Name: fabrication of extracellular matrix-derived foams and microcarriers as tissue-specific cell culture and delivery platforms
Uploaded: 2017-04-11T13:00:00
Duration: 11 min 19 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Fabrication of Extracellular Matrix-derived Foams and Microcarriers as Tissue-specific Cell Culture and Delivery Platforms at JoVE.com

The Natural Sciences and Engineering Research Council (NSERC) of Canada and the Canadian Institutes of Health Research (CIHR) have provided funding for this work. The authors would like to acknowledge Dr. Amin Rizkalla for the use of his electrospraying system, the Nanofabrication Facility at Western University for use of SEM imaging equipment, the Mount Brydges Abattoir for the provision of porcine tissue samples, and Drs. Aaron Grant, Brian Evans, and Robert Richards for their clinical collaborations in support of this research.

الكتاب ليس لديهم ما يكشف.

بشكل عام، يمكن bioscaffolds المستمدة من الأنسجة decellularized تقارب أوثق تكوين معقدة 3D وهيكل ECM في المكروية الخلوية المحلية بالمقارنة مع السقالات الاصطناعية أو نماذج الثقافة القياسية على أساس 2D برامج التعاون الفني. كما نوقش سابقا، التفاعلات خلية ECM هي ذات أهمية حاسمة في التوسط السلوك الخلوية على حد سواء في الثقافة وفي الجسم 1. وإذ تدرك أن الخصائص الكيميائية الحيوية، الفيزيائية الحيوية، والنشاط الحيوي للECM هي فريدة من نوعها في كل الأنسجة، وهناك أدلة متزايدة على أن دعم المنطقي لتطبيق نهج الأنسجة محددة في تصميم المواد الحيوية لهندسة الأنسجة، وكذلك في تطوير أكثر من الناحية الفسيولوجية نماذج الثقافة ذات الصلة ب في التجارب المختبرية 20. استخدام الأنسجة decellularized كمادة أولية، يمكن أن طرقنا تتضمن تركيبة معقدة من ECM الأنسجة محددة ضمن أكثر الزبونصيغ سقالة omizable. في حين أن خطوات المعالجة الميكانيكية والأنزيمية سوف يؤدي إلى فقدان التركيب الدقيق ECM الأصلي، وقد أظهرت دراسات سابقة مع DAT التي يتم حفظها آثار مفيدة للECM الدهنية المشتقة في هذه الأشكال سقالة، مما يشير إلى أن تكوين bioscaffold هو الوسيط الرئيسي وظيفة الخلايا 11، 29. وهناك ميزة كبيرة لاستخدام الرغاوي وناقل دقيق المستمدة ECM بمثابة ركائز ثقافة الخلية بالمقارنة مع الأنسجة decellularized سليمة هي أنها أكثر تجانسا، التي يمكن أن تحسن التوحيد في توزيع الخلايا والتفاعلات خلية خلية / خلية ECM. الأساليب المذكورة هنا يمكن استخدامها لتوليد مجموعة واسعة من bioscaffolds الأنسجة محددة لاستخدامها في زراعة الخلايا والأنسجة تطبيقات الهندسة. على سبيل المثال، بالإضافة إلى DAT، DDT، وDLV، وقد طبقت مختبرنا بنجاح هذه التقنيات لتوليد 3D بورالرغاوي الأوس باستخدام العظام decellularized والغضاريف والنواة اللبية، والتليف الحلقة، وكذلك المتاحة تجاريا، والكولاجين غير قابلة للذوبان المستمدة من وتر البقري. من وجهة نظر في المختبر، ويمكن استخدام هذه bioscaffolds كأساس لالإخلاص أعلى نماذج الثقافة 3D للتحقيق في الخلوي وعلم الأحياء، علم وظائف الأعضاء أو علم الأمراض 38، بمثابة ركائز النشطة بيولوجيا في الإنتاجية العالية منصات فحص المخدرات 39، أو المصفوفات كما مفيدة لالجذعية التمايز 40 و 41 خلية. DAT، DDT وDLV الرغاوي ملفقة بتركيزات من 25 - 50 ملغ / مل مستقرة في المدى الطويل في الثقافة المختبر (اختبار تصل إلى 28 يوما). وعلاوة على ذلك، يمكن لجميع الأنواع الثلاثة من ناقل دقيق دعم مرفق الخلية وانتشارها في ظل ظروف دينامية في نظام الثقافة الدوار القص منخفضة (10-15 دورة في الدقيقة) لمدة 2 أسابيع على الأقل. لتقديم الطلبات في الجسم الحي، وحيويا وbiodegradaبلي الرغاوي وناقل دقيق المستمدة ECM تبشر كمنتجات قبالة الجاهزة للاستخدام لتحفيز إعادة تشكيل الأنسجة بناء وتجديد 11، 29. وعلاوة على ذلك، يمكن استخدام السقالات خلايا لاصقة كما نظم تسليم العلاج بالخلايا 42 و 43. وكمثال على ذلك، عرضت الرغاوي DAT لتعزيز الأوعية الدموية وتكون الشحم عند المصنف مع مخولا لصيانة طائرات خيفي وزرعها تحت الجلد في نموذج الفئران مناعيا 29. بالنسبة إلى DAT سليمة والمواد الرغوية وDAT معالجة أكثر شدة تتحلل بسرعة أكثر من ذلك بكثير، مع تخفيض 50٪ في حجم لوحظ في 3 أسابيع لأنها أصبحت متكاملة مع الأنسجة المضيف، وشبه كامل ارتشاف بنسبة 12 أسابيع. ومع ذلك، كما يتسبب الرغاوي استجابة عائية أكثر فعالية، مما يدل على أن ECM-هضم انزيم زيارتها آثار فريدة من نوعها المؤيدة للالتجدد. وبالمثل، يمكن استخدام ناقل دقيق المستمدة ECM كما هو الحال في المختبر &lt;/ م&gt; ركائز ثقافة الخلية داخل النظم ثقافة ديناميكية وكما حقن المركبات تسليم خلية 11، 30، 44. وبشكل أكثر تحديدا، يمكن أن قطر وسطح كبير مساحة صغيرة من ناقل دقيق تمكين إيصال كمية كبيرة من الخلايا في حجم صغير، مع توفير المصفوفة التي قد تساعد على دعم بقاء الخلية وزيادة الاحتفاظ الخلية في موقع الحقن 30. قبل استخدامها في أي نظام المعيشة، فمن الأهمية بمكان لضمان أن ECM مصدر يخلو كبير من المكونات الخلوية مولدة و / أو الكواشف decellularization يحتمل أن تكون سامة للخلايا التي يمكن أن تثير رد فعل المضيف السلبية 7. يستخدم البيبسين انزيم بروتين عادة في إعداد الهلاميات المائية المستمدة ECM 15. البيبسين هو الأنزيم البروتيني غير محددة من شأنها أن هضم الكولاجين وغيرها من ECM البروتينات كثافة العملياتس 45 أجزاء صغيرة. في حين تم الإبلاغ عن الهلاميات المائية ملفقة من ECM-هضم الببسين أن يكون لها آثار خلايا مفيدة، والحد هو أن هذه المواد تميل إلى أن تكون غاية ضعيفة ميكانيكيا 46. لدينا في التطوير الأولي للناقل دقيق DAT، نحن تستخدم نهج المركب الذي كان الجمع بين البيبسين هضم DAT مع الجينات، وأضاف قطرة قطرة إلى CaCl 2 لتشكيل حبات كروية (30). كانت حبات في وقت لاحق الصور عبر ربط وتم استخراج الجينات باستخدام سيترات الصوديوم. بالإضافة إلى متطلبات يشابك الكيميائية، وكان قيود مفتاح أن ناقل دقيق ملفقة مع هذا النهج كان الاستقرار الفقراء أقل من حجم مجموعة من 900-950 ميكرون 30. في مكان البيبسين، والأساليب المقدمة هنا الاستفادة من عملية الهضم أكثر معتدل من ECM مع انزيم حال السكر α الأميليز، والذي يفترض أن يلتصق مجموعة الكربوهيدرات من telopeالمناطق ptide الكولاجين، وبالتالي زيادة القابلية للذوبان في حمض الخليك 37. هذا النهج يمكن عزل الكولاجين بلمرة للغاية التي يمكن استخدامها لتوليد الرغاوي وناقل دقيق المستمدة ECM نقية دون الحاجة إلى يشابك الكيميائية أو غيرها من المواد المضافة. واستقرت هذه bioscaffolds من خلال التفاعلات الفيزيائية والرابطة الهيدروجينية بين الألياف الكولاجين المحفوظة جيدا، على غرار الكولاجين في المكروية ECM الأم. الرغاوي هي منصة مرنة للغاية والتي يمكن أن تكون ملفقة في مجموعة واسعة من هندستها اعتمادا على قالب معين المحدد. لدراسات ثقافة الخلية، يمكن التصويت الرغاوي مباشرة في لوحات جيدا برامج التعاون الفني، لتشكيل الطلاء أو السقالات 3D متفاوتة سمك. لافتعال الرغاوي 3D مع الأسطح موحدة جدا، فمن المستحسن أن قالب مخصص تم تصميمه التي يمكن أن تكون مختومة على كلا الجانبين من البلاستيك أو الزجاج الشرائح. إما ECM مفروم أو cryomilled يمكن استخدامها لتجميعالرغاوي. بشكل عام، وجدنا أن الرغاوي cryomilled تميل إلى أن تكون أكثر ليونة ظاهريا ولها التركيب الدقيق أكثر تعطلت بتركيزات أقل 31 و 36. اعتمادا على مصدر الأنسجة، قد يسبب خطوات المعالجة الميكانيكية إضافية تغييرات في تكوين ECM التي يمكن أن تؤثر وظيفة الخلية. على سبيل المثال، في عملنا السابق، تم الكشف عن laminin في الرغاوي DLV المفروم، ولكن ليس cryomilled DLV الرغاوي 31. في المقابل، تم الكشف عن الكولاجين I، الكولاجين الرابع، laminin وفبرونيكتين في كل المفروم وcryomilled DAT الرغاوي 36. بالإضافة إلى خطوات المعالجة الميكانيكية، وحجم المسامية والمسام من الرغاوي يمكن ضبطها إلى حد ما من خلال تغيير تركيز تعليق ECM ودرجة حرارة التجمد 47. بشكل عام، وانخفاض تركيز المواد الرغوية (~ 10-15 ملغ / مل) هي نوعيا أكثر مسامية، ولكن قد يصاب بسرعة ولها الفقيرةالاستقرار في الثقافة على المدى الطويل 31 و 36. وبالمثل، فإن معدل تجميد أبطأ، حقق عادة من قبل أعلى درجة حرارة التجمد، يمكن أن يؤدي إلى مسام أكبر في الرغاوى نظرا لحجم بلورات الجليد تشكلت خلال تلفيق 29. كل من هذه المعايير قد تؤثر على التفاعلات الخلية التي تحتوي على المواد، بما في ذلك المرفق، تسلل، وإعادة عرض. على سبيل المثال، نمو الخلايا على الرغاوي التي هي ملفقة مع تركيزات أعلى ECM قد تكون محدودة للمناطق السطح، لا سيما مع مصادر ECM المفروم وفي ظل ظروف ثقافة ثابتة 36. لناقل دقيق، والمعايير الأساسية التي يمكن ضبطها هي تركيز تعليق ECM، إبرة قياس، والجهد التطبيقية، مع تركيزات أعلى عادة يحقق ناقل دقيق التي هي أكثر استقرارا في ظل ثقافة ديناميكية على المدى الطويل. بعد بدء electrospraying، وsuspens ECMيجب قطرات أيون تسقط بسرعة في وسط قارورة، نحو اتجاه جامع رقائق الألومنيوم. لمنع التجميع، فمن المهم أن حبات الاتصال النيتروجين السائل قبل احباط. المسافة بين الإبرة وسطح النيتروجين السائل يمكن تعديلها لتلبية هذه الاحتياجات. ومن المهم أن نلاحظ أن الأمثل قد يكون مطلوبا تبعا لخصائص كل مصدر ECM محددة، ولا سيما في تحديد النطاق تركيز من شأنها أن تولد bioscaffolds مستقرة. عامل رئيسي آخر هو بروتوكول decellularization التي يتم استخدامها لتوليد المواد الأولية، وطرق decellularization التي تحط من ECM أو وجود الكواشف المتبقية (على سبيل المثال، السطحي) قد تؤثر سلبا على استقرار الرغاوي الناتجة وناقل دقيق. إذا واجهت تحديات مع استقرار bioscaffold، والخيارات التي يمكن أن يتم التحقيق تشمل باستخدام عملية الإماهة أكثر تدرجا، وزيادة المعل ECMتركيز ension، واستكشاف مفروم مقابل ECM cryomilled. ينبغي لجميع هذه الخيارات تفشل في حل المشكلة، قد يكون من الضروري لاستكشاف بروتوكولات decellularization أو مصادر ECM بديل. لضمان استنساخ أثناء الإنتاج سقالة، يجب توخي الحذر خاصة في خطوات معينة في البروتوكول. عندما cryomilling الأنسجة decellularized، فمن المستحسن أن طحن أن تتم مباشرة بعد بالتجفيد في بيئة جافة للحد من احتمال تجميع الجسيمات نظرا لامتصاص الرطوبة من البيئة. خلال تلفيق ناقل دقيق، يقترح أن تعليق وelectrosprayed في دفعات صغيرة، مع حجم الحد الأقصى من 3 مل، لتجنب المشاكل مع عينة التبريد التي يمكن أن تؤدي إلى انسداد الإبرة. وعلاوة على ذلك، فمن الضروري أن ناقل دقيق لا يسمح لذوبان الجليد بعد عملية electrospraying. للحفاظ على الهندسة الكروية والاستقرار الميكانيكي، وmicrocarriالمتطلبات البيئية ينبغي جمع من النيتروجين السائل، وتنقل في حاوية مملوءة النيتروجين السائل، ومجفف بالتجميد على الفور. وأخيرا، بالنسبة لكل من الرغاوي وناقل دقيق، فمن الأهمية بمكان أن الخطوات الإماهة تتم ببطء على مدى فترة من عدة أيام. الإماهة السريع يمكن أن يؤدي إلى انهيار الهيكلي على المستويين الكلي و / أو الصغيرة الحجم. وعلاوة على ذلك، يجب أن يحدث الإماهة ببطء لمنع تشكيل فقاعات الهواء الصغيرة داخل سقالة، التي يمكن أن تتطلب قدرا كبيرا من الوقت لديغا في ظل فراغ خفيفة. وفي الختام، والأساليب المقدمة في هذه الورقة يمكن استخدامها لتصنيع مجموعة متنوعة من المواد الرغوية الأنسجة محددة وناقل دقيق يتكون من الذهب الخالص، ECM غير كيميائيا عبر ربط. ميزة للباحثين البيولوجي هي أن bioscaffolds من السهل التعامل معها ويمكن معالجتها على نحو مماثل لالأنسجة عند إجراء التحليلات مع تقنيات مثل الأنسجة، المناعية، أو الجينات والبروتينات المقايسات.وبالإضافة إلى ذلك، يمكن للالسقالات المستمدة ECM يكون تدهور إنزيمي لاستخراج السكان الخلية المصنف أو يمكن استخدامها مباشرة بوصفها وسائل إيصال الخلايا القابلة للتحلل وحيويا. عموما، هذه التكنولوجيا منصة مرنة يحمل فائدة كبيرة للعديد من التطبيقات بما في ذلك دراسات ثقافة الخلية 3D التحقيق وظيفة الخلية، بمثابة ركائز توسيع الخلية، وbioscaffolds موالية للالتجديدي.

وتتألف المصفوفة خارج الخلية (ECM) من شبكة معقدة 3D من البروتينات وبروتينات سكرية، والسكريات 1. مرة واحدة تعتبر إطارا في الغالب الهيكلي، ومن المسلم به الآن جيدا أن ECM يتضمن مجموعة متنوعة من الجزيئات النشطة بيولوجيا مع أدوار وظيفية هامة 2. التفاعلات خلية ECM يمكن توجيه بقاء الخلية، التصاق، والهجرة، والانتشار، والتمايز 3. في حين أن فئات رئيسية من الجزيئات ECM عموما المحفوظة بشكل جيد عبر الأنسجة والأنواع، كل الأنسجة لديها تكوين مصفوفة فريدة من نوعها والهندسة المعمارية (4). وعموما، يوفر ECM الأنسجة محددة لالمكروية مفيدة التي تتوسط ظيفة من دوين الخلوي لحجم الأنسجة / الجهاز 5. نظرا للدور الحاسم من ECM في التوسط وظيفة الخلوية، كان هناك اهتمام متزايد في ديvelopment من bioscaffolds المستمدة ECM للتطبيقات في هندسة الأنسجة والطب التجديدي. على وجه الخصوص، وقد تم اكتشاف طريقة decellularization على نطاق واسع كوسيلة للحصول على ECM من مجموعة واسعة من الأنسجة لاستخدامها كمادة سقالات للتجديد الأنسجة والخلايا تسليم 5 و 6 و 7. Decellularization عادة ما ينطوي على سلسلة من والكيميائية وأو مراحل المعالجة الميكانيكية / البيولوجية التي تستهدف إزالة الخلايا والمكونات الخلوية، بينما تسبب مثالي الحد الأدنى من تعديلات على هيكل 3D وتكوين ECM 8. من خلال مسح الأدب، ويمكن التعرف على بروتوكولات decellularization مختلف عن كل الأنسجة تقريبا في الجسم 7. بينما الأنسجة decellularized يمكن استخدامها مباشرة كما السقالات زرع أو 3D ركائز ثقافة الخلية، قد تسلل الخلويةتكون محدودة في الأنسجة مع هيكل ECM كثيفة 9. وعلاوة على ذلك، فإن عدم التجانس الطبيعي في ECM قد يسبب تقلبات في مرفق الخلية والتوزيع ضمن مصفوفات decellularized، والتي من المحتمل أن تؤثر على الاستجابة الخلوية 10. وبشكل عام، في حين واعدة بالنسبة لبعض التطبيقات، تطبيق الأنسجة decellularized في شكلها سليمة توفر التنوع المحدود من حيث الخصائص ضبط سقالة بما في ذلك الشكل، المسامية، وصلابة، فضلا عن طريقة التسليم للتطبيقات في الجسم الحي. وللتغلب على هذه القيود، مجموعات بحثية عديدة تطبق أساليب معالجة أخرى لتوليد صيغ سقالة مخصصة باستخدام الأنسجة decellularized كمادة قاعدة. في أبسط صوره، وهذا قد تنطوي على cryomilling الأنسجة decellularized لتوليد حقن جزيئات ECM الأنسجة محددة 11. يمكن إدراج هذه الجزيئات ECM بمثابة خلية instruعنصر التفاعلية الذي نظمه في السقالات المركبة مع المواد الحيوية الأخرى، مثل في الموقع يشابك الهلاميات 12 و 13 و 14. بالإضافة إلى المعالجة الميكانيكية، ويمكن أيضا الأنسجة decellularized أن تخضع لعملية الهضم الأنزيمي مع بروتين و / أو الانزيمات حال السكر لصنع الهلاميات المائية المستمدة ECM والمواد الرغوية، ناقل دقيق، والطلاء 15 و 16 و 17، وكذلك لتجميع bioinks للطباعة 3D 18. بالإضافة إلى التطبيقات الأنسجة والهندسة، وعقد bioscaffolds المستمدة ECM إمكانات كبيرة لتوليد أعلى الإخلاص نماذج في المختبر للبحث البيولوجي. وهناك حاجة كبيرة لتطوير أنظمة زراعة الخلايا 3D أن ألخص أفضل المكروية الخلوية المحلية 19. الأكثر في المختبر جوتجرى دراسات ثقافة الذراع حتى الآن على زراعة الأنسجة البوليسترين (برنامج التعاون الفني)، الذي لديه علاقة تذكر مع الوسط الخلوي معقد من الناحية البيولوجية والحيوية وجدت داخل الأنسجة الحية 20. بينما ملائمة لدراسة التفاعلات الخلوية في بيئة تسيطر عليها، وزراعة الخلايا على هذه ركائز 2D جامدة مبسطة يغير مرفق الخلية والتشكل، وكذلك كل خلية خلية وخلية ECM التفاعلات 21 و 22. التعديلات الخلوية لوحظ على 2D برامج التعاون الفني يمكن أن تؤثر على مسارات الإشارات بين الخلايا التي تنظم وظائف الخلية المتنوعة بما في ذلك البقاء على قيد الحياة، وانتشار، والهجرة، والتمايز، مما يثير تساؤلات من أهمية الدراسات 2D في النمذجة في أنظمة الجسم الحي 23. وكان هناك اعتراف متزايد بأن السلوك الخلوي يمكن أن تختلف اختلافا كبيرا في 2D مقابل النظم 3D 24، والتي البيوكيميائية ونصفيشير omechanical مع ECM هي الوسطاء الرئيسيين من وظيفة الخلية 25. وقد حاول العديد من الجماعات للتغلب على القيود المفروضة على أنظمة 2D التي وضعتها طلاء برامج التعاون الفني مع مكونات ECM مثل الكولاجين، laminin وفبرونيكتين. في حين أن هذه الاستراتيجيات يمكن أن تحسن مرفق الخلية وقد تغير الاستجابات الخلوية، وهذه النماذج لا تزال محدودة بسبب التكوين 2D على أن لا تحاكي التنظيم المكاني معقدة أو الكيمياء الحيوية من ECM الأصلي 26 و 27. لقد كان لدينا مختبر الهندسة الحيوية مهتمة في تطوير bioscaffolds المستمدة ECM بمثابة ركائز لتطبيقات زراعة الخلايا والأنسجة الهندسة 3-D. على وجه الخصوص، ونحن كان لها السبق في استخدام الأنسجة الدهنية decellularized (DAT) كمنصة سقالات للالدهنية تجديد 28. وعلاوة على ذلك، أنشأنا طرق تجميع ناقل دقيق 3D والرغاوي التي يسهل اختراقها باستخدام DAT هضمها مع البيبسين انزيم بروتين أو أنزيم الأميليز حال السكر α-29 و 30 و 31. وتجدر الإشارة إلى أننا أثبتنا في كل من هذه الأشكال سقالة أن يوفر ECM الدهنية المشتقة من المكروية الاستقرائي للتمايز مكون الشحم من الخلايا البشرية الدهنية المشتقة الجذعية / اللحمية (مخولا لصيانة طائرات) في الثقافة. وفي الآونة الأخيرة، وسعنا أساليب التصنيع لدينا لتوليد 3D الرغاوي التي يسهل اختراقها من الخنازير هضمها α الأميليز-decellularized البطين الأيسر (DLV) (طرق decellularization مقتبس من ينرايت وآخرون. 32)، وأظهرت أنها توفر منصة داعمة لإحداث cardiomyogenic في وقت مبكر التعبير علامة في التامور مخولا لصيانة طائرات المشتقة من الدهون الإنسان 31. توضح هذه المقالة بالتفصيل الطرق لتوليف غير كيميائيا عبر ربط 3D الرغاوي وناقل دقيق مسامية المستمدة بحتةمن ECM α الأميليز هضم لاستخدامها 3D معقدة بيولوجيا في ركائز الثقافة خلية المختبر وكما الحيوية لتجديد الأنسجة. من الناحية النظرية، أي مصدر ECM التي تحتوي على ارتفاع الوزن الجزيئي الكولاجين يمكن أن تستخدم كمادة انطلاق لهذه التقنيات. إلى إبداء المرونة لهذا النهج، وقد تم تطبيق أساليب لتوليد bioscaffolds الأنسجة محددة باستخدام DAT البشري، الخنزير decellularized الجلد الأنسجة (DDT) 8، والخنازير DLV كأمثلة التمثيلية. ويقدم الشكل 1 لمحة بصرية من عملية تصنيع لرغاوي وناقل دقيق المستمدة ECM. <img alt="شكل 1" src="/files/ftp_upload/55436/55436fig1.jpg" /> الشكل 1. نظرة عامة على طريقة لإنتاج الرغاوي وناقل دقيق المستمدة ECM-الأنسجة محددة. decel 1. الأنسجة Decellularized، أعدت في أعقاب تأسيسبروتوكولات lularization، ويمكن استخدامها لأنسجة محددة المستمدة ECM bioscaffold تلفيق. وتظهر الصور العيانية من DAT البشري رطب (أعد كما هو موضح في فلين 2010 28)، DDT الخنازير (أعد كما هو موضح في Reing، JE، وآخرون. 2010 8)، والخنازير DLV (أعد كما هو موضح في ينرايت وآخرون. 2010 32 )، والأمثلة النموذجية على مصادر ECM التي يمكن استخدامها كمواد البداية. تمثل القضبان نطاق 3 سم. 2. يتم مجفف بالتجميد أنسجة decellularized، ثم 3. مفروم ميكانيكيا. تمثل الحانات مقياس 1 سم. 4. ويمكن بعد ذلك cryomilled وECM المفروم، الذي هو اختياري للرغوة تلفيق، ولكن المطلوب لتخليق ناقل دقيق. يمثل مقياس شريط 3 مم. 5. ثم يتم هضمها وECM مفروم أو cryomilled مع α الأميليز والمتجانس لإنشاء تعليق ECM متجانسة. يمثل مقياس شريط 1 سم. <strأونج&gt; 6A) لرغوة تلفيق، يتم نقل تعليق ECM إلى المعرفة العفن، والمجمدة، ومجفف بالتجميد لتوليد سقالة 3D التي يسهل اختراقها مع الهندسة واضحة المعالم. يمثل مقياس شريط 1 سم. 6B) لتصنيع ناقل دقيق، وelectrosprayed تعليق ECM cryomilled لتوليد ناقل دقيق كروية منفصلة. يمثل مقياس شريط 2 مم. 7. الرغاوي وناقل دقيق ومن ثم يمكن ممهى تدريجيا والمصنف مع الخلايا. وتظهر الصور التمثيلية للمخولا لصيانة طائرات الإنسان (خلايا قابلة للحياة = الأخضر) المصنف على رغوة DAT (يسار) وDAT ناقل دقيق (يمين). تمثل الحانات مقياس 100 ميكرون. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/55436/55436fig1large.jpg" target="_blank">الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم.</a>

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Acetic acid, glacial</td>
			<td>BioShop</td>
			<td>ACE222.500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alligator clip leads</td>
			<td>VWR</td>
			<td>&#160;470149-728</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Aluminium foil</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>01-213-101</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>a-amylase&#160;</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>101074694</td>
			<td>from Aspergillus aryzae</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Analytical balance</td>
			<td>Sartorius</td>
			<td>CPA225D</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge&#160;</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>75004251</td>
			<td>With swinging bucket rotor for 15 and 50 mL centrifuge tubes</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge tubes (15 mL)</td>
			<td>Sarstedt</td>
			<td>62.554.205</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge tubes (50 mL)</td>
			<td>Sarstedt</td>
			<td>62.547.205</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collagen from bovine achilles tendon (insoluble)</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>C9879&#160;</td>
			<td>Or similar insoluble collagen source; Can be used as an alternative to decellularized tissues to fabricate the foams and microcarriers&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cryomilling system</td>
			<td>Retsch</td>
			<td>20.745.0001</td>
			<td>MM 400</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dessicator</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>8624426</td>
			<td>For lyophilized ECM and bioscaffold storage</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM: F12 Hams</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>D6421</td>
			<td>Used for proliferation media</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dewar flask</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>10-196-6</td>
			<td>Low form; volume range of 250 - 500 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Double distilled water</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>From Barnstead GenPure xCAD Water Purification System</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>D-PBS</td>
			<td>Wisent</td>
			<td>311425125</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ECM&#160;</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Isolated from human adipose tissue, porcine dermis or porcine myocardium, as described in Flynn et al. 2010, Reing et al. 2010, and Wainwright et al. 2010 (ref # 28, 8, 32)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol&#160;</td>
			<td>Greenfield Specialty Alcohols Inc.</td>
			<td>P016EAAN</td>
			<td>Absolute</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal bovine serum</td>
			<td>Wisent</td>
			<td>80150</td>
			<td>Used for proliferation media</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps</td>
			<td>VWR&#160;</td>
			<td>37-501-32</td>
			<td>For transferring the foams</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Freezer (-20 &#176;C)</td>
			<td>VWR</td>
			<td>97043-346</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Freezer ( -80 &#176;C)</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>EXF40086A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass vials</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>03-339-26D</td>
			<td>To store lyophilized cryomilled ECM</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hand held homogenizer&#160;</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>14-359-251</td>
			<td>Speed: 8000 - 30,000 RPM</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Homogenizer accessories: saw tooth bottom generator probes</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>14-261-17</td>
			<td>10 X 95 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Liquid nitrogen</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>For electrospraying</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lyophilizer</td>
			<td>Labconco</td>
			<td>7750021</td>
			<td>FreeZone4.5</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Milling chamber</td>
			<td>Retsch</td>
			<td>02.462.0213</td>
			<td>25 mL volume recommended</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Milling balls</td>
			<td>VWR</td>
			<td>16003-606</td>
			<td>10 mm diameter, stainless steel recommended</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>18G needle</td>
			<td>VWR</td>
			<td>C ABD305185</td>
			<td>For dispensing ECM suspension into moulds</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Orbital incubator shaker&#160;</td>
			<td>SciLogex</td>
			<td>832010089999</td>
			<td>Temperature controlled (37 &#176;C)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin-streptomycin</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>15140-122</td>
			<td>Used for proliferation media</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pipet-Aid XP</td>
			<td>Mandel Scientific</td>
			<td>DRU-4-000-101</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Retort stand</td>
			<td>VWR</td>
			<td>470019-526</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Retort stand clamp</td>
			<td>VWR</td>
			<td>21573-606</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Safety-Lok Syringe</td>
			<td>BD</td>
			<td>309606</td>
			<td>3 mL luer lock syringe for microcarrier fabrication and dispensing ECM suspension</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Serological pipettes (10 mL )</td>
			<td>Sarstedt&#160;</td>
			<td>86.1254.001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Serological pipettes (25 mL)</td>
			<td>Sarstedt&#160;</td>
			<td>86.1685.001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium chloride&#160;</td>
			<td>BioShop</td>
			<td>7647-14-5</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium phosphate monobasic&#160;</td>
			<td>BioShop</td>
			<td>10049-21-5</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scoopula</td>
			<td>VWR</td>
			<td>89259-968</td>
			<td>For collecting microcarriers</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical scissors</td>
			<td>VWR</td>
			<td>82027-590</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe pump</td>
			<td>VWR</td>
			<td>10117-490</td>
			<td>Microprocessor controlled</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>High voltage power supply</td>
			<td>Gamma High Voltage Research</td>
			<td>ES30P-5W/DDPM</td>
			<td>Capable of recommended 15 - 25 kV voltage range</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>12-well plates</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>12565321</td>
			<td>For use as molds during foam fabrication; Other sizes or user-defined molds can also be selected</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Winged infusion set</td>
			<td>Terumo</td>
			<td>22258092</td>
			<td>30 cm tubing length, 25 G 3/4 &#34; recommended; Other needle gauges can be used and may influence microcarrier diameter</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

fabrication of extracellular matrix-derived foams and microcarriers as tissue-specific cell culture and delivery platforms

وتوسطت وظيفة الخلية عن طريق التفاعل مع المصفوفة خارج الخلية (ECM)، التي لديها تركيبة معقدة الأنسجة محددة والهندسة المعمارية. وتركز هذه المقالة على طرق تصنيع المواد الرغوية وناقل دقيق مسامية المستمدة ECM لاستخدامها بوصفها ركائز البيولوجية ذات الصلة في 3D المتقدمة في نماذج زراعة الخلايا في المختبر أو السقالات الموالية للالتجدد وأنظمة تسليم خلية للهندسة الأنسجة والطب التجديدي. باستخدام الأنسجة decellularized أو الكولاجين غير قابلة للذوبان المنقى كمادة البداية، يمكن تطبيق تقنيات لتجميع مجموعة واسعة من bioscaffolds الأنسجة محددة مع هندستها للتخصيص. ينطوي على نهج المعالجة الميكانيكية والأنزيمية الهضم خفيفة الى تسفر عن تعليق ECM التي تستخدم لتصنيع الرغاوي ثلاثية الأبعاد أو ناقل دقيق من خلال إجراءات تجميد وبالتجفيد التي تسيطر عليها. هذه السقالات المستمدة ECM النقية هي التي يسهل اختراقها للغاية، ولكن مستقرة دون الحاجة إلى كيميائيآل يشابك وكلاء أو غيرها من المواد المضافة التي قد تؤثر سلبا على وظيفة الخلية. خصائص سقالة يمكن ضبطها إلى حد ما بفعل عوامل مختلفة مثل تركيز ECM تعليق، وأساليب المعالجة الميكانيكية، أو الظروف التوليف. بشكل عام، السقالات هي قوية وسهلة للتعامل، ويمكن معالجتها كما أنسجة لمعظم المقايسات البيولوجية القياسية، وتوفير منصة الثقافة 3D خلية تنوعا وسهلة الاستعمال الذي يحاكي تكوين ECM الأصلي. وعموما، قد تكون هذه الأساليب واضحة لافتعال الرغاوي وناقل دقيق المستمدة ECM مخصصة التي تهم كلا البيولوجيين والمهندسين الطبية الحيوية كمنصات خلايا مفيدة الأنسجة محددة لفي المختبر وفي التطبيقات الجسم الحي.

في الدراسة الحالية، قمنا ملفقة الرغاوي وناقل دقيق المستمدة ECM باستخدام DAT البشري، DDT الخنازير، والخنازير DLV كأمثلة التمثيلية مما يدل على أن تقنيات يمكن تطبيقها لتوليد bioscaffolds الأنسجة محددة باستخدام مجموعة متنوعة من الأنسجة decellularized كمصادر ECM ( الشكل 1). لكل من الرغوة وناقل دقيق تلفيق، وقد تم تكييف هذه التقنية Nishihara من الإذابة الكولاجين مع انزيم حال السكر α الأميليز 37 لتوليد تعليق ECM لزج من المواد الأنسجة بدءا decellularized، والذي يستخدم لتجميع bioscaffolds من خلال إجراءات تجميد وبالتجفيد التي تسيطر عليها. لافتعال الرغاوي، والأنسجة decellularized يمكن معالجتها من خلال إما تنميق الميكانيكية أو cryomilling لزيادة مساحة السطح قبل الهضم الأنزيمي. التالية45؛ -amylase العلاج والتجانس، والاستغناء عن تعليق ECM الناتجة في قالب المعرفة من قبل المستخدم، والذي هو ثم المجمدة والمجففة بالتبريد. السقالات ويمكن تخزين مستقر في الحالة الجافة لفترة طويلة من الزمن. قبل استخدامها في دراسات زراعة الخلايا، يجب أن تخضع السقالات مجفف بالتجميد لعملية الإماهة تسيطر عليها أن ينتج الرغاوي متجانسة مسامية عالية والمائية المستمدة من ECM النقي (الشكل 3A). إذا ممهى الرغاوي بسرعة كبيرة جدا، وتورم سريع قد يضر السمات الهيكلية الدقيقة، مما أدى إلى فقدان النزاهة وانهيار الهيكلية. بشكل عام، فإن المواد الرغوية الإبقاء على شكل محدد من قبل القالب الأصلي الإماهة التالية ومستقرة دون الحاجة إلى يشابك الكيميائية. الشكل 3B يظهر ممثل المجهر الإلكتروني الماسح (SEM) وصور للDAT، DDT، وDLV الرغاوى ملفقة مع ECM cryomilled بتركيز 35 ملغ / مل ودرجة حرارة تجميد -80 &amp; #176، C. <img alt="الشكل (3)" src="/files/ftp_upload/55436/55436fig3.jpg" /> الشكل 3. الصور التمثيلية للDAT، DDT، وDLV كسوات مصنعة مع Cryomilled ECM معلقات في تركيز 35 ملغ / مل والمجمدة في -80 ° C. A: عرض العيانية للDAT، DDT، وDLV المضروب الرغاوي توليفها في 48 جيدا زراعة الأنسجة لوحة العفن التالية الإماهة. تمثل الحانات مقياس 1 سم. B: الصور SEM من الرغاوي DAT، DDT، وDLV يظهر التركيب الدقيق التي يسهل اختراقها متجانسة. تمثل الحانات مقياس 100 ميكرون. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/55436/55436fig3large.jpg" target="_blank">الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم.</a> ويمكن أيضا أن تعليق ECM cryomilled استخدامها لتوليد ناقل دقيق المستمدة ECM نقية عبر تقنيات electrospraying (الشكل 2 </strأونج&gt;). لكل مصدر ECM، وتركيز تعليق، إبرة قياس، ومعدل التسريب، والجهد يمكن ضبطها لتوليد ناقل دقيق كروية منفصلة تتراوح 350-500 ميكرون في القطر التالية الإماهة للرقابة (الشكل 4A). في حين أن ناقل دقيق يمكن تخزينها في حالة مجفف بالتجميد، فمن المستحسن لسهولة التعامل مع التي يتم الاستغناء هم أو منخول لمجموعة الحجم المطلوب بعد إعادة تعليق في الإيثانول. وتشير SEM التصوير أن التركيب الدقيق ناقل دقيق يمكن أن يختلف وفقا لمصدر الأنسجة decellularized (الشكل 4B). <img alt="الشكل (4)" src="/files/ftp_upload/55436/55436fig4.jpg" /> الشكل 4. الصور التمثيلية للDAT، DDT، وDLV ناقل دقيق مصنعة مع Cryomilled ECM معلقات في تركيز 35 ملغ / مل، وهو معدل ضخ 0.5 مل / دقيقة، والجهد التطبيقية من 20 كيلو فولت. A: العيانية عرض سو رطب على ناقل دقيق DAT، DDT، وDLV. تمثل القضبان نطاق 4 مم. B: الصور SEM من ناقل دقيق DAT، DDT، وDLV تبين أن التركيب الدقيق والحجم يمكن أن تختلف تبعا لمصدر ECM. تمثل الحانات مقياس 100 ميكرون. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/55436/55436fig4large.jpg" target="_blank">الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم.</a> الخواص الميكانيكية للالسقالات تعتمد على مصدر ECM، وطريقة معالجة تطبيق (أي تنميق مقابل cryomilling)، وتركيز تعليق ECM، ودرجة حرارة التجمد. بشكل عام، السقالات هي لينة والمتوافقة مع الرجوعية الشباب في مجموعة من 1-5 كيلو باسكال ذكرت لDAT (50 و 100 ملغ / مل) 29 والرغاوي DLV (20-50 ملغ / مل) 31، و&lt;1 باسكال لناقل دقيق. الرغاوي cryomilled وعادة ما تكون أكثر ليونة عشروالرغاوي مفروم بسبب طبيعتها أكثر تعطلت. هناك حاجة إلى أنظمة الاختبار الميكانيكية المتخصصة مجهزة خلايا الحمل عالية الحساسية لتوصيف دقيق لخصائص الضغط. عادة، فإن المواد الرغوية وناقل دقيق يكون الرجوعية أقل من الأنسجة decellularized الأم نظرا لخطوات المعالجة الإضافية تشارك في تصنيع بما في ذلك عملية الهضم الأنزيمي والتجانس، فضلا عن الطبيعة غير تساهمي عبر ربط من السقالات. ومع ذلك، وهذا يمكن أن تختلف تبعا الأنسجة من الاهتمام. على سبيل المثال، في الأعمال السابقة، وجدنا أن مفروم DAT الرغاوى ملفقة بتركيزات عالية ECM زيارتها (100 ملغ / مل) الرجوعية مماثلة إلى الأنسجة الدهنية الأم 29. الرغاوي وناقل دقيق المستمدة ECM ممهى يمكن المصنف مع الخلايا تحت ظروف التربية ساكنا أو متحركا لتوفير منصة خلية داعمة لفي الدراسات المختبرية ثقافة خلية و/ س(ص) في تسليم خلية الجسم الحي. في حين السقالات دعم عموما مرفق الخلية، فإن كفاءة البذر تعتمد على مصدر ECM، هندسة سقالة والمسامية، ونوع من الخلايا في المصالح. على هذا النحو، فإن أساليب البذر وكثافة تتطلب التحسين تبعا للظروف التي يحددها المستخدم. لرغاوي المذكورة أعلاه، فإننا نوصي تركيز خلية البداية في مجموعة من ،25-1 × 10 6 خلية / سقالة، مع بذر الديناميكي على شاكر المداري لتعزيز تسلل خلية. لناقل دقيق، نقترح كثافة البذر الأولية في حدود 25000 - 50000 خلية / ملغ من ناقل دقيق، مع بذر تتم تحت الظروف الديناميكية في الثقافة قارورة الدوار 11. الصور المبينة في الجزء السفلي من الشكل 1 تمثل مخولا لصيانة طائرات الإنسان المصنفة على رغوة DAT (يسار) أو DAT ناقل دقيق (يمين، prelabeled مع صبغ الأمينات رد الفعل والظهور الزرقاء 13)، كما تصور من قبل الصغرى متحد البؤرSCOPY باستخدام الفلورسنت وصمة عار بقاء الخلية (الحية خلايا = الخضراء، ميتة خلايا = الحمراء، أشرطة النطاق تمثل 100 ميكرون). المجهر متحد البؤر يمكن استخدامها لتصور خلايا المصنف على سطح الرغاوي لتصل إلى 2 مم في السمك، ولكن التصور في المناطق الوسطى من السقالات محدودة بطبيعتها مبهمة. ومع ذلك، فإن المواد الرغوية وناقل دقيق يمكن أن تعامل على أنها الأنسجة والبارافين جزءا لا يتجزأ أو النسيجية والمناعى مقطوع البرد تحليلات لتصور توزيع الخلايا والتعبير علامة.

Watch this Scientific Journal Video about Fabrication of Extracellular Matrix-derived Foams and Microcarriers as Tissue-specific Cell Culture and Delivery Platforms at JoVE.com

Fabrication of Extracellular Matrix-derived Foams and Microcarriers as Tissue-specific Cell Culture and Delivery Platforms

المصفوفة خارج الخلية الأنسجة محددة (ECM) هو الوسيط الرئيسي من وظيفة الخلية. توضح هذه المقالة طرق توليف الرغاوي وناقل دقيق التي هي مستقرة بالثقافة بدون حاجة إلى يشابك الكيميائي لتقديم الطلبات في 3D متقدم في نماذج زراعة الخلايا المختبر أو bioscaffolds الموالية لالتجديدي المستمدة ECM الخالص.

تصنيع كسوات وناقل دقيق مستمد مصفوفة خارج الخلية حيث الثقافة خلية الأنسجة محددة ومنصات التوصيل

Cell function is mediated by interactions with the extracellular matrix (ECM), which has complex tissue-specific composition and architecture. The focus ...

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Microfabricated Platforms for Mechanically Dynamic Cell Culture

Microfabricated المنصات الحيوي للثقافة الخلية ميكانيكيا

The ability to systematically probe in vitro cellular response to combinations of mechanobiological stimuli for tissue engineering, drug discovery or ...

Rotating Cell Culture Systems for Human Cell Culture: Human Trophoblast Cells as a Model

نظم الدورية الثقافة خلية خلية للثقافة الإنسان : خلايا الأرومة الغاذية الإنسان نموذجا

The field of human trophoblast research aids in  understanding the complex environment established during placentation. Due to the  nature of these ...

Self-reporting Scaffolds for 3-Dimensional Cell Culture

سقالات الإبلاغ الذاتي للخلية ثقافة 3 الأبعاد

Culturing cells in 3D on appropriate scaffolds is thought to better mimic the in vivo microenvironment and increase cell-cell interactions. The resulting ...

Cell Squeezing as a Robust, Microfluidic Intracellular Delivery Platform

الضغط خلية باعتبارها قوية، ميكروفلويديك بين الخلايا توصيل منصة

Rapid mechanical deformation of cells has emerged as a promising, vector-free method for intracellular delivery of macromolecules and nanomaterials. This ...

Mesenchymal Stromal Cell Culture and Delivery in Autologous Conditions: A Smart Approach for Orthopedic Applications

الوسيطة اللحمية خلية الثقافة و التوصيل في حالة ذاتي: مقاربة ذكية لتطبيقات العظام

Human Mesenchymal Stromal Cells (hMSCs) are cultured in vitro with different media. Limits on their use in clinical settings, however, mainly depend on ...

Tunable Hydrogels from Pulmonary Extracellular Matrix for 3D Cell Culture

الانضباطي الهلاميات المائية من الرئوي خارج الخلية مصفوفة للثقافة خلية 3D

Here we present a method for establishing multiple component cell culture hydrogels for in vitro lung cell culture. Beginning with healthy en bloc lung ...

Synthesis of Biocompatible Liquid Crystal Elastomer Foams as Cell Scaffolds for 3D Spatial Cell Cultures

توليف حيويا الكريستال السائل المرنة كسوات كما السقالات الخليوي لزراعات الخلايا 3D المكانية

Here, we present a step-by-step preparation of a 3D, biodegradable, foam-like cell scaffold. These scaffolds were prepared by cross-linking star block ...

Comparable Decellularization of Fetal and Adult Cardiac Tissue Explants as 3D-like Platforms for In Vitro Studies

ديسيلولاريزيشن مماثلة لانسجة القلب الجنين والكبار Explants كمثل 3D منهاجي في المختبر الدراسات

Current knowledge of extracellular matrix (ECM)-cell communication translates to large two-dimensional (2D) in vitro culture studies where ECM components ...

Recombinant Collagen I Peptide Microcarriers for Cell Expansion and Their Potential Use As Cell Delivery System in a Bioreactor Model

المؤتلف الكولاجين أنا ميكروكاريرس الببتيد لتوسيع الخلية وإمكانية استخدامها كنظام إيصال خلية في مفاعل حيوي نموذج

Tissue engineering is a promising field, focused on developing solutions for the increasing demand on tissues and organs regarding transplantation ...

Fabricating a Kidney Cortex Extracellular Matrix-Derived Hydrogel

اختﻻق الكلي لحاء خارج الخلية المستمدة من مصفوفة المائية

Extracellular matrix (ECM) provides important biophysical and biochemical cues to maintain tissue homeostasis. Current synthetic hydrogels offer robust ...