Name: rearing ixodes scapularis, the black-legged tick: feeding immature stages on mice
Uploaded: 2017-05-08T13:00:00
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The authors acknowledge the help from the staff of Laboratory Animal Medicine, University of Nevada, Reno. MM received funding from Nevada INBRE.

प्रोटोकॉल (संख्या-00682) नीचे दिये संस्थागत पशु की देखभाल और उपयोग समिति (IACUC) नेवादा रेनो के विश्वविद्यालय में द्वारा अनुमोदित और नेवादा, रेनो के पशु अनुसंधान आचार समिति के विश्वविद्यालय के दिशा निर्देशो?...

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	<li>Gleim, E. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Factors+associated+with+tick+bites+and+pathogen+prevalence+in+ticks+parasitizing+humans+in+Georgia,+USA.">Factors associated with tick bites and pathogen prevalence in ticks parasitizing humans in Georgia, USA.</a> Parasites &amp;amp; Vectors. 9 (125), 1-13 (2016).</li><li>Krober, T., Guerin, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vitro+feeding+assays+for+hard+ticks.">In vitro feeding assays for hard ticks.</a> Trends Parasitol. 23 (9), 445-449 (2007).</li><li>Kuhnert, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Feeding+of+Hard+Ticks+In+Vitro:+New+Perspectives+for+Rearing+and+for+the+Identification+of+Systemic+Acaricides.">Feeding of Hard Ticks In Vitro: New Perspectives for Rearing and for the Identification of Systemic Acaricides.</a> ALTEX. 13 (2), 76-87 (1996).</li><li>Voigt, W. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vitro+feeding+of+instars+of+the+ixodid+tick+Amblyomma+variegaturn+on+skin+membranes+and+its+application+to+the+transmission+of+Theileria+mutans+and+Cowdria+ruminantium.">In vitro feeding of instars of the ixodid tick Amblyomma variegaturn on skin membranes and its application to the transmission of Theileria mutans and Cowdria ruminantium.</a> Parasitol. 107, 257-263 (1993).</li><li>Gregson, J. D., Smith, C. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ticks.">Ticks.</a> Insect Colonization and Mass Production. , 49-72 (1966).</li><li>Sonenshine, D. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Biology of Ticks. 2, (1993).</li><li>Bouchard, K. R., Wikel, S. K., Marquaedt, W. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Care,+maintenance,+and+experimental+infestation+of+ticks+in+the+laboratory+setting.">Care, maintenance, and experimental infestation of ticks in the laboratory setting.</a> Biology of Disease Vectors. , 705-711 (2005).</li><li>Schumaker, T. S., Barros, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Life+cycle+of+Ornithodoros+(Alectorobius)+talaje.+(Acari:Argasidae)+in+laboratory.">Life cycle of Ornithodoros (Alectorobius) talaje. (Acari:Argasidae) in laboratory.</a> J Med Entomol. 32, 249-254 (1995).</li><li>Banks, C. W., Oliver, J. H., Hopla, C. E., Dotson, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Laboratory+life+cycle+of+Ixodes+woodi+(Acari:Ixodidae).">Laboratory life cycle of Ixodes woodi (Acari:Ixodidae).</a> J. Med. Entomol. 35, 177-179 (1998).</li><li>James, A. M., Oliver, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Feeding+and+host+preference+of+immature+Ixodes+dammini,I.scapularis,and+I.pacificus.(Acari:Ixodidae).">Feeding and host preference of immature Ixodes dammini,I.scapularis,and I.pacificus.(Acari:Ixodidae).</a> J. Med. Entomol. 27, 324-330 (1990).</li></ol>

प्रोटोकॉल के भीतर महत्वपूर्ण कदम आकस्मिक बचने से बचने के लिए टिकी पालन करते समय सुरक्षा उपायों के कई स्तरों के लिए महत्वपूर्ण है सुरक्षा सुनिश्चित करने के लिए चिपचिपा टेप और एक पानी की खाई क?...

टिट्स हे वर्टिब्रेट्स के हेमाथोफेग्स एक्टोपारासाइट्स हैं और उन्हें दुनियाभर में वितरित किया जाता है। संयुक्त राज्य अमेरिका में, कम से कम 11 प्रजातियां टिक्ल्स सार्वजनिक स्वास्थ्य महत्व के रोगजनकों के वैक्टर हैं। Ixodes scapularis कई रोगज़नक़ों के संचरण के लिए जिम्मेदार है जैसे लाइम रोग ( बोरेरिया बर्गडोरफेरी ) के लौकिक ज्वर ( बी। मिआमोतोई), मानव ग्रैन्यूलोसिटिक एनाप्लाज्मोसिस ( एनाप्लाज्मा फॅगोसाइटोथिल्यूम ), और बॉयोबायोसिस (बाबेसीया एसपीपी)। आई के महत्व के बावजूद एक रोग वेक्टर के रूप में खूनी, प्रयोगशाला में पढ़ाई के लिए जंगली से बहुतायत में इन एराचेंड्स को इकट्ठा करना हमेशा संभव नहीं होता है। इसलिए, टिक प्रयोगशाला की पढ़ाई के लिए टिक टिकने की आवश्यकता है, टिक जीव विज्ञान पर अध्ययन, और टिक-रोगजनन बातचीत। सभी कठोर ticks (परिवार Ixodidae) के जीवन चक्र, जिसमें आई scapularis शामिल हैं, अंडा और तीन सक्रिय होते हैंई चरण: लार्वा, अप्सरा, और वयस्क। प्रत्येक सक्रिय चरण एक कशेरुका मेजबान पर फ़ीड। कई दिनों के लगाव और भोजन के दौरान टिक्क्स और उनके मेजबानों के बीच होने वाली जटिल बातचीत कृत्रिम भक्षणों का उपयोग करने के लिए दोहराना लगभग असंभव होती हैं, और बड़े पैमाने पर पालन करने वाले 2 , 3 , 4 के लिए पर्याप्त मात्रा में टेंक प्रदान करने की संभावना नहीं है। इसलिए, जीवित चूहों और खरगोशों को सबसे अधिक बार अपरिपक्व (लार्वा और निम्फ्स) पालन करने के लिए मेजबान, और टिक्कों के परिपक्व चरणों (वयस्क) क्रमशः उपयोग किया जाता है। प्रत्येक विकासात्मक चरण के दौरान रक्त के भोजन के लिए कई मेजबानों की आवश्यकता टिक टिकती है, और यह समय और लागत की गहन 5 , 6 , 7 है । अधिकांश टिक पालन करने वाले प्रोटोकॉल को एक निलंबित तार ग्रिड मंजिल पिंजरे 7 , 8 या एक बेलनाकार सी में चूहे रखने की आवश्यकता होती हैइस तरह के आयाम है कि पशु स्वतंत्र रूप से ले जाया जा सकता है और खुद को दूल्हे 6, 9, 10 में जीई। इन बेलनाकार पिंजरों बाद में एक तार ग्रिड के साथ एक shoebox पिंजरे के लिए स्थानांतरित कर रहे हैं। लटके हुए, अलग टिक तो पानी के नीचे से एकत्र कर रहे हैं। हालांकि, खिलाया उजागर में इस विधि परिणाम मूत्र तथा मल कि कवक विकास बढ़ाने के लिए और मृत्यु दर 9 टिकटिक कर सकते हैं के साथ दूषित पानी के लिए टिक्स। इसके अलावा, यह पानी गर्त से टिक भागने, और साथ ही चूहों को तनाव पैदा करने की संभावना बढ़ जाती है। इन समस्याओं को दरकिनार करने के लिए, हम यहाँ प्लास्टिक shoebox प्रकार डिस्पोजेबल पिंजरों के भीतर चूहों पर लार्वा टिक खिला का प्रदर्शन। इस विधि चूहों, बढ़ जाती है टिक वसूली से लटके हुए की सामान्य व्यवहार की अनुमति देता है, और संदूषण के कारण टिक मृत्यु दर कम हो जाती है।

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="865">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Puralube vet ointment</td>
			<td style="width:207px;">Amazon</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:323px;">Available from any Pet store or online store</td>
		</tr>
		<tr height="21">
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			<td>MV 2</td>
			<td>Set of bottom and lid</td>
		</tr>
		<tr height="21">
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			<td>Lab Supply, Fort Worth, TX</td>
			<td>&#160;ALPHA-Dri&#8482;</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

rearing ixodes scapularis, the black-legged tick: feeding immature stages on mice

Ixodes scapularis , लाइम रोग के वेक्टर, पूर्वी और मिडवेस्टर्न संयुक्त राज्य अमेरिका में सबसे महत्वपूर्ण बीमारी वैक्टर में से एक है। यह प्रजाति एक तीन मेजबान टिक है, जिसे प्रत्येक विकास चरण के लिए एक कशेरुक मेजबान से रक्त भोजन की आवश्यकता होती है, और वयस्क महिलाओं को प्रजनन के लिए एक रक्त भोजन की आवश्यकता होती है। लार्वाल टॉल्स अपने होस्ट को 3 से 5 दिनों के लिए होस्ट करते हैं, जब पूरी तरह से निगेटिव होने पर मेजबान को खिलाने और छोड़ना पड़ता है। कई अलग-अलग मेजबानों पर निर्भरता और प्रयोग के लिए लंबे समय से लगाव के समय प्रयोगशाला सेटिंग में टिक टिकने की जटिलता है। हालांकि, टिक जीव विज्ञान और टिक-रोगजन्य क्रियाकलापों को समझने के लिए, स्वस्थ, प्रयोगशाला-पौधों का उत्पादन करना आवश्यक है। यहां, हम चूहों पर अपरिवर्तनीय टिक फीडिंग के लिए एक सरल, लागत प्रभावी प्रोटोकॉल का प्रदर्शन करते हैं। हमने चूहों पर तनाव कम करने के लिए मौजूदा प्रोटोकॉल को संशोधित किया है और टिक्स के संपर्क से बचने के लिए जाल के बिना डिस्पोजेबल पिंजरों का उपयोग करके टिक फीडिंग सफलता और अस्तित्व में वृद्धि की है।चूहों मूत्र और मल के साथ दूषित पानी

हमने वर्तमान टिक टिकने वाले प्रोटोकॉल 6 , 10 में बेहतर खिला क्षमता और माउस होस्ट पर तनाव को कम करने के लिए संशोधित किया है। परिणाम दर्शाते हैं कि मानक जूता शैली शैली माउ?...

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Rearing Ixodes scapularis, the Black-legged Tick: Feeding Immature Stages on Mice

स्वास्थ्य संबंधी प्रयोगशाला-पौधों की टिक टिक का उत्पादन, टिक जीव विज्ञान पर अध्ययन के लिए आवश्यक है, और टिक-रोगजनन क्रियाएँ यहां हम अपरिपक्व टिक फीडिंग के लिए एक सरल प्रोटोकॉल प्रदर्शित करते हैं जो कि चूहों के लिए लागत प्रभावी और कम तनावपूर्ण है।

पालन<em&gt; Ixodes scapularis,</em&gt; ब्लैक टॉग्ड टिक: चूहों पर अपरिपक्व चरणों को खिलाना

Ixodes scapularis, the vector of Lyme disease, is one of the most important disease vectors in the eastern and Midwestern United States. This species is a ...

The overall goal of this tick-feeding protocol is to improve the existing standards by increasing the survival of blood-fed ticks, while reducing the stress to the rodent host. In addition to simplifying tick colony rearing, this method provides an easier way of collecting number of blood-fed ticks in a single collection day, which is essential to answer key biological questions in macrobiology fields. The main advantage of this technique is that ticks are not exposed to water containing mouse excreta, thereby reducing tick mortality.In addition, ticks can be collected on a single day, and this reduces stress to the mouse. To house tick vials for counting, make a container that allows minimal escape. Stick double-sided tape all around the top edges of a plastic container.Then, fill the container with about two centimeters of water. Next, place another small box or dish centrally in the container, and fill it with about one centimeter of water, so it sinks and stays in position. Store vials of tick larvae or nymphs inside this box or dish.To count the ticks for an infestation, use a microscope and a fine paintbrush to remove larvae or nymphs from the vial. Transfer 50 larvae or 25 nymphs to a scintillation vial. As soon as a vial is fully loaded, cover it with nylon mesh or organdy cloth screen, and secure the cover with tight rubber bands.Designate a separate room to house mice infested with ticks. To prevent accidental tick escape, place a sticky mat or double-sided carpet tape outside the room, and place another mat inside the door of the room. First, prepare an area to handle the ticks near the mice.Use a white or light-colored workbench. Make a border of double-sided tape around the perimeter of the work area on the bench. Now, anesthetize a mouse with isoflurane.When ready, transfer the mouse to a heating pad covered with paper towels, and attach a nose cone to deliver isoflurane continuously. Check the level of anesthesia using a toe pinch. Adjust the anesthetic based on the breathing pattern.80 to 230 breaths per minute is normal. Reduce the isoflurane if the breathing is slower. Also, apply a petroleum-jelly-based ophthalmic ointment to the eyes.Now, take one vial of 50 larvae or 25 nymphs and, using a paintbrush, transfer the ticks to the mouse. Place the ticks under the fur on the head between the ears. After placing the last tick, keep the mouse anesthetized for 20 minutes, so the ticks can attach before the mouse tries to remove them.After 20 minutes, return the mouse to a new home cage with white bedding for improved tick visibility. Include some toys and provide ad lib access to water and food. Use disposable boxes with tight-fitting lids.Next, place the home cage within a larger rat or gerbil cage that has double-sided sticky tape around the upper internal edge of the walls. Then, fill the space between the cages with about three centimeters of water. Immature ticks will detach after three to six days of feeding.From day three and onward, check the cages and the surrounding water for engorged ticks on a daily basis. Collect the detached ticks using a paintbrush or soft forceps, and transfer them to clean scintillation vials capped with nylon mesh cloths secured with rubber bands. On day seven, anesthetize the mouse as before, and check for any remaining attached ticks.Also, thoroughly check the bedding, the food trough and the water. Then, euthanize the mouse and autoclave the disposable cages, bedding, water bottle and food trough to eliminate any remaining ticks. House the engorged ticks in a controlled incubator.Within 12 to 18 weeks, the ticks should molt. At least once a week, check the ticks under the microscope for mold. If any mold is detected, wash the surviving ticks with 70%ethanol for five minutes.Then, rinse the survivors in water and transfer them to a filter paper to dry. Once clean and dry, transfer the ticks to new, clean vials, and continue their life cycle. Most ticks climbed up the walls of the containers after feeding, and were easy to collect.Ticks rarely escaped the mouse cages. The white bedding provided a good contrast to detect fed ticks. During collections, most ticks detached by day four.A few waited until day five to release, and by day seven, no mouse was carrying any ticks. About 2/3 of ticks were able to attach and feed to engorgement. The mice all remained healthy and did not show any signs of discomfort.Once mastered, this method can provide hundreds of blood-fed ticks in a single collection day. While performing this procedure, it's important to remember to wear full PPE to prevent accidental tick attachment.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Rearing Ixodes scapularis, the Black-legged Tick: Feeding Immature Stages on Mice

Methods for Rapid Transfer and Localization of Lyme Disease Pathogens Within the Tick Gut

रैपिड और टिक आंत के भीतर Lyme रोग रोगज़नक़ों के स्थानीयकरण के हस्तांतरण के लिए तरीके

Lyme disease is caused by infection with the spirochete pathogen Borrelia burgdorferi, which is maintained in nature by a tick-rodent infection cycle 1.  ...

Saliva, Salivary Gland, and Hemolymph Collection from Ixodes scapularis Ticks

Saliva, Salivary Gland, and Hemolymph Collection from Ixodes scapularis Ticks

लार लार ग्रंथि, Ixodes Scapularis Ticks से और Hemolymph संग्रह

Ticks are found worldwide and afflict humans with many tick-borne illnesses. Ticks are vectors for pathogens that cause Lyme disease and tick-borne ...

Feeding of Ticks on Animals for Transmission and Xenodiagnosis in Lyme Disease Research

लाइम रोग अनुसंधान में पारेषण और Xenodiagnosis के लिए पशु पर लगे निशान से दूध पिलाने

Transmission of the etiologic agent of Lyme disease, Borrelia burgdorferi, occurs by the  attachment and blood feeding of Ixodes species ticks on ...

Generation of Immature, Mature and Tolerogenic Dendritic Cells with Differing Metabolic Phenotypes

मेटाबोलिक phenotypes भिन्न के साथ अपरिपक्व, परिपक्व और Tolerogenic वृक्ष के समान कोशिकाओं की पीढ़ी

Immune response results from a complex interplay between the antigen non-specific innate immune system and the antigen specific adaptive immune system. ...

Development of a Hepatitis B Virus Reporter System to Monitor the Early Stages of the Replication Cycle

एक हेपेटाइटिस बी वायरस संवाददाता प्रणाली का विकास प्रतिकृति चक्र के प्रारंभिक दौर नजर रखने के लिए

Currently, it is possible to construct recombinant forms of various viruses, such as human immunodeficiency virus 1 (HIV-1) and hepatitis C virus (HCV), ...

Phenotypic Analysis of Rodent Malaria Parasite Asexual and Sexual Blood Stages and Mosquito Stages

Rodent मलेरिया परजीवी अलैंगिक और यौन रक्त चरणों और मच्छर चरणों का फेनोटाइपिक विश्लेषण

Recent advances in genetics and systems biology technologies have promoted our understanding of the biology of malaria parasites on the molecular level. ...

Generating Recombinant Avian Herpesvirus Vectors with CRISPR/Cas9 Gene Editing

सृजन रिकॉमबिनेंट एवियन Herpesvirus वैक्टर with CRISPR/Cas9 जीन संपादन

Herpesvirus of turkeys (HVT) is an ideal viral vector for the generation of recombinant vaccines against a number of avian diseases, such as avian ...

Cigarette Smoke Exposure in Mice using a Whole-Body Inhalation System

एक पूरे शरीर साँस लेना प्रणाली का उपयोग कर चूहों में सिगरेट धुआं जोखिम

Close to 14% of adults in the United States were reported to smoke cigarettes in 2018. The effects of cigarette smoke (CS) on lungs and cardiovascular ...

Feeding and Quantifying Animal-Derived Blood and Artificial Meals in Aedes aegypti Mosquitoes

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एडीज एजिप्टी मच्छरों में पशु-व्युत्पन्न रक्त और कृत्रिम भोजन को खिलाना और मात्रा निर्धारित करना

Females of certain mosquito species can spread diseases while biting vertebrate hosts to obtain protein-rich blood meals required for egg development. In ...

Standard Membrane Feeding Assay for the Detection of Plasmodium falciparum Infection in Anopheles Mosquito Vectors

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एनोफिलीज मच्छर वैक्टर में प्लाज्मोडियम फाल्सीपेरम संक्रमण का पता लगाने के लिए मानक झिल्ली खिला परख

Malaria remains one of the most devastating diseases worldwide and, to date, the African region is still responsible for 94% of all cases worldwide. This ...