Name: the ex vivo colon organ culture and its use in antimicrobial host defense studies
Uploaded: 2017-02-13T14:00:00
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Este trabajo fue apoyado por fondos de la enfermedad de Crohn y Colitis Foundation of America, (CCFA; 3711) Prevención del Cáncer y el Instituto de Investigación de Texas (CPRIT; RP160169), y UT Southwestern Medical Center dan a MHZ

Todos los experimentos aquí descritos se realizaron con ratones de 6-8 semanas de edad de tipo salvaje macho (C57BL6 / J) mantenido en una instalación libre de patógenos específicos (SPF) en el Centro de Recursos Animales (ARC), de UT Southwestern Medical Center. Todos los estudios fueron aprobados por el Comité de Cuidado y Uso de Animales Institucional (IACUC) y se llevaron a cabo de acuerdo con las directrices del IACUC y los Institutos Nacionales de Salud de Guía para el Cuidado y Uso de Animales de Laboratori...

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	<li>Maloy, K. J., Powrie, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intestinal+homeostasis+and+its+breakdown+in+inflammatory+bowel+disease.">Intestinal homeostasis and its breakdown in inflammatory bowel disease.</a> Nature. 474, 298-306 (2011).</li><li>Hooper, L. V., Macpherson, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immune+adaptations+that+maintain+homeostasis+with+the+intestinal+microbiota.">Immune adaptations that maintain homeostasis with the intestinal microbiota.</a> Nat Rev Immunol. 10, 159-169 (2010).</li><li>Vaishnava, S., Behrendt, C. L., Ismail, A. S., Eckmann, L., Hooper, L. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Paneth+cells+directly+sense+gut+commensals+and+maintain+homeostasis+at+the+intestinal+host-microbial+interface.">Paneth cells directly sense gut commensals and maintain homeostasis at the intestinal host-microbial interface.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 105, 20858-20863 (2008).</li><li>Kamada, N., Chen, G. Y., Inohara, N., Nunez, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Control+of+pathogens+and+pathobionts+by+the+gut+microbiota.">Control of pathogens and pathobionts by the gut microbiota.</a> Nat Immunol. 14, 685-690 (2013).</li><li>Wu, H. J., Wu, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+gut+microbiota+in+immune+homeostasis+and+autoimmunity.">The role of gut microbiota in immune homeostasis and autoimmunity.</a> Gut Microbes. 3, 4-14 (2012).</li><li>Zimmerman, N. P., Vongsa, R. A., Wendt, M. K., Dwinell, M. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chemokines+and+chemokine+receptors+in+mucosal+homeostasis+at+the+intestinal+epithelial+barrier+in+inflammatory+bowel+disease.">Chemokines and chemokine receptors in mucosal homeostasis at the intestinal epithelial barrier in inflammatory bowel disease.</a> Inflamm Bowel Dis. 14, 1000-1011 (2008).</li><li>Elliott, D. E., Siddique, S. S., Weinstock, J. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Innate+immunity+in+disease.">Innate immunity in disease.</a> Clin Gastroenterol Hepatol. 12, 749-755 (2014).</li><li>Chopra, D. P., Dombkowski, A. A., Stemmer, P. M., Parker, G. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intestinal+epithelial+cells+in+vitro.">Intestinal epithelial cells in vitro.</a> Stem Cells Dev. 19, 131-142 (2010).</li><li>Autrup, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Explant+culture+of+human+colon.">Explant culture of human colon.</a> Methods Cell Biol. 21, 385-401 (1980).</li><li>Qin, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+human+gut+microbial+gene+catalogue+established+by+metagenomic+sequencing.">A human gut microbial gene catalogue established by metagenomic sequencing.</a> Nature. 464, 59-65 (2010).</li><li>Wildenberg, M. E., vanden Brink, G. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+major+advance+in+ex+vivo+intestinal+organ+culture.">A major advance in ex vivo intestinal organ culture.</a> Gut. 61, 961-962 (2012).</li><li>Leushacke, M., Barker, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ex+vivo+culture+of+the+intestinal+epithelium:+strategies+and+applications.">Ex vivo culture of the intestinal epithelium: strategies and applications.</a> Gut. 63, 1345-1354 (2014).</li><li>Sato, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Single+Lgr5+stem+cells+build+crypt-villus+structures+in+vitro+without+a+mesenchymal+niche.">Single Lgr5 stem cells build crypt-villus structures in vitro without a mesenchymal niche.</a> Nature. 459, 262-265 (2009).</li><li>Tsilingiri, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Probiotic+and+postbiotic+activity+in+health+and+disease:+comparison+on+a+novel+polarised+ex-vivo+organ+culture+model.">Probiotic and postbiotic activity in health and disease: comparison on a novel polarised ex-vivo organ culture model.</a> Gut. 61, 1007-1015 (2012).</li><li>Haque, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Early+interactions+of+Salmonella+enterica+serovar+typhimurium+with+human+small+intestinal+epithelial+explants.">Early interactions of Salmonella enterica serovar typhimurium with human small intestinal epithelial explants.</a> Gut. 53, 1424-1430 (2004).</li><li>Hicks, S., Candy, D. C., Phillips, A. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adhesion+of+enteroaggregative+Escherichia+coli+to+pediatric+intestinal+mucosa+in+vitro.">Adhesion of enteroaggregative Escherichia coli to pediatric intestinal mucosa in vitro.</a> Infect Immun. 64, 4751-4760 (1996).</li><li>Knutton, S., Lloyd, D. R., Candy, D. C., McNeish, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vitro+adhesion+of+enterotoxigenic+Escherichia+coli+to+human+intestinal+epithelial+cells+from+mucosal+biopsies.">In vitro adhesion of enterotoxigenic Escherichia coli to human intestinal epithelial cells from mucosal biopsies.</a> Infect Immun. 44, 514-518 (1984).</li><li>Senior, P. V., Pritchett, C. J., Sunter, J. P., Appleton, D. R., Watson, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Crypt+regeneration+in+adult+human+colonic+mucosa+during+prolonged+organ+culture.">Crypt regeneration in adult human colonic mucosa during prolonged organ culture.</a> J Anat. 134, 459-469 (1982).</li><li>Smollett, K., Shaw, R. K., Garmendia, J., Knutton, S., Frankel, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Function+and+distribution+of+EspG2,+a+type+III+secretion+system+effector+of+enteropathogenic+Escherichia+coli.">Function and distribution of EspG2, a type III secretion system effector of enteropathogenic Escherichia coli.</a> Microbes Infect. 8, 2220-2227 (2006).</li><li>Bareiss, P. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Organotypical+tissue+cultures+from+adult+murine+colon+as+an+in+vitro+model+of+intestinal+mucosa.">Organotypical tissue cultures from adult murine colon as an in vitro model of intestinal mucosa.</a> Histochem Cell Biol. 129, 795-804 (2008).</li><li>Tsilingiri, K., Sonzogni, A., Caprioli, F., Rescigno, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+method+for+the+culture+and+polarized+stimulation+of+human+intestinal+mucosa+explants.">A novel method for the culture and polarized stimulation of human intestinal mucosa explants.</a> J Vis Exp. , e4368 (2013).</li><li>Hu, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+DNA+Sensor+AIM2+Maintains+Intestinal+Homeostasis+via+Regulation+of+Epithelial+Antimicrobial+Host+Defense.">The DNA Sensor AIM2 Maintains Intestinal Homeostasis via Regulation of Epithelial Antimicrobial Host Defense.</a> Cell Rep. 13, 1922-1936 (2015).</li><li>Moorghen, M., Chapman, M., Appleton, D. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+organ-culture+method+for+human+colorectal+mucosa+using+serum-free+medium.">An organ-culture method for human colorectal mucosa using serum-free medium.</a> J Pathol. 180, 102-105 (1996).</li><li>Dame, M. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+colon+tissue+in+organ+culture:+preservation+of+normal+and+neoplastic+characteristics.">Human colon tissue in organ culture: preservation of normal and neoplastic characteristics.</a> In Vitro Cell Dev Biol Anim. 46, 114-122 (2010).</li><li>Grant, A. J., Woodward, J., Maskell, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+an+ex+vivo+organ+culture+model+using+human+gastro-intestinal+tissue+and+Campylobacter+jejuni.">Development of an ex vivo organ culture model using human gastro-intestinal tissue and Campylobacter jejuni.</a> FEMS Microbiol Lett. 263, 240-243 (2006).</li></ol>

Las células epiteliales intestinales son muy sensibles en cuanto a sus necesidades de crecimiento y por lo tanto difíciles de cultivar. Las células epiteliales aisladas por tratamiento con EDTA no sobreviven en medios de cultivo celular convencionales, tales como DMEM 8. Por lo tanto, huésped-patógeno estudios de interacción utilizando cripta aislado o células epiteliales primarias son muy difíciles. Recientemente, Sato et al. se describe un sistema de cultivo organoid cripta, que es muy ...

El intestino representa un sistema dinámico que actúa como una barrera para los microorganismos comensales, lucha contra los patógenos invasores, y regula la composición microbiana 1. Las células epiteliales intestinales, que consta de los enterocitos, células caliciformes, células de Paneth y células enteroendocrinas, son las principales poblaciones de células que proporcionan las respuestas de defensa del huésped contra microbiota intestinal. Las células caliciformes producen mucinas que crean una zona desmilitarizada en la parte superior de la capa epitelial 2. Las células de Paneth y enterocitos producen péptidos antimicrobianos, citoquinas, y las especies de oxígeno y nitrógeno reactivos que constituyen las respuestas de defensa del huésped antimicrobianos y contribuyen a la formación de la composición microbiana intestinal 3, 4. Además de las células epiteliales, las células inmunes incluyendo macrófagos, células dendríticas, neutrófilos, células asesinas naturales, linfocitos y inna<html> células linfoides de TE en la lámina propia y la submucosa juegan un papel crítico en las respuestas de defensa del huésped antimicrobianos intestinales por citoquinas que producen, quimiocinas, y otros mediadores de 5 - 7. Con el fin de entender cómo el sistema inmune de la mucosa regula microbiota y proporciona protección contra la infección microbiana, es importante tener en cuenta la compleja interacción de las poblaciones de células heterogéneas de la tripa. Sin embargo, un modelo in vitro que abarca todas las características del intestino no está disponible. Por lo tanto, los estudios moleculares en la interacción huésped-patógeno en el intestino son muy desafiante. En los últimos años, varios sistemas de modelos que imitan aspectos de la mucosa intestinal han sido desarrollados para la investigación de los procesos fisiopatológicos implicados en las enfermedades inflamatorias del intestino (IBD) y otros trastornos gastrointestinales 8 -= &quot;xref&quot;&gt; 14. líneas de células epiteliales intestinales inmortalizadas son a menudo utilizados para estudiar las respuestas específicas de células epiteliales. Sin embargo, debido a la expresión diferencial de genes y la función en las células inmortalizadas, los datos obtenidos del uso de esas células no suelen coincidir con los observados en los estudios in vivo. Cripta intestinal organoid cultura recientemente ha surgido como una herramienta potencial para la evaluación de la respuesta del epitelio intestinal a diferentes estímulos 13. En este sistema, se permitió que las células madre de la cripta para crecer y desarrollar una estructura organoid 3D. Mientras que el sistema de cultivo organoide es muy útil para el estudio de muchos aspectos del epitelio intestinal, que no imita la compleja interacción de las células inmunes, células epiteliales y productos microbianos. El cultivo ex vivo del tejido intestinal ofrece una mejor representación de las respuestas de defensa en vivo de acogida. En este método, una parte del intestino se cultiva en una placa de cultivo celular ingenioh medios adecuados que permitan a los diferentes tipos de poblaciones de células en el intestino para ser metabólicamente activo durante al menos 48 h. Por lo tanto, un cultivo ex vivo del órgano se puede utilizar para medir la expresión de genes antimicrobianos y las respuestas de defensa del huésped del intestino a un estímulo particular. Los investigadores han estado utilizando el sistema de cultivo de órganos ex vivo para estudiar las respuestas de defensa del huésped frente a la infección microbiana en el intestino 15 de - 21 años. Recientemente hemos adoptado el sistema de cultivo de órganos para estudiar el papel de la inflamasoma en las respuestas de defensa del huésped antimicrobianos en colones de ratones 22. El inflamasoma es una plataforma molecular para la activación de la caspasa-1, que se requiere para la producción de IL-1β madura y IL-18. Hemos demostrado que la IL-1β e IL-18 inducen péptidos antimicrobianos que matan con eficacia pathobionts comensales tales como E. coli </em&gt;. Esta observación fue consistente con el aumento de la carga de E. coli en colones de ratones inflamosoma-22 defectuosa. Este sistema, por lo tanto se puede utilizar para estudiar el papel de los receptores de reconocimiento de patrones (PRRS) y otras moléculas inmunes innatas en las respuestas de defensa del huésped antimicrobianos intestinales, así como la patogénesis de los trastornos intestinales tales como la enfermedad inflamatoria del intestino (IBD) y el cáncer colorrectal (CRC). Hay más de 200 genes de susceptibilidad IBD, y mutaciones en muchos de estos genes están asociados con la composición microbiana alterada en el intestino. Es de gran importancia clínica para determinar el mecanismo preciso por el que los genes de susceptibilidad IBD-regulan microbiota intestinal. El objetivo general de este método es introducir un protocolo básico de ex vivo de cultivo de órganos de colon y demostrar cómo este método de cultivo se puede utilizar para estudiar las respuestas de defensa del huésped antimicrobianos del intestino.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Advanced DMEM/ F12</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>12634-010</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dulbecco&#39;s phosphate buffered saline, modified, w/o Calcium chloride &#38; Magnesium chloride</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>5634</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FBS, heat inactivated</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>F4135</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin-Streptomycin</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>15070063</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gentamicin solution</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>G1272</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mouse IL-1b recombinan</td>
			<td>Reprokine</td>
			<td>RKP10749</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mouse IL-18 recombinant</td>
			<td>Reprokine</td>
			<td>RKP70380</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TRIzol Reagent</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>15596018</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Difco Luria-Bertani Broth&#160;</td>
			<td>BD Bioscience</td>
			<td>244620</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD&#160;Difco Dehydrated Culture Media: MacConkey Agar</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>DF0075-17-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NanoDrop 1000 Spectrophotometer</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td></td>
			<td>Uded to measure RNA concentration</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>UV/Vis Spectrophotometer</td>
			<td>BECKMAN</td>
			<td>DU 530</td>
			<td>Used to determine E. coli count</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>iScript RT Supermix, 100 rxns</td>
			<td>Bio-Rad</td>
			<td>1708841</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>iTaq Univer SYBR Green Supermix&#160;</td>
			<td>Bio-Rad</td>
			<td>1725125&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lysing Matrix S (1/8&#34;), 2 mL Tube</td>
			<td>MP Biomedicals</td>
			<td>116925500</td>
			<td>Used to homgenize colon organ for RNA isolation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FastPrep-24 5G System</td>
			<td>Bio-Rad</td>
			<td>116005500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>100x15 Petri Dish</td>
			<td>Falcon</td>
			<td>5687</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Plate 6well ps TC CS100, Cellstar, 6w, tc, F-bottom (Flat), w/lid, sterile</td>
			<td>Cellstar</td>
			<td>5085</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>100 micron cell strainer</td>
			<td>Falcon</td>
			<td>5698</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sorvall Legend Micro 21R Centrifuge</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sorvall ST40R Centrifuge</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forma Scientific orbital shaker</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

the ex vivo colon organ culture and its use in antimicrobial host defense studies

El intestino muestra una arquitectura de cripta estructuras repetitivas que consisten en diferentes tipos de células epiteliales, lámina propia que contiene células del sistema inmune, y el estroma. Todas estas células heterogéneas contribuyen a la homeostasis intestinal y participar en la defensa del huésped antimicrobiana. Por lo tanto, la identificación de un modelo sustituto para el estudio de la respuesta inmune y la actividad antimicrobiana del intestino en un entorno in vitro es extremadamente difícil. Los estudios in vitro con líneas de células epiteliales intestinales inmortalizadas o incluso cripta primaria organoid cultura no representan la fisiología exacta del intestino normal y su microambiente. Aquí, se discute un método de tejido de colon cultivo ratón en una placa de cultivo y cómo este ex vivo sistema de cultivo de órganos se puede implementar en estudios relacionados con las respuestas de defensa del huésped antimicrobianos. En experimentos representativos, se demostró que dos puntos en cultivo de órganos expresan péptidos antimicrobianos en respOnse a exógenos IL-1β y IL-18. Además, las moléculas efectoras antimicrobianos producidos por los tejidos de colon en el cultivo de órganos matan eficientemente Escherichia coli in vitro. Este enfoque, por lo tanto, puede ser utilizado para diseccionar el papel de patrones moleculares de patógenos y asociado de peligros y sus receptores celulares en la regulación de la respuesta inmune innata intestinales y las respuestas de defensa del huésped antimicrobianos.

Una imagen representativa de dos puntos en cultivo de órganos se muestra en la Figura 1. Las piezas de colon en la cultura siguen siendo metabólicamente y fisiológicamente activo. Responden de manera eficiente a los estímulos exógenos añadidos al medio de cultivo. Un flujo de trabajo esquemática de la preparación del tejido del colon para el cultivo ex vivo y la estimulación con estímulos exógenos, por ejemplo, IL-1β y IL-18, se muestra en l...

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The Ex Vivo Colon Organ Culture and Its Use in Antimicrobial Host Defense Studies

The ex vivo organ culture allows investigation of biological processes in the context of the intact tissue architecture. Here, we introduce a method of ex vivo culture of the mouse colon, which can be used to study innate immunity and antimicrobial host defense in the intestine.

los<em&gt; Ex Vivo</em&gt; Colon Organo cultura y su uso en estudios de defensa antimicrobiana de host

The intestine displays an architecture of repetitive crypt structures consisting of different types of epithelial cells, lamina propia containing immune ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

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los<em&gt; Ex Vivo</em&gt; Cultura y Reconocimiento de Patrones receptor de estimulación de ratón intestinal organoides

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