Name: avian semen collection by cloacal massage and isolation of dna from sperm
Uploaded: 2018-02-05T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Avian Semen Collection by Cloacal Massage and Isolation of DNA from Sperm at JoVE.com

ونشكر نوغيرا خوسيه لمساعدة في وقت مبكر مع تدليك المذرق، ودعم جيفري كيتيلسون للمعمل. وأيد هذا العمل على جائزة FAR0022429 ابسكور ND إلى بجه. كانت تكاليف النشر بدعم سخي من "إدارة ندسو للعلوم البيولوجية".

هذا البروتوكول يشمل مواضيع الحيوانات الفقارية، وقد أقرها "رعاية الحيوان المؤسسية" واستخدام اللجنة (إياكوك) في جامعة ولاية داكوتا الشمالية.
1-السائل المنوي مجموعة من الطيور الجواثم استخدام تدليك المذرق
ملاحظة: المذرق التدليك هو أسلوب جمع السائل المنوي فعالة ف?...

<ol>
	<li>Briskie, J. V., Montgomerie, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sperm+size+and+sperm+competition+in+birds.">Sperm size and sperm competition in birds.</a> Proc. R. Soc. B. 247, 89-95 (1992).</li><li>Monaghan, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Telomeres+and+life+histories:+the+long+and+the+short+of+it.">Telomeres and life histories: the long and the short of it.</a> Ann. N.Y. Acad. Sci. 1206, 130-142 (2010).</li><li>Carrell, D. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epigenetics+of+the+male+gamete.">Epigenetics of the male gamete.</a> Fertility and Sterility. 97 (2), 267-274 (2012).</li><li>Burrows, W. H., Quinn, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+collection+of+spermatozoa+from+the+domestic+fowl+and+turkey.">The collection of spermatozoa from the domestic fowl and turkey.</a> Poultry Science. 16 (1), 19-24 (1937).</li><li>Wolfson, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+cloacal+protuberance:+a+means+for+determining+breeding+condition+in+live+male+birds.">The cloacal protuberance: a means for determining breeding condition in live male birds.</a> Bird-Banding. 23 (4), 159-165 (1952).</li><li>Kast, T. L., Ketterson, E. D., Nolan, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Variation+in+ejaculate+quality+in+dark-eyed+juncos+according+to+season,+stage+of+reproduction,+and+testosterone+treatment.">Variation in ejaculate quality in dark-eyed juncos according to season, stage of reproduction, and testosterone treatment.</a> The Auk. 115 (3), 684-693 (1998).</li><li>Helfenstein, F., Podevin, M., Richner, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sperm+morphology,+swimming+velocity,+and+longevity+in+the+house+sparrow+Passer+domesticus.">Sperm morphology, swimming velocity, and longevity in the house sparrow Passer domesticus.</a> Behav. Ecol. Sociobiol. 64, 557-565 (2010).</li><li>Purchase, C. F., Earle, P. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modifications+to+the+IMAGEJ+computer+assisted+sperm+analysis+plugin+greatly+improve+efficiency+and+fundamentally+alter+the+scope+of+attainable+data.">Modifications to the IMAGEJ computer assisted sperm analysis plugin greatly improve efficiency and fundamentally alter the scope of attainable data.</a> J. Appl. Icthyol. 28, 1013-1016 (2012).</li><li>Gill, P., Jeffreys, A. J., Werrett, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Forensic+application+of+DNA+'fingerprints'.">Forensic application of DNA 'fingerprints'.</a> Nature. 318 (12), 577-579 (1985).</li><li>Criscuolo, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Real-time+quantitative+PCR+assay+for+measurement+of+avian+telomeres.">Real-time quantitative PCR assay for measurement of avian telomeres.</a> J. Avian Biol. 40, 342-347 (2009).</li><li>Lovette, I. J., Fitzpatrick, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Cornell Lab of Ornithology Handbook of Bird Biology, 3rd Edition. , (2016).</li><li>. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> QIAamp DNA Micro Handbook. , (2014).</li><li>Carter, K. L., Robertson, B. C., Kempenaers, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+differential+DNA+extraction+method+for+sperm+on+the+perivitelline+membrane+of+avian+eggs.">A differential DNA extraction method for sperm on the perivitelline membrane of avian eggs.</a> Mol. Ecol. 9, 2149-2154 (2000).</li><li>Birkhead, T. R., Buchanan, K. L., Devoogd, T. J., Pellatt, E. J., Catchpole, C. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Song,+sperm+quality+and+testes+asymmetry+in+the+sedge+warbler.">Song, sperm quality and testes asymmetry in the sedge warbler.</a> Anim. Behav. 53, 965-971 (1997).</li><li>L&#252;pold, S., Calhim, S., Immler, S., Birkhead, T. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sperm+morphology+and+sperm+velocity+in+passerine+birds.">Sperm morphology and sperm velocity in passerine birds.</a> Proc. R. Soc. B. 276, 1175-1181 (2009).</li><li>Samour, J. H., Smith, C. A., Moore, H. D., Markham, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Semen+collection+and+spermatozoa+characteristics+in+budgerigars+(Melopsittacus+undulates).">Semen collection and spermatozoa characteristics in budgerigars (Melopsittacus undulates).</a> Vet. Rec. 118, 397-399 (1986).</li><li>Stelzer, G., Crosta, L., B&#252;rkle, M., Krautwalt-Junghanns, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Attempted+semen+collection+using+the+massage+technique+and+semen+analysis+in+various+psittacine+species.">Attempted semen collection using the massage technique and semen analysis in various psittacine species.</a> J. Avian Med. Surg. 19 (1), 7-13 (2005).</li></ol>

يصف لنا طريقة بسيطة وموثوق بها لجمع السائل المنوي من الطيور الصغيرة والمتوسطة الحجم في حالة نشطة التناسل، واستخراج الحمض النووي من إنفلونزا الطيور في الحيوانات المنوية.
بروتوكول استخراج الحمض النووي وصف السائل المنوي تعديل من مجموعة للبساطة ولكن المكرر للاستخدام في السا?...

الطيور ومواضيع مثالية للدراسات التي تنطوي على نوعية الحيوانات المنوية والمنافسة1والحيوانات المنوية telomere ديناميات2والتخلق3ومواضيع مماثلة، كما أنها تستخدم على نطاق واسع في البحوث البيولوجية ويمكن تذوق الحيوانات المنوية بسهولة باستخدام المذرق تدليك. تدليك المذرق أسلوب يدوي لطيف، وغير الغازية لجمع السائل المنوي من الطيور4،،من56. ويمكن الحصول على عينات متكررة بسهولة ولا أدوات خاصة مطلوبة، مما يجعل من السهل القيام به في الميدان أو في المختبر. رغم المذرق تدليك في الاستخدام لعقود من الزمان، فمن الصعب معرفة من كتب الأوصاف المتوفرة. ويهدف هذا المنشور تقليل الوقت والمشاركة في تعلم تدليك المذرق من عدم اليقين.
السائل المنوي التي تم جمعها من الطيور باستخدام تدليك المذرق يمكن استخدامها على الفور لتقييم حركية4،7 أو8من التلقيح الاصطناعي، أو المجمدة لاستخدامات أخرى مثل تصوير متقدمة واستخراج الحمض النووي. عينات السائل المنوي من الطيور الجواثم الصغيرة ولكن تحتوي على كثافة الحيوانات المنوية. يتم استخراج الحمض النووي باستخدام مجموعة أدوات استخراج تجاري للبساطة، مع بعض التعديلات للتغلب على ميزات الحماية المتخصصة للحيوانات المنوية9. بعد استخراج، يمكن قياس التيلومير الحيوانات المنوية باستخدام قبكر10.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:572px;" width="573">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Microhematocrit capillary tubes</td>
			<td style="width:71px;">Fisherbrand</td>
			<td style="width:119px;">22-362566</td>
			<td style="width:167px;">Any supplier can be used. Smaller tubes may be more effective for collection of small semen samples, such as from very small passerine birds like chipping sparrow.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Microcentrifuge tubes</td>
			<td style="width:71px;">Any</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">1x PBS</td>
			<td style="width:71px;">Any</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>Used for storing semen samples prior to DNA extraction.</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">DL-Dithiothreitol</td>
			<td style="width:71px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">D0632</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Tris base</td>
			<td style="width:71px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td align="right" style="width:119px;">10708976001</td>
			<td>Any supplier can be used.</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">EDTA</td>
			<td style="width:71px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td align="right" style="width:119px;">1233508</td>
			<td>Any supplier can be used.</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">NaCl</td>
			<td style="width:71px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td align="right" style="width:119px;">793566</td>
			<td>Any supplier can be used.</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">SDS</td>
			<td style="width:71px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td align="right" style="width:119px;">1614363</td>
			<td>Any supplier can be used.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">QIAamp DNA micro kit</td>
			<td style="width:71px;">Qiagen</td>
			<td align="right" style="width:119px;">56304</td>
			<td>Qiagen QIAamp DNA micro kit is recommended specifically. This DNA extraction protocol has been attempted with other commercial kits but with little success. The reasons for this are unknown to us.&#160;</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

avian semen collection by cloacal massage and isolation of dna from sperm

جمع السائل المنوي قد تكون مفيدة لمجموعة واسعة من التطبيقات بما في ذلك الدراسات التي تنطوي على نوعية الحيوانات المنوية، وديناميات telomere الحيوانات المنوية، والتخلق. الطيور المواضيع المستخدمة على نطاق واسع في البحوث البيولوجية وهي مثالية لدراسات شملت عينات الحيوانات المنوية المتكررة. ومع ذلك، موارد قليلة متاحة حاليا لأولئك الذين يرغبون في تعلم كيفية جمع واستخراج الحمض النووي من إنفلونزا الطيور في الحيوانات المنوية. هنا يصف لنا المذرق التدليك، تقنية يدوية رقيقة، وغير الغازية لجمع الحيوانات المنوية إنفلونزا الطيور. على الرغم من أن يتم إنشاء هذا الأسلوب في الأدب، يمكن أن يكون من الصعب معرفة من الأوصاف المتوفرة. كما نقدم معلومات لاستخراج الحمض النووي من السائل المنوي إنفلونزا الطيور باستخدام مجموعة أدوات استخراج تجاري مع بعض التعديلات. ويمكن استخدام تدليك المذرق بسهولة على أي الطيور الذكور الصغيرة إلى متوسطة الحجم في حالة الإنجاب. وبعد جمع والسائل المنوي يمكن استخدامها فورا لفحوصات حركية، أو المجمدة لاستخراج الحمض النووي بعد البروتوكول الموضحة هنا. هذا البروتوكول استخراج المكرر لإنفلونزا الطيور في الحيوانات المنوية وقد استخدمت بنجاح في العينات التي جمعت من العديد من أنواع الجواثم (أسير دوميستيكوس باسيرينا سبيزيلا، هايمورهوس مكسيكيو ميجراتوريوس توردوس ) وواحدة كولومبيد (كولومبا ليفيا).

تدليك المذرق واستخراج الحمض النووي باستخدام بروتوكول وصف قد أجريت على العديد من أنواع الجواثم وكولومبيد واحد (الجدول 1). وأكد أن وجود الحيوانات المنوية في السائل المنوي عينات جمعت من تدليك المذرق عرض كمية صغيرة من عينات المخفف تحت مجهر المركب في 400 X التكبير (<strong ...

Watch this Scientific Journal Video about Avian Semen Collection by Cloacal Massage and Isolation of DNA from Sperm at JoVE.com

Avian Semen Collection by Cloacal Massage and Isolation of DNA from Sperm

ويصف هذا البروتوكول المذرق التدليك، أسلوب يدوي غير الغازية لجمع السائل المنوي من الطيور، واستخراج الحمض النووي من إنفلونزا الطيور الحيوانات المنوية باستخدام مجموعة أدوات استخراج تجاري مع بعض التعديلات.

جمع السائل المنوي إنفلونزا الطيور بالتدليك المذرق وعزل الحمض النووي من الحيوانات المنوية

Collection of semen may be useful for a wide range of applications including studies involving sperm quality, sperm telomere dynamics, and epigenetics. ...

Research

JoVE Journal

Biology

Harvesting Sperm and Artificial Insemination of Mice

حصاد الحيوانات المنوية والتلقيح الاصطناعي من الفئران

Rodents of the genus Peromyscus (deer mice) are the most prevalent native North American mammals.  Peromyscus species are used in a wide range of research ...

Isolation of Genomic DNA from Mouse Tails

عزل الحمض النووي الجينوم من الذيول ماوس

Human Pancreatic Islet Isolation: Part I: Digestion and Collection of Pancreatic Tissue

الإنسان عزل جزيرة البنكرياس : الجزء الأول : الهضم ومجموعة من الأنسجة البنكرياس

Management of Type 1 diabetes is burdensome, both to the individual and society, costing over 100 billion dollars annually. Despite the widespread use of ...

Isolation and Culture of Avian Embryonic Valvular Progenitor Cells

العزلة وثقافة الطيور الجنينية الخلايا الاصلية صمامي

Proper formation and function of embryonic heart valves is critical for developmental progression. The early embryonic heart is a U-shaped tube of ...

Isolation and In vitro Activation of Caenorhabditis elegans Sperm

Isolation and In vitro Activation of Caenorhabditis elegans Sperm

والعزلة في المختبر تفعيل انواع معينة ايليجانس الحيوانات المنوية

Males and hermaphrodites are the two naturally found sexual forms in the nematode C. elegans. The amoeboid sperm are produced by both males and ...

A Practical and Novel Method to Extract Genomic DNA from Blood Collection Kits for Plasma Protein Preservation

طريقة عملية ومبتكرة لاستخراج الحمض النووي الجينوم من الدم أطقم مجموعة لحفظ البلازما بروتين

Laboratory tests can be done on the cellular or  fluid portions of the blood. The use of different blood collection tubes  determines the portion of the ...

Collection, Isolation and Enrichment of Naturally Occurring Magnetotactic Bacteria from the Environment

جمع وعزل والإثراء التي تحدث بصورة طبيعية بكتيريا Magnetotactic من البيئة

Magnetotactic bacteria (MTB) are aquatic microorganisms that were first notably described in 19751 from sediment samples collected in salt marshes of ...

Culturing Caenorhabditis elegans in Axenic Liquid Media and Creation of Transgenic Worms by Microparticle Bombardment

Culturing Caenorhabditis elegans in Axenic Liquid Media and Creation of Transgenic Worms by Microparticle Bombardment

زراعة<em&gt; انواع معينة ايليجانس</em &gt; في ممحوضة السائل وسائل الإعلام وإنشاء المعدلة وراثيا الديدان عن طريق قصف Microparticle

In this protocol, we present the required materials, and the procedure for making modified&#160;C. elegans&#160;Habituation and Reproduction media ...

DNA Electroporation, Isolation and Imaging of Myofibers

DNA Electroporation لل، عزل والتصوير من Myofibers

Mature muscle has a unique structure that is amenable to live cell imaging. Herein, we describe the experimental protocol for expressing fluorescently ...

Sperm Collection of Differential Quality Using Density Gradient Centrifugation

جمع الحيوانات المنوية فرق الجودة باستخدام الكثافة المتدرجة الطرد المركزي

In sexual reproduction, a male gamete or sperm cell fuses with a female gamete to bring about fertilization. However, a large number of sperm cells with ...