Name: rearing ixodes scapularis, the black-legged tick: feeding immature stages on mice
Uploaded: 2017-05-08T13:00:00
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The authors acknowledge the help from the staff of Laboratory Animal Medicine, University of Nevada, Reno. MM received funding from Nevada INBRE.

El protocolo (Número-00682) se describe a continuación es aprobado por el Comité Institucional de Cuidado y Uso de Animales (IACUC) de la Universidad de Nevada, Reno y sigue las directrices de la Universidad de Nevada, animal comité de ética de investigación de Reno. Brevemente, los ratones fueron anestesiados con isoflurano y se utilizó un cono de la nariz para mantener los niveles de isoflurano continuas durante 20 min. Un ungüento veterinario se utilizó para evitar el secado de los ojos bajo anestesia. pelli...

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	<li>Gleim, E. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Factors+associated+with+tick+bites+and+pathogen+prevalence+in+ticks+parasitizing+humans+in+Georgia,+USA.">Factors associated with tick bites and pathogen prevalence in ticks parasitizing humans in Georgia, USA.</a> Parasites &amp;amp; Vectors. 9 (125), 1-13 (2016).</li><li>Krober, T., Guerin, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vitro+feeding+assays+for+hard+ticks.">In vitro feeding assays for hard ticks.</a> Trends Parasitol. 23 (9), 445-449 (2007).</li><li>Kuhnert, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Feeding+of+Hard+Ticks+In+Vitro:+New+Perspectives+for+Rearing+and+for+the+Identification+of+Systemic+Acaricides.">Feeding of Hard Ticks In Vitro: New Perspectives for Rearing and for the Identification of Systemic Acaricides.</a> ALTEX. 13 (2), 76-87 (1996).</li><li>Voigt, W. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vitro+feeding+of+instars+of+the+ixodid+tick+Amblyomma+variegaturn+on+skin+membranes+and+its+application+to+the+transmission+of+Theileria+mutans+and+Cowdria+ruminantium.">In vitro feeding of instars of the ixodid tick Amblyomma variegaturn on skin membranes and its application to the transmission of Theileria mutans and Cowdria ruminantium.</a> Parasitol. 107, 257-263 (1993).</li><li>Gregson, J. D., Smith, C. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ticks.">Ticks.</a> Insect Colonization and Mass Production. , 49-72 (1966).</li><li>Sonenshine, D. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Biology of Ticks. 2, (1993).</li><li>Bouchard, K. R., Wikel, S. K., Marquaedt, W. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Care,+maintenance,+and+experimental+infestation+of+ticks+in+the+laboratory+setting.">Care, maintenance, and experimental infestation of ticks in the laboratory setting.</a> Biology of Disease Vectors. , 705-711 (2005).</li><li>Schumaker, T. S., Barros, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Life+cycle+of+Ornithodoros+(Alectorobius)+talaje.+(Acari:Argasidae)+in+laboratory.">Life cycle of Ornithodoros (Alectorobius) talaje. (Acari:Argasidae) in laboratory.</a> J Med Entomol. 32, 249-254 (1995).</li><li>Banks, C. W., Oliver, J. H., Hopla, C. E., Dotson, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Laboratory+life+cycle+of+Ixodes+woodi+(Acari:Ixodidae).">Laboratory life cycle of Ixodes woodi (Acari:Ixodidae).</a> J. Med. Entomol. 35, 177-179 (1998).</li><li>James, A. M., Oliver, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Feeding+and+host+preference+of+immature+Ixodes+dammini,I.scapularis,and+I.pacificus.(Acari:Ixodidae).">Feeding and host preference of immature Ixodes dammini,I.scapularis,and I.pacificus.(Acari:Ixodidae).</a> J. Med. Entomol. 27, 324-330 (1990).</li></ol>

Los pasos críticos dentro del Protocolo Es importante tener varios niveles de medidas de seguridad cuando la crianza de garrapatas para evitar el escape accidental. El uso de cinta adhesiva y un foso de agua son fundamentales para garantizar la seguridad. Es importante mantener el ratón anestesiado en una almohadilla de calefacción para mantener constante la temperatura del cuerpo. También se encontró que afeitarse el ratón no proporciona ningún beneficio adicional para la fijación de l...

Las garrapatas son ectoparásitos hematófagos obligados de los vertebrados y se distribuyen en todo el mundo. En los Estados Unidos, al menos 11 especies de garrapatas son vectores de patógenos de importancia para la salud pública 1. Ixodes scapularis es responsable de la transmisión de varios patógenos tales como los agentes causantes de la enfermedad de Lyme (Borrelia burgdorferi) fiebre recurrente (B. miyamotoi), anaplasmosis granulocítica humana (Anaplasma phagocytophilum), y babesiosis (Babesia spp.). A pesar de la importancia de I. scapularis como vector de la enfermedad, la recogida de estos arácnidos en abundancia en la naturaleza para los estudios en el laboratorio no siempre es factible. Por lo tanto, la producción de garrapatas sanos criados en el laboratorio es esencial para los estudios sobre la biología de la señal, y de la señal de patógenos interacciones. El ciclo vital de todas las garrapatas duras (Ixodidae) de la familia, incluyendo I. scapularis, consiste en el huevo y tres activetapas e: larva, ninfa y adulto. Cada etapa activa se alimenta de un huésped vertebrado. Las complejas interacciones que tienen lugar entre las garrapatas y sus anfitriones lo largo de varios días de fijación y la alimentación son casi imposibles de replicar usando alimentadores artificiales, y es improbable que proporcionar suficientes números de Fed garrapatas para la cría masiva de 2, 3, 4. Por lo tanto, los ratones y conejos vivos son los más usados ​​como anfitriones para la crianza de inmaduros (larvas y ninfas), y etapas maduras (adultos) de las garrapatas, respectivamente. El requisito de múltiples hosts para la alimentación de sangre durante cada etapa de desarrollo complica la cría de garrapata, y es el tiempo y el coste intensivo de 5, 6, 7. La mayoría de los protocolos de garrapatas cría requieren mantenimiento de los ratones en una jaula de alambre suelo de rejilla suspendido 7, 8 o en una ca cilíndricaGe de tales dimensiones que el animal no puede moverse libremente y prepararse 6 , 9 , 10 . Estas jaulas cilíndricas se transfieren posteriormente a una jaula de caja de zapatos con una rejilla de alambre. Las garrapatas engorged, separadas se recogen entonces del agua debajo. Sin embargo, este método resulta en la exposición de las garrapatas alimentadas a agua contaminada con orina y heces que pueden aumentar el crecimiento de hongos y la mortalidad de garrapatas 9 . Además, aumenta la posibilidad de escape de garrapata de la depresión de agua, así como causar estrés a los ratones. Para eludir estos problemas, aquí se demuestra la alimentación de garrapatas de larvas en ratones dentro de jaulas desechables de tipo caja de zapatos de plástico. Este método permite el comportamiento normal de los ratones, aumenta la recuperación de garrapatas engorged, y disminuye la mortalidad de garrapatas debido a la contaminación.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="865">
	<tbody>
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		</tr>
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		</tr>
	</tbody>
</table>

rearing ixodes scapularis, the black-legged tick: feeding immature stages on mice

Ixodes scapularis , el vector de la enfermedad de Lyme, es uno de los más importantes vectores de enfermedades en el este y el medio oeste de los Estados Unidos. Esta especie es una garrapata de tres huéspedes que requiere una comida de sangre de un huésped vertebrado para cada etapa de desarrollo, y las hembras adultas requieren una comida de sangre para su reproducción. Las garrapatas larvales se unen a su huésped durante 3 - 5 días para la alimentación y dejar al huésped cuando están completamente hinchadas. Esta dependencia de varios huéspedes diferentes y el largo tiempo de fijación para el engorgamiento complica la elevación de las garrapatas en el laboratorio. Sin embargo, para entender la biología de la garrapata y las interacciones de la garrapata-patógeno, la producción de garrapatas sanas, criadas en laboratorio es esencial. Aquí, demostramos un sencillo, costo-efectiva protocolo para inmaduros tick alimentación en ratones. Se modificaron los protocolos existentes para disminuir el estrés en los ratones y el aumento del éxito de la alimentación de garrapatas y la supervivencia mediante el uso de jaulas desechables sin fondo de malla para evitar el contacto de garrapatas wiAgua contaminada con orina y heces de ratones.

Hemos modificado los protocolos de cría de garrapatas existentes 6, 10 para mejorar la eficiencia de la alimentación y la reducción del estrés en el host del ratón. Los resultados demuestran que las jaulas de ratón estándar estilo caja de zapatos son muy adecuados para la cría de garrapata. La ropa de cama blanca proporciona un buen contraste para facilitar la recogida de las garrapatas alimentadas. La mayoría de las gar...

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Rearing Ixodes scapularis, the Black-legged Tick: Feeding Immature Stages on Mice

La producción de garrapatas sanos criados en el laboratorio es esencial para los estudios sobre la biología de la señal, y de la señal de patógenos interacciones. Aquí se demuestra un protocolo sencillo para la alimentación de la garrapata inmadura que es rentable y menos estresante para ratones.

La cría<em&gt; Ixodes scapularis,</em&gt; La garrapata de patas Negro: La alimentación de los estados inmaduros de ratones

Ixodes scapularis, the vector of Lyme disease, is one of the most important disease vectors in the eastern and Midwestern United States. This species is a ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Rearing Ixodes scapularis, the Black-legged Tick: Feeding Immature Stages on Mice

An Orthotopic Model of Serous Ovarian Cancer in Immunocompetent Mice for in vivo Tumor Imaging and Monitoring of Tumor Immune Responses

An Orthotopic Model of Serous Ovarian Cancer in Immunocompetent Mice for in vivo Tumor Imaging and Monitoring of Tumor Immune Responses

Un modelo ortotópico de cáncer de ovario seroso en ratones inmunocompetentes para In vivo Imágenes y seguimiento de tumores de las respuestas inmunitarias del tumor

Background: Ovarian cancer is generally diagnosed at an advanced stage where the case/fatality ratio is high and thus remains the most lethal of all ...

Investigación

Inmunología e Infección

Methods for Rapid Transfer and Localization of Lyme Disease Pathogens Within the Tick Gut

Métodos para la transferencia rápida y localización de la enfermedad de Lyme patógenos en el intestino garrapatas

Lyme disease is caused by infection with the spirochete pathogen Borrelia burgdorferi, which is maintained in nature by a tick-rodent infection cycle 1.  ...

Saliva, Salivary Gland, and Hemolymph Collection from Ixodes scapularis Ticks

Saliva, Salivary Gland, and Hemolymph Collection from Ixodes scapularis Ticks

La saliva, la glándula salival, y la Colección hemolinfa de las garrapatas Ixodes scapularis

Ticks are found worldwide and afflict humans with many tick-borne illnesses. Ticks are vectors for pathogens that cause Lyme disease and tick-borne ...

Feeding of Ticks on Animals for Transmission and Xenodiagnosis in Lyme Disease Research

La alimentación de las garrapatas de los animales para Transmisión y xenodiagnóstico en Lyme Investigación de Enfermedades

Transmission of the etiologic agent of Lyme disease, Borrelia burgdorferi, occurs by the  attachment and blood feeding of Ixodes species ticks on ...

Measuring Local Anaphylaxis in Mice

Medición anafilaxia local en ratones

Allergic responses are the result of the activation of mast cells and basophils, and the subsequent release of vasoactive and proinflammatory mediators. ...

Generation of Immature, Mature and Tolerogenic Dendritic Cells with Differing Metabolic Phenotypes

Generación de inmaduras, maduras y tolerogénico células dendríticas con diferentes fenotipos metabólico

Immune response results from a complex interplay between the antigen non-specific innate immune system and the antigen specific adaptive immune system. ...

Development of a Hepatitis B Virus Reporter System to Monitor the Early Stages of the Replication Cycle

Desarrollo de un sistema reportero virus de la hepatitis B para supervisar las primeras etapas del ciclo de replicación

Currently, it is possible to construct recombinant forms of various viruses, such as human immunodeficiency virus 1 (HIV-1) and hepatitis C virus (HCV), ...

Fluorescence-based Neuraminidase Inhibition Assay to Assess the Susceptibility of Influenza Viruses to The Neuraminidase Inhibitor Class of Antivirals

La neuraminidasa Ensayo de inhibición basado en la fluorescencia para evaluar la susceptibilidad de los virus de la influenza a El Inhibidor de la neuraminidasa clase de antivirales

The neuraminidase (NA) inhibitors are the only class of antivirals approved for the treatment and prophylaxis of influenza that are effective against ...

Phenotypic Analysis of Rodent Malaria Parasite Asexual and Sexual Blood Stages and Mosquito Stages

Análisis fenotípico de las etapas de la sangre asexual y sexual del parásito de la malaria de los roedores y las etapas de los mosquitos

Recent advances in genetics and systems biology technologies have promoted our understanding of the biology of malaria parasites on the molecular level. ...