Name: a microfluidic flow chamber model for platelet transfusion and hemostasis measures platelet deposition and fibrin formation in real-time
Uploaded: 2017-02-14T15:00:00
Duration: 9 min 38 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Microfluidic Flow Chamber Model for Platelet Transfusion and Hemostasis Measures Platelet Deposition and Fibrin Formation in Real-time at JoVE.com

وأيد هذا البحث من قبل مؤسسة البحوث والتنمية من الصليب الأحمر، فلاندرز خدمة الدم البلجيكية. ونحن نعترف بالدعم المالي المقدم من &quot;Bijzonder onderzoeksfond&quot; (محايد - صندوق الأبحاث الخاص) من جامعة غنت الممنوحة للمشروع مع عدد العقد BOF30290744.

<ol>
	<li>Levi, M., Hunt, B. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+critical+appraisal+of+point-of-care+coagulation+testing+in+critically+ill+patients.">A critical appraisal of point-of-care coagulation testing in critically ill patients.</a> J. Thromb. Haemost. 13 (11), 1960-1967 (2015).</li><li>Van Aelst, B., Feys, H. B., Devloo, R., Vandekerckhove, P., Compernolle, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microfluidic+Flow+Chambers+Using+Reconstituted+Blood+to+Model+Hemostasis+and+Platelet+Transfusion+In+Vitro.">Microfluidic Flow Chambers Using Reconstituted Blood to Model Hemostasis and Platelet Transfusion In Vitro.</a> J. Vis. Exp. (109), e53823 (2016).</li><li>Witt, S. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+platelet+function+defects+by+multi-parameter+assessment+of+thrombus+formation.">Identification of platelet function defects by multi-parameter assessment of thrombus formation.</a> Nat. Commun. 5, 4257 (2014).</li><li>Cazenave, J. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preparation+of+washed+platelet+suspensions+from+human+and+rodent+blood.">Preparation of washed platelet suspensions from human and rodent blood.</a> Methods Mol. Biol. 272, 13-28 (2004).</li><li>Roest, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Flow+chamber-based+assays+to+measure+thrombus+formation+in+vitro:+requirements+for+standardization.">Flow chamber-based assays to measure thrombus formation in vitro: requirements for standardization.</a> J. Thromb. Haemost. 9 (11), 2322-2324 (2011).</li><li>Zwaal, R. F., Comfurius, P., Bevers, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lipid-protein+interactions+in+blood+coagulation.">Lipid-protein interactions in blood coagulation.</a> Biochim. Biophys. Acta. 1376 (3), 433-453 (1998).</li><li>Dargaud, Y., Luddington, R., Baglin, T. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Elimination+of+contact+factor+activation+improves+measurement+of+platelet-dependent+thrombin+generation+by+calibrated+automated+thrombography+at+low-concentration+tissue+factor.">Elimination of contact factor activation improves measurement of platelet-dependent thrombin generation by calibrated automated thrombography at low-concentration tissue factor.</a> J. Thromb. Haemost. 4 (5), 1160-1161 (2006).</li><li>Bevers, E. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Defective+Ca(2+)-induced+microvesiculation+and+deficient+expression+of+procoagulant+activity+in+erythrocytes+from+a+patient+with+a+bleeding+disorder:+a+study+of+the+red+blood+cells+of+Scott+syndrome.">Defective Ca(2+)-induced microvesiculation and deficient expression of procoagulant activity in erythrocytes from a patient with a bleeding disorder: a study of the red blood cells of Scott syndrome.</a> Blood. 79 (2), 380-388 (1992).</li><li>Bevers, E. M., Comfurius, P., van Rijn, J. L., Hemker, H. C., Zwaal, R. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Generation+of+prothrombin-converting+activity+and+the+exposure+of+phosphatidylserine+at+the+outer+surface+of+platelets.">Generation of prothrombin-converting activity and the exposure of phosphatidylserine at the outer surface of platelets.</a> Eur. J. Biochem. 122 (2), 429-436 (1982).</li><li>Muller, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Platelet+polyphosphates+are+proinflammatory+and+procoagulant+mediators+in+vivo.">Platelet polyphosphates are proinflammatory and procoagulant mediators in vivo.</a> Cell. 139 (6), 1143-1156 (2009).</li><li>Smith, S. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Polyphosphate+modulates+blood+coagulation+and+fibrinolysis.">Polyphosphate modulates blood coagulation and fibrinolysis.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 103 (4), 903-908 (2006).</li><li>Tiberghien, P., Follea, G., Muller, J. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Platelet+Transfusions+in+Acute+Leukemia.">Platelet Transfusions in Acute Leukemia.</a> N. Engl. J. Med. 375 (1), 96-97 (2016).</li><li>Deckmyn, H., Feys, H. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assays+for+quality+control+of+platelets+for+transfusion.">Assays for quality control of platelets for transfusion.</a> ISBT Science Series. 8 (1), 221-224 (2013).</li><li>Sakariassen, K. S., Bolhuis, P. A., Sixma, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+blood+platelet+adhesion+to+artery+subendothelium+is+mediated+by+factor+VIII-Von+Willebrand+factor+bound+to+the+subendothelium.">Human blood platelet adhesion to artery subendothelium is mediated by factor VIII-Von Willebrand factor bound to the subendothelium.</a> Nature. 279 (5714), 636-638 (1979).</li><li>Alevriadou, B. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Real-time+analysis+of+shear-dependent+thrombus+formation+and+its+blockade+by+inhibitors+of+von+Willebrand+factor+binding+to+platelets.">Real-time analysis of shear-dependent thrombus formation and its blockade by inhibitors of von Willebrand factor binding to platelets.</a> Blood. 81 (5), 1263-1276 (1993).</li><li>Nesbitt, W. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+shear+gradient-dependent+platelet+aggregation+mechanism+drives+thrombus+formation.">A shear gradient-dependent platelet aggregation mechanism drives thrombus formation.</a> Nat. Med. 15 (6), 665-673 (2009).</li><li>Stalker, T. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hierarchical+organization+in+the+hemostatic+response+and+its+relationship+to+the+platelet-signaling+network.">Hierarchical organization in the hemostatic response and its relationship to the platelet-signaling network.</a> Blood. 121 (10), 1875-1885 (2013).</li><li>Swieringa, F., Kuijpers, M. J., Lamers, M. M., vander Meijden, P. E., Heemskerk, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rate-limiting+roles+of+the+tenase+complex+of+factors+VIII+and+IX+in+platelet+procoagulant+activity+and+formation+of+platelet-fibrin+thrombi+under+flow.">Rate-limiting roles of the tenase complex of factors VIII and IX in platelet procoagulant activity and formation of platelet-fibrin thrombi under flow.</a> Haematologica. 100 (6), 748-756 (2015).</li><li>McDonald, J. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fabrication+of+microfluidic+systems+in+poly(dimethylsiloxane).">Fabrication of microfluidic systems in poly(dimethylsiloxane).</a> Electrophoresis. 21 (1), 27-40 (2000).</li><li>Gutierrez, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microfluidic+devices+for+studies+of+shear-dependent+platelet+adhesion.">Microfluidic devices for studies of shear-dependent platelet adhesion.</a> Lab. Chip. 8 (9), 1486-1495 (2008).</li><li>Hartman, R. L., McMullen, J. P., Jensen, K. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Deciding+whether+to+go+with+the+flow:+evaluating+the+merits+of+flow+reactors+for+synthesis.">Deciding whether to go with the flow: evaluating the merits of flow reactors for synthesis.</a> Angew. Chem. Int. Ed. Engl. 50 (33), 7502-7519 (2011).</li><li>Podoplelova, N. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Blood coagulation factors bound to procoagulant platelets are concentrated in their cap structures to promote clotting. , (2016).</li><li>Der Meijden, P. E. V. a. n., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Platelet-+and+erythrocyte-derived+microparticles+trigger+thrombin+generation+via+factor+XIIa.">Platelet- and erythrocyte-derived microparticles trigger thrombin generation via factor XIIa.</a> J. Thromb. Haemost. 10 (7), 1355-1362 (2012).</li><li>Nickel, K. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+polyphosphate-factor+XII+pathway+drives+coagulation+in+prostate+cancer-associated+thrombosis.">The polyphosphate-factor XII pathway drives coagulation in prostate cancer-associated thrombosis.</a> Blood. 126 (11), 1379-1389 (2015).</li><li>Okorie, U. M., Denney, W. S., Chatterjee, M. S., Neeves, K. B., Diamond, S. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Determination+of+surface+tissue+factor+thresholds+that+trigger+coagulation+at+venous+and+arterial+shear+rates:+amplification+of+100+fM+circulating+tissue+factor+requires+flow.">Determination of surface tissue factor thresholds that trigger coagulation at venous and arterial shear rates: amplification of 100 fM circulating tissue factor requires flow.</a> Blood. 111 (7), 3507-3513 (2008).</li><li>Shen, F., Kastrup, C. J., Liu, Y., Ismagilov, R. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Threshold+response+of+initiation+of+blood+coagulation+by+tissue+factor+in+patterned+microfluidic+capillaries+is+controlled+by+shear+rate.">Threshold response of initiation of blood coagulation by tissue factor in patterned microfluidic capillaries is controlled by shear rate.</a> Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol. 28 (11), 2035-2041 (2008).</li></ol>

الكتاب ليس لديهم ما يكشف.

ونقل الصفيحات مركزات يوصف للمريض نقص الصفيحات لمنع أو وقف النزيف. وقد أبرزت تأثيره السريرية مؤخرا في استعراض تاريخي للسرطان الدم الحاد 12، مشيرة إلى أن زيادة معدلات البقاء على قيد الحياة من الأطفال المرضى في الستينات والسبعينات تعزى إلى حد كبير إلى التحسينات في (الصفائح الدموية) الطب نقل الدم. يتم استخدام مركزات الصفيحات أيضا لوقف النزيف في مجال الصدمات النفسية الحادة أو أثناء الجراحة. في هذه الظروف، ويفضل الصفائح الدموية مع خصائص محفز التخثر ممتازة التي تبدأ بسرعة الارقاء، ولكن تعد مركزات الصفائح الدموية من التبرعات من المتبرعين، وعلى عكس الأدوية الدوائي، وموحدة من قبل التحضير فقط، وليس من قبل (الكيميائية) التكوين. لذلك، العديد من الأسئلة في مجال بنوك الدم هي التي لم يرد عليها، بما فيها تلك المتعلقة الطرائق المثلى للتبرع، وظروف التخزين، وممارسات نقل الدم. في مجال ررatelet (نقل) البيولوجيا، العديد من الأسئلة بشأن إزالة الخلايا من التداول، كما تبقى مساهمة الصفائح الدموية المنقول إلى الارقاء، أو المناعة التي لم يتم الرد عليها. هي التقنيات المخبرية العديدة للتحليل وظيفة الصفيحات المتاحة، ولكن هذه تعالج في الغالب الجانب المفرد وظيفة الصفائح الدموية، مثل تجميع أو تحبب 13. لتقييم نطاق واسع الصفائح الدموية والمركزات الصفائح الدموية، ونماذج شاملة من الارقاء لا غنى عنها، وهذه يجب أن تشمل الهيدروناميكا. الريولوجيا الدم ضروري لتفسير السلوك الصفائح الدموية بشكل صحيح أثناء الارقاء 14 أو 15 أو تخثر 16، حتى لو منع تخثر الدم يمنع الكالسيوم 2+ و / أو الثرومبين للمشاركة في وجود سترات أو الهيبارين، على التوالي 2. لدراسة التفاعل بين تجلط الدم والصفائح الدموية وظيفة تحت تدفق 17، مطلوب 18 وتوليد الثرومبين العادي، وبالتالي، مجانا الكالسيوم 2+ كذلك. الإعداد التجريبية لدراسة الارقاء في ظل هذه الظروف معقدة، لأن التدابير لمنع &quot;الأداة&quot; أو التنشيط غير المنضبط للتخثر ينبغي أن تؤخذ قدر الإمكان. وعلاوة على ذلك، تستخدم العديد من المجموعات البحثية المتخصصة حسب الطلب الأجهزة 19 و 20، والذي يسبب التغير الكبير بين المختبرات 5. القيود النمطية لهذا النهج هي استخدام السفن مستطيلة، لمحات من تدفق غير نابض، ومواد الطلاء غير البشرية 5. مقايسة وصفنا هنا يستخدم الأدوات المتاحة تجاريا، وبالتالي قد تكون مناسبة لتوحيد. لأنه يتم تنشيط رد فعل تجلط الدم شلال بسهولة مرة واحدة لا يرد الدم داخل الجسم البشري، إعادة التكلس تسيطر هي خطوة محورية. تيس تحقيق ذلك، إضافة الكالسيوم 2+ يجب تأجيلها إلى قبل نضح على سطح الكولاجين رد الفعل، لأنه عندما يتم تزويد 2+ عازلة الكالسيوم بكميات كبيرة إلى الدم ثابتة، تخثر يأخذ حتما مكان، في نهاية المطاف انسداد الأنابيب ويتحامل البيانات تفسير (لا تظهر البيانات). الحل لهذه المشكلة هو ضخ العازلة الكالسيوم 2+ والدم على حدة، مما يسمح لخلط من قبل قوات الحمل الحراري وناشر خلال نضح في طريقها إلى غرفة التحليل. ويتحقق الاختلاط الكامل في قطعة 46 سم من الأنابيب بين الاختلاط وتحليل الدوائر. تم احتساب هذه المدة لمدة بقاء الأمثل من الكواشف إلى المزيج على أساس القوانين الأساسية للكتلة والنقل الحمل الحراري 21 خلال نضح بمعدل تدفق المستخدمة (1000 ق -1). أثبت هذا النهج يمكن السيطرة عليها وقابلة للتكرار. تفعيل الاتصال من تجلط الدم وينظر أحيانا باعتبارها الأداة بسيطةاخذ عينات من الدم ويجب تجنبها عند تفسير زمن التجلط. لذلك، أثبتنا أنه في حالة عدم وجود موانع، يبدأ تجلط الدم تلامس يسببها في 16.7 دقيقة (± 3.7 دقيقة) التروية. في ظل وجود CTI لمنع تفعيل الاتصال FXIIa بوساطة، لا يبدأ تجلط الدم خلال تعريفها بشكل تعسفي من التجربة (30 دقيقة). هذه النافذة من التجريب هو طويل بما فيه الكفاية لتمييز عينات التي هي المؤيدة أو جرعات. على الرغم من تجلط الدم عن طريق تفعيل الاتصال يمكن أن يكون نتيجة غير مرغوب فيها من الدم بالاتصال الأسطح الاصطناعية، بياناتنا تظهر تأثير جرعة البيولوجي واضح من الصفائح الدموية. هذا يمكن أن يكون هاما للطب نقل الدم، بسبب النتائج الأخيرة على العامل XII، الصفائح الدموية فوسفات 10، توزيع فسفاتيديل 22، والمجهرية الدقيقة الصفائح الدموية 23 وإعادة تقييم الواقع بالتماس التخثر كما مساهما هاما في الارقاء، والبريدوخاصة في سياق تخثر 24. على سبيل المثال، فإن العائد المتغير من نقل الصفائح الدموية لدى مرضى أو التعبير فسفاتيديل متغير من الصفائح الدموية راهن قد بالتالي تحفز التغير في الكفاءة العلاجية إذا ثبت تخثر الناجح يعتمد على هذه العوامل. بواسطة lipidated rhTF شارك في شل حركة مع الكولاجين، الطريق تخثر خارجي، أو TF مسار، يتم تنشيط خلال ترسب الصفائح الدموية على الكولاجين. ويمتد هذا الفحص إلى الوضع الأكثر شمولا، كنموذج للإصابات التي تجلب الدم في اتصال مع الخلايا التي تحمل TF والأنسجة. وتشير البيانات المتوفرة لدينا أن شارك في تجميد الكولاجين وTF ينخفض ​​لحظة بداية تجلط الدم ولكن لا يغير من معدل تجلط الدم. من المذكرة، وكمية من rhTF ثبتوا على السطح هو متغير مهم في هذا النموذج 25 و 26 و يجب أن تكون موحدة ضمن دراسة معينة. في presenم من CTI، مسار TF يمكن دراستها على وجه الحصر (لا يظهر) لأنه يتم منع تفعيل الاتصال. في الختام، لدينا الإعداد التجريبية يجمع نموذجا للنقل عن طريق إعادة الدم الصفيحات مع الصفائح الدموية راهن ونموذج من الارقاء التي تعتمد على الكالسيوم ترسب الصفائح الدموية وتكوين الفيبرين تحت تدفق الهيدروديناميكية. وسيتم استخدام هذا الاختبار للرد على أسئلة حول طبيعة محفز التخثر الصفائح الدموية راهن وتقنيات إعداد التركيز آثار الصفائح الدموية لديها في هذا الشأن.

وتصور الارقاء الابتدائي والثانوي في الأصل عن اثنين من العمليات الكيميائية الحيوية للانفصال نسبيا. كان ينظر الإرقاء الأولي كمساهم رئيسي في ظروف التدفق الشرياني، مع دورا رئيسيا لالصفائح الدموية، في حين كان ينظر الإرقاء الثانوي للسيطرة على تجلط الدم تحت تدفق الدم الوريدي، والسماح للسلسلة البروتيني لتشكيل الليفين غير قابلة للذوبان. أعادت تشكيل العقود القليلة الماضية هذه النظرة التقليدية إلى حد كبير، معترفا بأن نشاط الصفائح الدموية وتخثر مترابطة وهي عمليات لا تقل أهمية خلال الارقاء الفسيولوجية والمرضية في كل (غير المتطرفة) الأوساط الهيدروديناميكية. وقد ترجم هذا الرأي إلى العيادة، حيث يتزايد استخدامها المقايسات وضعت لقياس شامل تجلط كامل الدم، ولكن مع العديد من الأسئلة المتبقية على أهمية وإمكانية التطبيق وفائدة 1. نشرنا مؤخرا تحليل وظيفي من الصفائح الدمويةيركز باستخدام غرف تدفق الموائع الدقيقة المغلفة مع الكولاجين ييفي في نموذج في المختبر من نقل 2، مع عينات تحتوي على كميات طبيعية من خلايا الدم الحمراء والبلازما والصفائح الدموية. يستخدم هذا الأسلوب الهيبارين أو هيرودين anticoagulated الدم، مما يعني ضمنا أي أو مشاركة محدودة من الارقاء الثانوي، والتي تعتمد على توليد الثرومبين والكالسيوم المتأين (كاليفورنيا 2+). لدعم تشكيل الثرومبين، وبالتالي لتشمل جميع جوانب الارقاء تحت تدفق ميكروفلويديك، قمنا بتطوير طريقة مكملة على القاعدة التقنية نفسها، بما في ذلك الآن مجانا الكالسيوم 2+. وبهذه الطريقة، ترسب الصفائح الدموية وتكوين الفيبرين يمكن دراستها، ومرة ​​أخرى في نموذج نقل الصفائح الدموية، لتقييم الصفائح الدموية نوعية التركيز. في هذه الطريقة، وصفت الصفائح والفيبرينوجين مع fluorophores التي فصلت تماما أطياف الانبعاث. اللون المزدوج، في الوقت الحقيقي الفيديو المجهر ثم يسمح تحليلالتصاق الصفيحات الأساسي، فضلا عن بدء تجلط الدم وترسب الفيبرين. متغير مهم في هذا النوع من الاختبار هو إعادة التكلس، لأن إضافة الكالسيوم 2+ إلى الدم ثابتة، قبل التروية، سيتسبب حتما تخثر بمبادرة الاتصال في الحاوية. سيكون هذا بدء التحيز قراءات بسبب انسداد الأنابيب وبيوشيب مداخل قبل التروية. لذلك، في أسلوبنا، anticoagulated سترات الدم وضخت في كاليفورنيا 2+ عازلة المحتوية على حدة من خلال الساقين العليا من غرفة مدخل على شكل حرف Y. يتم خلط المكونات أثناء التروية قبل الدخول إلى غرفة تحليل المغلفة مع الكولاجين وحده أو بالاشتراك مع عامل النسيج البشري المؤتلف (rhTF). من خلال تكييف سرعات تدفق مضخات منفصلة وتركيز الكالسيوم 2+ في المنطقة العازلة، وتخفيف 10٪ من عينة الدم النهائية تأخذ مكان. باستخدام هذا البروتوكول الموسعة، ونحن لشرح مساهمة خثراتعامل نشوئها الثاني عشر (العامل XII) وتركيز الصفائح الدموية للاتصال مسار تخثر الشروع في ظل التدفق. تظهر البيانات المتوفرة لدينا أيضا أنه من خلال طلاء rhTF جنبا إلى جنب مع الكولاجين، ومسار العامل النسيجي يمكن قياسها بصورة متزامنة.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="1210">
	<tbody>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;width:291px;">1 mL Syringe</td>
			<td style="width:220px;">BD</td>
			<td style="width:256px;">A00434</td>
			<td style="width:443px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;width:291px;">10 mL Syringe</td>
			<td style="width:220px;">BD</td>
			<td style="width:256px;">309604</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;width:291px;">2 mL Syringe</td>
			<td style="width:220px;">BD</td>
			<td style="width:256px;">307727</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;width:291px;">Alexa Fluor 405</td>
			<td style="width:220px;">Life Technologies</td>
			<td style="width:256px;">A30100</td>
			<td style="width:443px;">The manufacturer&#39;s manual was followed for labeling of fibrinogen</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;width:291px;">BD vacutainer Eclipse</td>
			<td style="width:220px;">Becton, Dickinson and Company</td>
			<td style="width:256px;">368650</td>
			<td>Blood collection needle with preattached holder</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;width:291px;">BD vacutainer tube with EDTA&#160;</td>
			<td style="width:220px;">Becton, Dickinson and Company</td>
			<td style="width:256px;">368856</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;width:291px;">BD vacutainer tube with Sodium Citrate</td>
			<td style="width:220px;">Becton, Dickinson and Company</td>
			<td style="width:256px;">366575</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;width:291px;">Blocking buffer</td>
			<td style="width:220px;">in house preparation</td>
			<td style="width:256px;">in house preparation</td>
			<td style="width:443px;">1.0% (w/v) bovine serum albumin and 0.1% (w/v) glucose in HBS</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;width:291px;">Calcein AM</td>
			<td style="width:220px;">Molecular probes</td>
			<td style="width:256px;">C1430</td>
			<td style="width:443px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;width:291px;">Coagulation buffer</td>
			<td style="width:220px;">in house preparation</td>
			<td style="width:256px;">in house preparation</td>
			<td style="width:443px;">10mM CaCl2 and 3.75 mM MgCl2 in HBS</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;width:291px;">Conical tube 15mL</td>
			<td style="width:220px;">Greiner bio-one</td>
			<td style="width:256px;">1888271</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;width:291px;">Conical tube 50mL</td>
			<td style="width:220px;">Greiner bio-one</td>
			<td style="width:256px;">227261</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;width:291px;">Corn trypsin inhibitor (CTI)</td>
			<td style="width:220px;">Enzyme Research Laboratories</td>
			<td style="width:256px;">CTI</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;width:291px;">Denaturated alcohol</td>
			<td style="width:220px;">Fiers</td>
			<td style="width:256px;">T0011.5</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;width:291px;">DiOC6</td>
			<td style="width:220px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:256px;">318426</td>
			<td style="width:443px;">3,3&#8242;-Dihexyloxacarbocyanine iodide - 1mM solution in DMSO</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;">Exigo microfluidic pump</td>
			<td>Cellix</td>
			<td>EXIGO-PC-FS7.0-MF</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;width:291px;">Fibrinogen</td>
			<td style="width:220px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:256px;">F3879</td>
			<td style="width:443px;">Labelled in house with AF 405 - stock concentration 10.7 mg/mL</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;">Hematology analyzer</td>
			<td>Sysmex</td>
			<td>pocH-100i</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:291px;">HEPES buffered saline (HBS)</td>
			<td style="width:220px;">in house preparation</td>
			<td style="width:256px;">in house preparation</td>
			<td style="width:443px;">10mM 4-(2-hydroxyethyl)-1-piperazineethanesulfonic acid (HEPES) buffered saline (0.9% (w/v) NaCl, pH 7.4</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;width:291px;">Horm Collagen</td>
			<td style="width:220px;">Takeda/Nycomed</td>
			<td style="width:256px;">1130630</td>
			<td style="width:443px;">Native equine tendon collagen (type I) 
			Isotonic glucose solution to dilute collagen is supplemented</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;width:291px;">Humidified box</td>
			<td style="width:220px;">Cellix</td>
			<td style="width:256px;">HUMID-BOX</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;">Incubation water bath</td>
			<td>GFL</td>
			<td>1013</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;">Microscope</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td>Axio Observer Z1</td>
			<td>equipped with a colibri-LED and high resolution CCD camera</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;">Mirus Evo Nanopump</td>
			<td>Cellix</td>
			<td>188-MIRUS-PUMP-EVO</td>
			<td>with Multiflow8</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;">Pipette</td>
			<td>Brand</td>
			<td>A03429</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;width:291px;">Pipette tips 100-1000</td>
			<td style="width:220px;">Greiner bio-one</td>
			<td style="width:256px;">740290</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;width:291px;">Pipette tips 1-10</td>
			<td style="width:220px;">Eppendorf</td>
			<td style="width:256px;">A08928</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;width:291px;">Pipette tips 2-200</td>
			<td style="width:220px;">Greiner bio-one</td>
			<td style="width:256px;">739280</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;width:291px;">Platelet concentrate orbital shaker</td>
			<td style="width:220px;">Helmer</td>
			<td style="width:256px;">PF-48i</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;width:291px;">Precision wipes</td>
			<td style="width:220px;">Kimtech</td>
			<td style="width:256px;">5511</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;width:291px;">Pepsin solution&#160;</td>
			<td style="width:220px;">Hanna instrument&#160;</td>
			<td style="width:256px;">HI7073L&#160;</td>
			<td style="width:443px;">2g pepsin per 75 ml solution, Protein cleaning solution with pepsin</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;width:291px;">Recombinant Human Tissue Factor Innovin</td>
			<td style="width:220px;">Dade Berhing</td>
			<td style="width:256px;">B4212-40</td>
			<td style="width:443px;">rhTF with synthetic phospholipids</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;width:291px;">Software microscope&#160;</td>
			<td style="width:220px;">Zeiss</td>
			<td style="width:256px;">N/A</td>
			<td>ZEN 2012</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;width:291px;">Sterile docking device</td>
			<td style="width:220px;">Terumo BCT</td>
			<td style="width:256px;">TSCD</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;">Table Top Centrifuge</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>521-0095</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;">Tube Roller</td>
			<td>Ratek</td>
			<td>BTR5-12V</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;width:291px;">Tubing Sealer</td>
			<td style="width:220px;">Terumo BCT</td>
			<td style="width:256px;">AC-155</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;width:291px;">Vena8 syringe connector pin</td>
			<td style="width:220px;">Cellix</td>
			<td style="width:256px;">CONNECTORS-B1IC-PACK100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;width:291px;">Vena8 Fluoro+ Biochips</td>
			<td style="width:220px;">Cellix</td>
			<td style="width:256px;">188V8CF-400-100-02P10</td>
			<td>Coated biochip</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;width:291px;">Vena8 Needles</td>
			<td style="width:220px;">Cellix</td>
			<td style="width:256px;">SS-P-B1IC-B1OC-PACK200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;width:291px;">Vena8 Tubing</td>
			<td style="width:220px;">Cellix</td>
			<td style="width:256px;">TUBING-TYGON-B1IC-B1OC-ROLL 100F</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;width:291px;">VenaDelta Y1 Biochips</td>
			<td style="width:220px;">Cellix</td>
			<td style="width:256px;">VDY1-400-100-01-02</td>
			<td>Mixing biochip</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;width:291px;">Vortex mixer</td>
			<td style="width:220px;">VWR</td>
			<td style="width:256px;">58816-121</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:291px;">ZEN2012 software</td>
			<td style="width:220px;">Zeiss</td>
			<td style="width:256px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a microfluidic flow chamber model for platelet transfusion and hemostasis measures platelet deposition and fibrin formation in real-time

نماذج ميكروفلويديك من الارقاء تقييم وظائف الصفائح الدموية في ظل ظروف القص الهيدروديناميكية، ولكن في وجود مضادات التخثر، وقيدت هذا التحليل لترسب الصفائح الدموية فقط. العلاقة المعقدة بين الكالسيوم 2+ معتمد على تجلط الدم والصفائح الدموية وظيفة تتطلب إعادة التكلس دقيق ورقابة من الدم قبل التحليل. يستخدم الإعداد لدينا قناة خلط على شكل حرف Y، التي تمد المركز الكالسيوم 2+ / المغنيسيوم 2+ عازلة لتدفق الدم فقط قبل التروية، مما يتيح إعادة التكلس السريع دون عينة ركود. وهناك فرق عشرة أضعاف في سرعة تدفق بين مكامن يقلل من التخفيف. ثم يتم perfused الدم معادة التكلس في غرفة التحليل المغلفة الكولاجين، ويسمح وضع العلامات فرق التصوير في الوقت الحقيقي من كل من الصفائح الدموية والفيبرين ترسب باستخدام مضان الفيديو المجهر. ويستخدم هذا النظام فقط الأدوات المتاحة تجاريا، مما يزيد من فرص توحيد. إعادة تشكيل تروالدم mbocytopenic مع الصفائح الدموية من المختزنة يركز علاوة على ذلك نماذج الصفيحات نقل، مما يثبت استخدامه في هذا المجال البحثي. وأظهرت البيانات النموذجية أن بداية تجلط الدم وترسب الفيبرين كانوا يعتمدون خطيا على تركيز الصفائح الدموية، مما يؤكد العلاقة بين الارقاء الابتدائي والثانوي في نموذجنا. في إطار زمني من 16 دقيقة التروية، لم تفعيل الاتصال لم يحدث، على الرغم من إعادة التكلس إلى الكالسيوم العادي 2+ والمغنيسيوم 2+ المستويات. عندما تم تثبيط عامل التخثر XIIa التي كتبها المانع التربسين والذرة، وكان هذا الإطار الزمني لفترة أطول، مما يشير إلى مجموعة ديناميكية كبيرة فيها تغييرات في طبيعة محفز التخثر من الصفائح الدموية ويمكن تقييم. شارك في تجميد العامل النسيجي مع الكولاجين خفضت كثيرا من الوقت لبدء التخثر، ولكن ليس معدل. الخيار لدراسة العامل النسيجي و / أو مسار اتصال يزيد براعة وفائدة الفحص.

وصفت تحليل البيانات الخام في الوقت الحقيقي في الشكل 1. أولا، الصفائح الدموية تلتصق على سطح رد الفعل، مما أدى إلى زيادة مطردة في مخضر سجلت (الشكل 1A، ط)، وتسمى التصاق. خلال هذه المرحلة، هناك القليل البنفسجي مضان، مشيرا إلى أن الفيبرين ليس أو ليست سوى شكل طفيف (الشكل 1B). عند بدء من التخثر، والودائع الفيبرين بسرعة-الاستشعاع البنفسجي (ج)، وخلال ذلك الوقت، الصفيحات زيادات مضان الخضراء في حوالي نفس المعدل، المعين هنا كما تراكم الصفائح الدموية (ب). وبالتالي هناك تجربة واحدة بإرجاع ثلاثة معدلات الزيادة مضان (الأول والثاني، والثالث) كمؤشر بديل للسرعة التي الصفائح الدموية والفيبرين ترسب يحدث في هذا النموذج. وعلاوة على ذلك، واستقراء لحظة بداية تجلط الدم (لحظة من الظهور (د))، والذي هو محدد من الصفائح الدمويةإمكانية محفز التخثر. في غياب TF، تخثر بدء بطيء ويعمل من خلال مسار الاتصال حيث ينشط المجمع tenase جوهري FX عبر تفعيل مباشر للFIX 6 من معهد حرية التعبير و / أو العامل XII في المقام الأول. لإثبات تبعية العامل XII، وأضيف 4 ميكرومتر مثبط التربسين الذرة (CTI) لكبح العامل XII المنشط (FXIIa) 7. فإن هذا لن يؤثر على تثبيط التصاق الصفائح الدموية (الشكل 2A)، ولكن لم تخثر لا تبدأ لمدة إجمالية محددة، تعسفا، من تجربة نضح (الشكل 2B والتكميلية فيديو 1). في المختبر، وطريقة الاتصال يمكن أن تبدأ من مواد غريبة مثل الزجاج، أو في فحوصات السريرية باستخدام المواد المعدنية مثل الكاولين. في الجسم الحي، وتوفر الصفائح الدموية تنشيط شحنة سالبة 8 &lt;/ سوب&gt; من خلال التعرض الغشاء من الدهون الفوسفاتية الحمضية 9، مثل فسفاتيديل، و / أو من خلال إطلاق سراح فوسفات (ورم) 10، 11. لدينا ميكروفلويديك يقلد فحص في الوقت الحقيقي وهذا الأخير لأنه، في مجموعة من تركيزات صفائح الدم، وهي تعتمد على رد فعل لوقف نزيف الدم في عدد الصفائح الدموية (الشكل 3). من خلال زيادة عدد الصفائح الدموية في عينة تشكيلها، فإن معدل التصاق (الشكل 3A)، وتراكم (الشكل 3B والأخضر)، والتخثر (الشكل 3B، البنفسجي) زاد خطيا. لحظة من الظهور تقصير كبير (الشكل 3C) عن طريق زيادة تركيز الصفائح الدموية، مما يشير إلى أن هناك حاجة إلى عدد عتبة (تفعيل) أودعت الصفائح الدموية لتحريك التخثر. على تلف الأنسجة في الجسم الحي، ومع ذلك، فإن الخلايا الحاملة للTF طnitiate تخثر الدم عن طريق مجمع tenase خارجي FVIIa-TF في وجود الكالسيوم 2+. وتحاكي هذه في الإعداد التجريبية لدينا من قبل بعد طلاء غرف نضح التي تحتوي على الكولاجين مع rhTF lipidated. في تحليل تقرن القنوات المغلفة مع الكولاجين فقط أو بالاشتراك مع rhTF، كان التخثر بداية أسرع بكثير الشكل (4A). وبلغت نسبة التصاق الصفائح الدموية يست خطية، لذلك يمكن أن يؤديها أي الانحدار الخطي (لا تظهر البيانات). وكان كل من معدل تجلط الدم وتراكم الصفائح الدموية لا تختلف بين الشروط (الشكل 4B-4C، التكميلية فيديو 2). <img alt="شكل 1" src="/files/ftp_upload/55351/55351fig1.jpg" /> الشكل 1: تحليل الانحدار من التصاق الصفائح الدموية وتخثر في غرف نضح ميكروفلويديك. هذا الرقم يوضح المعلمات المستمدة من الوقت الحقيقي مضان البيانات الخام<html> اكتسب خلال تدفق الدم معادة التكلس على سطح رد الفعل. (أ) متوسط كثافة مضان أخضر يظهر ترسب الصفائح الدموية في وظيفة من الزمن الارواء. يصف منحنى عملية ذات النسقين بدءا من (ط) زيادة ببطء التصاق الصفائح الدموية الخطي يتبعه تراكم الخطي (ب) التي تنمو بسرعة. وتراجعت كل من أجزاء خطية من منحنى والمنحدر من هذه يصف السعرين تشكيل خثرة من قبل مضان الصفائح الدموية. (ط) التصاق و (ب) التراكم. (ب) يعني كثافة مضان البنفسجي يظهر ترسب الليفين في وظيفة من الزمن. خلال التصاق الصفائح الدموية، والبنفسجي مضان غائب بشكل أساسي، في حين أنه سرعان ما تطور بدء التالي من تجلط الدم. يتم تعريف حظة من الظهور (د) على أنه اعتراض مع محور س من الانحدار الخطي استقراء من (ج) المرحلة الثانية من تشكيل خثرة من قبل مضان الفيبرين المعينة هنا كما تجلط الدم.EF = &quot;http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/55351/55351fig1large.jpg&quot; الهدف = &quot;_ فارغة&quot;&gt; الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم. <img alt="الشكل 2" src="/files/ftp_upload/55351/55351fig2.jpg" /> الشكل 2: في حالة عدم وجود TF، تجلط الدم في غرف تدفق نضح المغلفة الكولاجين يعتمد على FXIIa. تم تنفيذ نضح ميكروفلويديك الدم أعيد تحتوي على CTI أو عازلة التحكم (مراقبة) بمعدل القص من 1000 ق -1 ليصبح المجموع 30 دقيقة. (أ) نسبة التصاق الصفائح الدموية (ق -1) لا يتوقف على CTI. (ب) كانت لحظة من الظهور للعينات تعامل CTI-تتجاوز الحد المسموح به 30 دقيقة من التجربة (كما هو موضح خط منقط)، مما يدل على الاعتماد على FXIIa هذه المعلمة. الحانات والنقاط هي القيم الوسطية، وشعيرات هي الانحراف المعياري. كان التحليل الإحصائي التي تقرن اختبار t. (NS = غير الهامة، ن ≥3). <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/55351/55351fig2large.jpg" target="_blank">الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.</a> <img alt="الشكل (3)" src="/files/ftp_upload/55351/55351fig3.jpg" /> يعتمد التخثر تحت التدفق على عدد الصفائح الدموية: الرقم 3. أجريت تجارب نضح ميكروفلويديك في غرف المغلفة الكولاجين مع الدم تشكيلها في وجود الكالسيوم 2+ ومتفاوتة تركيز الصفائح الدموية (ن ≥3). (A) معدل معدل التصاق الصفائح الدموية (ب) من تراكم الصفائح الدموية (الخضراء) والتخثر (البنفسجي)، و (C) لحظة من الحدوث وتظهر وظائف تركيزات الصفائح الدموية في الدم تشكيلها. النقاط هي القيم الوسطية، وشعيرات هي الانحرافات المعيارية. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/55351/55351fig3large.jpg" target="_blank">الرجاء انقر هنا لعرض أكبر فيرسي</a>على هذا الرقم. <img alt="الشكل (4)" src="/files/ftp_upload/55351/55351fig4.jpg" /> الشكل 4: تفعيل كل من فريق العمل ومسار الاتصال تخثر تقصير كبير في لحظة من بين بداية من تجلط الدم. أعيد الدم، في وجود الكالسيوم 2+، تم perfused من خلال الغرف المغلفة مع الكولاجين وحده أو مع الكولاجين وrhTF لدراسة مسار الاتصال وحدها أو مزيجا من مسارات الاتصال وفريق العمل. (A) هو اختصار لحظة من بين بداية من تجلط الدم بشكل ملحوظ في غرف تدفق التي تحتوي على TF. (ب) معدل تراكم الصفائح الدموية خلال التخثر و (C) معدل تجلط الدم لا تختلف بشكل كبير بين الكولاجين فقط أو غرف تدفق collagen- والمغلفة rhTF. الحانات والنقاط هي القيم الوسطية. شعيرات هي الانحرافات المعيارية. كان التحليل الإحصائي التي تقرن اختبار t. (NS = ليس كبيرا، * P &lt;<html> 0.05، ن ≥3). <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/55351/55351fig4large.jpg" target="_blank">الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.</a> <img alt="فيديو 1" src="/files/ftp_upload/55351/55351vid1.jpg" /> التكميلي فيديو 1: في غياب TF، تجلط الدم في غرف تدفق نضح المغلفة الكولاجين يعتمد على FXIIa. يتم تحديد دور لمسار الاتصال في غرف تدفق نضح المغلفة الكولاجين. (A) متراكب تسلسل الصور مضان من الصفائح الدموية (الخضراء) والليفين (ogen) (البنفسجي) ترسب في غياب CTI. (ب) نفس تسلسل لوحة ولكن مع القناة الخضراء مغلقا. (C) متراكب تسلسل الصور مضان من الصفائح الدموية (الخضراء) والليفين (ogen) (البنفسجي) ترسب في وجود CTI. (د) نفس تسلسل لوحة C ولكن مع القناة الخضراء مغلقا.ecsource.jove.com/files/ftp_upload/55351/Supplementary_video_1.avi &quot;الهدف =&quot; _ فارغة &quot;&gt; اضغط هنا لتحميل هذا الفيديو. <img alt="فيديو 2" src="/files/ftp_upload/55351/55351vid2.jpg" /> التكميلي فيديو 2: تفعيل كل من فريق العمل ومسار الاتصال تقصير كبير في تخثر حظة من الحدوث. لدراسة دور فريق العمل، واستخدمت غرف تدفق المغلفة مع الكولاجين وحده أو مع الكولاجين وrhTF. (A) متراكب تسلسل الصور مضان من الصفائح الدموية (الخضراء) والليفين (ogen) (البنفسجي) ترسب في غرف تدفق المغلفة فقط مع الكولاجين. (ب) نفس تسلسل لوحة ولكن مع القناة الخضراء مغلقا. (C) متراكب تسلسل الصور مضان من الصفائح الدموية (الخضراء) والليفين (ogen) (البنفسجي) ترسب في غرف تدفق المغلفة مع كل من الكولاجين وrhTF. (د) نفس تسلسل لوحة C ولكن مع switc قناة الأخضر[هد] باتجاه آخر. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/55351/Supplementary_video_2.avi" target="_blank">يرجى الضغط هنا لتحميل هذا الفيديو.</a>

Watch this Scientific Journal Video about A Microfluidic Flow Chamber Model for Platelet Transfusion and Hemostasis Measures Platelet Deposition and Fibrin Formation in Real-time at JoVE.com

A Microfluidic Flow Chamber Model for Platelet Transfusion and Hemostasis Measures Platelet Deposition and Fibrin Formation in Real-time

وتصف هذه الورقة نموذج تجريبي من الارقاء الذي يقيس وقت واحد وظيفة الصفائح الدموية وتخثر الدم. يتم قياس الصفائح الدموية ومضان الليفين في الوقت الحقيقي، ويتم تحديد معدل الصفائح الدموية التصاق، ومعدل تجلط الدم، وبداية من تجلط الدم. يتم استخدام نموذج لتحديد خصائص الصفائح الدموية محفز التخثر تحت التدفق في المركزات لنقل الدم.

للدائرة نموذج ميكروفلويديك تدفق لصفائح الدم نقل والإرقاء يقيس ترسب الصفائح الدموية والليفين تشكيل في الوقت الحقيقي

Microfluidic models of hemostasis assess platelet function under conditions of hydrodynamic shear, but in the presence of anticoagulants, this analysis is ...

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Parallel-plate Flow Chamber and Continuous Flow Circuit to Evaluate Endothelial Progenitor Cells under Laminar Flow Shear Stress

موازية لوحة الدائرة التدفق المستمر وحلبة لتقييم تدفق الخلايا الاصلية تحت تدفق رقائقي غشائي إجهاد القص

The overall goal of this method is to describe a technique to subject adherent cells to laminar flow conditions and evaluate their response to well ...

A Novel Three-dimensional Flow Chamber Device to Study Chemokine-directed Extravasation of Cells Circulating under Physiological Flow Conditions

رواية ثلاثي الأبعاد التدفق جهاز الدائرة لدراسة Chemokine الموجه التسرب من خلايا اعارة تحت ظروف تدفق الفسيولوجي

Extravasation of circulating cells from the bloodstream plays a central role in many physiological and pathophysiological processes, including stem cell ...

Protocol for Biofilm Streamer Formation in a Microfluidic Device with Micro-pillars

بروتوكول لتشكيل بيوفيلم الملون في جهاز ميكروفلويديك مع مايكرو الأركان

Several bacterial species possess the ability to attach to surfaces and colonize them in the form of thin films called biofilms. Biofilms that grow in ...

Microfluidic Genipin Deposition Technique for Extended Culture of Micropatterned Vascular Muscular Thin Films

ميكروفلويديك Genipin ترسب تقنية للثقافة الموسعة من Micropatterned الأوعية الدموية العضلات الرقيقة

The chronic nature of vascular disease progression requires the development of experimental techniques that simulate physiologic and pathologic vascular ...

Layer-by-layer Collagen Deposition in Microfluidic Devices for Microtissue Stabilization

طبقة تلو طبقة الكولاجين ترسب في أجهزة ميكروفلويديك لMicrotissue لتحقيق الاستقرار

Although microfluidics provides exquisite control of the cellular microenvironment, culturing cells within microfluidic devices can be challenging. 3D ...

Characterization of Leukocyte-platelet Rich Fibrin, A Novel Biomaterial

توصيف خلايا الدم البيضاء، الصفائح الدموية الغنية الليفين، رواية بيولوجية

Autologous platelet concentrates represent promising innovative tools in the field of regenerative medicine and have been extensively used in oral ...

Microfluidic Flow Chambers Using Reconstituted Blood to Model Hemostasis and Platelet Transfusion In Vitro

Microfluidic Flow Chambers Using Reconstituted Blood to Model Hemostasis and Platelet Transfusion In Vitro

ميكروفلويديك تدفق الدوائر عن طريق الدم تم اعادة تشكيل لنموذج الإرقاء وصفائح الدم نقل<em&gt; في المختبر</em

Blood platelets prepared for transfusion gradually lose hemostatic function during storage. Platelet function can be investigated using a variety of ...

Microfluidic Bioprinting for Engineering Vascularized Tissues and Organoids

فاسكولاريزيد بيوبرينتينج موائع جزيئية لهندسة الأنسجة وأورجانويدس

Engineering vascularized tissue constructs and organoids has been historically challenging. Here we describe a novel method based on microfluidic ...

A Protocol for Real-time 3D Single Particle Tracking

بروتوكول لتتبع في الوقت الحقيقي 3D الجسيمات مفردة

Real-time three-dimensional single particle tracking (RT-3D-SPT) has the potential to shed light on fast, 3D processes in cellular systems. Although ...

Manufacturing of a Nafion-coated, Reduced Graphene Oxide/Polyaniline Chemiresistive Sensor to Monitor pH in Real-time During Microbial Fermentation

تصنيع نافيون المغلفة، وخفضت الجرافين أكسيد/بوليانيليني تشيميريسيستيفي استشعار لمراقبة درجة الحموضة في "الوقت الحقيقي أثناء التخمر الميكروبية"

Here, we report the engineering of a solid-state micro pH sensor based on polyaniline-functionalized, electrochemically reduced graphene oxide (ERGO-PA). ...