Name: quantification of endosome and lysosome motilities in cultured neurons using fluorescent probes
Uploaded: 2017-05-22T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Quantification of Endosome and Lysosome Motilities in Cultured Neurons Using Fluorescent Probes at JoVE.com

Vi takker Dr. Ricardo Dolmetsch (Stanford University School of Medicine, tilstede tilknytning: Novartis Institutes for Biomedical Research) for å bidra til å utvikle denne analysen og Dr. Matthew Wood, Takuma Aihara og Dongsook Kim for deres kritiske lesning av manuskriptet.

Alle dyreprosedyrer ble utført med godkjenning fra Universitetet i Tsukuba dyrepleie og brukskomité (IACUC). 1. Disseksjon <ol><li> For å forberede embryonale dag 13-14 ICR- eller C57BL / 6-foster, euthaniser gravide mus ved cervikal dislokasjon. Ta ut livmoren og legg den i en petriskål med Hank Balanced Salt Solution (HBSS). Skyll det godt for å fjerne blodet. </li><li> Ved hjelp av tapper, overfør livmoren til en ny petriskål med 70% etanol for å sterilisere. </li><li> Overfør ...

<ol>
	<li>Nicot, A. S., Laporte, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endosomal+phosphoinositides+and+human+diseases.">Endosomal phosphoinositides and human diseases.</a> Traffic. 9 (8), 1240-1249 (2008).</li><li>De Matteis, M. A., Luini, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mendelian+disorders+of+membrane+trafficking.">Mendelian disorders of membrane trafficking.</a> N Engl J Med. 365 (10), 927-938 (2011).</li><li>Lebrand, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Late+endosome+motility+depends+on+lipids+via+the+small+GTPase+Rab7.">Late endosome motility depends on lipids via the small GTPase Rab7.</a> EMBO J. 21 (6), 1289-1300 (2002).</li><li>Chen, C. S., Bach, G., Pagano, R. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Abnormal+transport+along+the+lysosomal+pathway+in+mucolipidosis,+type+IV+disease.">Abnormal transport along the lysosomal pathway in mucolipidosis, type IV disease.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 95 (11), 6373-6378 (1998).</li><li>Venugopal, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neurologic,+gastric,+and+opthalmologic+pathologies+in+a+murine+model+of+mucolipidosis+type+IV.">Neurologic, gastric, and opthalmologic pathologies in a murine model of mucolipidosis type IV.</a> Am J Hum Genet. 81 (5), 1070-1083 (2007).</li><li>Li, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+molecular+mechanism+to+regulate+lysosome+motility+for+lysosome+positioning+and+tubulation.">A molecular mechanism to regulate lysosome motility for lysosome positioning and tubulation.</a> Nat Cell Biol. 18 (4), 404-417 (2016).</li><li>Tsuruta, F., Green, E. M., Rousset, M., Dolmetsch, R. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=PIKfyve+regulates+CaV1.2+degradation+and+prevents+excitotoxic+cell+death.">PIKfyve regulates CaV1.2 degradation and prevents excitotoxic cell death.</a> J Cell Biol. 187 (2), 279-294 (2009).</li><li>Tsuruta, F., Dolmetsch, R. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=PIKfyve+mediates+the+motility+of+late+endosomes+and+lysosomes+in+neuronal+dendrites.">PIKfyve mediates the motility of late endosomes and lysosomes in neuronal dendrites.</a> Neurosci Lett. 605, 18-23 (2015).</li><li>McCartney, A. J., Zhang, Y., Weisman, L. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Phosphatidylinositol+3,5-bisphosphate:+low+abundance,+high+significance.">Phosphatidylinositol 3,5-bisphosphate: low abundance, high significance.</a> Bioessays. 36 (1), 52-64 (2014).</li><li>Shisheva, A., Sbrissa, D., Ikonomov, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Plentiful+PtdIns5P+from+scanty+PtdIns(3,5)P2+or+from+ample+PtdIns?+PIKfyve-dependent+models:+Evidence+and+speculation+(response+to:+DOI+10.1002/bies.201300012).">Plentiful PtdIns5P from scanty PtdIns(3,5)P2 or from ample PtdIns? PIKfyve-dependent models: Evidence and speculation (response to: DOI 10.1002/bies.201300012).</a> Bioessays. 37 (3), 267-277 (2015).</li><li>Chow, C. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mutation+of+FIG4+causes+neurodegeneration+in+the+pale+tremor+mouse+and+patients+with+CMT4J.">Mutation of FIG4 causes neurodegeneration in the pale tremor mouse and patients with CMT4J.</a> Nature. 448 (7149), 68-72 (2007).</li><li>Zhang, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Loss+of+Vac14,+a+regulator+of+the+signaling+lipid+phosphatidylinositol+3,5-bisphosphate,+results+in+neurodegeneration+in+mice.">Loss of Vac14, a regulator of the signaling lipid phosphatidylinositol 3,5-bisphosphate, results in neurodegeneration in mice.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 104 (44), 17518-17523 (2007).</li><li>Mizushima, N., Yamamoto, A., Matsui, M., Yoshimori, T., Ohsumi, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+analysis+of+autophagy+in+response+to+nutrient+starvation+using+transgenic+mice+expressing+a+fluorescent+autophagosome+marker.">In vivo analysis of autophagy in response to nutrient starvation using transgenic mice expressing a fluorescent autophagosome marker.</a> Mol Biol Cell. 15 (3), 1101-1111 (2004).</li><li>. Manual Tracking, a plug-in for ImageJ software [Internet] Available from: <a target="_blank" href="https://imagej.nih.gov/ij/plugins/track/track.html">https://imagej.nih.gov/ij/plugins/track/track.html</a> (2017)</li><li>Hu, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Exopolysaccharide-independent+social+motility+of+Myxococcus+xanthus.">Exopolysaccharide-independent social motility of Myxococcus xanthus.</a> PLoS One. 6 (1), e16102 (2011).</li><li>Tan, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+four+type+IV+pilin+homologues+in+Stigmatella+aurantiaca+DSM17044+by+heterologous+expression+in+Myxococcus+xanthus.">Characterization of four type IV pilin homologues in Stigmatella aurantiaca DSM17044 by heterologous expression in Myxococcus xanthus.</a> PLoS One. 8 (9), e75105 (2013).</li><li>Choi, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+genetic+variant+of+cortactin+linked+to+acute+lung+injury+impairs+lamellipodia+dynamics+and+endothelial+wound+healing.">A genetic variant of cortactin linked to acute lung injury impairs lamellipodia dynamics and endothelial wound healing.</a> Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 309 (9), L983-L994 (2015).</li><li>Dahirel, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Movement+propensity+and+ability+correlate+with+ecological+specialization+in+European+land+snails:+comparative+analysis+of+a+dispersal+syndrome.">Movement propensity and ability correlate with ecological specialization in European land snails: comparative analysis of a dispersal syndrome.</a> J Anim Ecol. 84 (1), 228-238 (2015).</li><li>Hu, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interplay+between+type+IV+pili+activity+and+exopolysaccharides+secretion+controls+motility+patterns+in+single+cells+of+Myxococcus+xanthus.">Interplay between type IV pili activity and exopolysaccharides secretion controls motility patterns in single cells of Myxococcus xanthus.</a> Sci Rep. 6, 17790 (2016).</li><li>. Manual Tracking [Internet] Available from: <a target="_blank" href="https://imagej.nih.gov/ij/plugins/track/Manual">https://imagej.nih.gov/ij/plugins/track/Manual</a> (2017)</li><li>. ImageJ Tracking plug-in [Internet] Available from: <a target="_blank" href="https://imagej.net/Category:Tracking">https://imagej.net/Category:Tracking</a> (2017)</li><li>Tinevez, J. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=TrackMate:+An+open+and+extensible+platform+for+single-particle+tracking.">TrackMate: An open and extensible platform for single-particle tracking.</a> Methods. , (2016).</li><li>Ekvall, M. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Three-dimensional+tracking+of+small+aquatic+organisms+using+fluorescent+nanoparticles.">Three-dimensional tracking of small aquatic organisms using fluorescent nanoparticles.</a> PLoS One. 8 (11), e78498 (2013).</li><li>Jeyakumar, M., Dwek, R. A., Butters, T. D., Platt, F. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Storage+solutions:+treating+lysosomal+disorders+of+the+brain.">Storage solutions: treating lysosomal disorders of the brain.</a> Nat Rev Neurosci. 6 (9), 713-725 (2005).</li></ol>

Denne protokollen introduserer prosedyren for kvantifisering av vesikelmotilitet. I primære nevroner har endosomer og lysosomer en tendens til å vise høy motilitet hos yngre nevroner (4-6 DIV). Gitt at nevroner må levere noen komponenter til ledende kanter for å forlenge nevrale prosesser, bør membranhandel foregå dynamisk i dette stadiet. Dermed er det viktig å bruke yngre nevroner til å observere dynamisk motilitet i nevendon dendriter. I tillegg har større vesikler ikke en tendens til å oppvise høy motili...

Nøyaktig kontroll av endosomlysosomhandel er uunnværlig for regulering av nevronfunksjon. Spesielt er de dynamiske bevegelsene til disse vesiklene en nøkkelfaktor som ligger til grund for reguleringen av nevronmorfologi, utvikling og overlevelse. Feil i dette systemet forårsaker alvorlige nevroniske lidelser 1 , 2 . De molekylære mekanismene som knytter vesikkelhandel til nevonale sykdommer anses som kompliserte, og flere grupper har forsøkt å undersøke denne relevansen. For eksempel er det rapportert at perturbed late endosomotilitet er signifikant forbundet med Niemann-Pick C sykdom 3 , en arvet nevrodegenerativ lidelse forårsaket av lysosomfeil. Et annet eksempel er en mutasjon i en lysosomal Ca 2+ kanal, trpml 1, noe som forringer lysosomal motilitet, noe som resulterer i lysosomale lagringssykdommer 4 , 5 , </Sup&gt; 6 . Vår gruppe har rapportert at dysregulering av PtdIns (3,5) P 2 omsetning undertrykker endosom og lysosomotilitet i nevroner, noe som fører til økt sårbarhet for stressresponsen 7 , 8 . Metabolsk regulering av PtdIns (3,5) P 2 , som hovedsakelig lokaliserer seg på late endosomer og lysosomer, spiller en viktig rolle i et bredt spekter av cellulære funksjoner, inkludert vesikkelhandel og fusjonsfission prosesser 9 , 10 . Siden nedsatt PtdIns (3,5) P 2- omsetning forårsaker alvorlig nevrodegenerasjon 11 , 12 , kan avvigende regulering av endosomlysosommotilitet være en nøkkelfaktor for å forstå patogenesen av nevrodegenerasjon. En undersøkelse av molekylære mekanismer som ligger til grunn for vesikkmotilitet, kan således gi lovende ledetråder som kan utdype vår undeResten av flere nevroniske lidelser. I dette papiret presenterer vi en verdifull metode for å kvantifisere vesikkmotilitet i nevroner ved hjelp av en gratis programvarepakke kalt manuell sporing. Målet var å utvikle en rask kvantifiseringsmetode for å analysere vesikkmotilitet. Denne kvantifiseringen er rettet gjennom en standard tilnærming til å klikke på et referansepunkt i hver ramme av en time-lapse-film. Bruken av Manual Tracking-programvaren gjør denne tilnærmingen ganske enkel og av bred funksjon, i motsetning til andre applikasjoner. Videre er denne tilnærmingen også anvendelig for andre celler, for eksempel glialceller. Selv om denne metoden er primitiv, kan den brukes på ulike analyser, inkludert cellulær motilitet og morfologisk forandring. Etter å ha definert et referansepunkt over en sekvens av bilder, kan informasjon om posisjonene til referansepunktene og tiden ved hver posisjon trekkes ut fra sekvensielle bilder ved hjelp av dataanalyse og bildebehandlingsmjukware. Samlet sett er denne metoden enkel, men kraftig og bidrar til utviklingen av forbedret effektivitet i studier basert på membranhandel, for eksempel de som undersøker endosomlysosomfunksjonen.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Neurobasal medium</td>
			<td>Thermo Fisher</td>
			<td>21103-049</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dulbecco&#39;s modified eagle medium&#160;</td>
			<td>Wako</td>
			<td>044-29765</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Opti-MEM</td>
			<td>Thermo Fisher</td>
			<td>31985070</td>
			<td>Serum free medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hank&#39;s balanced salt solution</td>
			<td>Thermo Fisher</td>
			<td>14170112</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicilin Streptmycin</td>
			<td>Thermo Fisher</td>
			<td>15140122</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-Glutamine</td>
			<td>Thermo Fisher</td>
			<td>25030081</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>B-27 Supplements</td>
			<td>Thermo Fisher</td>
			<td>17504044</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2.5% Trypsine</td>
			<td>Thermo Fisher</td>
			<td>15090046</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>poly-D-lysine hydrobromide</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P7280</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>poly-L-ornithine&#160;</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P4957</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nylon cell strainer</td>
			<td>Corning</td>
			<td>431750</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lipofectamine 2000</td>
			<td>Thermo Fisher</td>
			<td>11668027</td>
			<td>Transfection reagent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polyethyleneimine &#34;Max&#34;</td>
			<td>polysciences</td>
			<td>24765</td>
			<td>Transfection reagent. As an alternative to Lipofectamine2000, 0.1mg/ml Polyethyleneimine dissolved in sterilized water is available. But it is low efficiency and high toxicity.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BIOREVO BZ-9000</td>
			<td>Keyence</td>
			<td>NA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Incubation system INUG2-K13</td>
			<td>Tokay Hit</td>
			<td>NA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GraphPad Prism version 6.0</td>
			<td>GraphPad Software</td>
			<td>NA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Excel version 15</td>
			<td>Microsoft</td>
			<td>NA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ImageJ verion 1.47</td>
			<td>NA</td>
			<td>NA</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

quantification of endosome and lysosome motilities in cultured neurons using fluorescent probes

I hjernen spiller membranhandelssystemer viktige roller i regulering av nevrale funksjoner, som nevronmorfologi, synaptisk plastisitet, overlevelse og glialkommunikasjon. Til dato har mange studier rapportert at mangler i disse systemene forårsaker ulike nevrale sykdommer. Dermed kan forståelse av mekanismene som ligger bak vesikkeldynamikken, gi innflytelsesrike ledetråder som kan hjelpe til med behandling av flere nevrale lidelser. Her beskriver vi en metode for kvantifisering av vesikkmotiliteter, for eksempel motilitetsavstand og bevegelseshastighet, ved hjelp av en programvareplugin for ImageJ-plattformen. For å oppnå bilder for kvantifisering merket vi neuronale endosomlysosomstrukturer med EGFP-merkede vesikkelmarkørproteiner og observerte bevegelsen av vesikler ved hjelp av en tidsforskjellmikroskopi. Denne metoden er svært nyttig og forenkler måling av vesikkmotilitet i nevritt, slik som axoner og dendritter, samt i soma til både nevroner og glialceller. FurthermoRe, denne metoden kan brukes på andre cellelinjer, slik som fibroblaster og endotelceller. Denne tilnærmingen kan gi en verdifull fremgang i vår forståelse av membranhandel.

Denne analysen ble utformet for å måle vesikkeldynamikk i in vitro- kultur. Denne analysen ble benyttet for å bestemme vesikelmotiliteten assosiert med neuronal morfologi og overlevelse. Figur 1A og B viser representative data som viser lysosommotilitet i nevroner. Kortikale nevroner ble transfektert med lysosommarkøren, LAMP-EGFP, og observert ved bruk av et standard fluorescensmikroskop. Det har tidligere vært rapportert at spesifikke end...

Watch this Scientific Journal Video about Quantification of Endosome and Lysosome Motilities in Cultured Neurons Using Fluorescent Probes at JoVE.com

Quantification of Endosome and Lysosome Motilities in Cultured Neurons Using Fluorescent Probes

Undersøkelsen av membranhandel er avgjørende for å forstå nevronfunksjoner. Her presenterer vi en metode for kvantifisering av vesikelmotilitet i nevroner. Dette er en praktisk metode som kan tilpasses kvantifiseringen av membranhandel i nervesystemet.

Kvantifisering av endosom og lysosommotiliteter i dyrkede neuroner ved bruk av fluorescerende prober

In the brain, membrane trafficking systems play important roles in regulating neuronal functions, such as neuronal morphology, synaptic plasticity, ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Dissection and Culture of Commissural Neurons from Embryonic Spinal Cord

Commissural neurons have been widely used to investigate the mechanisms underlying axon guidance during embryonic spinal cord development. The cell bodies ...

Fluorescence Recovery After Photobleaching (FRAP) of Fluorescence Tagged Proteins in Dendritic Spines of Cultured Hippocampal Neurons

Fluorescence Recovery After Photobleaching FRAP of Fluorescence Tagged Proteins in Dendritic Spines of Cultured Hippocampal Neurons

FRAP has been used to quantify the mobility of GFP-tagged proteins. Using a strong excitation laser, the fluorescence of a GFP-tagged protein is bleached ...

Analysis of Dendritic Spine Morphology in Cultured CNS Neurons

Dendritic spines are the sites of the majority of excitatory connections within the brain, and form the post-synaptic 
compartment of synapses. These ...

Quantitative Analysis of Synaptic Vesicle Pool Replenishment in Cultured Cerebellar Granule Neurons using FM Dyes

Kvantitativ analyse av Synaptic vesicle Pool Etterfylling i Cultured lillehjernen Granule Neurons bruker FM Fargestoffer

After neurotransmitter release in central nerve terminals, SVs are rapidly retrieved by endocytosis.  Retrieved SVs are then refilled with ...

Inducing Dendritic Growth in Cultured Sympathetic Neurons

Inducing dendrittiske Veksten i dyrkede sympatiske Neurons

The shape of the dendritic arbor determines the total synaptic input a neuron can receive 1-3, and influences the types and distribution of these inputs ...

Large-scale Recording of Neurons by Movable Silicon Probes in Behaving Rodents

Storskala opptak av nevroner med bevegelige Silicon Sonder i oppfører Gnagere

A major challenge in neuroscience is linking behavior to the collective activity of neural assemblies. Understanding of input-output relationships of ...

Lateral Diffusion and Exocytosis of Membrane Proteins in Cultured Neurons Assessed using Fluorescence Recovery and Fluorescence-loss Photobleaching

Lateral Diffusjon og eksocytose av membran proteiner i dyrkede Neurons vurdert ved hjelp av Fluorescens Recovery og fluorescens-tap photobleaching

Membrane proteins such as receptors and ion channels undergo active trafficking in neurons, which are highly polarised and morphologically complex. This ...

Retrograde Fluorescent Labeling Allows for Targeted Extracellular Single-unit Recording from Identified Neurons In vivo

Retrograde Fluorescent Labeling Allows for Targeted Extracellular Single-unit Recording from Identified Neurons In vivo

Retrograde Fluorescent Merking Tillater målrettet Ekstracellulær Single-enhet Opptak fra Identifiserte Nerveceller<em&gt; In vivo</em

The overall goal of this method is to record single-unit responses from an identified population of neurons. In vivo electrophysiological recordings from ...

Genetic Study of Axon Regeneration with Cultured Adult Dorsal Root Ganglion Neurons

Genetisk studie av Axon Regeneration med dyrkede Voksen røttene ganglion Neurons

It is well known that mature neurons in the central nervous system (CNS) cannot regenerate their axons after injuries due to diminished intrinsic ability ...

Detection of Protein Palmitoylation in Cultured Hippocampal Neurons by Immunoprecipitation and Acyl-Biotin Exchange (ABE)

Detection of Protein Palmitoylation in Cultured Hippocampal Neurons by Immunoprecipitation and Acyl-Biotin Exchange ABE

Påvisning av Protein palmitoylation i Cultured hippocampus neurons ved Immunoutfellingsanalyse og Acyl-Biotin Exchange (ABE)

Palmitoylation is a post-translational lipid  modification involving the attachment of a 16-carbon saturated fatty acid,  palmitate, to cysteine residues ...