Name: a high-throughput cell microarray platform for correlative analysis of cell differentiation and traction forces
Uploaded: 2017-03-01T11:00:00
Duration: 12 min 4 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about A High-throughput Cell Microarray Platform for Correlative Analysis of Cell Differentiation and Traction Forces at JoVE.com

हम स्वीकार करते हैं ऑस्टिन Cyphersmith और Mayandi Sivaguru (जीनोमिक जीवविज्ञान के लिए कार्ल आर Woese संस्थान, इलिनोइस विश्वविद्यालय Champaign-Urbana) माइक्रोस्कोपी के साथ सहायता के लिए और उदारता माइक्रोस्कोपी मूल में स्क्रीन और वीडियो पर कब्जा मिलनसार के लिए।

लेखकों घोषणा की कि वे कोई प्रतिस्पर्धा वित्तीय हितों की है कि।

हमारे प्रयोगों में, हमने पाया है कि सबसे आम विफलताओं गढ़े सरणियों की गुणवत्ता से संबंधित हैं और खराब ब्याज की जैविक प्रणाली में प्रतिक्रिया होती है। हम सेल माइक्रोएरे प्रयोगों में आम विफलता मोड और जुड़े समस्या निवारण चरणों के लिए 1 टेबल के लिए पाठक को देखें। विशेष रूप से सरणियों की गुणवत्ता के बारे में, हम निम्नलिखित सलाह देते हैं। तकनीकी गुणवत्ता और प्रोटीन कार्यक्रमों, मानकों, और जैसे rhodamine संयुग्मित dextran के रूप में fluorescently लेबल अणुओं का उपयोग कर buffers की मजबूती की पुष्टि करें। या तो पहले या निर्माता के निर्देशों के अनुसार प्रोटीन और आगे नेत्रहीन के बाद अच्छी तरह से साफ पिन जाँच करें कि पिन चैनलों एक प्रकाश माइक्रोस्कोप का उपयोग मलबे के स्पष्ट हैं। सामान्य प्रोटीन दाग या immunolabeling का उपयोग कर arrayed बायोमोलिक्यूल प्रतिधारण की पुष्टि करें। ध्यान दें कि 70 केडीए के नीचे एक आणविक वजन के साथ biomolecules अक्सर हाइड्रोजेल 23 में बनाए रखा नहीं कर रहे हैं, </<html> sup&gt; 31। अनेक प्रकार की कोशिकाओं का उपयोग कर arrayed बायोमोलिक्यूल सेल कार्यक्षमता मान्य। ध्यान दें कि केवल पक्षपाती कोशिकाओं सरणियों के साथ संगत कर रहे हैं; इसके अतिरिक्त, सरणियों के लिए आसंजन दोनों सेल विशिष्ट गुण (जैसे, इंटीग्रिन अभिव्यक्ति प्रोफ़ाइल) और चयनित ईसीएम प्रोटीन पर निर्भर है। सीमित स्थान के कारण, हम यहाँ सरणी डिजाइन, लेआउट, और निर्माण की एक व्यापक उपचार प्रदान की है और पाठक का उल्लेख पिछले कार्यों के लिए 23, 25 नहीं किया है। हम आम तौर पर 100 मौके subarrays (150 माइक्रोन मौके व्यास, 450 माइक्रोन केंद्र के लिए केंद्र की दूरी) 10-20 अद्वितीय बायोमोलिक्यूल की स्थिति (यानी, 5-10 स्पॉट / हालत) की रचना का उपयोग करें। एक सरणी में subarrays की संख्या ब्याज की बायोमोलिक्यूल की स्थिति की संख्या है, जो आराम से एक 25 × 75 मिमी खुर्दबीन स्लाइड पर 1,280 करने के लिए बढ़ाया जा सकता है पर निर्भर करता है (~ 64 subarrays में 6,400 स्पॉट)xref &quot;&gt; 25, 31 मापदंडों के ऊपर आगे ब्याज के पैटर्न आकार के आधार पर अलग अलग होंगे;। 75 से पैटर्न पैदा करने में सक्षम पिन - 450 माइक्रोन आसानी से उपलब्ध हैं। ऐरे प्रयोगों सबसे अच्छा उच्च स्कोरिंग arrayed ब्याज की जैविक मॉडल प्रणाली अन्य संस्कृति स्वरूपों का उपयोग करने की स्थिति, परख readouts, और के सत्यापन से पूरित कर रहे हैं। विशेष रूप से, हम आगे मानक आणविक जीव विज्ञान तकनीक (जैसे, QRT- पीसीआर, immunoblotting) या मानक TFM के साथ संयोजन के रूप में थोक संस्कृतियों का उपयोग चुनिंदा arrayed की स्थिति के प्रभाव को मान्य सलाह देते हैं। आनुवंशिक हेरफेर के लिए एक उपयुक्त मॉडल जैविक प्रणाली को भी सरणियों में मनाया प्रभाव पुष्टि करने के लिए सेवा कर सकते हैं में रुचि का कारक की (जैसे, पछाड़ना या overexpression)। विवो में पशु मॉडल सत्यापन का एक और साधन प्रतिनिधित्व करते हैं और हाल ही में, उदाहरण के लिए इस्तेमाल किया जाता था, में galectin -3 और galectin-8 की केंद्रीय भूमिका की पुष्टि के लिएफेफड़ों के कैंसर मेटास्टेटिक आला, के रूप में शुरू में सेल माइक्रोएरे 31, 49 के माध्यम से पहचान की। अन्य तरीकों की एक संख्या में सेलुलर कार्यों की microenvironmental विनियमन, दो आयामी microfabricated सिस्टम 18, 50, 51, 52, 53, 54, 55 और तीन आयामी इंजीनियर biomaterial प्रणालियों 56 की एक किस्म, 57, 58 सहित जांच के लिए इस्तेमाल किया गया है , 59, 60, 61। अन्य तरीकों के साथ तुलना में, सेल माइक्रोएरे मंच की विशेष लाभ यहाँ वर्णित से मिलकर बनता है: (1) के लिए throughputसैकड़ों या कारकों के विभिन्न संयोजनों, बातचीत के प्रभाव के विश्लेषण के लिए सक्षम करने के हजारों; (2) सुलभ, स्वचालित इमेजिंग और विश्लेषण; (3) arrayed कारकों में से नियंत्रित प्रस्तुति के साथ दोनों जैव रासायनिक और biophysical readouts के एकीकरण; (4) सब्सट्रेट सामग्री गुण भिन्न करने की क्षमता; और (5) उच्च सामग्री एकल कोशिका सेल भाग्य और समारोह का विश्लेषण। सारांश में, ट्यून करने योग्य सब्सट्रेट कठोरता के substrates पर TFM के साथ सेल प्रोटीन का संयोजन दोनों जैव रासायनिक और biophysical संकेतों की पूरी तरह से लक्षण वर्णन सक्षम बनाता है। यहाँ के रूप में प्रस्तुत किया है, इस मंच generalizable है और आसानी से सेल भेदभाव और mechanotransduction की मिश्रित microenvironmental नियमन का एक बेहतर समझ की दिशा में पक्षपाती सेल प्रकार के ऊतक और संदर्भों की एक किस्म के लिए लागू किया जा सकता है।

कोशिकाओं और microenvironmental कारकों आसपास के बीच सहभागिता विकास, homeostasis, और रोग रोगजनन 1, 2, 3, 4 भर में जैविक प्रक्रियाओं की एक बड़ी विविधता मध्यस्थता। ये microenvironmental बातचीत ligand-रिसेप्टर बंधन के माध्यम से सेल सेल बातचीत कोशिकाओं को घुलनशील कारकों में से वितरण, सेल मैट्रिक्स बंधन, और शामिल हैं। ऊपर जैव रासायनिक विचार करने के अलावा, इस तरह के सब्सट्रेट यांत्रिक गुणों के रूप में biophysical मापदंडों, (जैसे, यंग मापांक, porosity) और सेल के आकार, और संबंधित डाउनस्ट्रीम mechanotransduction तेजी से मान्यता सेल भेदभाव 5, 6, 7, 8 के प्रमुख मध्यस्थों के रूप में प्राप्त की है, 9 <sup&gt; 10। इन microenvironmental बातचीत से उत्पन्न सिग्नल जीन नेटवर्क और संकेत दे रास्ते के लिए सामग्री के रूप में सेवा करते हैं। इसके अलावा, इन सेल आंतरिक घटकों को भी स्रावित कारकों और मैट्रिक्स अपमानजनक एंजाइमों, सेल आंतरिक आनुवंशिक कार्यक्रमों और सेल बाह्य कारकों microenvironmental 5, 11, 12 के बीच एक जटिल सह नियामक पाश को पूरा करने के माध्यम से microenvironment को फीडबैक प्रदान करते हैं। Microenvironmental कारकों में से नियंत्रित प्रस्तुति के लिए इंजीनियर सिस्टम के उपयोग के अलग अलग संदर्भों 13, 14, 15 के एक रेंज में उपयोगी साबित हो गया। विशेष रूप से microfabricated सिस्टम miniaturization 13 के माध्यम से प्रोटीन और कोशिकाओं के रूप में अच्छी तरह से अत्यधिक parallelized विश्लेषण के सटीक स्थानिक patterning में मदद की है, <supवर्ग = &quot;xref&quot;&gt; 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22। सेल प्रोटीन एक ऐसी प्रणाली है जो microfabricated में biomolecules के संयोजन संपर्क छपी एक लोचदार polyacrylamide हाइड्रोजेल सब्सट्रेट 23, 24, 25 पर प्रतिनिधित्व कर रहे हैं। सेल चिपकने वाला घटकों (अर्थात् मैट्रिक्स प्रोटीन) का समावेश निरंतर कोशिका आसंजन और प्रोटीन पर संस्कृति है, जो अक्सर immunocytochemistry और फ्लोरोसेंट संवाददाताओं के माध्यम से नीचे की ओर विश्लेषण द्वारा पीछा किया जाता है सक्षम बनाता है। सेल प्रोटीन उत्पादकता जिगर सेल phenotype 23, 26, तंत्रिका अग्रदूत भेदभाव 27, mammar का एक बेहतर समझ हासिल करने की दिशा में निर्देशित किया गया हैY पूर्वज भाग्य का निर्णय 28, भ्रूण स्टेम सेल रखरखाव / भेदभाव 23, 29, 30, फेफड़ों के कैंसर मेटास्टेसिस 31, और 32 मेलेनोमा में चिकित्सीय प्रतिक्रिया। हमने हाल ही में एण्डोडर्म विनिर्देश 33, जिगर पूर्वज भेदभाव 34, 35, और फेफड़ों के ट्यूमर सेल दवा प्रतिक्रिया 36 में बाह्य मैट्रिक्स (ईसीएम) प्रोटीन संरचना की भूमिका को परिभाषित करने के लिए सेल प्रोटीन के उपयोग का प्रदर्शन किया है। इन कार्यों में, हम सरणी मंच के मिश्रित क्षमताओं का विस्तार और बाह्य मैट्रिक्स संरचना और बायोमैकेनिक्स के साथ सेल आंतरिक सिगनल के चौराहों की खोज पर ध्यान केंद्रित किया है। इसके अलावा, हम इस सरणी मंच में biophysical readouts को लागू किया है मात्रात्मक चरित्र करने की क्षमता प्रदान करने के लिएभेदभाव में सेल सिकुड़ना की terize भूमिका 35 प्रक्रियाओं। ऐसा करने के लिए, हम एकीकृत सेल प्रोटीन के साथ कर्षण शक्ति माइक्रोस्कोपी (TFM) सेल जनित कर्षण के उच्च throughput आकलन कर सकें। TFM सेल जनित कर्षण बलों को मापने के लिए एक व्यापक रूप से उपयोग विधि है और एकल कोशिका और संरचना और स्थानीय microenvironment 37, 38, 39, 40 के बायोमैकेनिक्स के साथ ऊतक स्तरीय समारोह के समन्वय के बारे में महत्वपूर्ण अंतर्दृष्टि प्रदान की गई है। इस प्रकार, सेल प्रोटीन के साथ TFM के संयोजन कुंजी, physiologically प्रासंगिक biophysical मानकों को मापने के लिए एक उच्च throughput प्रणाली प्रदान करता है। सेल माइक्रोएरे यहाँ वर्णित मंच चार वर्गों के होते हैं: Polyacrylamide substrates, सरणियों, सेल संस्कृति और परख readout के निर्माण, और डेटा के विश्लेषण का निर्माण। देखपहले तीन प्रयोगात्मक वर्गों का एक योजनाबद्ध सारांश के लिए चित्रा 1; इम्यूनोफ्लोरेसेंस आंकड़ों के विश्लेषण पर ध्यान देने के साथ अंतिम खंड के एक योजनाबद्ध सारांश के लिए चित्र 2 देखें। आदेश बायोमैकेनिकल सेल सब्सट्रेट बातचीत के अध्ययन के लिए सेल माइक्रोएरे मंच अनुकूल करने के लिए, हम ट्यून करने योग्य यंग मापांक लेकिन इसी तरह के porosity के polyacrylamide substrates इस्तेमाल किया, प्रति वेन एट अल। 41। उनकी सब्सट्रेट पर कोशिकाओं द्वारा लगाए गए बलों की TFM माप सक्षम करने के लिए, हम मोटी कांच माइक्रोस्कोप अक्सर अन्य समूहों द्वारा उपयोग स्लाइड्स के अलावा एक गिलास नीचे पेट्री डिश प्रारूप लागू किया है। इस प्रकार, इस सेल माइक्रोएरे मंच TFM के माध्यम से खुर्दबीन स्लाइड और सेल उत्पन्न बलों पर immunofluorescence के माध्यम से सेल भेदभाव के समानांतर माप अलग गिलास नीचे बर्तन पर करने में सक्षम है। हम यह भी विश्लेषणात्मक दृष्टिकोण आमतौर पर सेल प्रोटीन के साथ प्रयोग करने के लिए कई सुधार लागू है। specificalLy, समग्र द्वीप तीव्रता के पैरामीट्रिक जेड-स्कोरिंग के बजाय, हम एकल कोशिका तीव्रता मापने के लिए और आदेश गैर सामान्य वितरण के लिए खाते में और अधिक सही सेलुलर व्यवहार का वर्णन करने में quantile सामान्य बनाने के लागू होते हैं। हमारा मानना ​​है कि इन सुधारों के जैविक प्रक्रियाओं, जिसमें दोनों जैव रासायनिक और biophysical संकेतों महत्वपूर्ण भूमिका निभाते हैं पारस्परिक की जांच की दिशा में विशेष उपयोगिता प्रदान करते हैं। इसके अलावा, हमारे विश्लेषणात्मक सुधार सेलुलर कार्यों जिसके लिए एकल कोशिका और जनसंख्या के स्तर का व्यवहार हट जाना की एक श्रृंखला का अध्ययन करने के लिए सेल प्रोटीन के आवेदन को सक्षम।

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>0.2 &#181;m syringe filter</td>
			<td>Pall Corporation</td>
			<td>4433</td>
			<td>Match with appropriately-sized Luer lock plastic syringes.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>100&#215; penicillin&#8211;streptomycin solution</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>SV30010</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>22&#215;60 mm coverglasses</td>
			<td>Electron Microscope Sciences</td>
			<td>63765</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3-(trimethoxysilyl)propyl methacrylate (3-TPM)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>440159</td>
			<td>Store under inert gas per manufacturer&#39;s instructions. Exposure of 3-TPM to air could compromise silanization of glass substrates. CAUTION: 3-TPM is a combustible liquid. Keep away from heat, sparks, open flames, and hot surfaces and use only in a chemical fume hood.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3-[(3-Cholamidopropyl)dimethylammonio]-1-propanesulfonate hydrate (CHAPS)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>C3023</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>35 mm glass-bottom Petri dishes</td>
			<td>Cell E&#38;G</td>
			<td>GBD00002-200</td>
			<td>13 mm well consisting of #1.5 coverglass. Enables TFM and live-cell imaging.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>384-well polypropylene V-bottom microplate, non-sterile</td>
			<td>USA Scientific</td>
			<td>1823-8400</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>6-well polystyrene microplates</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>08-772-1B</td>
			<td>35 mm glass-bottom Petri dishes fit into wells of microplate, easying array fabrication.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acetone</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>179973</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acrylamide</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>A3553</td>
			<td>CAUTION: Exposure to acrylamide can result in acute toxicity and irritation. Wear protective gloves, clothing, and eye protection.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collagen I, rat tail</td>
			<td>EMD Millipore</td>
			<td>08-115MI</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collagen III, human</td>
			<td>EMD Millipore</td>
			<td>CC054</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collagen IV, human</td>
			<td>EMD Millipore</td>
			<td>CC076</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Crosslinker, 365 nm</td>
			<td>UVP</td>
			<td>CL-1000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dextran, rhodamine B-conjugated, 70 kDa</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>D1841</td>
			<td>Used as a marker for array location.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dimethyl sulfoxide</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>BP231</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dulbecco&#39;s phosphate-buffered saline (PBS)</td>
			<td>Fisher Scientific (HyClone)</td>
			<td>SH3001302</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethyl alcohol</td>
			<td>Decon Labs</td>
			<td>2701</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>ED</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fc-recombinant DLL1, mouse</td>
			<td>R&#38;D Systems</td>
			<td>5026-DL-050</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fc-recombinant DLL4, mouse</td>
			<td>AdipoGen</td>
			<td>AG-40A-0145-C050</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fc-recombinant JAG1, rat</td>
			<td>R&#38;D Systems</td>
			<td>599-JG-100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fibronectin, human</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>F2006</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluorescent microscope, inverted</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td>Axiovert 200M</td>
			<td>Ensure microscope is equipped with a robotic stage for both automated fluorescent imaging and TFM. Environmental control (i.e., 37 &#176;C and 5% CO2) is highly advisable for TFM.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluoromount G with DAPI</td>
			<td>SouthernBiotech</td>
			<td>0100-20</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glacial acetic acid</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>695092</td>
			<td>CAUTION: Acetic acid is flammable and corrosive. Wear protective gloves, clothing, and eye protection.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glycerol</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>M6145</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Irgacure 2959</td>
			<td>BASF Corporation</td>
			<td>55047962</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Laminin, mouse</td>
			<td>EMD Millipore</td>
			<td>CC095</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Methanol</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>179957</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microarray scanner</td>
			<td>GenePix</td>
			<td>4000B</td>
			<td>Fluorophores must be Cy3- or Cy5-compatible.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microarrayer</td>
			<td>Digilab</td>
			<td>OmniGrid Micro</td>
			<td>Other microarrayerse of similar or greater capability can readily be substituted.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscope slides, 25&#215;75 mm</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>CLS294775X25</td>
			<td>~0.9&#8211;1.1 mm thickness.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>N,N&#8242;-Methylenebisacrylamide (bisacrylamide)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>M7279</td>
			<td>CAUTION: Exposure to acrylamide can result in acute toxicity and irritation. Wear protective gloves, clothing, and eye protection.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Paraformaldehyde (PFA), 16% v/v</td>
			<td>Electron Microscope Sciences</td>
			<td>RT15710</td>
			<td>Prepare PFA fresh (do not store) for optimal fixation. CAUTION: Exposure to PFA can result in acute toxicity and can also irritate or corrode skin on contact. Wear protective gloves, clothing, and eye protection and use only in a chemical fume hood.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Protein A/G, recombinant</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>21186</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pyrex drying tray, 2000 ml</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>15-242B&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rectangular 4-chambered culture dish</td>
			<td>Fisher Scientific (Nunc)</td>
			<td>12-565-495</td>
			<td>For cell culture on arrayed microscope slides.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium acetate</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>S2889</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium hydroxide</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>415413</td>
			<td>CAUTION: NaOH is highly caustic and can cause severe skin burns and eye damage. Wear protective gloves, clothing, and eye protection.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stealth pin for arraying</td>
			<td>ArrayIt</td>
			<td>SMP3</td>
			<td>Clean pins after each array run using the instructions of the manufacturer. Produces 150 micron domains; purchase other pin sizes (75&#8211;450 microns) as suited to your particular application.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Triton X-100</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>X100</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a high-throughput cell microarray platform for correlative analysis of cell differentiation and traction forces

Microfabricated सेलुलर प्रोटीन है, जो एक लोचदार हाइड्रोजेल सतह पर biomolecules के संपर्क मुद्रित संयोजन से मिलकर बनता है, सेल भेदभाव पर arrayed जैव रासायनिक संकेतों के प्रभाव को मापने के लिए एक कसकर नियंत्रित, उच्च throughput इंजीनियर प्रणाली प्रदान करते हैं। सेल प्रोटीन का उपयोग करते हुए हाल के प्रयासों को मिश्रित के अध्ययन है, जिसमें कई कारकों microenvironmental समानांतर में प्रस्तुत कर रहे हैं के लिए उनकी उपयोगिता का प्रदर्शन किया है। हालांकि, इन प्रयासों सेल प्रतिक्रिया पर जैव रासायनिक संकेतों के प्रभाव की जांच पर मुख्य रूप से ध्यान केंद्रित किया है। यहाँ, हम कर्षण बल माइक्रोस्कोपी द्वारा immunofluorescence और biomechanical सेल सब्सट्रेट बातचीत से दोनों सेल भेदभाव के मूल्यांकन के लिए ट्यून करने योग्य सामग्री के गुणों के साथ एक सेल माइक्रोएरे मंच प्रस्तुत करते हैं। ऐसा करने के लिए, हम दो अलग-अलग या तो माइक्रोस्कोप स्लाइड या गिलास नीचे पेट्री डिश पर गढ़े यंग मापांक बदलती के polyacrylamide हाइड्रोजेल उपयोग स्वरूपों का विकास किया है। हम bes प्रदानटी प्रथाओं और इन हाइड्रोजेल substrates पर प्रोटीन का निर्माण, प्रोटीन पर बाद में सेल संस्कृति, और डेटा के अधिग्रहण के लिए समस्या निवारण। यह मंच है जो दोनों जैव रासायनिक (जैसे, बाह्य मैट्रिक्स संरचना) और biophysical के लिए (जैसे, सब्सट्रेट कठोरता) संकेतों महत्वपूर्ण निभा सकते हैं, भूमिकाओं पारस्परिक जैविक प्रक्रियाओं की जांच में उपयोग के लिए अच्छी तरह से अनुकूल है।

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A High-throughput Cell Microarray Platform for Correlative Analysis of Cell Differentiation and Traction Forces

सेल भेदभाव दोनों मैट्रिक्स संरचना और सब्सट्रेट सामग्री संपत्तियों सहित microenvironmental कारकों की एक मेजबान के द्वारा नियंत्रित किया जाता है। हम यहाँ एक तकनीक कर्षण बल माइक्रोस्कोपी के साथ संयोजन के रूप में दोनों सेल भेदभाव और microenvironmental संदर्भ के एक समारोह के रूप में बायोमैकेनिकल सेल सब्सट्रेट बातचीत का मूल्यांकन करने के लिए सेल प्रोटीन के उपयोग का वर्णन है।

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