Name: rapid and refined cd11b magnetic isolation of primary microglia with enhanced purity and versatility
Uploaded: 2017-04-13T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Rapid and Refined CD11b Magnetic Isolation of Primary Microglia with Enhanced Purity and Versatility at JoVE.com

Dette arbejde blev støttet af National Institutes of Health (NIH) Tilskud: NS088206 og ES026892. Den W. Eugene og Linda Lloyd Begavet Stol til AGK og dekaner professorat til AK er også anerkendt.

Anvendelse af dyrene og protokol procedurer blev godkendt og under tilsyn af Institutional Animal Care og brug Udvalg (IACUC) på Iowa State University (Ames, IA, USA) 1. Dyrkning af blandede gliale kulturer <ol><li> Halshugge 1.-2 dage gamle hvalpe hurtigt med 5,5 tommer opererer saks, og placere hovederne straks i et 50 ml rør på is. Bemærk, at denne halshugning er den tilstand af eutanasi. </li><li> I en laminar luftstrøm hætte, lave et lille snit i kraniet og meninges anve...

<ol>
	<li>Schulz, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+lineage+of+myeloid+cells+independent+of+Myb+and+hematopoietic+stem+cells.">A lineage of myeloid cells independent of Myb and hematopoietic stem cells.</a> Science. 336 (6077), 86-90 (2012).</li><li>Prinz, M., Priller, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microglia+and+brain+macrophages+in+the+molecular+age:+from+origin+to+neuropsychiatric+disease.">Microglia and brain macrophages in the molecular age: from origin to neuropsychiatric disease.</a> Nat Rev Neurosci. 15 (5), 300-312 (2014).</li><li>Alliot, F., Godin, I., Pessac, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microglia+derive+from+progenitors,+originating+from+the+yolk+sac,+and+which+proliferate+in+the+brain.">Microglia derive from progenitors, originating from the yolk sac, and which proliferate in the brain.</a> Brain Res Dev Brain Res. 117 (2), 145-152 (1999).</li><li>Ransohoff, R. M., Cardona, A. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+myeloid+cells+of+the+central+nervous+system+parenchyma.">The myeloid cells of the central nervous system parenchyma.</a> Nature. 468 (7321), 253-262 (2010).</li><li>Kettenmann, H., Kirchhoff, F., Verkhratsky, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microglia:+new+roles+for+the+synaptic+stripper.">Microglia: new roles for the synaptic stripper.</a> Neuron. 77 (1), 10-18 (2013).</li><li>Su, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synuclein+activates+microglia+in+a+model+of+Parkinson's+disease.">Synuclein activates microglia in a model of Parkinson's disease.</a> Neurobiol Aging. 29 (11), 1690-1701 (2008).</li><li>Dzamko, N., Geczy, C. L., Halliday, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inflammation+is+genetically+implicated+in+Parkinson's+disease.">Inflammation is genetically implicated in Parkinson's disease.</a> Neuroscience. 302, 89-102 (2015).</li><li>Xing, B., Bachstetter, A. D., Van Eldik, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microglial+p38alpha+MAPK+is+critical+for+LPS-induced+neuron+degeneration,+through+a+mechanism+involving+TNFalpha.">Microglial p38alpha MAPK is critical for LPS-induced neuron degeneration, through a mechanism involving TNFalpha.</a> Mol Neurodegener. 6, 84 (2011).</li><li>Panicker, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fyn+Kinase+Regulates+Microglial+Neuroinflammatory+Responses+in+Cell+Culture+and+Animal+Models+of+Parkinson's+Disease.">Fyn Kinase Regulates Microglial Neuroinflammatory Responses in Cell Culture and Animal Models of Parkinson's Disease.</a> J Neurosci. 35 (27), 10058-10077 (2015).</li><li>Moehle, M. S., West, A. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=M1+and+M2+immune+activation+in+Parkinson's+Disease:+Foe+and+ally?.">M1 and M2 immune activation in Parkinson's Disease: Foe and ally?.</a> Neuroscience. 302, 59-73 (2015).</li><li>Saijo, K., Glass, C. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microglial+cell+origin+and+phenotypes+in+health+and+disease.">Microglial cell origin and phenotypes in health and disease.</a> Nat Rev Immunol. 11 (11), 775-787 (2011).</li><li>Paolicelli, R. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synaptic+pruning+by+microglia+is+necessary+for+normal+brain+development.">Synaptic pruning by microglia is necessary for normal brain development.</a> Science. 333 (6048), 1456-1458 (2011).</li><li>Floden, A. M., Combs, C. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microglia+repetitively+isolated+from+in+vitro+mixed+glial+cultures+retain+their+initial+phenotype.">Microglia repetitively isolated from in vitro mixed glial cultures retain their initial phenotype.</a> J Neurosci Methods. 164 (2), 218-224 (2007).</li><li>Saura, J., Tusell, J. M., Serratosa, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-yield+isolation+of+murine+microglia+by+mild+trypsinization.">High-yield isolation of murine microglia by mild trypsinization.</a> Glia. 44 (3), 183-189 (2003).</li><li>Gordon, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+simple+magnetic+separation+method+for+high-yield+isolation+of+pure+primary+microglia.">A simple magnetic separation method for high-yield isolation of pure primary microglia.</a> J Neurosci Methods. 194 (2), 287-296 (2011).</li><li>Prinz, M., Priller, J., Sisodia, S. S., Ransohoff, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heterogeneity+of+CNS+myeloid+cells+and+their+roles+in+neurodegeneration.">Heterogeneity of CNS myeloid cells and their roles in neurodegeneration.</a> Nat Neurosci. 14 (10), 1227-1235 (2011).</li><li>Marek, R., Caruso, M., Rostami, A., Grinspan, J. B., Das Sarma, ., J, <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Magnetic+cell+sorting:+a+fast+and+effective+method+of+concurrent+isolation+of+high+purity+viable+astrocytes+and+microglia+from+neonatal+mouse+brain+tissue.">Magnetic cell sorting: a fast and effective method of concurrent isolation of high purity viable astrocytes and microglia from neonatal mouse brain tissue.</a> J Neurosci Methods. 175 (1), 108-118 (2008).</li><li>Hasko, G., Pacher, P., Vizi, E. S., Illes, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adenosine+receptor+signaling+in+the+brain+immune+system.">Adenosine receptor signaling in the brain immune system.</a> Trends Pharmacol Sci. 26 (10), 511-516 (2005).</li><li>Radulovic, M., Yoon, H., Wu, J., Mustafa, K., Scarisbrick, I. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Targeting+the+thrombin+receptor+modulates+inflammation+and+astrogliosis+to+improve+recovery+after+spinal+cord+injury.">Targeting the thrombin receptor modulates inflammation and astrogliosis to improve recovery after spinal cord injury.</a> Neurobiol Dis. 93, 226-242 (2016).</li><li>Ay, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+cloning,+epigenetic+regulation,+and+functional+characterization+of+Prkd1+gene+promoter+in+dopaminergic+cell+culture+models+of+Parkinson's+disease.">Molecular cloning, epigenetic regulation, and functional characterization of Prkd1 gene promoter in dopaminergic cell culture models of Parkinson's disease.</a> J Neurochem. 135 (2), 402-415 (2015).</li><li>Gordon, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protein+kinase+Cdelta+upregulation+in+microglia+drives+neuroinflammatory+responses+and+dopaminergic+neurodegeneration+in+experimental+models+of+Parkinson's+disease.">Protein kinase Cdelta upregulation in microglia drives neuroinflammatory responses and dopaminergic neurodegeneration in experimental models of Parkinson's disease.</a> Neurobiol Dis. 93, 96-114 (2016).</li></ol>

Ældre mikrogliaceller isoleringsmetoder har begrænsede inddrivelser som ikke er passende til forskellige proteinanalyser ved Western blot og RNA analyser ved QRT-PCR. Den differentielle adhærens og milde trypsinisering metoder er to almindelige fremgangsmåder med lave mikroglialceller udbytter 13, 14, 15. Søjlen-baserede CD11b tilgang har også lav genvinding, men opnår større renhed end forskellen adhærens og mild tryp...

Mikroglia er Myb-uafhængige stationære makrofager af mesodermal oprindelse, som differentierer fra c-kit + / CD45- erythromyeloid progenitorer i blodet øer i blommesækken 1, 2. Når embryologiske mikroglia har koloniseret det centrale nervesystem (CNS), de overgangen fra en amoeboid til en forgrenet formular 3. Disse voksne mikroglia er klassificeret som surveillant da deres dynamiske forgreninger sonde sunde hjerneparenkym for potentielle fornærmelser 4. Selvom mikroglia kun bidrage til ca. 10% af CNS cellepopulationen, deres evne til at flise blandt hinanden sikrer maksimal scanning af parenkym 4, 5. Fare-associerede molekylmønstre (dæmper), såsom α-synuclein 6, 7 og amyloid-β 8 eller pathogen-associerede molekylmønstre (PAMPs), såsom lipopolysaccharid (LPS) 9, klassisk aktivere mikroglia at fremme en inflammatorisk reaktion karakteriseret ved reversion til amoeboid aktive tilstand og produktionen af nitrogenoxid, tumornekrosefaktor-α (TNF), interleukin 1β (IL-1β), IL-6, IL-12, og kemokin CC motiv ligand 2 9, 10, 11. I neuroinflammatoriske tilstande, såsom Parkinsons sygdom, hvor patogene α-synuclein har akkumuleret, er en neurodegenerativ cyklus oprettet fra død af dopaminerge neuroner, som frigiver mere aggregeret α-synuclein, yderligere fremme af klassisk aktivering af mikroglia 7. Svarende til perifere makrofager, kan mikroglia også har evnen til alternativt aktivere i nærvær af anti-inflammatoriske cytokiner IL-4 og IL-10, hvilket giver dem den potenteial fremme neural reparation og svækkende inflammation 2, 11. Bortset fra deres immunologiske roller i CNS, er mikroglia blevet beskrevet som vitale regulatorer af neuronal kredsløb ved beskæring synapser under udviklingen. For eksempel Cx3cr1- KO-mus har mindre tætte mikroglia og reduceret synaptisk beskæring, hvilket fører til en overflod af dendritiske spidser, umodne synapser og de elektrofysiologiske mønstre af en underudviklet CNS 12. Forståelsen af ​​disse fysiologiske kompleksitet og de forskellige funktionelle roller mikroglia i homeostase af CNS er afgørende for søgningen efter terapi rettet mod neurodegenerative sygdomme. På området neuroimmunology, in vitro forsøg, er yderst ønskelige på grund af den større feasibility for mekanistiske undersøgelser, de lavere vedligeholdelsesomkostninger, og for at være mindre tids- og arbejdskrævende. Furthermore, evnen til at isolere cellepopulationer er kritisk at afgrænse funktionaliteten af ​​disse målceller under foreskrevne betingelser. Der findes talrige mikrogliaceller isoleringsmetoder, men de er begrænset ved deres evne til at opnå relativt høje numre og renhed til bred eksperimentering 13, 14, 15. For eksempel en klynge af differentiering 11b (CD11b) er en almindelig overflademarkør af monocytter, makrofager og mikroglia 16. Ved at udnytte CD11, blev en fremgangsmåde til magnetisk separation først beskrevet som en søjle tilgang, der gav ~ 99,5% renhed og ~ 1,6 x 10 6 mikroglia pr neonatal hjerne 17. Vores laboratorium for nylig udviklet en søjle-fri CD11 magnetisk separationsmetode 15, som vi udført i et polystyrenrør ved at mærke CD11 med et monoklonalt antistof konjugeret til phycoerythrin (PE). Et bispecifikt secondary antistof til PE og dextran komplekser med PE. Når bundet, er dextran-coatede magnetiske partikler indført, hvilket binder til dextran ende af antistof-komplekset. Endelig er polystyrenrør anbragt i en magnet for mikroglial isolation. Denne fremgangsmåde fordoblet udbyttet til ~ 3,2 x 10 6 mikroglia pr neonatal hjerne, men på bekostning af reducerende renhed til ~ 97%. Heri, demonstrerer vi en hurtig og raffineret kolonne-fri CD11 magnetisk separation protokol (figur 1). Denne forbedrede fremgangsmåde forbliver som muligt, som vores oprindelige kolonne-fri metode, da prisen på CD11b magnetisk separation kit er den samme. Færdiggørelsen reduceres i halve, hvilket kan være afgørende for at maksimere celleoverlevelse og udbytte. Især renheden opnået fra denne optimerede metode er ~&gt; 99%, en markant forbedring i forhold til renheden opnået fra den oprindelige kolonne-fri metode udviklet af vores laboratorium 15. Vigtigst er det, CD11b-PEikke udnyttes, hvilket eliminerer behovet for at inkubere væk fra lys og tillader anvendelse af den røde kanal til fluorescensmikroskopi. Endelig som i den oprindelige CD11b fremgangsmåde en astrocytiske del af højt udbytte og renhed opnås med denne forbedrede fremgangsmåde. Astrocytter er de mest talrige gliaceller i CNS, hvilket fører til tanken om, at deres homeostatiske funktioner er uundværlige i forhold til patofysiologi 18. Disse gliaceller spiller en rolle i forskellige fysiologiske funktioner, såsom dannelse af blod-hjerne-barrieren, hvilket giver næringsstof støtte, opretholde neurotransmitter homeostase, danner glia ar som respons på skade, neurobeskyttelse, indlæring og hukommelse, og neuroinflammation, eksemplificering deres undersøgende potentiale i glial biologi 19. Morfologi og funktionaliteten af ​​mikroglia og astrocytter er blevet konstateret via konfokalmikroskopi, Western blotting, kvantitativ Real-Time Polymerase Chain Reaction (QRT-PCR), GRiess nitrit assay og Luminex multiplex cytokin assay. Raffinement tilvejebringes af denne protokol giver øget tillid vedrørende mikroglial eller astrocytisk renhed, bredere anvendelse af fluorescensmikroskopi med tilgængeligheden af den røde kanal, og sparer tid, som alle er vigtige for in vitro forsøg.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>EasySep CD11b Separation Kit II</td>
			<td>StemCell Technologies</td>
			<td>18970</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EasySep Magnet</td>
			<td>StemCell Technologies</td>
			<td>18000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM/F12 (1:1) (1x)</td>
			<td>Life Technologies&#160;</td>
			<td>11330057</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium Pyruvate</td>
			<td>Life Technologies&#160;</td>
			<td>11360070</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MEM Non-essential amino acids (100x)</td>
			<td>Life Technologies&#160;</td>
			<td>11140050</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-Glutamine (100x)</td>
			<td>Life Technologies&#160;</td>
			<td>25030081</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EDTA</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>AM9260G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal Bovine Serum</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>13H469</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>0.25% Trypsin-EDTA</td>
			<td>Gibco by Life Technologies</td>
			<td>25200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dulbecco&#39;s PBS</td>
			<td>Gibco by Life Technologies</td>
			<td>14190250</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

rapid and refined cd11b magnetic isolation of primary microglia with enhanced purity and versatility

Mikroglia er de primære respondere på centralnervesystemet fornærmelser; Men meget er stadig ukendt om deres rolle i reguleringen af ​​neuroinflammation. Mikroglia er mesodermale celler, der fungerer på samme måde makrofager i landmåling inflammatorisk stress. Den klassiske (M1-type) og alternativ (M2-type) aktiveringer af makrofager er også blevet udvidet til at mikroglia i et forsøg på at bedre at forstå den underliggende samspil disse fænotyper har i neuroinflammatoriske sygdomme som Parkinsons, Alzheimers og Huntingtons sygdomme. In vitro eksperimenter under anvendelse primær mikroglia tilbyder hurtige og pålidelige resultater, der kan forlænges med in vivo miljø. Selv om dette er en klar fordel i forhold in vivo eksperimentering, isolering mikroglia samtidig opfylde tilstrækkelige udbytter af optimal renhed har været en udfordring. Almindelige metoder øjeblikket anvendes enten lider af lavt genvinding, lav renhed eller begge. Heri vi DEMonstrate en forfining af kolonnen-free CD11 magnetisk separationsmetode, der opnår en høj celleindvinding og forbedret renhed på den halve tid. Vi foreslår denne optimerede metode som en særdeles nyttig model af primær microglial isolation med henblik på at studere neuroinflammation og neurodegeneration.

Microglia isoleret under anvendelse CD11 Positive Selection kit II har høj renhed Primære muse mikroglia blev isoleret ved anvendelse af ovennævnte protokol og udpladet på poly-D-lysin-overtrukne dækglas at kontrollere renheden af ​​isolation. Ti tusind celler blev udpladet pr brønd og immuncytokemisk analyse blev udført under anvendelse af ioniseret calcium-bindende adaptormolekyle 1 (Iba1) som en markør for mikrogli...

Watch this Scientific Journal Video about Rapid and Refined CD11b Magnetic Isolation of Primary Microglia with Enhanced Purity and Versatility at JoVE.com

Rapid and Refined CD11b Magnetic Isolation of Primary Microglia with Enhanced Purity and Versatility

Her præsenteres en protokol til isolering mikroglia fra postnatal museunger (dag 1) til in vitro forsøg. Denne improviserede fremgangsmåde til isolation genererer både højt udbytte og renhed, en betydelig fordel i forhold alternative fremgangsmåder, der tillader essentielle eksperimenter med henblik på at belyse mikroglial biologi.

Hurtig og Raffineret CD11b Magnetisk Isolering af Primary Mikroglia med Enhanced Renhed og Alsidighed

Microglia are the primary responders to central nervous system insults; however, much remains unknown about their role in regulating neuroinflammation. ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

The Use of Magnetic Resonance Spectroscopy as a Tool for the Measurement of Bi-hemispheric Transcranial Electric Stimulation Effects on Primary Motor Cortex Metabolism

Brug af Magnetic Resonance Spectroscopy som et værktøj til måling af Bi-halvkugleformet Transkranial Electric Stimulation Virkninger på Primary Motor Cortex Metabolisme

Transcranial direct current stimulation (tDCS) is a neuromodulation technique that has been increasingly used over the past decade in the treatment of ...

Effects of Transcranial Alternating Current Stimulation on the Primary Motor Cortex by Online Combined Approach with Transcranial Magnetic Stimulation

Virkningerne af transkranial vekselstrøm Stimulation på den primære Motor Cortex af Online kombineret tilgang med transkranial magnetisk Stimulation

Transcranial Alternating Current Stimulation (tACS) is a neuromodulatory technique able to act through sinusoidal electrical waveforms in a specific ...

Characterization and Isolation of Mouse Primary Microglia by Density Gradient Centrifugation

Karakterisering og Isolation af musen primære mikroglia ved tæthed Gradient centrifugering

Microglia, the resident immune cells in the brain, are the first responders to inflammation or injury in the central nervous system. Recent research has ...

Isolation and Culture of Rodent Microglia to Promote a Dynamic Ramified Morphology in Serum-free Medium

Isolation og kultur af gnaver mikroglia at fremme en dynamisk forgrenet morfologi i serumfrit Medium

Microglia represent 5 - 10% of all central nervous system (CNS) cells and are increasingly drawing attention due to their contributions during ...

Isolation and RNA Extraction of Neurons, Macrophages and Microglia from Larval Zebrafish Brains

Isolation og RNA udvinding af neuroner, makrofager og mikroglia fra larve zebrafisk hjerner

To gain a detailed understanding of the role of different CNS cells during development or the establishment and progression of brain pathologies, it is ...

Rapid and Specific Immunomagnetic Isolation of Mouse Primary Oligodendrocytes

Hurtig og specifik Immunomagnetic Isolation af musen primære Oligodendrocytes

The efficient and robust isolation and culture of primary oligodendrocytes (OLs) is a valuable tool for the in vitro study of the development of ...

Rapid Isolation of Dorsal Root Ganglion Macrophages

Hurtig isolering af dorsale Rodganglion makrofager

There are growing interests to study the molecular and cellular interactions among immune cells and sensory neurons in the dorsal root ganglia after ...

Isolation and Culture of Primary Neurons and Glia from Adult Rat Urinary Bladder

Isolation og kultur af primære neuroner og Glia fra voksen rotte urinblære

The lower urinary tract has two main functions, namely, periodic urine storage and micturition; these functions are mediated through central and ...

Magnetic Isolation of Microglial Cells from Neonate Mouse for Primary Cell Cultures

Magnetisk isolering af mikroglialceller fra nyfødt mus til primære cellekulturer

Microglia, as brain resident macrophages, are fundamental to several functions, including response to environmental stress and brain homeostasis. ...

Primary Cultures of Rat Astrocytes and Microglia and Their Use in the Study of Amyotrophic Lateral Sclerosis

Primære kulturer af rotteastrocytter og microglia og deres anvendelse i undersøgelsen af amyotrofisk lateral sklerose

This protocol demonstrates how to prepare primary cultures of glial cells, astrocytes, and microglia from the cortices of Sprague Dawley rats and how to ...