Name: nerve-sparing mid-urethral obstruction (nemo) in female small rodents
Uploaded: 2017-04-25T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Nerve-sparing Mid-urethral Obstruction NeMO in Female Small Rodents at JoVE.com

The work was funded by a CHIR operating grant (DJB).

Das folgende experimentelle Protokoll wurde von der Institution Tierpflegekommission genehmigt. 1. NEMO bei weiblichen Ratten <ol><li> Vorbereitung <ol><li> Legen Sie eine weibliche Sprague-Dawley Ratten mit einem Gewicht von etwa 200 g unter 3% Isofluran-Narkose, wiege das Tier, und rasieren und desinfizieren prepubic Bereich 3 mal ein Iodatom chirurgischen Peeling. </li><li> Auf einem Heizkissen, Bandhinterbeinen und Schwanz nach unten und die Blase mit einem 20-Gauge-An...

<ol>
	<li>Andersson, K. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Storage+and+voiding+symptoms:+pathophysiologic+aspects.">Storage and voiding symptoms: pathophysiologic aspects.</a> Urology. 62 (5), 3-10 (2003).</li><li>Boyle, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+prevalence+of+lower+urinary+tract+symptoms+in+men+and+women+in+four+centres.+The+UrEpik+study.">The prevalence of lower urinary tract symptoms in men and women in four centres. The UrEpik study.</a> BJU Int. 92 (4), 409-414 (2003).</li><li>Coyne, K. S., Wein, A., Nicholson, S., Kvasz, M., Chen, C. I., Milsom, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Economic+burden+of+urgency+urinary+incontinence+in+the+United+States:+a+systematic+review.">Economic burden of urgency urinary incontinence in the United States: a systematic review.</a> J Manag Care Pharm. 20 (2), 130-140 (2014).</li><li>Buttyan, R., Chen, M. W., Levin, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+bladder+outlet+obstruction+and+molecular+insights+into+the+basis+for+the+development+of+bladder+dysfunction.">Animal models of bladder outlet obstruction and molecular insights into the basis for the development of bladder dysfunction.</a> Eur. Urol. 32 (Suppl 1), 32-39 (1997).</li><li>Mattiasson, A., Uvelius, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Changes+in+contractile+properties+in+hypertrophic+rat+urinary+bladder.">Changes in contractile properties in hypertrophic rat urinary bladder.</a> J Urol. 128 (6), 1340-1342 (1982).</li><li>Chang, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Alteration+of+the+PKC-mediated+signaling+pathway+for+smooth+muscle+contraction+in+obstruction-induced+hypertrophy+of+the+urinary+bladder.">Alteration of the PKC-mediated signaling pathway for smooth muscle contraction in obstruction-induced hypertrophy of the urinary bladder.</a> Lab Invest. 89 (7), 823-832 (2009).</li><li>Moore, J. A., Brading, A. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+porcine+model+of+bladder+outlet+obstruction+incorporating+radio-telemetered+cystometry.">A porcine model of bladder outlet obstruction incorporating radio-telemetered cystometry.</a> BJU Int. 100 (5), 1192-1193 (2007).</li><li>Beamon, C. R., Mazar, C., Salkini, M. W., Phull, H. S., Comiter, C. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effect+of+sildenafil+citrate+on+bladder+outlet+obstruction:+a+mouse+model.">The effect of sildenafil citrate on bladder outlet obstruction: a mouse model.</a> BJU Inte. 104 (2), 252-256 (2009).</li><li>Pandita, R. K., Fujiwara, M., Alm, P., Andersson, K. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cystometric+evaluation+of+bladder+function+in+non-anesthetized+mice+with+and+without+bladder+outlet+obstruction.">Cystometric evaluation of bladder function in non-anesthetized mice with and without bladder outlet obstruction.</a> J Urol. 164 (4), 1385-1389 (2000).</li><li>Kang, Y. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Early+Sequential+Changes+in+Bladder+Function+after+Partial+Bladder+Outlet+Obstruction+in+Awake+Sprague-Dawley+Rats:+Focus+on+the+Decompensated+Bladder.">Early Sequential Changes in Bladder Function after Partial Bladder Outlet Obstruction in Awake Sprague-Dawley Rats: Focus on the Decompensated Bladder.</a> Korean J Urol. 52 (12), 835-837 (2011).</li><li>Schroeder, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protective+effect+of+an+oral+endothelin+converting+enzyme+inhibitor+on+rat+detrusor+function+after+outlet+obstruction.">Protective effect of an oral endothelin converting enzyme inhibitor on rat detrusor function after outlet obstruction.</a> J Urol. 172 (3), 1171-1174 (2004).</li><li>Sidler, M., Aitken, K., Jiang, J., Bijos, D., B&#228;gli, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term="sometimes+a+sham+is+just+a+sham"+-+why+the+rodent+model+of+partial+bladder+outlet+obstruction+needs+adjustment.">"sometimes a sham is just a sham" - why the rodent model of partial bladder outlet obstruction needs adjustment.</a> J Urol. 195 (4), e379 (2016).</li><li>Jin, L. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Persistent+detrusor+overactivity+in+rats+after+relief+of+partial+urethral+obstruction.">Persistent detrusor overactivity in rats after relief of partial urethral obstruction.</a> Am. J. Physiol. Regul. Integr. Comp. Physiol. 301 (4), R896-R904 (2011).</li></ol>

Tiersterblichkeit ist eines der wichtigsten Anliegen des traditionellen Modells der pBOO am proximalen Harnröhre, bei 15% oder mehr in vielen Berichten 10, 11, 13. NEMO erscheint minimal Sterblichkeit zu haben, wenn bei weiblichen Ratten angewendet. Proximale Harnröhrenobstruktion bei Mäusen ist technisch anspruchsvoller als bei Ratten und damit auch anfälliger für Komplikationen. Unter Verwendung einer 26...

Die partielle Blasenaustrittsobstruktion (pBOO) hat eine hohe Prävalenz und kann zu einer schweren Blasenfunktionsstörung führen 1 ; Das Spektrum reicht von angeborenen Fehlbildungen wie posterioren Harnröhrenventilen oder Hypospadien, über erworbene urethrale Strikturen bis hin zu einer gutartigen Prostatahyperplasie. Letzteres betrifft mehr als 30% der Männer sechzig Jahre und älter 2 . Große Patientenbelastung und immense Gesundheitspflege Kosten im Zusammenhang mit pBOO rechtfertigen die beträchtliche Forschung Anstrengungen in das Studium Blase Remodeling als Reaktion auf erhöhte Abfluss Widerstand 3 . Von 2006 bis 2015 wurden über 220 PubMed indizierte Artikel über die Wirkung von pBOO auf die Harnblase veröffentlicht. Obwohl Tiermodelle für pBOO in mehreren Arten 4 , wie der Ratte 5 , dem Kaninchen 6 , Schwein 7 und Mous, entwickelt worden sinde 8, 9, die wohl am häufigsten verwendeten Tiermodell jedoch sind weibliche Ratten partielle Obstruktion der proximalen Harnröhre unterziehen; Zugriff auf den Bauch der Tiere, exteriorisieren der Blase, und Dissektion um den Blasenhals sind unvermeidlich mit dieser traditionellen Technik proximalen Harnröhrenobstruktion. Veränderlichkeit in dem Grad der Behinderung und Tiersterblichkeit sind nur einige der Bedenken bei diesem Verfahren 10, 11 zugeordnet ist ; wir haben gezeigt , dass in scheinoperierten Tieren, Dissektion um den proximalen Harnröhre zu physiologischen Veränderungen führt , die 12 mit einem Verlust von Nervenfasern am Blasenhals zu korrelieren. Dieses Ergebnis zeigt, dass die am häufigsten pBOO Tiermodell verwendet, die bei weiblichen Nagern Zugriff auf die proximale Harnröhre beinhaltet, führt zu einer Denervierung Verletzung mit verbundenen strukturellen und funktionellen Veränderungen der Blase, beeinflussteSchein und behindern Tiere. Daher wurde eine alternative Ansatz zu vermeiden Denervierung Verletzung erforderlich. Unser Labor entwickelt und evaluiert einen Nerve sparende Mittelharnröhrenobstruktion (NEMO) Ansatz, wirksam bei der Induktion der erwartete Obstruktion assoziierte Veränderungen in der Blase, wie Erhöhung der Organmasse und Restharn, während scheinoperierten Tiere von nicht operierten Kontrolltieren nicht zu unterscheiden waren . Auch blieb die gestreifte Harnröhrenschließmuskel unangetastet, da sie proximal zu der Ebene der Präparation liegen. Die Weitere Variabilität in Massen Obstruktion-induzierte Zunahme der Blase war signifikant niedriger als bei herkömmlicher proximaler Harnröhrenobstruktion und Tiersterblichkeit war Null. Wir wandten auch erfolgreich NEMO bei weiblichen Mäusen mit weniger als 10% Mortalität bei Tieren behindert, während alle pBOO Modelle für bisher beschriebenen Mäuse um 50% mit einer Mortalität verbunden waren. Studieren Blase Umbau im Zusammenhang mit pBOO bei Mäusen profitieren von applicability des gesamten Spektrums von transgenen Modifikationen. Sezieren um die Mitte des Harnröhre bei weiblichen Nagern induzieren nicht die unerwünschten und verwirrende strukturellen oder funktionellen Veränderungen in der Harnblase im traditionellen proximalen Obstruktion Modell beobachtet. Trotzdem induziert immer noch eine teilweise Verstopfung in der Mitte der Harnröhre Ebene induzierende Blase Hypertrophie und erhöhte Restharn, wie für pBOO aus einem Tiermodell erwartet. Wichtig ist, dass bei Mäusen NEMO Durchführung eröffnet Untersuchung von Blasen Remodeling in pBOO transgene Verfahren, die in größeren Nagetieren praktisch nicht erreichbar sind.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="1064">
	<tbody>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:216px;">Female rat&#160;</td>
			<td style="width:123px;">Charles-River Canada</td>
			<td style="width:559px;">Sprague Dawley Rat (Crl:SD); Strain Code: 400</td>
			<td style="width:167px;">about 200g</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:216px;">Isoflorane vaporizer</td>
			<td style="width:123px;">Benson medical industries inc.</td>
			<td style="width:559px;">TEC III Isoflurane; product code: 53-T3ISO&#160;</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:216px;">Isoflorane</td>
			<td style="width:123px;">Fresenius Kabi Animal Health</td>
			<td style="width:559px;">Isoflorane; product code CP0406V2</td>
			<td style="width:167px;">&#160;250ml bottle</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:216px;">Disposable scalpell</td>
			<td style="width:123px;">Ted Pella, Inc.</td>
			<td style="width:559px;">#15 Sterile, Stainless Steel Scalpels; catalogue number 549-9-15S</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:216px;">Microscopy forceps</td>
			<td style="width:123px;">Ted Pella, Inc.</td>
			<td style="width:559px;">Aesculap Microscopy Forceps, Finepoint, 115mm; product number 5443</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:216px;">Adson forceps</td>
			<td style="width:123px;">Ted Pella, Inc.</td>
			<td style="width:559px;">Aesculap Adson Dissection Forceps, Curved, 120mm; product number 5002-9</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:216px;">Curved surgical scissors</td>
			<td style="width:123px;">Ted Pella, Inc.</td>
			<td style="width:559px;">Surgical Scissors, Curved, S/S, 105mm; catalogue number 1376</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:216px;">0.9mm inox metal rod</td>
			<td style="width:123px;">goodfellow.com</td>
			<td style="width:559px;">Stainless Steel - AISI 316L Wire Diameter:0.9mm; order code 911-684-65</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:216px;">Skin hooks - self made from inox steel</td>
			<td style="width:123px;">goodfellow.com</td>
			<td style="width:559px;">Stainless Steel - AISI 316L Wire Diameter:0.9mm; order code 911-684-65</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:216px;">4-0 Silk suture</td>
			<td style="width:123px;">esutures.com</td>
			<td style="width:559px;">4-0 Sofsilk black 98&#34; strand; product number LS640</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:216px;">5-0 Vicry suture</td>
			<td style="width:123px;">esutures.com</td>
			<td style="width:559px;">5-0 Vicryl undyed 27&#34; RB-1 taper; product number J213H</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:216px;">Needle holder</td>
			<td style="width:123px;">Medsupplier.com</td>
			<td style="width:559px;">Integra Miltex Carb-N-Sert Baumgartner Needle Holder - 5 1/2&#34;; product code SKU NEE4484-8-40TC 
			SKU NEE4484-8-40TC 
			SKU NEE4484-8-40TC&#160;</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:216px;">Temgesic (Buprenorphine)</td>
			<td style="width:123px;">first veterinary supply</td>
			<td style="width:559px;">Buprenex 0.3MG/ml inj amps; item #075701</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:216px;">1ml syringe with 27G needle</td>
			<td style="width:123px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:559px;">BD&#160;Tuberculin Syringe, BD 309623</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:216px;">20G Angiocath</td>
			<td style="width:123px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:559px;">Andwin Scientific&#160;ANGIOCATH 20 GA; Catalog No. NC9561906</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:216px;">Recovery diet</td>
			<td style="width:123px;">clearh2o</td>
			<td>DietGel 31M; 72-08-5022</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:216px;">C57Bl/6 female mice</td>
			<td style="width:123px;">Charles-River Canada</td>
			<td style="width:559px;">C57BL/6 Mouse (C57BL/6NCrI); Strain Code: 027</td>
			<td style="width:167px;">about 18g</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:216px;">24G angiocath</td>
			<td style="width:123px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:559px;">Hanna Pharmaceutical Supply Co., Inc.&#160;IV CATH ANGIOCATH 24GX3/4IN; Catalog No. NC9814340</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:216px;">5-0 Ethibond</td>
			<td style="width:123px;">esutures.com</td>
			<td style="width:559px;">5-0 Ethibond green 30&#34; RB-1 taper; product number X550H</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">26G syringe needle</td>
			<td style="width:123px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:559px;">BD Precisionglide syringe needle, Gauge 26; z192392</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Normal Saline</td>
			<td style="width:123px;">Baxter</td>
			<td style="width:559px;">0.9% Sodium Chloride Injection, USP, 100 mL MINI-BAG; product code 2B0043</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

nerve-sparing mid-urethral obstruction (nemo) in female small rodents

Partielle Blasenauslassobstruktion (pBOO) hat eine hohe Prävalenz, verursacht erhebliche Patientenbelastung und immens Kosten im Gesundheitswesen. Das häufigste Tiermodell Blase Umbau in pBOO zu untersuchen sind weibliche Nager unterziehen partielle Obstruktion am proximalen Harnröhre. Veränderlichkeit in dem Grad der Behinderung und Tiersterblichkeit sind wichtige Anliegen mit proximaler Obstruktion. Außerdem gefährdet Blase Innervation um den proximalen Harnröhre und Blasenhals zu sezieren. Wir entwickelten eine nervenschonenden mittleren Harnröhrenobstruktion (NEMO) Modell für pBOO die Nachteile des traditionellen Modells zu vermeiden. Wir näherten uns der Harnröhre unmittelbar unterhalb der Schambeinfuge, die die Notwendigkeit für Laparotomie sowie für die Präparation in diesem Bereich vermieden; Auch blieb die gestreifte Harnröhrenschließmuskel unberührt. Wir führten NEMO in weiblichen Sprague-Dawley-Ratten (12 Hindernisse, 6 Scheintiere) sowie bei weiblichen C57 / BL6-Mäuse (20 Behinderungs, 18 Schein Tiere). Nach zwei Wochen werteten wir die Blasenfunktion, Blasenmasse und Körpermasse. Wir hatten keine Todesfälle unter obstructed- oder scheinoperierten weiblichen Ratten; wie für das traditionelle proximale pBOO-Verfahren beschrieben, banden wir die Naht um die proximale Urethra und ein 0,9 mm Metallstab vorübergehend platziert. NEMO induzierte eine 85% ige Erhöhung der Blasenmasse nach zwei Wochen, durchschnittliche Resturinvolumen betrug 0,4 ml in Ratten teilweise verstopft, während nur 0,03 ml in sham Tieren. Bei Mäusen testeten wir drei Größen von Kanülen, die sie entlang der Harnröhre platziert, wenn die Naht zu binden. Wir fanden heraus, dass eine 27-Gauge-Kanüle führte zu mehr als 50% Tiersterblichkeit; Platzieren der Kanüle 25-gauge nicht die gewünschte Reaktion bei der Erhöhung Blasenmasse brachte; eine 26-Gauge-Kanüle Verwendung ergab positive Ergebnisse mit minimaler Tiersterblichkeit (1/8) noch eine signifikanten 2-fache Erhöhung der Blasenmasse.

Nerve sparende Mittelharnröhrenobstruktion (NEMO) bei weiblichen Ratten Mortalität Wir führten eine Mitte Harnröhrenobstruktion auf mehr als 40 weibliche Ratten so weit und hatte keine Mortalitäten. Blase Masse <p class="jove_content" fo:keep-together.within-page="1...

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Nerve-sparing Mid-urethral Obstruction NeMO in Female Small Rodents

Traditionelle Modellierung von Teil Blasenauslassobstruktion bei Nagetieren ist voller Tiersterblichkeit. Eine Denervierung Verletzung von Dissektion um den proximalen Harnröhre und Blasenhals ist ebenfalls von großer Bedeutung. Wir entwickeln und evaluiert eine sichere und zuverlässige Obstruktion Modell Mitte der Harnröhre, die Mängel des traditionellen Modells zu vermeiden.

Nerve sparende Mittelharnröhrenobstruktion (NEMO) in Female Kleine Nagetiere

Partial bladder outlet obstruction (pBOO) has a high prevalence, causes significant patient burden, and immense health care costs. The most common animal ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Nerve-sparing Mid-urethral Obstruction (NeMO) in Female Small Rodents

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