Name: a microfluidic flow chamber model for platelet transfusion and hemostasis measures platelet deposition and fibrin formation in real-time
Uploaded: 2017-02-14T15:00:00
Duration: 9 min 38 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Microfluidic Flow Chamber Model for Platelet Transfusion and Hemostasis Measures Platelet Deposition and Fibrin Formation in Real-time at JoVE.com

מחקר זה מומן על ידי הקרן למחקר ופיתוח של שירות דם חוצת פלנדריה האדומה הבלגי. אנו מכירים תמיכה פיננסית הניתנת על ידי &quot;Bijzonder onderzoeksfond&quot; (BOF - קרן מחקר מיוחדת) מאונ&#39; גנט שהוענקה הפרויקט עם BOF30290744 מספר החוזה.

<ol>
	<li>Levi, M., Hunt, B. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+critical+appraisal+of+point-of-care+coagulation+testing+in+critically+ill+patients.">A critical appraisal of point-of-care coagulation testing in critically ill patients.</a> J. Thromb. Haemost. 13 (11), 1960-1967 (2015).</li><li>Van Aelst, B., Feys, H. B., Devloo, R., Vandekerckhove, P., Compernolle, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microfluidic+Flow+Chambers+Using+Reconstituted+Blood+to+Model+Hemostasis+and+Platelet+Transfusion+In+Vitro.">Microfluidic Flow Chambers Using Reconstituted Blood to Model Hemostasis and Platelet Transfusion In Vitro.</a> J. Vis. Exp. (109), e53823 (2016).</li><li>Witt, S. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+platelet+function+defects+by+multi-parameter+assessment+of+thrombus+formation.">Identification of platelet function defects by multi-parameter assessment of thrombus formation.</a> Nat. Commun. 5, 4257 (2014).</li><li>Cazenave, J. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preparation+of+washed+platelet+suspensions+from+human+and+rodent+blood.">Preparation of washed platelet suspensions from human and rodent blood.</a> Methods Mol. Biol. 272, 13-28 (2004).</li><li>Roest, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Flow+chamber-based+assays+to+measure+thrombus+formation+in+vitro:+requirements+for+standardization.">Flow chamber-based assays to measure thrombus formation in vitro: requirements for standardization.</a> J. Thromb. Haemost. 9 (11), 2322-2324 (2011).</li><li>Zwaal, R. F., Comfurius, P., Bevers, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lipid-protein+interactions+in+blood+coagulation.">Lipid-protein interactions in blood coagulation.</a> Biochim. Biophys. Acta. 1376 (3), 433-453 (1998).</li><li>Dargaud, Y., Luddington, R., Baglin, T. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Elimination+of+contact+factor+activation+improves+measurement+of+platelet-dependent+thrombin+generation+by+calibrated+automated+thrombography+at+low-concentration+tissue+factor.">Elimination of contact factor activation improves measurement of platelet-dependent thrombin generation by calibrated automated thrombography at low-concentration tissue factor.</a> J. Thromb. Haemost. 4 (5), 1160-1161 (2006).</li><li>Bevers, E. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Defective+Ca(2+)-induced+microvesiculation+and+deficient+expression+of+procoagulant+activity+in+erythrocytes+from+a+patient+with+a+bleeding+disorder:+a+study+of+the+red+blood+cells+of+Scott+syndrome.">Defective Ca(2+)-induced microvesiculation and deficient expression of procoagulant activity in erythrocytes from a patient with a bleeding disorder: a study of the red blood cells of Scott syndrome.</a> Blood. 79 (2), 380-388 (1992).</li><li>Bevers, E. M., Comfurius, P., van Rijn, J. L., Hemker, H. C., Zwaal, R. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Generation+of+prothrombin-converting+activity+and+the+exposure+of+phosphatidylserine+at+the+outer+surface+of+platelets.">Generation of prothrombin-converting activity and the exposure of phosphatidylserine at the outer surface of platelets.</a> Eur. J. Biochem. 122 (2), 429-436 (1982).</li><li>Muller, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Platelet+polyphosphates+are+proinflammatory+and+procoagulant+mediators+in+vivo.">Platelet polyphosphates are proinflammatory and procoagulant mediators in vivo.</a> Cell. 139 (6), 1143-1156 (2009).</li><li>Smith, S. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Polyphosphate+modulates+blood+coagulation+and+fibrinolysis.">Polyphosphate modulates blood coagulation and fibrinolysis.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 103 (4), 903-908 (2006).</li><li>Tiberghien, P., Follea, G., Muller, J. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Platelet+Transfusions+in+Acute+Leukemia.">Platelet Transfusions in Acute Leukemia.</a> N. Engl. J. Med. 375 (1), 96-97 (2016).</li><li>Deckmyn, H., Feys, H. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assays+for+quality+control+of+platelets+for+transfusion.">Assays for quality control of platelets for transfusion.</a> ISBT Science Series. 8 (1), 221-224 (2013).</li><li>Sakariassen, K. S., Bolhuis, P. A., Sixma, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+blood+platelet+adhesion+to+artery+subendothelium+is+mediated+by+factor+VIII-Von+Willebrand+factor+bound+to+the+subendothelium.">Human blood platelet adhesion to artery subendothelium is mediated by factor VIII-Von Willebrand factor bound to the subendothelium.</a> Nature. 279 (5714), 636-638 (1979).</li><li>Alevriadou, B. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Real-time+analysis+of+shear-dependent+thrombus+formation+and+its+blockade+by+inhibitors+of+von+Willebrand+factor+binding+to+platelets.">Real-time analysis of shear-dependent thrombus formation and its blockade by inhibitors of von Willebrand factor binding to platelets.</a> Blood. 81 (5), 1263-1276 (1993).</li><li>Nesbitt, W. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+shear+gradient-dependent+platelet+aggregation+mechanism+drives+thrombus+formation.">A shear gradient-dependent platelet aggregation mechanism drives thrombus formation.</a> Nat. Med. 15 (6), 665-673 (2009).</li><li>Stalker, T. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hierarchical+organization+in+the+hemostatic+response+and+its+relationship+to+the+platelet-signaling+network.">Hierarchical organization in the hemostatic response and its relationship to the platelet-signaling network.</a> Blood. 121 (10), 1875-1885 (2013).</li><li>Swieringa, F., Kuijpers, M. J., Lamers, M. M., vander Meijden, P. E., Heemskerk, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rate-limiting+roles+of+the+tenase+complex+of+factors+VIII+and+IX+in+platelet+procoagulant+activity+and+formation+of+platelet-fibrin+thrombi+under+flow.">Rate-limiting roles of the tenase complex of factors VIII and IX in platelet procoagulant activity and formation of platelet-fibrin thrombi under flow.</a> Haematologica. 100 (6), 748-756 (2015).</li><li>McDonald, J. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fabrication+of+microfluidic+systems+in+poly(dimethylsiloxane).">Fabrication of microfluidic systems in poly(dimethylsiloxane).</a> Electrophoresis. 21 (1), 27-40 (2000).</li><li>Gutierrez, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microfluidic+devices+for+studies+of+shear-dependent+platelet+adhesion.">Microfluidic devices for studies of shear-dependent platelet adhesion.</a> Lab. Chip. 8 (9), 1486-1495 (2008).</li><li>Hartman, R. L., McMullen, J. P., Jensen, K. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Deciding+whether+to+go+with+the+flow:+evaluating+the+merits+of+flow+reactors+for+synthesis.">Deciding whether to go with the flow: evaluating the merits of flow reactors for synthesis.</a> Angew. Chem. Int. Ed. Engl. 50 (33), 7502-7519 (2011).</li><li>Podoplelova, N. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Blood coagulation factors bound to procoagulant platelets are concentrated in their cap structures to promote clotting. , (2016).</li><li>Der Meijden, P. E. V. a. n., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Platelet-+and+erythrocyte-derived+microparticles+trigger+thrombin+generation+via+factor+XIIa.">Platelet- and erythrocyte-derived microparticles trigger thrombin generation via factor XIIa.</a> J. Thromb. Haemost. 10 (7), 1355-1362 (2012).</li><li>Nickel, K. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+polyphosphate-factor+XII+pathway+drives+coagulation+in+prostate+cancer-associated+thrombosis.">The polyphosphate-factor XII pathway drives coagulation in prostate cancer-associated thrombosis.</a> Blood. 126 (11), 1379-1389 (2015).</li><li>Okorie, U. M., Denney, W. S., Chatterjee, M. S., Neeves, K. B., Diamond, S. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Determination+of+surface+tissue+factor+thresholds+that+trigger+coagulation+at+venous+and+arterial+shear+rates:+amplification+of+100+fM+circulating+tissue+factor+requires+flow.">Determination of surface tissue factor thresholds that trigger coagulation at venous and arterial shear rates: amplification of 100 fM circulating tissue factor requires flow.</a> Blood. 111 (7), 3507-3513 (2008).</li><li>Shen, F., Kastrup, C. J., Liu, Y., Ismagilov, R. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Threshold+response+of+initiation+of+blood+coagulation+by+tissue+factor+in+patterned+microfluidic+capillaries+is+controlled+by+shear+rate.">Threshold response of initiation of blood coagulation by tissue factor in patterned microfluidic capillaries is controlled by shear rate.</a> Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol. 28 (11), 2035-2041 (2008).</li></ol>

החוקרים אין לי מה לחשוף.

עירוי טסיות מתרכז רושם למטופל thrombocytopenic למנוע או לעצור את הדימום. ההשפעה הקלינית שלה היה מסומן לאחרונה סקירה היסטורית של לוקמיה חריפה 12, ונזכר כי שיעורי ההישרדות מוגבר מטופלים ילדים בשנות השישים והשבעים היו המיוחס בעיקר לשיפורים (טסיות) רפואה עירוי. תרכיזי טסיות משמשים גם כדי לבלום דימום טראומה חריפה או במהלך ניתוח. בתנאים אלה, טסיות עם תכונות procoagulant מצוינות כי במהירות ליזום המוסטאסיס עדיף, אבל מתרכז טסיות ערוכים מתרומות של תורמים מרצון ושלא כמו תרופות פרמקולוגיות, הם טופלו ע&quot;י הכנה בלבד, ולא על ידי רכב (כימי). לכן, כמה שאלות בתחום בנקאות דם הם ללא מענה, כוללים אלה על שיטות תרומה אופטימליות, תנאי אחסון, ושיטות עירוי. בתחום platelet (עירוי) ביולוגיה, שאלות רבות על אישור התא מהמחזור, תרומת טסיות בעירוי כדי המוסטאסיס, או אימונולוגיה שלהם גם נותרו ללא מענה. טכניקות מעבדה רבות לניתוח תפקוד טסיות זמינות, אבל אלה בעיקר להתמודד עם היבט מיוחד של תפקוד טסיות, כגון איסוף או degranulation 13. כדי רחב להעריך טסיות ותרכיזים טסיות, מודלים מקיפים של המוסטאסיס הם הכרחיים, ועל אלה לכלול הידרודינמיקה. Rheology דם חיוני לפרש התנהגות טסיות כראוי במהלך המוסטאסיס 14, 15 או פקקת 16, גם אם קרישה מונע Ca 2 + ו / או תרומבין להשתתף במעמד ציטראט או הפרין, בהתאמה 2. כדי לחקור את יחסי הגומלין בין קרישה ותפקוד טסיות תחת זרם 17, 18, דור תרומבין רגיל נדרש, ולכן, Ca חינם 2 + גם כן. הגדרת הניסוי ללימוד המוסטאסיס בתנאים אלה מורכבת, היות אמצעים למניעה &quot;חפץ&quot; או הפעלה לא מבוקרת של קרישה צריכה לקחת כמה שיותר. יתר על כן, הרבה קבוצות מחקר מיוחדות להשתמש בחומרת מחוייט 19, 20, הגורם השתנות היתר ומעבדה משמעותיות 5. מגבלות טיפוסיות של גישה זו הן את השימוש של כלי מלבני, פרופילי זרימה בלתי pulsatile, וציפויי משטח שאינו אדם 5. את assay המתואר כאן משתמש בכלים זמינים מסחרי ולכן עשוי להיות מתאים סטנדרטיזציה. בגלל תגובת מפל הקרישה מופעלת בקלות ברגע דם ולא בתוך גוף האדם, נשלטה recalcification היא צעד מכריע. To להשיג זאת, תוספת של Ca 2 + צריכה להידחות עד ממש לפני זלוף על פני קולגן תגובתי, כי כאשר מאגר Ca 2+ מסופק בכמויות גדולות לדם סטטי, באופן בלתי נמנעת הקרישה מתרחשת, בסופו של דבר סתימת צינורות הטיית נתונים פרשנות (מידע לא מוצג). הפתרון לבעיה זו הוא להגביר את חיץ Ca 2 + והדם בנפרד, המאפשר ערבוב ידי כוחות הסעה ו מתרחבים במהלך זלוף בדרכה אל חדר הניתוח. ערבוב מלא מושגת קטע 46 ס&quot;מ של צינורות בין תאי ערבוב וניתוח. אורך זו חושבה בפעם להתעכב אופטימלי של ריאגנטים לערבב מבוסס על חוקי היסוד של המוני ותחבורה הסעה 21 במהלך זלוף בשיעור הזרימה משמש (1,000 s -1). גישה זו הוכיחה לשליטה לשחזור. הפעלה של קרישה לתקשר לפעמים נתפסה כמוצר של פשוטדגימת דם כדי להימנע כאשר לפרש פעמי קרישה. לכן, הראינו כי, בהעדר מעכבי קרישה נגרם קשר מתחילה ב 16.7 דקות (± 3.7 דקות) של זלוף. בנוכחות CTI לעכב הפעלת מגע בתיווך FXIIa, קרישה ולא הוחל במהלך מוגדר באופן שרירותי של הניסוי (30 דק &#39;). חלון של ניסויים זה ארוך מספיק כדי להבחין דגימות כי הם בעד או אנטי-תרומבוטי. למרות קרישה על ידי הפעלת קשר יכולה להיות תוצאה לא רצויה של דם למחלקת משטחים מלאכותיים, הנתונים שלנו ומוכיחות השפעה במינון ביולוגית ברורה של טסיות. זה יכול להיות חשוב עבור רפואת עירוי, כי ממצאים אחרונים על FXII, טסיות polyphosphates 10, הפצת phosphatidylserine 22, ו microparticles טסיות 23 יש המשוערך למעשה קרישת מסלול מגע בתור תורם חשוב המוסטאסיס, דוארבמיוחד בהקשר של פקק 24. למשל, התשואה המשתנה של עירויי טסיות בחולים או ביטוי phosphatidylserine משתנה של טסיות פקידה ניתן אפוא לגרום השתנות יעילות טיפולית אם מוצגת קרישה מוצלחת תלוי בגורמים אלה. על ידי שיתוף משתק lipidated rhTF עם קולגן, תוואי הקרישה החיצוני, או מסלול TF, מופעל במהלך בתצהיר טסיות על קולגן. זה מרחיב את assay למצב המקיף ביותר שלה, כמודל פציעות המביאים דם במגע עם תאים TF נושאות ורקמות. הנתונים שלנו מראים כי שיתוף וקיבוע של קולגן TF מקטין את רגע הופעת קרישה אך אינו משנה את קצב קרישה. מן הראוי לציין כי כמות rhTF משותקת על פני השטח היא משתנה חשוב במודל זה 25, 26 ויש טופל בתוך מחקר נתון. ב presence של CTI, מסלול TF ניתן ללמוד באופן בלעדי (לא מוצג) כי הפעלת מגע נמנעת. לסיכום, הגדרת הניסוי שלנו משלבת מודל של עירוי על ידי כינון מחדש של דם thrombocytopenic עם טסיות פקידה ודגם של המוסטאסיס ידי בתצהיר טסיות סידן תלוי היווצרות הפיברין תחת זרם הידרודינמית. assay זה ישמש כדי לענות על שאלות על טבע procoagulant של טסיות פקידה ואת הטכניקות הכנה להתרכז השפעות טסיות יש על זה.

המוסטאסיס יסודי ותיכון היו להמשיג במקור שני תהליכים ביוכימיים הניתנים להפרדה יחסית. המוסטאסיס ראשי נתפס כתורם מרכזי תנאי זרימה עורקת, עם תפקיד מפתח עבור טסיות, בעוד נתפס המוסטאסיס משני לשלוט קרישה תחת זרימת דם מוריד, המאפשר מפל פרוטאז לגבש הפיברין מסיס. בעשורים האחרונים אשר עצבו השקפה מסורתית זו באופן משמעותי, והודה כי הפעלת טסיות וקרישה תלויות זה בזה הם תהליכים חשובים באותה מידה במהלך המוסטאסיס פיסיולוגי ופתולוגיים בכל (לא קיצוניים) בחוגים הידרודינמית. השקפה זו תורגמה למרפאת, שם מבחנים המציאו כדי למדוד כל-דם קרישה באופן מקיף יותר ויותר בשימוש, אם כי עם הרבה שאלות שנותרו רלוונטית, תחולה וקהילה 1. פרסמנו לאחרונה אנליזה פונקציונלית של טסיותמרכזת באמצעות תאי זרימה microfluidic מצופה קולגן סיבי במודל במבחנה של עירוי 2, עם דגימות המכילות כמויות רגילות של כדוריות דם אדומות, פלסמה וטסיות דם. שיטה זו משתמשת הפרין או הירודין anticoagulated דם, רומז שום או מעורבות מוגבלת של המוסטאסיס משנית, אשר תלויה הדור תרומבין וסידן מיונן (Ca 2 +). כדי לתמוך היווצרות תרומבין וכך לכלול את כל ההיבטים של המוסטאסיס תחת זרם microfluidic, פיתחנו שיטה משלימה על אותה פלטפורמה טכנית, עכשיו כולל חינם Ca 2 +. בדרך זו, בתצהיר טסיות והיווצרות הפיברין ניתן ללמוד, שוב במודל של עירוי טסיות, כדי להעריך את איכות תרכיז הטסיות. בשיטה זו, טסיות ו פיברינוגן מסומנים עם fluorophores כי יש להפריד ספקטרום פליטה מלאה. צבע כפול, מיקרוסקופיה וידאו בזמן אמת ואז מתיר ניתוחהידבקות טסיות עיקרית, וכן ייזום קרישה בתצהיר הפיברין. משתנה חשוב בסוג זה של assay הוא recalcification, כי התוספת של Ca 2 + לדם סטטי, לפני זלוף, בהכרח תגרום קרישת קשר ביוזמת בתוך המכל. חניכה זה תהיה להטות את ההודעה עקב סתימת פתחי כניסת צינורות biochip לפני זלוף. לכן, בשיטה שלנו, ציטרט anticoagulated דם וכרית המכילה Ca 2 + נשאבת בנפרד דרך הרגליים העליונות של תא מפרצון בצורת Y. הרכיבים מעורבבים במהלך זלוף לפני הכניסה תא ניתוח מצופה קולגן לבד או בשילוב עם גורמי רקמה אנושי רקומביננטי (rhTF). על ידי התאמת מהירויות הזרימה של משאבות נפרדות ואת הריכוז של Ca 2 + למאגר, דילול 10% מהמדגם דם הסופי מתרחש. שימוש בפרוטוקול מורחב זה, אנחנו מדגימים את תרומת coagulaXII גורם tion (FXII) וריכוז טסיות לפנות ייזום קרישת מסלול תחת זרם. הנתונים שלנו מראים גם כי על ידי ציפוי rhTF לצד קולגן, מסלול גורמי רקמה ניתן למדוד בו זמנית.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="1210">
	<tbody>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;width:291px;">1 mL Syringe</td>
			<td style="width:220px;">BD</td>
			<td style="width:256px;">A00434</td>
			<td style="width:443px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;width:291px;">10 mL Syringe</td>
			<td style="width:220px;">BD</td>
			<td style="width:256px;">309604</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;width:291px;">2 mL Syringe</td>
			<td style="width:220px;">BD</td>
			<td style="width:256px;">307727</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;width:291px;">Alexa Fluor 405</td>
			<td style="width:220px;">Life Technologies</td>
			<td style="width:256px;">A30100</td>
			<td style="width:443px;">The manufacturer&#39;s manual was followed for labeling of fibrinogen</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;width:291px;">BD vacutainer Eclipse</td>
			<td style="width:220px;">Becton, Dickinson and Company</td>
			<td style="width:256px;">368650</td>
			<td>Blood collection needle with preattached holder</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;width:291px;">BD vacutainer tube with EDTA&#160;</td>
			<td style="width:220px;">Becton, Dickinson and Company</td>
			<td style="width:256px;">368856</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;width:291px;">BD vacutainer tube with Sodium Citrate</td>
			<td style="width:220px;">Becton, Dickinson and Company</td>
			<td style="width:256px;">366575</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;width:291px;">Blocking buffer</td>
			<td style="width:220px;">in house preparation</td>
			<td style="width:256px;">in house preparation</td>
			<td style="width:443px;">1.0% (w/v) bovine serum albumin and 0.1% (w/v) glucose in HBS</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;width:291px;">Calcein AM</td>
			<td style="width:220px;">Molecular probes</td>
			<td style="width:256px;">C1430</td>
			<td style="width:443px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;width:291px;">Coagulation buffer</td>
			<td style="width:220px;">in house preparation</td>
			<td style="width:256px;">in house preparation</td>
			<td style="width:443px;">10mM CaCl2 and 3.75 mM MgCl2 in HBS</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;width:291px;">Conical tube 15mL</td>
			<td style="width:220px;">Greiner bio-one</td>
			<td style="width:256px;">1888271</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;width:291px;">Conical tube 50mL</td>
			<td style="width:220px;">Greiner bio-one</td>
			<td style="width:256px;">227261</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;width:291px;">Corn trypsin inhibitor (CTI)</td>
			<td style="width:220px;">Enzyme Research Laboratories</td>
			<td style="width:256px;">CTI</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;width:291px;">Denaturated alcohol</td>
			<td style="width:220px;">Fiers</td>
			<td style="width:256px;">T0011.5</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;width:291px;">DiOC6</td>
			<td style="width:220px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:256px;">318426</td>
			<td style="width:443px;">3,3&#8242;-Dihexyloxacarbocyanine iodide - 1mM solution in DMSO</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;">Exigo microfluidic pump</td>
			<td>Cellix</td>
			<td>EXIGO-PC-FS7.0-MF</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;width:291px;">Fibrinogen</td>
			<td style="width:220px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:256px;">F3879</td>
			<td style="width:443px;">Labelled in house with AF 405 - stock concentration 10.7 mg/mL</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;">Hematology analyzer</td>
			<td>Sysmex</td>
			<td>pocH-100i</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:291px;">HEPES buffered saline (HBS)</td>
			<td style="width:220px;">in house preparation</td>
			<td style="width:256px;">in house preparation</td>
			<td style="width:443px;">10mM 4-(2-hydroxyethyl)-1-piperazineethanesulfonic acid (HEPES) buffered saline (0.9% (w/v) NaCl, pH 7.4</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;width:291px;">Horm Collagen</td>
			<td style="width:220px;">Takeda/Nycomed</td>
			<td style="width:256px;">1130630</td>
			<td style="width:443px;">Native equine tendon collagen (type I) 
			Isotonic glucose solution to dilute collagen is supplemented</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;width:291px;">Humidified box</td>
			<td style="width:220px;">Cellix</td>
			<td style="width:256px;">HUMID-BOX</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;">Incubation water bath</td>
			<td>GFL</td>
			<td>1013</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;">Microscope</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td>Axio Observer Z1</td>
			<td>equipped with a colibri-LED and high resolution CCD camera</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;">Mirus Evo Nanopump</td>
			<td>Cellix</td>
			<td>188-MIRUS-PUMP-EVO</td>
			<td>with Multiflow8</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;">Pipette</td>
			<td>Brand</td>
			<td>A03429</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;width:291px;">Pipette tips 100-1000</td>
			<td style="width:220px;">Greiner bio-one</td>
			<td style="width:256px;">740290</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;width:291px;">Pipette tips 1-10</td>
			<td style="width:220px;">Eppendorf</td>
			<td style="width:256px;">A08928</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;width:291px;">Pipette tips 2-200</td>
			<td style="width:220px;">Greiner bio-one</td>
			<td style="width:256px;">739280</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;width:291px;">Platelet concentrate orbital shaker</td>
			<td style="width:220px;">Helmer</td>
			<td style="width:256px;">PF-48i</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;width:291px;">Precision wipes</td>
			<td style="width:220px;">Kimtech</td>
			<td style="width:256px;">5511</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;width:291px;">Pepsin solution&#160;</td>
			<td style="width:220px;">Hanna instrument&#160;</td>
			<td style="width:256px;">HI7073L&#160;</td>
			<td style="width:443px;">2g pepsin per 75 ml solution, Protein cleaning solution with pepsin</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;width:291px;">Recombinant Human Tissue Factor Innovin</td>
			<td style="width:220px;">Dade Berhing</td>
			<td style="width:256px;">B4212-40</td>
			<td style="width:443px;">rhTF with synthetic phospholipids</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;width:291px;">Software microscope&#160;</td>
			<td style="width:220px;">Zeiss</td>
			<td style="width:256px;">N/A</td>
			<td>ZEN 2012</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;width:291px;">Sterile docking device</td>
			<td style="width:220px;">Terumo BCT</td>
			<td style="width:256px;">TSCD</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;">Table Top Centrifuge</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>521-0095</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;">Tube Roller</td>
			<td>Ratek</td>
			<td>BTR5-12V</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;width:291px;">Tubing Sealer</td>
			<td style="width:220px;">Terumo BCT</td>
			<td style="width:256px;">AC-155</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;width:291px;">Vena8 syringe connector pin</td>
			<td style="width:220px;">Cellix</td>
			<td style="width:256px;">CONNECTORS-B1IC-PACK100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;width:291px;">Vena8 Fluoro+ Biochips</td>
			<td style="width:220px;">Cellix</td>
			<td style="width:256px;">188V8CF-400-100-02P10</td>
			<td>Coated biochip</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;width:291px;">Vena8 Needles</td>
			<td style="width:220px;">Cellix</td>
			<td style="width:256px;">SS-P-B1IC-B1OC-PACK200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;width:291px;">Vena8 Tubing</td>
			<td style="width:220px;">Cellix</td>
			<td style="width:256px;">TUBING-TYGON-B1IC-B1OC-ROLL 100F</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;width:291px;">VenaDelta Y1 Biochips</td>
			<td style="width:220px;">Cellix</td>
			<td style="width:256px;">VDY1-400-100-01-02</td>
			<td>Mixing biochip</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:21px;width:291px;">Vortex mixer</td>
			<td style="width:220px;">VWR</td>
			<td style="width:256px;">58816-121</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:291px;">ZEN2012 software</td>
			<td style="width:220px;">Zeiss</td>
			<td style="width:256px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a microfluidic flow chamber model for platelet transfusion and hemostasis measures platelet deposition and fibrin formation in real-time

מודלי microfluidic של המוסטאסיס להעריך תפקוד טסיות בתנאים של גזירה הידרודינמית, אך בנוכחות של תרופות נגד קרישת דם, ניתוח זה מוגבל בתצהיר טסיות בלבד. הקשר המסובך בין פונקצית הקרישה הטסיות התלויה 2+ Ca דורש recalcification זהיר ומבוקר של דם לפני הניתוח. ההגדרה שלנו משתמשת ערוץ ערבוב בצורת Y, המספק חיץ Ca 2 + / Mg מרוכז 2+ זורם בדם רק לפני זלוף, מה שמאפשר recalcification המהיר ללא קיפאון מדגם. הבדל של פי עשר מהירויות זרימה בין שני מאגרי ממזער דילול. הדם recalcified הוא perfused אז בתא ניתוח מצופה קולגן, וסימון ההפרש מתיר הדמיה בזמן אמת של שניהם בתצהיר טסיות הפיברין באמצעות מיקרוסקופ וידאו הקרינה. המערכת משתמשת רק כלים זמינים מסחרית, להגדיל את הסיכויים של סטנדרטיזציה. כינון של throדם mbocytopenic עם טסיות הפקידה מתרכז יתר דגמים עירוי טסיות, המוכיח את השימוש בו בתחום מחקר זה. נתונים למופת הוכיחו כי התפרצות קרישה בתצהיר הפיברין היו תלויים באופן ליניארי על ריכוז טסיות, המאשר את היחסים בין המוסטאסיס יסודי ותיכון במודל שלנו. בתוך פרק זמן של לפחות 16 זלוף, הפעלת מגע לא התקיימה, למרות recalcification לקדמותו Ca 2+ ורמות Mg 2+. כאשר גורם קרישה XIIa היה עצור על ידי מעכבי טריפסין תירס, מסגרת זמן זו היה אפילו יותר, מה שמעיד על טווח דינמי ניכר בו שינויים באופי procoagulant של טסיות ניתן להעריך. Co-וקיבוע של גורם רקמת קולגן משמעותי את הזמן להופעת קרישה, אבל לא בקצב שלה. האפשרות ללמוד את גורמי רקמה ו / או מסלול הקשר מגדילה את צדדיות שירות של assay.

הניתוח של נתונים גולמיים בזמן אמת מתואר באיור 1. ראשית, טסיות לדבוק פני השטח תגובתי, וכתוצאה מכך עלייה מתמדת פלואורסצנטי ירוק רשמה (איור 1 א, ט), שנקרא הידבקות. במהלך שלב זה, יש קרינה סגולה קטנה, המציין כי הפיברין הוא לא או הוא רק נוצר שולי (איור 1B). עם תחילת הקרישה, סגול-קורנים פיקדונות הפיברין במהירות (iii), ובמשך כל הזמן הזה, עליות פלואורסצנטי ירוקות טסיות בערך באותו השיעור, המיועדות כאן הצטברות טסיות (ii). ניסוי בודד ובכך מחזיר שלושה שיעורי גידול קרינה (I, II, ו- III) כסמן פונדקאי עבור המהירות שבה בתצהיר טסיות הפיברין מתקיים במודל זה. יתר על כן, ברגע של הופעת קרישה (רגע-של-onset (iv)) הוא אקסטרפולציה, אשר הוא קובע של טסיותפוטנציאל procoagulant. בהעדר TF, ייזום קרישה איטי והוא פועל בעיקר דרך מסלול הקשר שם מתחם tenase מהותי מפעיל FX באמצעות הפעלה ישירה של FIX 6 על ידי FXI ו / או FXII. כדי להדגים את תלות FXII, 4 מיקרומטר של מעכבי טריפסין התירס (CTI) נוסף לעכב FXII מופעל (FXIIa) 7. עיכוב זה לא משפיע על הידבקות טסיות (איור 2 א), אבל קרישה לא להתחיל את משך הזמן הכולל מוגדר באופן שרירותי של ניסוי זלוף (איור 2B ו משלים וידאו 1). במבחנה, מסלול הקשר ניתן ביוזמת חומרים זרים כמו זכוכית, או מבחנים קליניים באמצעות חומר מינרלים כמו קאולין. בשנת vivo, טסיות מופעל לספק את המטען השלילי 8 &lt;/ sup&gt; דרך חשיפה הממברנה של פוספוליפידים חומצי 9, כמו phosphatidylserine, ו / או באמצעות שחרור polyphosphates (פוליפ) 10, 11. מחקה assay microfluidic בזמן אמת שלנו הלה כי, בטווח של ריכוזי טסיות, התגובה עוצר דמום תלוי ספירת הטסיות (איור 3). על ידי הגדלת מספר הטסיות במדגם מחדש, שיעור הדבקה (איור 3 א), הצטברות (איור 3B, ירוק), וקרישה (איור 3B, סגול) עלה באופן ליניארי. ברגע-של-onset קצר משמעותי (איור 3 ג) על ידי ריכוז טסיות הגדלה, דבר המצביע על כך מספר סף של (מופעל) שהופקד טסיות נדרש להפעיל קרישה. עם נזק לרקמות in vivo, לעומת זאת, TF נושאות תאים אקבלnitiate קרישת הדם דרך מתחם tenase חיצוני FVIIa-TF בנוכחות Ca 2 +. זה חיקה ההתקנה הניסיונית שלנו בדואר ציפוי לתאי זלוף המכיל קולגן עם rhTF lipidated. בניתוח לזווג ערוצי מצופה קולגן בלבד או בשילוב עם rhTF, התפרצות קרישה היה מהר יותר באופן משמעותי (איור 4 א). שיעור הידבקות טסיות לא היה ליניארי, ולכן אין רגרסיה ליניארית יכולה להתבצע (מידע לא מוצג). הן שיעור קרישה וצבירת טסיות לא היו שונים בין התנאים (איור 4 ב-4C, משלים וידאו 2). <img alt="איור 1" src="/files/ftp_upload/55351/55351fig1.jpg" /> איור 1: ניתוח רגרסיה של הידבקות טסיות וקרישה בתאי זלוף microfluidic. נתון זה מבהיר את הפרמטרים הנגזרים מנתוני גלם קרינה בזמן אמת<html> שנרכש במהלך זרימת דם recalcified מעל משטח תגובתי. (א) ממוצע עוצמת הקרינה ירוקה מראה בתצהיר טסיות בתפקוד זמן זלוף. העקום מתאר תהליך bimodal החל (i) הגדלת הידבקות טסיות ליניארי לאט ואחריו (ii) גדלה הצטברות ליניארי במהירות. שני החלקים ליניארי של עקומת רגרסיה והשיפוע אלה מתארים שני שיעורי היווצרות פקיק ידי קרינה טסיות; (I) דבק (ii) הצטברות. (ב) ממוצע עוצמת הקרינה סגולה תערוכות בתצהיר של הפיברין כפונקציה של זמן. במהלך הידבקות טסיות, קרינה סגולה היא בעצם נעדרת, בזמן שהוא במהירות מפתחת החניכה הבאה של קרישה. ה (iv) רגע-של-onset מוגדרת ליירט עם ציר ה- x של רגרסיה ליניארית אקסטרפולציה של (iii) בשלב השני של היווצרות פקיק ידי הקרינה הפיברין המיועד כאן קרישה.יעד EF = &quot;http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/55351/55351fig1large.jpg&quot; = &quot;_ blank&quot;&gt; לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו. <img alt="איור 2" src="/files/ftp_upload/55351/55351fig2.jpg" /> איור 2: בהעדר TF, קרישה בתאי זרימה זלוף מצופה קולגן תלוי FXIIa. זלוף microfluidic דם מחדש המכיל CTI או חיץ מלא (CONTROL) בוצע בשיעור גזירה של 1,000 s -1 עבור סכום כולל של 30 דקות. (א) שיעור הידבקות טסיות (s -1) לא היה תלוי CTI. (ב) הרגע-של-onset עבור דגימות שטופלו CTI היה מעבר לגבול 30 דקות של הניסוי (מוצג כקו מקווקו), הוכיח את תלות FXIIa של פרמטר זה. קווים ונקודות הם ערכים ממוצעים, שפם הוא סטיית התקן. ניתוח סטטיסטי היה על ידי מבחן t מזווג. (NS = לא משמעותי, n ≥3). <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/55351/55351fig2large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.</a> <img alt="איור 3" src="/files/ftp_upload/55351/55351fig3.jpg" /> איור 3: קרישה תחת זרם תלוי במספר הטסיות. ניסויי זלוף microfluidic בוצעו בתאים מצופים קולגן עם דם מחדש בנוכחות Ca 2 + וריכוזי טסיות משתנים (n ≥3). (א) שערי הידבקות טסיות (B) שיעור צבירת טסיות (ירוק) וקרישה (סגול), ו- (ג) רגע-של-onset מוצגים תפקידי ריכוזים טסיות בדם מחדש. נקודות הן ערכים ממוצעים, שפם מציין את סטיית התקן. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/55351/55351fig3large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג versi גדול</a>על של נתון זה. <img alt="איור 4" src="/files/ftp_upload/55351/55351fig4.jpg" /> איור 4: הפעלת שתי קרישת TF ומגע מסלול משמעותי מקצרת את הרגע-של-תחילת הקרישה. מחדש בדם, בנוכחות Ca 2 +, היה perfused דרך התאים מצופים קולגן לבד או עם קולגן rhTF ללמוד את מסלול המגע בלבד או שילוב של מסלולי קשר TF. (א) ברגע-של-תחילת קרישה מתקצר משמעותית בתאי זרימה המכיל TF. (ב) שיעור צבירת טסיות במהלך קרישה ו- (ג) שיעור קרישה אינם שונים משמעותית בין קולגן בלבד או collagen- ותאי זרימת מצופה rhTF. קווים ונקודות הם ערכים ממוצעים; שפם מציין את סטיית התקן. ניתוח סטטיסטי היה על ידי מבחן t מזווג. (NS = לא משמעותי, * P &lt;<html> 0.05, n ≥3). <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/55351/55351fig4large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.</a> <img alt="וידאו 1" src="/files/ftp_upload/55351/55351vid1.jpg" /> וידאו משלים 1: בהעדר TF, קרישה בתאי זרימה זלוף מצופה קולגן תלוי FXIIa. התפקיד של מסלול המגע נקבע תאי זרימת זלוף מצופה קולגן. (א) רצף תמונת קרינה מעולף של טסיות (ירוק) הפיברין (עוגן) בתצהיר (סגול) בהעדר CTI. (ב) רצף זהה פנל אבל עם המסלול הירוק כבוי. (C) רצף תמונת קרינה מעולף של טסיות (ירוק) הפיברין (עוגן) (סגול) בתצהיר בנוכחות CTI. (ד) רצף זהה הפאנל C אבל עם המסלול הירוק כבוי.&quot;Target =&quot; ecsource.jove.com/files/ftp_upload/55351/Supplementary_video_1.avi _ blank &quot;&gt; אנא לחץ כאן כדי להוריד את הסרטון הזה. <img alt="וידאו 2" src="/files/ftp_upload/55351/55351vid2.jpg" /> משלים וידאו 2: הפעלת שני TF ואת מסלול הקשר מקצר את הקרישה משמעותית רגע-של-onset. כדי ללמוד את התפקיד של TF, תאי זרימה מצופה קולגן לבד או עם קולגן rhTF שימשו. (א) רצף תמונת קרינה מעולף של טסיות (ירוק) הפיברין (עוגן) (סגול) בתצהיר בתאי תזרים המצופה רק עם קולגן. (ב) רצף זהה פנל אבל עם המסלול הירוק כבוי. (C) רצף תמונת קרינה מעולף של טסיות (ירוק) הפיברין (עוגן) (סגול) בתצהיר בתאי תזרים מצופה הוא עם קולגן rhTF. (ד) רצף זהה הפאנל C אבל עם switc המסלול הירוקהד off. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/55351/Supplementary_video_2.avi" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להוריד את הסרטון הזה.</a>

Watch this Scientific Journal Video about A Microfluidic Flow Chamber Model for Platelet Transfusion and Hemostasis Measures Platelet Deposition and Fibrin Formation in Real-time at JoVE.com

A Microfluidic Flow Chamber Model for Platelet Transfusion and Hemostasis Measures Platelet Deposition and Fibrin Formation in Real-time

מאמר זה מתאר מודל ניסיוני של המוסטאסיס המודד פונקציה וקרישה טסיות זמנית. טסיות קרינת הפיברין נמדדות בזמן אמת, וקצב הידבקות טסיות דם, קרישת שיעור, והתחלה של קרישה נחושה. המודל משמש כדי לקבוע מאפיינים טסיות procoagulant תחת זרם מתרכז עבור עירוי.

מודל לשכת תזרים Microfluidic עבור עירוי טסיות המוסטאסיס מודד הפקדת טסיות והיווצרות הפיברין בזמן אמת

Microfluidic models of hemostasis assess platelet function under conditions of hydrodynamic shear, but in the presence of anticoagulants, this analysis is ...

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Parallel-plate Flow Chamber and Continuous Flow Circuit to Evaluate Endothelial Progenitor Cells under Laminar Flow Shear Stress

במקביל, צלחת תזרים לשכת ואת מעגל זרימה רציפה להערכת ובתאים אנדותל תחת מתח זרימה למינרית שאר

The overall goal of this method is to describe a technique to subject adherent cells to laminar flow conditions and evaluate their response to well ...

A Novel Three-dimensional Flow Chamber Device to Study Chemokine-directed Extravasation of Cells Circulating under Physiological Flow Conditions

התקן תזרים הלשכה תלת ממדי רומן ללמוד chemokine ביים-extravasation של תאים במחזור בתנאי זרימה פיסיולוגיים

Extravasation of circulating cells from the bloodstream plays a central role in many physiological and pathophysiological processes, including stem cell ...

Protocol for Biofilm Streamer Formation in a Microfluidic Device with Micro-pillars

פרוטוקול ליצירת biofilm Streamer במכשיר microfluidic עם מיקרו עמודים

Several bacterial species possess the ability to attach to surfaces and colonize them in the form of thin films called biofilms. Biofilms that grow in ...

Microfluidic Genipin Deposition Technique for Extended Culture of Micropatterned Vascular Muscular Thin Films

טכניקת microfluidic Genipin הפקדת לתרבות מורחבת של כלי דם micropatterned השרירים Thin Films

The chronic nature of vascular disease progression requires the development of experimental techniques that simulate physiologic and pathologic vascular ...

Layer-by-layer Collagen Deposition in Microfluidic Devices for Microtissue Stabilization

קולגן שכבת הפקדת-ידי שכבה במכשירי microfluidic לMicrotissue ייצוב

Although microfluidics provides exquisite control of the cellular microenvironment, culturing cells within microfluidic devices can be challenging. 3D ...

Characterization of Leukocyte-platelet Rich Fibrin, A Novel Biomaterial

אפיון של יקוציט-טסיות העשיר הפיברין, רומן ביולוגי

Autologous platelet concentrates represent promising innovative tools in the field of regenerative medicine and have been extensively used in oral ...

Microfluidic Flow Chambers Using Reconstituted Blood to Model Hemostasis and Platelet Transfusion In Vitro

Microfluidic Flow Chambers Using Reconstituted Blood to Model Hemostasis and Platelet Transfusion In Vitro

Microfluidic זרימה צ&#39;יימברס שימוש מחדש דם למודל המוסטאסיס ואת טסיות עירוי<em&gt; במבחנה</em

Blood platelets prepared for transfusion gradually lose hemostatic function during storage. Platelet function can be investigated using a variety of ...

Microfluidic Bioprinting for Engineering Vascularized Tissues and Organoids

Vascularized Microfluidic Bioprinting עבור הנדסת רקמות, Organoids

Engineering vascularized tissue constructs and organoids has been historically challenging. Here we describe a novel method based on microfluidic ...

A Protocol for Real-time 3D Single Particle Tracking

פרוטוקול לצורך מעקב בזמן אמת 3D חלקיק יחיד

Real-time three-dimensional single particle tracking (RT-3D-SPT) has the potential to shed light on fast, 3D processes in cellular systems. Although ...

Manufacturing of a Nafion-coated, Reduced Graphene Oxide/Polyaniline Chemiresistive Sensor to Monitor pH in Real-time During Microbial Fermentation

ייצור מצופים Nafion, מופחתת גראפן תחמוצת/Polyaniline Chemiresistive חיישן על צג ה-pH בזמן אמת במהלך התסיסה מיקרוביאלי

Here, we report the engineering of a solid-state micro pH sensor based on polyaniline-functionalized, electrochemically reduced graphene oxide (ERGO-PA). ...