Name: nerve-sparing mid-urethral obstruction (nemo) in female small rodents
Uploaded: 2017-04-25T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Nerve-sparing Mid-urethral Obstruction NeMO in Female Small Rodents at JoVE.com

The work was funded by a CHIR operating grant (DJB).

O protocolo experimental seguinte foi aprovado pelo comitê de cuidados com os animais da instituição. 1. Nemo em ratas <ol><li> Preparação <ol><li> Colocar um rato fêmea Sprague-Dawley pesando cerca de 200 g sob anestesia de isoflurano a 3%, peso do animal, e barbear e desinfectar a área pré-púbica 3 vezes utilizando uma limpeza cirúrgica iodo. </li><li> Em uma almofada de aquecimento, fita membros posteriores e cauda para baixo e cateterização da bexiga com um...

<ol>
	<li>Andersson, K. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Storage+and+voiding+symptoms:+pathophysiologic+aspects.">Storage and voiding symptoms: pathophysiologic aspects.</a> Urology. 62 (5), 3-10 (2003).</li><li>Boyle, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+prevalence+of+lower+urinary+tract+symptoms+in+men+and+women+in+four+centres.+The+UrEpik+study.">The prevalence of lower urinary tract symptoms in men and women in four centres. The UrEpik study.</a> BJU Int. 92 (4), 409-414 (2003).</li><li>Coyne, K. S., Wein, A., Nicholson, S., Kvasz, M., Chen, C. I., Milsom, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Economic+burden+of+urgency+urinary+incontinence+in+the+United+States:+a+systematic+review.">Economic burden of urgency urinary incontinence in the United States: a systematic review.</a> J Manag Care Pharm. 20 (2), 130-140 (2014).</li><li>Buttyan, R., Chen, M. W., Levin, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+bladder+outlet+obstruction+and+molecular+insights+into+the+basis+for+the+development+of+bladder+dysfunction.">Animal models of bladder outlet obstruction and molecular insights into the basis for the development of bladder dysfunction.</a> Eur. Urol. 32 (Suppl 1), 32-39 (1997).</li><li>Mattiasson, A., Uvelius, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Changes+in+contractile+properties+in+hypertrophic+rat+urinary+bladder.">Changes in contractile properties in hypertrophic rat urinary bladder.</a> J Urol. 128 (6), 1340-1342 (1982).</li><li>Chang, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Alteration+of+the+PKC-mediated+signaling+pathway+for+smooth+muscle+contraction+in+obstruction-induced+hypertrophy+of+the+urinary+bladder.">Alteration of the PKC-mediated signaling pathway for smooth muscle contraction in obstruction-induced hypertrophy of the urinary bladder.</a> Lab Invest. 89 (7), 823-832 (2009).</li><li>Moore, J. A., Brading, A. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+porcine+model+of+bladder+outlet+obstruction+incorporating+radio-telemetered+cystometry.">A porcine model of bladder outlet obstruction incorporating radio-telemetered cystometry.</a> BJU Int. 100 (5), 1192-1193 (2007).</li><li>Beamon, C. R., Mazar, C., Salkini, M. W., Phull, H. S., Comiter, C. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effect+of+sildenafil+citrate+on+bladder+outlet+obstruction:+a+mouse+model.">The effect of sildenafil citrate on bladder outlet obstruction: a mouse model.</a> BJU Inte. 104 (2), 252-256 (2009).</li><li>Pandita, R. K., Fujiwara, M., Alm, P., Andersson, K. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cystometric+evaluation+of+bladder+function+in+non-anesthetized+mice+with+and+without+bladder+outlet+obstruction.">Cystometric evaluation of bladder function in non-anesthetized mice with and without bladder outlet obstruction.</a> J Urol. 164 (4), 1385-1389 (2000).</li><li>Kang, Y. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Early+Sequential+Changes+in+Bladder+Function+after+Partial+Bladder+Outlet+Obstruction+in+Awake+Sprague-Dawley+Rats:+Focus+on+the+Decompensated+Bladder.">Early Sequential Changes in Bladder Function after Partial Bladder Outlet Obstruction in Awake Sprague-Dawley Rats: Focus on the Decompensated Bladder.</a> Korean J Urol. 52 (12), 835-837 (2011).</li><li>Schroeder, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protective+effect+of+an+oral+endothelin+converting+enzyme+inhibitor+on+rat+detrusor+function+after+outlet+obstruction.">Protective effect of an oral endothelin converting enzyme inhibitor on rat detrusor function after outlet obstruction.</a> J Urol. 172 (3), 1171-1174 (2004).</li><li>Sidler, M., Aitken, K., Jiang, J., Bijos, D., B&#228;gli, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term="sometimes+a+sham+is+just+a+sham"+-+why+the+rodent+model+of+partial+bladder+outlet+obstruction+needs+adjustment.">"sometimes a sham is just a sham" - why the rodent model of partial bladder outlet obstruction needs adjustment.</a> J Urol. 195 (4), e379 (2016).</li><li>Jin, L. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Persistent+detrusor+overactivity+in+rats+after+relief+of+partial+urethral+obstruction.">Persistent detrusor overactivity in rats after relief of partial urethral obstruction.</a> Am. J. Physiol. Regul. Integr. Comp. Physiol. 301 (4), R896-R904 (2011).</li></ol>

A mortalidade dos animais é uma das principais preocupações do modelo tradicional de pBOO na uretra proximal, em 15% ou mais em muitos relatórios 10, 11, 13. Nemo parece ter mortalidade mínima quando aplicado em ratos fêmeas. obstrução uretral proximal em murganhos é tecnicamente mais exigente do que em ratos e, portanto, ainda mais propensos a complicações. Utilizando uma cânula de calibre 26 como ...

Parcial obstrução da saída da bexiga (pBOO) tem uma prevalência elevada e pode resultar em disfunção da bexiga grave 1; o espectro varia de malformações congénitas, tais como válvulas de uretra posterior ou hypospadias, mais de estreitamento uretral adquiridos a hiperplasia benigna da próstata. O último que afecta mais de 30% dos homens de sessenta anos e mais velhos 2. Grande fardo paciente e os custos de saúde associados com imensas pBOO justificar o esforço de investigação considerável colocar em estudar a remodelação da bexiga em resposta à resistência aumentada saída 3. De 2006 até 2015, mais de 220 PubMed indexados artigos foram publicados sobre o efeito de pBOO na bexiga urinária. Embora os modelos animais para pBOO Elaboraram-se várias espécies, tais como 4 a 5 de rato, o coelho 6, 7 porco, e compue 8, 9, sem dúvida, o modelo animal mais habitualmente utilizada, porém, são ratos do sexo feminino submetidos a obstrução parcial da uretra proximal; acesso ao abdómen dos animais, exteriorizante da bexiga, e dissecção em torno do pescoço da bexiga são inevitáveis ​​com esta técnica obstrução uretral proximal tradicional. Variabilidade no grau de obstrução e a mortalidade dos animais são apenas alguns dos problemas associados com este procedimento 10, 11; mostrou-se que em animais de engano operados, dissecção em torno da uretra proximal leva a alterações fisiológicas que se correlacionam com perda de fibras nervosas no colo da bexiga 12. Esta descoberta indica que o modelo animal pBOO mais utilizada, a qual envolve o acesso a uretra proximal em roedores do sexo feminino, conduz a uma lesão desnervação com alterações estruturais e funcionais associadas da bexiga, afectandofarsa e animais obstruídas. Por conseguinte, foi necessário um método alternativo evitar lesões desnervação. O nosso laboratório desenvolvidos e avaliada uma abordagem obstrução médio-uretral poupadores de Nervo (nemo), eficaz na indução de alterações associadas à obstrução esperada na bexiga, tais como aumento da massa do órgão e urina residual, enquanto que os animais operados de forma simulada foram indistinguíveis dos animais de controlo não operados . Além disso, o esfíncter uretral estriado permaneceu intacta como ela se encontra próximo do limite de dissecção. Além disso, a variabilidade no aumento induzido por obstrução em massa da bexiga foi significativamente menor do que na obstrução uretral proximal tradicional e a mortalidade dos animais foi zero. Nós também aplicado com sucesso nemo em ratinhos fêmea com uma mortalidade inferior a 10% nos animais obstruídos, enquanto que todos os modelos pBOO para ratinhos descritos até à data foram associadas com uma mortalidade de cerca de 50%. Estudar remodelação da bexiga no contexto de pBOO em ratos irá beneficiar de applicabildade de todo o espectro de modificações transgénicos. Dissecando em torno do meio da uretra em roedores do sexo feminino não induz as alterações estruturais ou funcionais indesejáveis ​​e de confusão na bexiga urinária observado no modelo de obstrução proximal tradicional. No entanto, a indução de uma obstrução parcial no nível médio-uretral ainda induz a hipertrofia da bexiga e aumento da urina residual, como esperado a partir de um modelo animal para pBOO. Importante, realizando nemo em ratinhos abre investigação de remodelação da bexiga em pBOO a métodos transgénicos, que são praticamente inexistentes em roedores maiores.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="1064">
	<tbody>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:216px;">Female rat&#160;</td>
			<td style="width:123px;">Charles-River Canada</td>
			<td style="width:559px;">Sprague Dawley Rat (Crl:SD); Strain Code: 400</td>
			<td style="width:167px;">about 200g</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:216px;">Isoflorane vaporizer</td>
			<td style="width:123px;">Benson medical industries inc.</td>
			<td style="width:559px;">TEC III Isoflurane; product code: 53-T3ISO&#160;</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:216px;">Isoflorane</td>
			<td style="width:123px;">Fresenius Kabi Animal Health</td>
			<td style="width:559px;">Isoflorane; product code CP0406V2</td>
			<td style="width:167px;">&#160;250ml bottle</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:216px;">Disposable scalpell</td>
			<td style="width:123px;">Ted Pella, Inc.</td>
			<td style="width:559px;">#15 Sterile, Stainless Steel Scalpels; catalogue number 549-9-15S</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:216px;">Microscopy forceps</td>
			<td style="width:123px;">Ted Pella, Inc.</td>
			<td style="width:559px;">Aesculap Microscopy Forceps, Finepoint, 115mm; product number 5443</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:216px;">Adson forceps</td>
			<td style="width:123px;">Ted Pella, Inc.</td>
			<td style="width:559px;">Aesculap Adson Dissection Forceps, Curved, 120mm; product number 5002-9</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:216px;">Curved surgical scissors</td>
			<td style="width:123px;">Ted Pella, Inc.</td>
			<td style="width:559px;">Surgical Scissors, Curved, S/S, 105mm; catalogue number 1376</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:216px;">0.9mm inox metal rod</td>
			<td style="width:123px;">goodfellow.com</td>
			<td style="width:559px;">Stainless Steel - AISI 316L Wire Diameter:0.9mm; order code 911-684-65</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:216px;">Skin hooks - self made from inox steel</td>
			<td style="width:123px;">goodfellow.com</td>
			<td style="width:559px;">Stainless Steel - AISI 316L Wire Diameter:0.9mm; order code 911-684-65</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:216px;">4-0 Silk suture</td>
			<td style="width:123px;">esutures.com</td>
			<td style="width:559px;">4-0 Sofsilk black 98&#34; strand; product number LS640</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:216px;">5-0 Vicry suture</td>
			<td style="width:123px;">esutures.com</td>
			<td style="width:559px;">5-0 Vicryl undyed 27&#34; RB-1 taper; product number J213H</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:216px;">Needle holder</td>
			<td style="width:123px;">Medsupplier.com</td>
			<td style="width:559px;">Integra Miltex Carb-N-Sert Baumgartner Needle Holder - 5 1/2&#34;; product code SKU NEE4484-8-40TC 
			SKU NEE4484-8-40TC 
			SKU NEE4484-8-40TC&#160;</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:216px;">Temgesic (Buprenorphine)</td>
			<td style="width:123px;">first veterinary supply</td>
			<td style="width:559px;">Buprenex 0.3MG/ml inj amps; item #075701</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:216px;">1ml syringe with 27G needle</td>
			<td style="width:123px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:559px;">BD&#160;Tuberculin Syringe, BD 309623</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:216px;">20G Angiocath</td>
			<td style="width:123px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:559px;">Andwin Scientific&#160;ANGIOCATH 20 GA; Catalog No. NC9561906</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:216px;">Recovery diet</td>
			<td style="width:123px;">clearh2o</td>
			<td>DietGel 31M; 72-08-5022</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:216px;">C57Bl/6 female mice</td>
			<td style="width:123px;">Charles-River Canada</td>
			<td style="width:559px;">C57BL/6 Mouse (C57BL/6NCrI); Strain Code: 027</td>
			<td style="width:167px;">about 18g</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:216px;">24G angiocath</td>
			<td style="width:123px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:559px;">Hanna Pharmaceutical Supply Co., Inc.&#160;IV CATH ANGIOCATH 24GX3/4IN; Catalog No. NC9814340</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:216px;">5-0 Ethibond</td>
			<td style="width:123px;">esutures.com</td>
			<td style="width:559px;">5-0 Ethibond green 30&#34; RB-1 taper; product number X550H</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">26G syringe needle</td>
			<td style="width:123px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:559px;">BD Precisionglide syringe needle, Gauge 26; z192392</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Normal Saline</td>
			<td style="width:123px;">Baxter</td>
			<td style="width:559px;">0.9% Sodium Chloride Injection, USP, 100 mL MINI-BAG; product code 2B0043</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

nerve-sparing mid-urethral obstruction (nemo) in female small rodents

obstrução da saída da bexiga parcial (pBOO) tem alta prevalência, causas carga paciente significativa, e os custos de saúde imensos. O modelo animal mais comum para investigar remodelação da bexiga em pBOO são roedores do sexo feminino submetidos a obstrução parcial na uretra proximal. Variabilidade no grau de obstrução e a mortalidade dos animais são os principais preocupações com obstrução proximal. Além disso, dissecando em torno da uretra proximal e do colo da bexiga compromete inervação da bexiga. Nós desenvolvemos um modelo de obstrução mid-uretral poupadores de nervo (Nemo) para pBOO evitando as desvantagens do modelo tradicional. Nós nos aproximamos da uretra apenas inferior à sínfise púbica, o que evitou a necessidade de laparotomia, bem como para dissecção nesta área; Também, o esfíncter uretral estriado permaneceu intacta. Foi realizada nemo em ratos Sprague-Dawley do sexo feminino (12 obstruções, 6 animais sham), bem como em ratinhos fêmea C57 / BL6 (20 obstruçãos, 18 animais sham). Depois de duas semanas, avaliamos a função da bexiga, a massa da bexiga, e massa corporal. Nós não tivemos mortalidade entre ratas obstructed- ou operados por simulação; tal como descrito para o proximal tradicional pBOO-método, que amarrado a sutura em torno da uretra proximal e uma haste de metal colocado temporariamente 0,9 milímetros. Nemo induziu um aumento de 85% em massa da bexiga após duas semanas, o volume médio de urina residual foi de 0,4 mL em ratos parcialmente obstruída enquanto apenas 0,03 ml em animais sham. Em ratinhos, foram testados 3 tamanhos de cânulas que colocados ao longo da uretra quando atar o fio de sutura. Descobrimos que a utilização de uma cânula de calibre 27 resultou em mais de mortalidade dos animais 50%; colocação da cânula de calibre 25 não deu a resposta desejada no aumento da massa da bexiga; utilizando uma cânula de calibre 26, produziu resultados favoráveis ​​com a mortalidade mínima dos animais (1/8) ainda um aumento significativo de 2 vezes em massa da bexiga.

-Nervo poupadores Mid-obstrução uretral (Nemo) em ratas Mortalidade Foi realizada uma obstrução mid-uretral em mais de 40 ratas tão longe e não tinha mortalidades. massa da bexiga Média massa bexiga relativ...

Watch this Scientific Journal Video about Nerve-sparing Mid-urethral Obstruction NeMO in Female Small Rodents at JoVE.com

Nerve-sparing Mid-urethral Obstruction NeMO in Female Small Rodents

modelagem tradicional de obstrução da saída da bexiga parcial em roedores é cheio com a mortalidade dos animais. Uma lesão desnervação de dissecção em torno da uretra proximal e do colo da bexiga também é de grande preocupação. Nós desenvolvido e avaliado um modelo de obstrução mid-uretral segura e confiável, evitando as deficiências do modelo tradicional.

-Nervo poupadores Mid-obstrução uretral (Nemo) em fêmeas pequenos roedores

Partial bladder outlet obstruction (pBOO) has a high prevalence, causes significant patient burden, and immense health care costs. The most common animal ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Nerve-sparing Mid-urethral Obstruction (NeMO) in Female Small Rodents

Protocol for Long Duration Whole Body Hyperthermia in Mice

Protocolo para Longa Duração Hipertermia corpo inteiro em Ratos

Hyperthermia is a general term used to define the increase in core body temperature above normal. It is often used to describe the increased core body ...

Medicina

The Use of Cystometry in Small Rodents: A Study of Bladder Chemosensation

O Uso de cistometria em pequenos roedores: Um Estudo de Chemosensation Bexiga

	The lower urinary tract (LUT) functions as a  dynamic reservoir that is able to store urine and to efficiently expel it at a  convenient time. While ...

Orthotopic Small Bowel Transplantation in Rats

Transplante de intestino delgado de ratos ortotópico

Small  bowel transplantation has become an accepted clinical option for patients with  short gut syndrome and failure of parenteral nutrition ...

Retinal Detachment Model in Rodents by Subretinal Injection of Sodium Hyaluronate

Descolamento de Retina modelo em roedores por injeção sub-retiniana de hialuronato de sódio

Subretinal injection of sodium hyaluronate is a widely accepted method of inducing retinal detachment (RD). However, the height and duration of RD or the ...

Remote Limb Ischemic Preconditioning:  A Neuroprotective Technique in Rodents

Membro Remoto Pré-Condicionamento Isquêmico: A Técnica neuroprotetor em roedores

Sublethal ischemia protects tissues against subsequent, more severe ischemia through the upregulation of endogenous mechanisms in the affected tissue. ...

Performing Subretinal Injections in Rodents to Deliver Retinal Pigment Epithelium Cells in Suspension

Realizando Subretinal Injeções em roedores para entregar epitélio pigmentar da retina células em suspensão

The conversion of light into electrical impulses occurs in the outer retina and is accomplished largely by rod and cone photoreceptors and retinal pigment ...

Transcutaneous Assessment of Renal Function in Conscious Rodents

Avaliação transcutânea da função renal em roedores conscientes

Glomerular filtration rate (GFR) is the gold standard to assess overall kidney function. However, traditional methods to evaluate GFR are cumbersome and ...

Transcanalicular Diode Laser-assisted Dacryocystorhinostomy for the Treatment of Primary Acquired Nasolacrimal Duct Obstruction

Transcanalicular diodo Laser-assisted Dacryocystorhinostomy para o tratamento da primária adquiriu a obstrução do ducto Nasolacrimal

Today&#39;s gold standard in the treatment of infrasaccal primary acquired nasolacrimal duct obstruction (PANDO) is external dacryocystorhinostomy (DCR), ...

Studying Left Ventricular Reverse Remodeling by Aortic Debanding in Rodents

Estudando remodelagem reversa ventricular esquerda por debandagem aórtica em roedores

To better understand the left ventricular (LV) reverse remodeling (RR), we describe a rodent model wherein, after aortic banding-induced LV remodeling, ...

Oxygen-Induced Retinopathy Model for Ischemic Retinal Diseases in Rodents

Modelo de Retinopatia Induzida por Oxigênio para Doenças Isquêmicas da Retina em Roedores

One of the commonly used models for ischemic retinopathies is the oxygen-induced retinopathy (OIR) model. Here we describe detailed protocols for the OIR ...