Name: nerve-sparing mid-urethral obstruction (nemo) in female small rodents
Uploaded: 2017-04-25T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Nerve-sparing Mid-urethral Obstruction NeMO in Female Small Rodents at JoVE.com

The work was funded by a CHIR operating grant (DJB).

Følgende forsøgsprotokol blev godkendt af institutionens dyr pleje udvalg. 1. Nemo hos hunrotter <ol><li> Forberedelse <ol><li> Placer en Sprague-Dawley-rotte vejer omkring 200 g til under 3% isoflurananæstesi afvejes dyret, og barbering og desinficere prepubic område 3 gange under anvendelse af en iod kirurgisk krat. </li><li> På en varmepude, tape bagben og hale ned og selvkaterisation blæren med en 20-gauge angiokateter, som også blidt tapede ned for at forhindre...

<ol>
	<li>Andersson, K. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Storage+and+voiding+symptoms:+pathophysiologic+aspects.">Storage and voiding symptoms: pathophysiologic aspects.</a> Urology. 62 (5), 3-10 (2003).</li><li>Boyle, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+prevalence+of+lower+urinary+tract+symptoms+in+men+and+women+in+four+centres.+The+UrEpik+study.">The prevalence of lower urinary tract symptoms in men and women in four centres. The UrEpik study.</a> BJU Int. 92 (4), 409-414 (2003).</li><li>Coyne, K. S., Wein, A., Nicholson, S., Kvasz, M., Chen, C. I., Milsom, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Economic+burden+of+urgency+urinary+incontinence+in+the+United+States:+a+systematic+review.">Economic burden of urgency urinary incontinence in the United States: a systematic review.</a> J Manag Care Pharm. 20 (2), 130-140 (2014).</li><li>Buttyan, R., Chen, M. W., Levin, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+bladder+outlet+obstruction+and+molecular+insights+into+the+basis+for+the+development+of+bladder+dysfunction.">Animal models of bladder outlet obstruction and molecular insights into the basis for the development of bladder dysfunction.</a> Eur. Urol. 32 (Suppl 1), 32-39 (1997).</li><li>Mattiasson, A., Uvelius, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Changes+in+contractile+properties+in+hypertrophic+rat+urinary+bladder.">Changes in contractile properties in hypertrophic rat urinary bladder.</a> J Urol. 128 (6), 1340-1342 (1982).</li><li>Chang, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Alteration+of+the+PKC-mediated+signaling+pathway+for+smooth+muscle+contraction+in+obstruction-induced+hypertrophy+of+the+urinary+bladder.">Alteration of the PKC-mediated signaling pathway for smooth muscle contraction in obstruction-induced hypertrophy of the urinary bladder.</a> Lab Invest. 89 (7), 823-832 (2009).</li><li>Moore, J. A., Brading, A. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+porcine+model+of+bladder+outlet+obstruction+incorporating+radio-telemetered+cystometry.">A porcine model of bladder outlet obstruction incorporating radio-telemetered cystometry.</a> BJU Int. 100 (5), 1192-1193 (2007).</li><li>Beamon, C. R., Mazar, C., Salkini, M. W., Phull, H. S., Comiter, C. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effect+of+sildenafil+citrate+on+bladder+outlet+obstruction:+a+mouse+model.">The effect of sildenafil citrate on bladder outlet obstruction: a mouse model.</a> BJU Inte. 104 (2), 252-256 (2009).</li><li>Pandita, R. K., Fujiwara, M., Alm, P., Andersson, K. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cystometric+evaluation+of+bladder+function+in+non-anesthetized+mice+with+and+without+bladder+outlet+obstruction.">Cystometric evaluation of bladder function in non-anesthetized mice with and without bladder outlet obstruction.</a> J Urol. 164 (4), 1385-1389 (2000).</li><li>Kang, Y. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Early+Sequential+Changes+in+Bladder+Function+after+Partial+Bladder+Outlet+Obstruction+in+Awake+Sprague-Dawley+Rats:+Focus+on+the+Decompensated+Bladder.">Early Sequential Changes in Bladder Function after Partial Bladder Outlet Obstruction in Awake Sprague-Dawley Rats: Focus on the Decompensated Bladder.</a> Korean J Urol. 52 (12), 835-837 (2011).</li><li>Schroeder, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protective+effect+of+an+oral+endothelin+converting+enzyme+inhibitor+on+rat+detrusor+function+after+outlet+obstruction.">Protective effect of an oral endothelin converting enzyme inhibitor on rat detrusor function after outlet obstruction.</a> J Urol. 172 (3), 1171-1174 (2004).</li><li>Sidler, M., Aitken, K., Jiang, J., Bijos, D., B&#228;gli, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term="sometimes+a+sham+is+just+a+sham"+-+why+the+rodent+model+of+partial+bladder+outlet+obstruction+needs+adjustment.">"sometimes a sham is just a sham" - why the rodent model of partial bladder outlet obstruction needs adjustment.</a> J Urol. 195 (4), e379 (2016).</li><li>Jin, L. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Persistent+detrusor+overactivity+in+rats+after+relief+of+partial+urethral+obstruction.">Persistent detrusor overactivity in rats after relief of partial urethral obstruction.</a> Am. J. Physiol. Regul. Integr. Comp. Physiol. 301 (4), R896-R904 (2011).</li></ol>

Dødelighed dyr er en af de største bekymringer den traditionelle model med pBOO ved den proximale urinrør, ved 15% eller mere i mange rapporter 10, 11, 13. Nemo ser ud til at have minimal dødelighed, når de anvendes i hunrotter. Proximal urethral obstruktion i mus er teknisk mere udfordrende end i rotter og dermed endnu mere udsat for komplikationer. Ved hjælp af en 26-gauge kanyle som pladsholder for vor...

Delvis blæreobstruktion (pBOO) har en høj forekomst og kan resultere i alvorlig blæredysfunktion 1; spektret spænder fra medfødte misdannelser såsom posterior urethrale ventiler eller hypospadi, over erhvervede urethrale strikturer til godartet prostatahyperplasi. Sidstnævnte påvirker mere end 30% af mænd tres år og ældre 2. Stor patient byrde og enorme udgifter til sundhedspleje i forbindelse med pBOO garanterer den betydelige forskningsindsats lagt i at studere blære remodeling som reaktion på øget udstrømning modstand 3. Fra 2006 til 2015, i løbet af 220 PubMed indekseret artiklerne er publiceret om effekten af ​​pBOO på urinblæren. Selvom dyremodeller for pBOO er blevet udtænkt i adskillige arter 4, såsom rotte 5, kanin 6, gris 7, og mouse 8, 9, nok den mest almindeligt anvendte dyremodel er imidlertid hunrotter gennemgår delvis obstruktion af den proksimale urethra; adgang til dyrenes mave, exteriorizing af blæren, og dissektion omkring blærehalsen er uundgåelige med denne traditionelle proksimale urethral obstruktion teknik. Variation i graden af obstruktion og dødelighed dyr er kun nogle af de bekymringer, der er forbundet med denne procedure 10, 11; vi viste, at i skinopererede dyr, dissektion omkring den proximale urethra fører til fysiologiske ændringer, der korrelerer med tab af nervefibre ved blærehalsen 12. Dette fund indikerer, at det mest almindeligt anvendte pBOO dyremodel, som involverer adgang til proximale urinrør hos kvindelige gnavere, fører til en denervering skade med tilhørende strukturelle og funktionelle ændringer i blæren, der påvirkersham og obstruerede dyr. Derfor blev behov for en alternativ fremgangsmåde undgår denervering skade. Vores laboratorium udviklet og evalueret en Nerve-besparende Mid-urethral obstruktion (NEMO) tilgang, effektive til at inducere forventede obstruktion-associerede ændringer i blæren, såsom forøgelse orgel masse og residualurin, mens skinopererede dyr var ikke skelnes fra ikke-opererede kontroldyr . Også den tværstribede urethral sphincter forblev uberørt som den ligger proksimalt til niveauet for dissektion. Endvidere variabilitet i obstruktion-inducerede stigning i blæren masse var væsentligt lavere end i traditionelle proximal urethral obstruktion og dødelighed dyr var nul. Vi også anvendt med succes NEMO i hunmus med en dødelighed i obstruerede dyr mindre end 10%, mens alle pBOO modeller for mus, der er beskrevet til dato var forbundet med en dødelighed på ca. 50%. Studere blære remodeling i forbindelse med pBOO i mus vil drage fordel af applicability af hele spektret af transgene modifikationer. Dissekering omkring midten af ​​urinrøret hos kvindelige gnavere inducerer ikke de uønskede og confounding strukturelle eller funktionelle ændringer i urinblæren observeret i traditionelle proximale obstruktion model. Ikke desto mindre, inducerer en delvis obstruktion på midten af ​​urethra niveau stadig inducerer blære hypertrofi og øget residual urin, som forventet fra en dyremodel for pBOO. Vigtigere, udfører NEMO i mus åbner undersøgelse af blære remodeling i pBOO transgene metoder, som er stort set utilgængelig i større gnavere.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="1064">
	<tbody>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:216px;">Female rat&#160;</td>
			<td style="width:123px;">Charles-River Canada</td>
			<td style="width:559px;">Sprague Dawley Rat (Crl:SD); Strain Code: 400</td>
			<td style="width:167px;">about 200g</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:216px;">Isoflorane vaporizer</td>
			<td style="width:123px;">Benson medical industries inc.</td>
			<td style="width:559px;">TEC III Isoflurane; product code: 53-T3ISO&#160;</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:216px;">Isoflorane</td>
			<td style="width:123px;">Fresenius Kabi Animal Health</td>
			<td style="width:559px;">Isoflorane; product code CP0406V2</td>
			<td style="width:167px;">&#160;250ml bottle</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:216px;">Disposable scalpell</td>
			<td style="width:123px;">Ted Pella, Inc.</td>
			<td style="width:559px;">#15 Sterile, Stainless Steel Scalpels; catalogue number 549-9-15S</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:216px;">Microscopy forceps</td>
			<td style="width:123px;">Ted Pella, Inc.</td>
			<td style="width:559px;">Aesculap Microscopy Forceps, Finepoint, 115mm; product number 5443</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:216px;">Adson forceps</td>
			<td style="width:123px;">Ted Pella, Inc.</td>
			<td style="width:559px;">Aesculap Adson Dissection Forceps, Curved, 120mm; product number 5002-9</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:216px;">Curved surgical scissors</td>
			<td style="width:123px;">Ted Pella, Inc.</td>
			<td style="width:559px;">Surgical Scissors, Curved, S/S, 105mm; catalogue number 1376</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:216px;">0.9mm inox metal rod</td>
			<td style="width:123px;">goodfellow.com</td>
			<td style="width:559px;">Stainless Steel - AISI 316L Wire Diameter:0.9mm; order code 911-684-65</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:216px;">Skin hooks - self made from inox steel</td>
			<td style="width:123px;">goodfellow.com</td>
			<td style="width:559px;">Stainless Steel - AISI 316L Wire Diameter:0.9mm; order code 911-684-65</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:216px;">4-0 Silk suture</td>
			<td style="width:123px;">esutures.com</td>
			<td style="width:559px;">4-0 Sofsilk black 98&#34; strand; product number LS640</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:216px;">5-0 Vicry suture</td>
			<td style="width:123px;">esutures.com</td>
			<td style="width:559px;">5-0 Vicryl undyed 27&#34; RB-1 taper; product number J213H</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:216px;">Needle holder</td>
			<td style="width:123px;">Medsupplier.com</td>
			<td style="width:559px;">Integra Miltex Carb-N-Sert Baumgartner Needle Holder - 5 1/2&#34;; product code SKU NEE4484-8-40TC 
			SKU NEE4484-8-40TC 
			SKU NEE4484-8-40TC&#160;</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:216px;">Temgesic (Buprenorphine)</td>
			<td style="width:123px;">first veterinary supply</td>
			<td style="width:559px;">Buprenex 0.3MG/ml inj amps; item #075701</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:216px;">1ml syringe with 27G needle</td>
			<td style="width:123px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:559px;">BD&#160;Tuberculin Syringe, BD 309623</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:216px;">20G Angiocath</td>
			<td style="width:123px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:559px;">Andwin Scientific&#160;ANGIOCATH 20 GA; Catalog No. NC9561906</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:216px;">Recovery diet</td>
			<td style="width:123px;">clearh2o</td>
			<td>DietGel 31M; 72-08-5022</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:216px;">C57Bl/6 female mice</td>
			<td style="width:123px;">Charles-River Canada</td>
			<td style="width:559px;">C57BL/6 Mouse (C57BL/6NCrI); Strain Code: 027</td>
			<td style="width:167px;">about 18g</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:216px;">24G angiocath</td>
			<td style="width:123px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:559px;">Hanna Pharmaceutical Supply Co., Inc.&#160;IV CATH ANGIOCATH 24GX3/4IN; Catalog No. NC9814340</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:216px;">5-0 Ethibond</td>
			<td style="width:123px;">esutures.com</td>
			<td style="width:559px;">5-0 Ethibond green 30&#34; RB-1 taper; product number X550H</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">26G syringe needle</td>
			<td style="width:123px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:559px;">BD Precisionglide syringe needle, Gauge 26; z192392</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Normal Saline</td>
			<td style="width:123px;">Baxter</td>
			<td style="width:559px;">0.9% Sodium Chloride Injection, USP, 100 mL MINI-BAG; product code 2B0043</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

nerve-sparing mid-urethral obstruction (nemo) in female small rodents

Delvis blæreobstruktion (pBOO) har en høj prævalens, medfører væsentlig patient byrde, og enorme udgifter til sundhedspleje. Den mest almindelige dyremodel til at undersøge blæren remodeling i pBOO er hungnavere undergår delvis obstruktion ved den proximale urinrøret. Variation i graden af ​​obstruktion og dødelighed dyr er store bekymringer med proksimal obstruktion. Endvidere dissekering omkring den proximale urethra og blærehalsen truer blære innervation. Vi udviklede en nerve-besparende mid-urethral obstruktion (NEMO) model for pBOO undgå ulemperne ved den traditionelle model. Vi nærmede urinrøret bare ringere end skambenssammenføjning, der undgås behovet for laparotomi samt for dissektion på dette område; også, det stribede urinrørslukkemusklen forblev urørt. Udførte vi NEMO i Sprague-Dawley-rotter (12 forhindringer, 6 sham dyr) samt i kvindelige C57 / BL6-mus (20 obstruktions, 18 sham dyr). Efter to uger, vi evaluerede blærefunktion, blære masse, og kropsmasse. Vi havde ingen mortalitet blandt obstructed- eller skinopererede hunrotter; som beskrevet for traditionelle proximale pBOO-metode, vi bandt suturen omkring den proximale urethra og en midlertidigt placeret 0,9 mm metalstang. NEMO inducerede en forøgelse i blære massen 85% efter to uger, gennemsnitlig residualurinvolumen var 0,4 ml i delvist obstruerede rotter mens kun 0,03 ml i sham dyr. I mus, testede vi 3 størrelser af kanyler, som vi tilføjet langs urinrøret når binde sutur. Vi fandt, at anvendelse af en 27-gauge kanyle medført over dødeligheden 50% dyr; placere 25-gauge kanyle gav ikke den ønskede respons i stigende blære masse; anvendelse af en 26-gauge kanyle gav gunstige resultater med minimal dyr dødelighed (1/8) endnu en signifikant stigning 2 gange i blære masse.

Nerve-besparende Mid-urethral obstruktion (NEMO) i hunrotter Dødelighed Vi udførte en mid-urethral obstruktion på over 40 hunrotter hidtil og havde ingen dødelighed. Blære masse Gennemsnitlige blære masse (b...

Watch this Scientific Journal Video about Nerve-sparing Mid-urethral Obstruction NeMO in Female Small Rodents at JoVE.com

Nerve-sparing Mid-urethral Obstruction NeMO in Female Small Rodents

Traditionelle modellering af delvis blæreobstruktion i gnavere er behæftet med dødelighed dyr. En denervering skade fra dissektion omkring den proximale urethra og blærehalsen er ligeledes af stor bekymring. Vi udviklede og evaluerede en sikker og pålidelig mid-urethral obstruktion model, så man undgår manglerne ved den traditionelle model.

Nerve-besparende Mid-urethral obstruktion (NEMO) i kvindelige lille Gnavere

Partial bladder outlet obstruction (pBOO) has a high prevalence, causes significant patient burden, and immense health care costs. The most common animal ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Nerve-sparing Mid-urethral Obstruction (NeMO) in Female Small Rodents

Protocol for Long Duration Whole Body Hyperthermia in Mice

Protokol for Long Duration Whole Body Hypertermi i mus

Hyperthermia is a general term used to define the increase in core body temperature above normal. It is often used to describe the increased core body ...

The Use of Cystometry in Small Rodents: A Study of Bladder Chemosensation

	The lower urinary tract (LUT) functions as a  dynamic reservoir that is able to store urine and to efficiently expel it at a  convenient time. While ...

Orthotopic Small Bowel Transplantation in Rats

Orthotopisk tyndtarmstransplantation i rotter

Small  bowel transplantation has become an accepted clinical option for patients with  short gut syndrome and failure of parenteral nutrition ...

Retinal Detachment Model in Rodents by Subretinal Injection of Sodium Hyaluronate

Nethindeløsning Model i Gnavere ved subretinal Injektion af Natriumhyaluronats

Subretinal injection of sodium hyaluronate is a widely accepted method of inducing retinal detachment (RD). However, the height and duration of RD or the ...

Remote Limb Ischemic Preconditioning:  A Neuroprotective Technique in Rodents

Fjernbetjening Limb iskæmisk konditionering: En neuroprotektiv Teknik i Gnavere

Sublethal ischemia protects tissues against subsequent, more severe ischemia through the upregulation of endogenous mechanisms in the affected tissue. ...

Performing Subretinal Injections in Rodents to Deliver Retinal Pigment Epithelium Cells in Suspension

Udførelse subretinale Injektioner i Gnavere at levere retinale pigmentepitel celler i suspension

The conversion of light into electrical impulses occurs in the outer retina and is accomplished largely by rod and cone photoreceptors and retinal pigment ...

Transcutaneous Assessment of Renal Function in Conscious Rodents

Transkutan vurdering af nyrefunktionen i bevidste Gnavere

Glomerular filtration rate (GFR) is the gold standard to assess overall kidney function. However, traditional methods to evaluate GFR are cumbersome and ...

Transcanalicular Diode Laser-assisted Dacryocystorhinostomy for the Treatment of Primary Acquired Nasolacrimal Duct Obstruction

Transcanalicular Diode Laser-assisteret Dacryocystorhinostomy til behandling af primær erhvervet nasolacrimale kanal obstruktion

Today&#39;s gold standard in the treatment of infrasaccal primary acquired nasolacrimal duct obstruction (PANDO) is external dacryocystorhinostomy (DCR), ...

Studying Left Ventricular Reverse Remodeling by Aortic Debanding in Rodents

Undersøgelse venstre ventrikulær reverse remodeling af Aortic Debanding i gnavere

To better understand the left ventricular (LV) reverse remodeling (RR), we describe a rodent model wherein, after aortic banding-induced LV remodeling, ...

Oxygen-Induced Retinopathy Model for Ischemic Retinal Diseases in Rodents

Oxygen-induceret retinopati Model for iskæmiske retinale sygdomme hos gnavere

One of the commonly used models for ischemic retinopathies is the oxygen-induced retinopathy (OIR) model. Here we describe detailed protocols for the OIR ...