Name: initial evaluation of antibody-conjugates modified with viral-derived peptides for increasing cellular accumulation and improving tumor targeting
Uploaded: 2018-03-08T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Initial Evaluation of Antibody-conjugates Modified with Viral-derived Peptides for Increasing Cellular Accumulation and Improving Tumor Targeting at JoVE.com

Эта работа финансировалась обществом исследований рака (Канада) и кису. Авторы благодарят д -р Самиа МТА-Моханд и Жан-Франсуа Beaudoin за помощь. Д-р Анхель Лопес (Университет Южной Австралии) для mAb A14.

В естественных условиях животных описал были проведены эксперименты согласно утвержденным протоколом и этические руководящие принципы Комитета по этике при университетский центр де Шербрук для экспериментов животных.
1. антитела пептида спряжение
П...

Основными задачами системного доставки анти-рак агентов являются увеличить накопления на опухоли и поглощение в раковые клетки и уменьшить нежелательные побочные эффекты в здоровых тканях. AC целевой доставки молекулярных полезных для опухолевых клеток является весьма перспективным...

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Sulfo-SMCC</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>22122</td>
			<td>There are many homo- and hetero-bifunctional maleimide crosslinkers to choose from.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Amicon Ultra-0.5 mL Centrifugal Filters</td>
			<td>EMD Millipore</td>
			<td>UFC505096</td>
			<td>There are pack sizes of 8, 24, and 96. Choose according to your needs.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Precision Plus Protein Kaleidoscope Standards</td>
			<td>BioRad</td>
			<td>1610375EDU</td>
			<td>Mulicolor recombinant proteins from 10-250 kDa.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin-EDTA (0.25%), phenol red</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>25200056</td>
			<td>100 or 500 mL volumes to choose from.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Goat anti-Mouse IgG (H+L) Secondary Antibody, Alexa Fluor 647 conjugate</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>A-21235</td>
			<td>1-10 &#956;g/mL recommended</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NOTA-NHS</td>
			<td>CheMatech</td>
			<td>C100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lamin A/C antibody (N-18)</td>
			<td>Santa Cruz Biotechnology</td>
			<td>sc-6215</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rab7 antibody</td>
			<td>Santa Cruz Biotechnology</td>
			<td>sc-376362</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>A14 mAb</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>555902</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NuPAGE LDS Sample Buffer (4x)</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>NP0007</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2-Mercaptoethanol</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>M3148-25ML</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TF-1a cells</td>
			<td>ATCC</td>
			<td>ATCC CRL-2003</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RPMI 1640 medium</td>
			<td>ATCC</td>
			<td>ATCC 30-2001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RIPA lysis and extraction buffer</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>89900</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>AMIDE medical imaging software</td>
			<td>available at amide.sourceforge.net</td>
			<td></td>
			<td>Completely free download</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FluoView FV1000 Confocal Microscope</td>
			<td>Olympus</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluoview Software</td>
			<td>Olympus</td>
			<td></td>
			<td>www.olympus-lifescience.com</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ITLC strips</td>
			<td>Biodex</td>
			<td>150-771</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

initial evaluation of antibody-conjugates modified with viral-derived peptides for increasing cellular accumulation and improving tumor targeting

Антитела конъюгатов (АКГ) изменен с пептидами, вирус производные являются потенциально мощный класс опухолевых клеток агентов доставки для молекулярной нагрузок используется в лечении рака и изображений из-за увеличения сотовой накопления над текущей ACs. Во время ранних переменного тока в vitro развития, методы флуоресценции и Радиоиммуноанализы достаточно для определения внутриклеточной локализации, накопление эффективность и специфики целевой ячейки. В настоящее время нет консенсуса на стандартизированные методы подготовки клетки для оценки AC внутриклеточного накопления и локализации. Первоначальное тестирование ACs с вирусом производные пептиды имеет решающее значение, особенно если были построены несколько кандидатов. Определение внутриклеточного накопления флуоресценции могут быть затронуты фонового сигнала от ACs на поверхности клеток и усложнить толкование накопления. Для Радиоиммуноанализы фракционированный обычно обработанные клетки и измерения радиоактивности в различных клеточных компартментов. Однако лизис клеток зависит от ячейки к ячейке и часто ядерные и цитоплазматические отсеков не адекватно изолированы. Это может производить вводящие в заблуждение данные о свойствах доставки полезной нагрузки. Внутривенные инъекции radiolabeled вирус производные пептид модифицированные ACs в опухоли, принимая мышей, следуют радионуклидной визуализации-это мощный метод для определения свойства доставки опухоли ориентации и полезной нагрузки в в естественных условиях этапа развития. Однако это относительно недавнее улучшение и несколько групп оценивается вирус производные пептид модифицированные ACs таким образом. Мы описываем обработки обработанные клетки более точно оценить вирус производные пептид модифицированные накопление переменного тока при использовании confocal микроскопии и Радиоиммуноанализы. В частности метод trypsinizing клетки, чтобы удалить поверхности клетки связаны ACs. Мы также предоставляют метод для улучшения клеточной фракционирования. Наконец этот протокол предоставляет метод в естественных условиях с использованием позитронно-эмиссионная томография (ПЭТ) для оценки первоначальной опухоли, ориентация свойства опухоли подшипник мышей. Мы используем радиоизотопные 64Cu (t1/2 = 12,7 ч) как полезные данные примера в настоящем Протоколе.

1 процедура строительство 7G 3 изменена с ChAcNLS с помощью сульфогруппу ККАП как сшивателя является очень надежным. Как правило при загрузке на 12% гель и проанализированы SDS-PAGE, это приводит к различимых поэтапное увеличение МВт пропорционального увеличения соотношения су...

Watch this Scientific Journal Video about Initial Evaluation of Antibody-conjugates Modified with Viral-derived Peptides for Increasing Cellular Accumulation and Improving Tumor Targeting at JoVE.com

Initial Evaluation of Antibody-conjugates Modified with Viral-derived Peptides for Increasing Cellular Accumulation and Improving Tumor Targeting

Вирусные производные пептиды, в сочетании с антител конъюгатов (ACs) — это подход, набирает обороты из-за возможности доставлять молекулярной аппаратуру с накоплением рост опухолевых клеток. Используя общие методы для оценки пептид спряжение, переменного тока и полезной нагрузки внутриклеточного накопления и опухоли таргетинга, этот протокол помогает исследователям на этапах первоначального развития.

Первоначальная оценка антител конъюгаты изменения с пептидами вирусный производные для повышения сотовой накопления и ориентации опухоли

Antibody-conjugates (ACs) modified with virus-derived peptides are a potentially powerful class of tumor cell delivery agents for molecular payloads used ...

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Increasing cDNA Yields from Single-cell Quantities of mRNA in Standard Laboratory Reverse Transcriptase Reactions using Acoustic Microstreaming

Увеличение урожайности кДНК из одной ячейки в количествах мРНК в стандартных реакций обратной транскриптазы лаборатории использованием акустической Microstreaming

Correlating gene expression with cell behavior is ideally done at the single-cell level.  However, this is not easily achieved because the small amount of ...

Hydrophobic Salt-modified Nafion for Enzyme Immobilization and Stabilization

Гидрофобные Солт-модифицированный Nafion для иммобилизации ферментов и стабилизации

Over the last decade, there has been a wealth of application for immobilized and stabilized enzymes including biocatalysis, biosensors, and biofuel ...

PLGA Nanoparticles Formed by Single- or Double-emulsion with Vitamin E-TPGS

ПМГК Наночастицы, образованные одним или двумя-эмульсии с витамином E-TPGS

Poly(lactic-co-glycolic acid) (PLGA) is a biocompatible member of the aliphatic polyester family of biodegradable polymers. PLGA has long been a popular ...

Production and Targeting of Monovalent Quantum Dots

Производство и таргетинг одновалентных квантовых точек

The multivalent nature of commercial quantum dots (QDs) and the difficulties associated with producing monovalent dots have limited their applications in ...

Fabrication of a Functionalized Magnetic Bacterial Nanocellulose with Iron Oxide Nanoparticles

Изготовление функционализированного магнитной Бактериальный Nanocellulose с оксида железа наночастицами

In this study, bacterial nanocellulose (BNC) produced by the bacteria Gluconacetobacter xylinus is synthesized and impregnated in situ with iron oxide ...

Cell Labeling and Targeting with Superparamagnetic Iron Oxide Nanoparticles

Маркировка клеток и ориентации с Суперпарамагнитные наночастиц оксида железа

Targeted delivery of cells and therapeutic agents would benefit a wide range of biomedical applications by concentrating the therapeutic effect at the ...

Solid Lipid Nanoparticles (SLNs) for Intracellular Targeting Applications

Solid Lipid Nanoparticles SLNs for Intracellular Targeting Applications

Твердые липидов Наночастицы (SLNS) для внутриклеточного Ориентация Приложения

Nanoparticle-based delivery vehicles have shown great promise for intracellular targeting applications, providing a mechanism to specifically alter ...

Fabrication of a Multiplexed Artificial Cellular MicroEnvironment Array

Изготовление мультиплексированных искусственных сотовой микроокружения массива

Cellular microenvironments consist of a variety of cues, such as growth factors, extracellular matrices, and intercellular interactions. These cues are ...

Synthesis of Multi-walled Carbon Nanotubes Modified with Silver Nanoparticles and Evaluation of Their Antibacterial Activities and Cytotoxic Properties

Синтез многостенные углеродные нанотрубки, модифицированных наночастиц серебра и оценки их антибактериальная деятельность и цитотоксических свойств

In this study, multi-walled carbon nanotubes (MWCNTs) were treated with an aqueous sulfuric acid solution to form an oxygen-based functional group. Silver ...

Protocol for MicroRNA Transfer into Adult Bone Marrow-derived Hematopoietic Stem Cells to Enable Cell Engineering Combined with Magnetic Targeting

Протокол для передачи микроРНК в взрослого костного мозга-производные гемопоэтических стволовых клеток для включения клеточной инженерии, в сочетании с магнитной ориентации

While CD133+ hematopoietic stem cells (SCs) have been proven to provide high potential in the field of regenerative medicine, their low retention rates ...