdering af den følsomhed over influenzavira til neuraminidaseinhibitoren Class of Antivirale

The neuraminidase (NA) inhibitors are the only class of antivirals approved for the treatment and prophylaxis of influenza that are effective against ...

Phenotypic Analysis of Rodent Malaria Parasite Asexual and Sexual Blood Stages and Mosquito Stages

Fænotypisk analyse af gnaven malaria Parasisite aseksuelle og seksuelle blod stadier og myg stadier

Recent advances in genetics and systems biology technologies have promoted our understanding of the biology of malaria parasites on the molecular level. ...