Name: rearing ixodes scapularis, the black-legged tick: feeding immature stages on mice
Uploaded: 2017-05-08T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Rearing Ixodes scapularis, the Black-legged Tick: Feeding Immature Stages on Mice at JoVE.com

The authors acknowledge the help from the staff of Laboratory Animal Medicine, University of Nevada, Reno. MM received funding from Nevada INBRE.

Protokollen (Nummer-00682) som er skissert nedenfor, er godkjent av Institutt for dyrepleie og brukskomité (IACUC) ved University of Nevada Reno, og følger retningslinjene fra University of Nevada, Renos dyreforskningsetikkkomité. Kort fortalt ble musene bedøvet med isofluran og en nesekegle ble brukt for å opprettholde kontinuerlige isoflurannivåer i 20 minutter. En veterinærsalve ble brukt for å forhindre tørking av øynene under anestesi. Tånpinne ble brukt til å fastslå anestesienivået og pustehastighet...

<ol>
	<li>Gleim, E. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Factors+associated+with+tick+bites+and+pathogen+prevalence+in+ticks+parasitizing+humans+in+Georgia,+USA.">Factors associated with tick bites and pathogen prevalence in ticks parasitizing humans in Georgia, USA.</a> Parasites &amp;amp; Vectors. 9 (125), 1-13 (2016).</li><li>Krober, T., Guerin, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vitro+feeding+assays+for+hard+ticks.">In vitro feeding assays for hard ticks.</a> Trends Parasitol. 23 (9), 445-449 (2007).</li><li>Kuhnert, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Feeding+of+Hard+Ticks+In+Vitro:+New+Perspectives+for+Rearing+and+for+the+Identification+of+Systemic+Acaricides.">Feeding of Hard Ticks In Vitro: New Perspectives for Rearing and for the Identification of Systemic Acaricides.</a> ALTEX. 13 (2), 76-87 (1996).</li><li>Voigt, W. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vitro+feeding+of+instars+of+the+ixodid+tick+Amblyomma+variegaturn+on+skin+membranes+and+its+application+to+the+transmission+of+Theileria+mutans+and+Cowdria+ruminantium.">In vitro feeding of instars of the ixodid tick Amblyomma variegaturn on skin membranes and its application to the transmission of Theileria mutans and Cowdria ruminantium.</a> Parasitol. 107, 257-263 (1993).</li><li>Gregson, J. D., Smith, C. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ticks.">Ticks.</a> Insect Colonization and Mass Production. , 49-72 (1966).</li><li>Sonenshine, D. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Biology of Ticks. 2, (1993).</li><li>Bouchard, K. R., Wikel, S. K., Marquaedt, W. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Care,+maintenance,+and+experimental+infestation+of+ticks+in+the+laboratory+setting.">Care, maintenance, and experimental infestation of ticks in the laboratory setting.</a> Biology of Disease Vectors. , 705-711 (2005).</li><li>Schumaker, T. S., Barros, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Life+cycle+of+Ornithodoros+(Alectorobius)+talaje.+(Acari:Argasidae)+in+laboratory.">Life cycle of Ornithodoros (Alectorobius) talaje. (Acari:Argasidae) in laboratory.</a> J Med Entomol. 32, 249-254 (1995).</li><li>Banks, C. W., Oliver, J. H., Hopla, C. E., Dotson, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Laboratory+life+cycle+of+Ixodes+woodi+(Acari:Ixodidae).">Laboratory life cycle of Ixodes woodi (Acari:Ixodidae).</a> J. Med. Entomol. 35, 177-179 (1998).</li><li>James, A. M., Oliver, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Feeding+and+host+preference+of+immature+Ixodes+dammini,I.scapularis,and+I.pacificus.(Acari:Ixodidae).">Feeding and host preference of immature Ixodes dammini,I.scapularis,and I.pacificus.(Acari:Ixodidae).</a> J. Med. Entomol. 27, 324-330 (1990).</li></ol>

Kritiske trinn i protokollen Det er viktig å ha flere nivåer av sikkerhetstiltak når oppdragelse flått å unngå utilsiktet flukt. Bruk av tape og en vannvollgrav er avgjørende for å ivareta sikkerheten. Det er viktig å holde en bedøvet mus på en varmepute for å holde kroppstemperaturen konstant. Vi fant også at å barbere musa ikke gir noen ekstra fordel for tick vedlegg. En person mus kan holdes i samme bur for en uke i et utpekt &quot;tick rom&quot; som ytterligere begrenser konta...

Ticks er obligatorisk hematofag ectoparasites av vertebrater og distribueres over hele verden. I USA er minst 11 arter av flått vektorer av patogener av folkehelsemessig betydning 1 . Ixodes scapularis er ansvarlig for overføring av flere patogener, som forårsaker av Lyme sykdom ( Borrelia burgdorferi ) relapsing feber ( B. miyamotoi), human granulocytisk anaplasmosis ( Anaplasma phagocytophilum ) og babesiosis (Babesia spp.). Til tross for viktigheten av I. scapularis som en sykdomsvektor, er det ikke alltid mulig å samle disse arachnider i overflod fra naturen til studier i laboratoriet. Derfor er produksjon av friske laboratorieoppdrett flått nødvendig for studier av fekbiologi og kryss-patogen-interaksjoner. Livssyklusen til alle harde flått (familie Ixodidae), inkludert I. scapularis, består av egget og tre aktivaE stadier: larver, nymf og voksen. Hver aktiv fase fôrer på en vertebrat vert. De komplekse interaksjonene som foregår mellom flått og verter over flere dager med vedlegg og fôring er nesten umulig å replikere ved hjelp av kunstige matere, og er usannsynlig å gi nok antall matte flått til massestall 2 , 3 , 4 . Derfor brukes levende mus og kaniner hyppigst som verter for oppdrett av umodne (larver og nymfer), og modne stadier (voksne) av flått, henholdsvis. Kravet på flere verter for blodfôring under hvert utviklingsstadium kompliserer kryssoppdrett, og er tid og kostnadskrevende 5 , 6 , 7 . De fleste kryssopdriftsprotokoller krever at musene holdes i et hengslet kabinett 7 , 8 eller i sylindrisk ca.Ge av slike dimensjoner at dyret ikke kan bevege seg fritt og gifte seg selv 6 , 9 , 10 . Disse sylindriske burene overføres senere til en skoboksbur med et nettgitter. Engorged, frittliggende flått blir deretter samlet fra vannet under. Imidlertid resulterer denne metoden i å utsette matte flått til vann forurenset med urin og avføring som kan øke soppvekst og kryssdødelighet 9 . I tillegg øker det muligheten for tippflukt fra vannet, samt forårsaker stress til mus. For å omgå disse problemene demonstrerer vi her larvkryssfôring på mus i engangsskobber av plastskoboks. Denne metoden tillater normal oppførsel av mus, øker engorged tick recovery, og reduserer tick mortality på grunn av forurensning.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="865">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Puralube vet ointment</td>
			<td style="width:207px;">Amazon</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:323px;">Available from any Pet store or online store</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Disposable mouse cage</td>
			<td>&#160;Innovive, San Diego, CA&#160;</td>
			<td>MV 2</td>
			<td>Set of bottom and lid</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">White Alpha dri bedding&#160;</td>
			<td>Lab Supply, Fort Worth, TX</td>
			<td>&#160;ALPHA-Dri&#8482;</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

rearing ixodes scapularis, the black-legged tick: feeding immature stages on mice

Ixodes scapularis , vektoren av Lyme sykdom, er en av de viktigste sykdomsvektorer i øst og Midtvesten. Denne arten er en tre vert tick som krever et blod måltid fra en vertebrate vert for hvert utviklingsstadium, og de voksne kvinnene krever et blod måltid for reproduksjon. Larval flått festes til verten i 3 - 5 dager for fôring og slipp av verten når den er fullstendig engorged. Denne avhengigheten av flere forskjellige verter og den lange vedleggstiden for engorgement kompliserer tikkeoppdrett i laboratorieinnstillingen. For å forstå kryssbiologi og kryss-patogen-interaksjoner er imidlertid produksjon av sunne, laboratorieoppdrett flått nødvendig. Her demonstrerer vi en enkel, kostnadseffektiv protokoll for umodne kryssfôring på mus. Vi endret de eksisterende protokollene for redusert stress på mus og økt fiksing av fôringssuksess og overlevelse ved bruk av engangsbur uten maskebunn for å unngå kontakt med flått with vann som er forurenset med mus urin og avføring.

Vi har endret eksisterende tick-oppsamlingsprotokoller 6 , 10 for bedre fôringseffektivitet og redusert stress på musens vert. Resultatene viser at standardmuseet med buksestangsmuseet er godt egnet for tyrking. Det hvite sengetøy ga en god kontrast for enkel samling av matte flått. De fleste flåttene klatret opp veggene av beholderne etter fôring og var lett å samle. I tillegg forhindret det tettmonterte dekselet til de e...

Watch this Scientific Journal Video about Rearing Ixodes scapularis, the Black-legged Tick: Feeding Immature Stages on Mice at JoVE.com

Rearing Ixodes scapularis, the Black-legged Tick: Feeding Immature Stages on Mice

Produksjonen av sunne laboratorie oppdratt flått er viktig å studier på kryss biologi, og kryss-patogen interaksjoner. Her viser vi en enkel protokoll for umoden tick fôring som er kostnadseffektivt og mindre stressende for mus.

oppdragelse<em&gt; Ixodes scapularis,</em&gt; The Black-legged Tick: Feeding Immature Stages på Mus

Ixodes scapularis, the vector of Lyme disease, is one of the most important disease vectors in the eastern and Midwestern United States. This species is a ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Rearing Ixodes scapularis, the Black-legged Tick: Feeding Immature Stages on Mice

An Orthotopic Model of Serous Ovarian Cancer in Immunocompetent Mice for in vivo Tumor Imaging and Monitoring of Tumor Immune Responses

An Orthotopic Model of Serous Ovarian Cancer in Immunocompetent Mice for in vivo Tumor Imaging and Monitoring of Tumor Immune Responses

Background: Ovarian cancer is generally diagnosed at an advanced stage where the case/fatality ratio is high and thus remains the most lethal of all ...

Methods for Rapid Transfer and Localization of Lyme Disease Pathogens Within the Tick Gut

Lyme disease is caused by infection with the spirochete pathogen Borrelia burgdorferi, which is maintained in nature by a tick-rodent infection cycle 1.  ...

Saliva, Salivary Gland, and Hemolymph Collection from Ixodes scapularis Ticks

Saliva, Salivary Gland, and Hemolymph Collection from Ixodes scapularis Ticks

Spytt, spyttkjertel, og Hemolymph Collection fra Ixodes Scapularis Flått

Ticks are found worldwide and afflict humans with many tick-borne illnesses. Ticks are vectors for pathogens that cause Lyme disease and tick-borne ...

Feeding of Ticks on Animals for Transmission and Xenodiagnosis in Lyme Disease Research

Transmission of the etiologic agent of Lyme disease, Borrelia burgdorferi, occurs by the  attachment and blood feeding of Ixodes species ticks on ...

Measuring Local Anaphylaxis in Mice

Måle Lokale anafylaksi i Mus

Allergic responses are the result of the activation of mast cells and basophils, and the subsequent release of vasoactive and proinflammatory mediators. ...

Generation of Immature, Mature and Tolerogenic Dendritic Cells with Differing Metabolic Phenotypes

Generering av umoden, moden og tolerogene dendrittiske celler med ulik Metabolsk fenotyper

Immune response results from a complex interplay between the antigen non-specific innate immune system and the antigen specific adaptive immune system. ...

Development of a Hepatitis B Virus Reporter System to Monitor the Early Stages of the Replication Cycle

Utvikling av en hepatitt B virus Reporter system for å overvåke tidlige stadier av Replication Cycle

Currently, it is possible to construct recombinant forms of various viruses, such as human immunodeficiency virus 1 (HIV-1) and hepatitis C virus (HCV), ...

Fluorescence-based Neuraminidase Inhibition Assay to Assess the Susceptibility of Influenza Viruses to The Neuraminidase Inhibitor Class of Antivirals

Fluorescens-baserte Neuraminidase inhiberingsanalyse for å vurdere i hvilken grad influensavirus til neuraminidase Inhibitor Class of Antivirale

The neuraminidase (NA) inhibitors are the only class of antivirals approved for the treatment and prophylaxis of influenza that are effective against ...

Phenotypic Analysis of Rodent Malaria Parasite Asexual and Sexual Blood Stages and Mosquito Stages

Fenotypiske analyse av gnager malaria parasitt aseksuell og seksuelle blodprøver og Mosquito stadier

Recent advances in genetics and systems biology technologies have promoted our understanding of the biology of malaria parasites on the molecular level. ...