Name: rearing ixodes scapularis, the black-legged tick: feeding immature stages on mice
Uploaded: 2017-05-08T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Rearing Ixodes scapularis, the Black-legged Tick: Feeding Immature Stages on Mice at JoVE.com

The authors acknowledge the help from the staff of Laboratory Animal Medicine, University of Nevada, Reno. MM received funding from Nevada INBRE.

Protokollet (Number-00.682) beskrivs nedan har godkänts av Institutional Animal Care och användning kommittén (IACUC) vid University of Nevada Reno och följer riktlinjerna i University of Nevada, Reno djurforskningsetiska kommittén. I korthet, sövdes mössen med isofluran och en noskon användes för att upprätthålla kontinuerliga isofluran nivåer för 20 min. En veterinär salva användes för att förhindra uttorkning av ögon under anestesi. Tå nypa användes för att fastställa anestesinivå och andning m...

<ol>
	<li>Gleim, E. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Factors+associated+with+tick+bites+and+pathogen+prevalence+in+ticks+parasitizing+humans+in+Georgia,+USA.">Factors associated with tick bites and pathogen prevalence in ticks parasitizing humans in Georgia, USA.</a> Parasites &amp;amp; Vectors. 9 (125), 1-13 (2016).</li><li>Krober, T., Guerin, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vitro+feeding+assays+for+hard+ticks.">In vitro feeding assays for hard ticks.</a> Trends Parasitol. 23 (9), 445-449 (2007).</li><li>Kuhnert, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Feeding+of+Hard+Ticks+In+Vitro:+New+Perspectives+for+Rearing+and+for+the+Identification+of+Systemic+Acaricides.">Feeding of Hard Ticks In Vitro: New Perspectives for Rearing and for the Identification of Systemic Acaricides.</a> ALTEX. 13 (2), 76-87 (1996).</li><li>Voigt, W. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vitro+feeding+of+instars+of+the+ixodid+tick+Amblyomma+variegaturn+on+skin+membranes+and+its+application+to+the+transmission+of+Theileria+mutans+and+Cowdria+ruminantium.">In vitro feeding of instars of the ixodid tick Amblyomma variegaturn on skin membranes and its application to the transmission of Theileria mutans and Cowdria ruminantium.</a> Parasitol. 107, 257-263 (1993).</li><li>Gregson, J. D., Smith, C. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ticks.">Ticks.</a> Insect Colonization and Mass Production. , 49-72 (1966).</li><li>Sonenshine, D. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Biology of Ticks. 2, (1993).</li><li>Bouchard, K. R., Wikel, S. K., Marquaedt, W. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Care,+maintenance,+and+experimental+infestation+of+ticks+in+the+laboratory+setting.">Care, maintenance, and experimental infestation of ticks in the laboratory setting.</a> Biology of Disease Vectors. , 705-711 (2005).</li><li>Schumaker, T. S., Barros, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Life+cycle+of+Ornithodoros+(Alectorobius)+talaje.+(Acari:Argasidae)+in+laboratory.">Life cycle of Ornithodoros (Alectorobius) talaje. (Acari:Argasidae) in laboratory.</a> J Med Entomol. 32, 249-254 (1995).</li><li>Banks, C. W., Oliver, J. H., Hopla, C. E., Dotson, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Laboratory+life+cycle+of+Ixodes+woodi+(Acari:Ixodidae).">Laboratory life cycle of Ixodes woodi (Acari:Ixodidae).</a> J. Med. Entomol. 35, 177-179 (1998).</li><li>James, A. M., Oliver, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Feeding+and+host+preference+of+immature+Ixodes+dammini,I.scapularis,and+I.pacificus.(Acari:Ixodidae).">Feeding and host preference of immature Ixodes dammini,I.scapularis,and I.pacificus.(Acari:Ixodidae).</a> J. Med. Entomol. 27, 324-330 (1990).</li></ol>

Kritiska steg i protokollet Det är viktigt att ha flera nivåer av säkerhetsåtgärder när uppfödning fästingar för att undvika oavsiktlig fly. Användning av tejp och en vatten vallgrav är avgörande för att garantera säkerheten. Det är viktigt att hålla den sövda musen på en värmedyna för att hålla kroppstemperaturen konstant. Vi fann också att raka musen inte ger någon extra fördel för fästingvidhäftning. En enskild mus kan hållas i samma bur under en vecka i en utsedd...

Fästingar är obligatoriska hematofagliga ektoparasiter hos ryggradsdjur och distribueras över hela världen. I Förenta staterna är minst 11 arter av fästingar vektorer av patogener av folkhälsoproblem 1 . Ixodes scapularis är ansvarig för överföringen av flera patogener, såsom orsakssambanden till Lyme- sjukdomen ( Borrelia burgdorferi ) relapsing fever ( B. miyamotoi), human granulocytisk anaplasmos ( Anaplasma phagocytophilum ) och babesiosis (Babesia spp.). Trots vikten av I. scapularis som en sjukdomsvektor är det inte alltid möjligt att samla dessa araknider i överflöd från vilda för studier i laboratoriet. Därför är produktionen av friska laboratorieuppfödda fästingar avgörande för studier av fästbiologi och tick-patogen interaktioner. Livscykeln för alla hårda fästingar (familjen Ixodidae), inklusive I. scapularis, består av ägget och tre aktivaE-steg: larva, nymf och vuxen. Varje aktivt stadium matar på en vertebrat värd. De komplexa interaktioner som äger rum mellan fästingar och deras värdar under flera dagar av fästning och utfodring är nästan omöjliga att replikera med hjälp av artificiella matare, och det är osannolikt att de ger tillräckligt med fodrade fästingar för massuppfödning 2 , 3 , 4 . Därför används levande möss och kaniner oftast som värdar för odling av omogna (larver och nymfer), och mogna steg (vuxna) av fästingar. Kravet på flera värdar för blodfodring under varje utvecklingsstadium komplicerar fältuppfödning och är tid och kostnadskrävande 5 , 6 , 7 . De flesta fästuppfödningsprotokoll kräver att musen hålls i ett golvburen 7 , 8 eller i ett cylindriskt caGe av sådana dimensioner att djuret inte kan röra sig fritt och bruka sig själv 6 , 9 , 10 . Dessa cylindriska burar överförs senare till en skobox med ett trådnät. Engorged, fristående ticks uppsamlas sedan från vattnet under. Emellertid resulterar denna metod i att exponera matade fästingar till vatten förorenat med urin och avföring som kan öka svamptillväxt och fäst mortalitet 9 . Dessutom ökar det möjligheten att tippa fly från vattentraget, samt orsaka spänning på möss. För att kringgå dessa problem demonstrerar vi här larvalkfodring på möss i engångsburar av plast-shoebox-typ. Denna metod möjliggör det normala beteendet hos möss, ökar engorged tick recovery och minskar fäst mortalitet på grund av kontaminering.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="865">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Puralube vet ointment</td>
			<td style="width:207px;">Amazon</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:323px;">Available from any Pet store or online store</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Disposable mouse cage</td>
			<td>&#160;Innovive, San Diego, CA&#160;</td>
			<td>MV 2</td>
			<td>Set of bottom and lid</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">White Alpha dri bedding&#160;</td>
			<td>Lab Supply, Fort Worth, TX</td>
			<td>&#160;ALPHA-Dri&#8482;</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

rearing ixodes scapularis, the black-legged tick: feeding immature stages on mice

Ixodes scapularis, vektorn av borrelia är en av de viktigaste vektorerna i östra och Midwestern USA sjukdomar. Arten är en tre värd fästing som kräver en blodmjöl från ett ryggradsdjur värd för varje utvecklingsfas, och vuxna kvinnor kräver en blodmjöl för reproduktion. Larvfästingar fäster sin värd för 3 - 5 dagar för matning och lämning värd när den är helt svullna. Detta beroende på ett flertal olika värdar och den långa fästtiden för mjölkstockning försvårar tick uppfödning i laboratoriemiljö. Men för att förstå tick biologi och fästing patogen interaktioner är avgörande produktionen av friska, laboratorie uppfödda fästingar. Här visar vi en enkel, kostnadseffektiv protokoll för omogen tick livnär sig på möss. Vi ändrat de befintliga protokoll för minskad stress på möss och ökad tick mata framgång och överlevnad genom att använda engångs burar utan maskbottnar för att undvika kontakt av fästingar wiDet vatten som är förorenat med urin och avföring från möss.

Vi modifierade befintliga fästing uppfödning protokoll 6, 10 för förbättrad matningseffektivitet och minskad stress på musen värd. Resultaten visar att de vanliga skokartong stil mus burar är väl lämpade för tick uppfödning. Den vita sängkläder som en bra kontrast för enkel samling av matade fästingar. De flesta fästingar klättrade uppför väggarna i behållarna efter utfodring och var lätta att samla in. Dess...

Watch this Scientific Journal Video about Rearing Ixodes scapularis, the Black-legged Tick: Feeding Immature Stages on Mice at JoVE.com

Rearing Ixodes scapularis, the Black-legged Tick: Feeding Immature Stages on Mice

Produktionen av friska laboratorieuppfödda fästingar är avgörande för studier av fästbiologi och tick-patogen interaktioner. Här visar vi ett enkelt protokoll för omoglad fekmatning som är kostnadseffektiv och mindre stressfull för möss.

uppfödning<em&gt; Ixodes scapularis,</em&gt; Black-legged Tick: Feeding omogna stadier på möss

Ixodes scapularis, the vector of Lyme disease, is one of the most important disease vectors in the eastern and Midwestern United States. This species is a ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Rearing Ixodes scapularis, the Black-legged Tick: Feeding Immature Stages on Mice

An Orthotopic Model of Serous Ovarian Cancer in Immunocompetent Mice for in vivo Tumor Imaging and Monitoring of Tumor Immune Responses

An Orthotopic Model of Serous Ovarian Cancer in Immunocompetent Mice for in vivo Tumor Imaging and Monitoring of Tumor Immune Responses

En Orthotopic Modell av serös äggstockscancer hos immunkompetenta möss In vivo Bildgivande och övervakning av tumör Immunsvar

Background: Ovarian cancer is generally diagnosed at an advanced stage where the case/fatality ratio is high and thus remains the most lethal of all ...

Methods for Rapid Transfer and Localization of Lyme Disease Pathogens Within the Tick Gut

Metoder för snabb överföring och lokalisering av Borrelia Patogener Inom Tick Gut

Lyme disease is caused by infection with the spirochete pathogen Borrelia burgdorferi, which is maintained in nature by a tick-rodent infection cycle 1.  ...

Saliva, Salivary Gland, and Hemolymph Collection from Ixodes scapularis Ticks

Saliva, Salivary Gland, and Hemolymph Collection from Ixodes scapularis Ticks

Saliv, spottkörtel och hemolymfa Collection från Ixodes scapularis fästingar

Ticks are found worldwide and afflict humans with many tick-borne illnesses. Ticks are vectors for pathogens that cause Lyme disease and tick-borne ...

Feeding of Ticks on Animals for Transmission and Xenodiagnosis in Lyme Disease Research

Utfodring av fästingar på djur för Transmission och Xenodiagnosis i Lyme Disease Research

Transmission of the etiologic agent of Lyme disease, Borrelia burgdorferi, occurs by the  attachment and blood feeding of Ixodes species ticks on ...

Measuring Local Anaphylaxis in Mice

Mätning Lokala Anafylaxi i möss

Allergic responses are the result of the activation of mast cells and basophils, and the subsequent release of vasoactive and proinflammatory mediators. ...

Generation of Immature, Mature and Tolerogenic Dendritic Cells with Differing Metabolic Phenotypes

Generation av omogna, mogna och tolerogena dendritiska celler med olika Metabolic fenotyper

Immune response results from a complex interplay between the antigen non-specific innate immune system and the antigen specific adaptive immune system. ...

Development of a Hepatitis B Virus Reporter System to Monitor the Early Stages of the Replication Cycle

Utveckling av en hepatit B-virus Reporter system för att övervaka de tidiga stadierna av replikationscykeln

Currently, it is possible to construct recombinant forms of various viruses, such as human immunodeficiency virus 1 (HIV-1) and hepatitis C virus (HCV), ...

Fluorescence-based Neuraminidase Inhibition Assay to Assess the Susceptibility of Influenza Viruses to The Neuraminidase Inhibitor Class of Antivirals

Fluorescens-baserade neuraminidas Inhibition analys för att bedöma känsligheten hos influensavirus till The neuraminidashämmaren Class of Virushämmande

The neuraminidase (NA) inhibitors are the only class of antivirals approved for the treatment and prophylaxis of influenza that are effective against ...

Phenotypic Analysis of Rodent Malaria Parasite Asexual and Sexual Blood Stages and Mosquito Stages

Fenotypisk analys av gnagare malaria parasit asexuella och sexuella blod stadier och Myggstadier

Recent advances in genetics and systems biology technologies have promoted our understanding of the biology of malaria parasites on the molecular level. ...