Name: avian semen collection by cloacal massage and isolation of dna from sperm
Uploaded: 2018-02-05T12:30:00
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हम cloacal मालिश के साथ जल्दी सहायता के लिए जोस Noguera धंयवाद, और Jeffrey Kittilson लैब समर्थन के लिए । इस काम के लिए BJH को एक एनडी EPSCoR FAR0022429 पुरस्कार से समर्थन मिला. प्रकाशन लागत उदारता से जैविक विज्ञान के NDSU विभाग द्वारा समर्थित थे ।

इस प्रोटोकॉल हड्डीवाला पशु विषयों शामिल है और संस्थागत पशु देखभाल और उपयोग समिति उत्तर डकोटा राज्य विश्वविद्यालय में (IACUC) द्वारा अनुमोदित किया गया है ।
1. एक passerine पक्षी से वीर्य संग्रह cloacal मालिश...

<ol>
	<li>Briskie, J. V., Montgomerie, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sperm+size+and+sperm+competition+in+birds.">Sperm size and sperm competition in birds.</a> Proc. R. Soc. B. 247, 89-95 (1992).</li><li>Monaghan, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Telomeres+and+life+histories:+the+long+and+the+short+of+it.">Telomeres and life histories: the long and the short of it.</a> Ann. N.Y. Acad. Sci. 1206, 130-142 (2010).</li><li>Carrell, D. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epigenetics+of+the+male+gamete.">Epigenetics of the male gamete.</a> Fertility and Sterility. 97 (2), 267-274 (2012).</li><li>Burrows, W. H., Quinn, J. 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J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Forensic+application+of+DNA+'fingerprints'.">Forensic application of DNA 'fingerprints'.</a> Nature. 318 (12), 577-579 (1985).</li><li>Criscuolo, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Real-time+quantitative+PCR+assay+for+measurement+of+avian+telomeres.">Real-time quantitative PCR assay for measurement of avian telomeres.</a> J. Avian Biol. 40, 342-347 (2009).</li><li>Lovette, I. J., Fitzpatrick, J. 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हम छोटे और मध्यम पक्षियों से पुनर्उत्पादकता सक्रिय स्थिति में वीर्य एकत्रित करने के लिए एक सरल और विश्वसनीय विधि का वर्णन करते हैं, और एवियन शुक्राणु से डीएनए निकालने ।
वर्णित वीर्य डीएनए न?...

पक्षियों शुक्राणु गुणवत्ता और प्रतियोगिता1, शुक्राणु telomere गतिशीलता2, epigenetics3, और इसी तरह के विषयों को शामिल अध्ययन के लिए आदर्श विषयों रहे हैं, के रूप में वे व्यापक रूप से जैविक अनुसंधान और शुक्राणु में उपयोग किया जाता है आसानी से cloacal का उपयोग कर सकते है नमूना मालिश. Cloacal मालिश पक्षी4,5,6से वीर्य इकट्ठा करने के लिए एक सौंय, गैर इनवेसिव मैनुअल तकनीक है । दोहराया नमूनों आसानी से प्राप्त किया जा सकता है और कोई विशेष उपकरण की आवश्यकता है, यह सरल करने के लिए क्षेत्र या प्रयोगशाला में प्रदर्शन कर रहे हैं । हालांकि cloacal मालिश दशकों के लिए उपयोग में किया गया है, यह उपलब्ध लिखित विवरण से जानने के लिए मुश्किल है । इस प्रकाशन के लिए समय और cloacal मालिश सीखने में शामिल अनिश्चितता को कम करना है ।
cloacal मालिश का उपयोग कर पक्षियों से एकत्र वीर्य गतिशीलता आकलन4,7 या कृत्रिम गर्भाधान के लिए तुरंत इस्तेमाल किया जा सकता है8, या ऐसे उंनत इमेजिंग और डीएनए निष्कर्षण के रूप में अंय का उपयोग करता है के लिए जमे हुए । passerine पक्षियों से वीर्य के नमूने छोटे होते हैं लेकिन घनी पैक्ड शुक्राणु होते हैं. डीएनए सादगी के लिए एक वाणिज्यिक निष्कर्षण किट का उपयोग कर निकाला जाता है, संशोधनों के साथ शुक्राणु के विशेष सुरक्षात्मक सुविधाओं को दूर करने के लिए9. निष्कर्षण के बाद, शुक्राणु telomeres qPCR10का उपयोग कर मापा जा सकता है ।

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:572px;" width="573">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Microhematocrit capillary tubes</td>
			<td style="width:71px;">Fisherbrand</td>
			<td style="width:119px;">22-362566</td>
			<td style="width:167px;">Any supplier can be used. Smaller tubes may be more effective for collection of small semen samples, such as from very small passerine birds like chipping sparrow.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Microcentrifuge tubes</td>
			<td style="width:71px;">Any</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">1x PBS</td>
			<td style="width:71px;">Any</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>Used for storing semen samples prior to DNA extraction.</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">DL-Dithiothreitol</td>
			<td style="width:71px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">D0632</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Tris base</td>
			<td style="width:71px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td align="right" style="width:119px;">10708976001</td>
			<td>Any supplier can be used.</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">EDTA</td>
			<td style="width:71px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td align="right" style="width:119px;">1233508</td>
			<td>Any supplier can be used.</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">NaCl</td>
			<td style="width:71px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td align="right" style="width:119px;">793566</td>
			<td>Any supplier can be used.</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">SDS</td>
			<td style="width:71px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td align="right" style="width:119px;">1614363</td>
			<td>Any supplier can be used.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">QIAamp DNA micro kit</td>
			<td style="width:71px;">Qiagen</td>
			<td align="right" style="width:119px;">56304</td>
			<td>Qiagen QIAamp DNA micro kit is recommended specifically. This DNA extraction protocol has been attempted with other commercial kits but with little success. The reasons for this are unknown to us.&#160;</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

avian semen collection by cloacal massage and isolation of dna from sperm

वीर्य का संग्रह शुक्राणु गुणवत्ता, शुक्राणु telomere गतिशीलता, और epigenetics शामिल अध्ययन सहित आवेदनों की एक विस्तृत श्रृंखला के लिए उपयोगी हो सकता है । पक्षी व्यापक रूप से जैविक अनुसंधान में विषयों का इस्तेमाल कर रहे है और दोहराया शुक्राणु नमूनों को शामिल अध्ययन के लिए आदर्श होते हैं । हालांकि, कुछ संसाधनों को कैसे इकट्ठा करने और एवियन शुक्राणु से डीएनए निकालने के लिए सीखने के इच्छुक लोगों के लिए वर्तमान में उपलब्ध हैं । यहां हम cloacal मालिश, एक सज्जन, गैर इनवेसिव मैनुअल तकनीक का वर्णन एवियन शुक्राणु इकट्ठा करने के लिए । हालांकि इस तकनीक को साहित्य में स्थापित किया गया है, लेकिन उपलब्ध विवरण से सीखना मुश्किल हो सकता है । हम भी एवियन वीर्य से डीएनए निकालने के लिए संशोधनों के साथ एक वाणिज्यिक निष्कर्षण किट का उपयोग करने के लिए जानकारी प्रदान करते हैं । Cloacal मालिश आसानी से प्रजनन हालत में किसी भी छोटे-से मध्यम आकार के नर पक्षी पर इस्तेमाल किया जा सकता है । संग्रह के बाद, वीर्य गतिशीलता परख के लिए तुरंत इस्तेमाल किया जा सकता है, या डीएनए निष्कर्षण के लिए जमे हुए प्रोटोकॉल निंनलिखित यहां वर्णित है । इस निष्कर्षण प्रोटोकॉल एवियन शुक्राणु के लिए परिष्कृत किया गया था और सफलतापूर्वक कई passerine प्रजातियों से एकत्र नमूनों पर इस्तेमाल किया गया है (राहगीर domesticus, Spizella passerina, Haemorhous mexicanus, और Turdus migratorius ) और एक columbid (Columba livia) ।

Cloacal मालिश और डीएनए निष्कर्षण वर्णित प्रोटोकॉल का उपयोग कई passerine प्रजातियों और एक columbid पर प्रदर्शन किया गया है (तालिका 1) । cloacal मालिश द्वारा एकत्र वीर्य के नमूनों में शुक्राणु की उपस्थिति 400...

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Avian Semen Collection by Cloacal Massage and Isolation of DNA from Sperm

इस प्रोटोकॉल cloacal मालिश, पक्षियों से वीर्य इकट्ठा करने के लिए एक गैर इनवेसिव पुस्तिका तकनीक का वर्णन है, और एवियन शुक्राणु से डीएनए निष्कर्षण संशोधनों के साथ एक वाणिज्यिक निष्कर्षण किट का उपयोग कर ।

Cloacal मालिश और शुक्राणु से डीएनए के अलगाव द्वारा एवियन वीर्य संग्रह

Collection of semen may be useful for a wide range of applications including studies involving sperm quality, sperm telomere dynamics, and epigenetics. ...

Research

JoVE Journal

Biology

Harvesting Sperm and Artificial Insemination of Mice

फसल काटने वाले शुक्राणु और चूहे के कृत्रिम गर्भाधान

Rodents of the genus Peromyscus (deer mice) are the most prevalent native North American mammals.  Peromyscus species are used in a wide range of research ...

Isolation of Genomic DNA from Mouse Tails

जीनोमिक डीएनए के माउस पूंछ से अलगाव

Human Pancreatic Islet Isolation: Part I: Digestion and Collection of Pancreatic Tissue

मानव अग्नाशय आइलेट अलगाव: भाग मैं: पाचन और अग्नाशय के ऊतक का संग्रह

Management of Type 1 diabetes is burdensome, both to the individual and society, costing over 100 billion dollars annually. Despite the widespread use of ...

Isolation and Culture of Avian Embryonic Valvular Progenitor Cells

अलगाव और एवियन भ्रूणीय वाल्वुलर पूर्वपुस्र्ष कोशिकाओं की संस्कृति

Proper formation and function of embryonic heart valves is critical for developmental progression. The early embryonic heart is a U-shaped tube of ...

Isolation and In vitro Activation of Caenorhabditis elegans Sperm

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अलगाव और इन विट्रो में सक्रियकरण Caenorhabditis एलिगेंस शुक्राणु

Males and hermaphrodites are the two naturally found sexual forms in the nematode C. elegans. The amoeboid sperm are produced by both males and ...

A Practical and Novel Method to Extract Genomic DNA from Blood Collection Kits for Plasma Protein Preservation

प्लाज्मा प्रोटीन संरक्षण के लिए रक्त संग्रह किट से जीनोमिक डीएनए निकालने के लिए एक व्यावहारिक और उपन्यास विधि

Laboratory tests can be done on the cellular or  fluid portions of the blood. The use of different blood collection tubes  determines the portion of the ...

Collection, Isolation and Enrichment of Naturally Occurring Magnetotactic Bacteria from the Environment

संग्रह है, और स्वाभाविक रूप से पर्यावरण से Magnetotactic बैक्टीरिया उत्पन्न का अलगाव संवर्धन

Magnetotactic bacteria (MTB) are aquatic microorganisms that were first notably described in 19751 from sediment samples collected in salt marshes of ...

Culturing Caenorhabditis elegans in Axenic Liquid Media and Creation of Transgenic Worms by Microparticle Bombardment

Culturing Caenorhabditis elegans in Axenic Liquid Media and Creation of Transgenic Worms by Microparticle Bombardment

संवर्धन<em&gt; Caenorhabditis एलिगेंस</em &gt; Microparticle बमबारी से axenic तरल मीडिया और ट्रांसजेनिक कीड़े के निर्माण में

In this protocol, we present the required materials, and the procedure for making modified&#160;C. elegans&#160;Habituation and Reproduction media ...

DNA Electroporation, Isolation and Imaging of Myofibers

डीएनए इलेक्ट्रोपोरेशन, Myofibers के अलगाव और इमेजिंग

Mature muscle has a unique structure that is amenable to live cell imaging. Herein, we describe the experimental protocol for expressing fluorescently ...

Sperm Collection of Differential Quality Using Density Gradient Centrifugation

शुक्राणु का संग्रह विभेदक गुणवत्ता घनत्व ढाल केंद्रापसारक का उपयोग

In sexual reproduction, a male gamete or sperm cell fuses with a female gamete to bring about fertilization. However, a large number of sperm cells with ...