Name: an il-8 transiently transgenized mouse model for the in vivo long-term monitoring of inflammatory responses
Uploaded: 2017-07-07T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about An IL-8 Transiently Transgenized Mouse Model for the In Vivo Long-term Monitoring of Inflammatory Responses at JoVE.com

وأيد هذا العمل من قبل الإيطالية مؤسسة الكيس التليف الكيسي فك # 18/2013، فك # 29/2015 ومن قبل الإيطالية الكيسي التليف الكيسي من خلال فرع فينيتو-أسوسيازيون فينيتا لوتا كونترو لا فيبروسي سيستيكا أونلوس.

تمت الموافقة على جميع التجارب على الحيوانات الموصوفة من قبل لجنة رعاية الحيوان الداخلية للتجارب الحيوانية من قبل المركز المشترك بين الإدارات لخدمة البحوث التجريبية في جامعة فيرونا والامتثال للتوجيه الأوروبي 2010/63 إي، الإيطالية D.Lgs 26/2014 والمنقحة &quot;دليل لرعاية واست?...

<ol>
	<li>Barnes, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Therapeutic+approaches+to+asthma-chronic+obstructive+pulmonary+disease+overlap+syndromes.">Therapeutic approaches to asthma-chronic obstructive pulmonary disease overlap syndromes.</a> J Allergy Clin Immunol. 136 (3), 531-545 (2015).</li><li>Cohen-Cymberknoh, M., Kerem, E., Ferkol, T., Elizur, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Airway+inflammation+in+cystic+fibrosis:+molecular+mechanisms+and+clinical+implications.">Airway inflammation in cystic fibrosis: molecular mechanisms and clinical implications.</a> Thorax. 68 (12), 1157-1162 (2013).</li><li>Dhooghe, B., Noel, S., Huaux, F., Leal, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lung+inflammation+in+cystic+fibrosis:+pathogenesis+and+novel+therapies.">Lung inflammation in cystic fibrosis: pathogenesis and novel therapies.</a> Clin Biochem. 47 (7-8), 539-546 (2014).</li><li>Durham, A. L., Caramori, G., Chung, K. F., Adcock, I. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Targeted+anti-inflammatory+therapeutics+in+asthma+and+chronic+obstructive+lung+disease.">Targeted anti-inflammatory therapeutics in asthma and chronic obstructive lung disease.</a> Transl Res. 167 (1), 192-203 (2015).</li><li>Sagel, S. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Noninvasive+biomarkers+of+airway+inflammation+in+cystic+fibrosis.">Noninvasive biomarkers of airway inflammation in cystic fibrosis.</a> Curr Opin Pulm Med. 9 (6), 516-521 (2003).</li><li>Starkey, M. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+models+of+infectious+exacerbations+of+airway+inflammation.">Murine models of infectious exacerbations of airway inflammation.</a> Curr Opin Pharmacol. 13 (3), 337-344 (2013).</li><li>Cacalano, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neutrophil+and+B+cell+expansion+in+mice+that+lack+the+murine+IL-8+receptor+homolog.">Neutrophil and B cell expansion in mice that lack the murine IL-8 receptor homolog.</a> Science. 265 (5172), 682-684 (1994).</li><li>Simonet, W. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long-term+impaired+neutrophil+migration+in+mice+overexpressing+human+interleukin-8.">Long-term impaired neutrophil migration in mice overexpressing human interleukin-8.</a> J Clin Invest. 94 (3), 1310-1319 (1994).</li><li>Stellari, F. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+imaging+of+transiently+transgenized+mice+with+a+bovine+interleukin+8+(CXCL8)+promoter/luciferase+reporter+construct.">In vivo imaging of transiently transgenized mice with a bovine interleukin 8 (CXCL8) promoter/luciferase reporter construct.</a> PLoS One. 7 (6), e39716 (2012).</li><li>Stellari, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+imaging+of+the+lung+inflammatory+response+to+Pseudomonas+aeruginosa+and+its+modulation+by+azithromycin.">In vivo imaging of the lung inflammatory response to Pseudomonas aeruginosa and its modulation by azithromycin.</a> J Transl Med. 13, 251 (2015).</li><li>Stellari, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+monitoring+of+lung+inflammation+in+CFTR-deficient+mice.">In vivo monitoring of lung inflammation in CFTR-deficient mice.</a> J Transl Med. 14 (1), 226 (2016).</li><li>De Simone, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Host+genetic+background+influences+the+response+to+the+opportunistic+Pseudomonas+aeruginosa+infection+altering+cell-mediated+immunity+and+bacterial+replication.">Host genetic background influences the response to the opportunistic Pseudomonas aeruginosa infection altering cell-mediated immunity and bacterial replication.</a> PLoS One. 9 (9), e106873 (2014).</li></ol>

في عمل سابق 11 ، تم عرض تباين بين بيل-8-لوك تعتمد بلي وعلامات بال. واعتمدت على درجة التفاضلية من الحساسية داخل سلالات الفأر 12 . لهذا السبب، فإن التطبيق الأول للنموذج بيل-8-لوك لسلالة فأر مختلفة يتطلب دراسة أولية للاستجابة الالتهابية، سواء من حي?...

أمراض الرئة المزمنة، مثل الربو، مرض الانسداد الرئوي المزمن (كوبد)، التليف الكيسي (سف)، توسع القصبات، تتميز بالتهاب مجرى الهواء. يتميز التهاب مجرى الهواء من وذمة، تسلل الخلوية، T الليمفاوية وتنشيط الخلايا البدينة، وزيادة إفرازات مجرى الهواء، وترسب الكولاجين المفرط. سف هو اضطراب متعدد الأنظمة، والسبب الرئيسي للوفاة والمراضة هو العدوى البكتيرية الرئة مع زيادة تفاقم الرئوي. ويتوقع الانخفاض في وظائف الرئة نتائج أقل فقرا 1 و 2 و 3 و 4 . وعادة ما يلاحظ حالة التهاب الجهاز التنفسي من خلال تقييم علامات المناعية تجنيد خلال العملية الالتهابية في المواد المستمدة من الخطوط الجوية السفلى والعلوية، مثل البلغم، الذي يوفر متغير ريسults. كما يتم تنفيذ القصبات 5 . نماذج الفئران هي أدوات قيمة للتحقيق في التسبب وتطور الأمراض التي تتميز التهاب المسالك الهوائية والتي لم يتم بعد تحديد العلاجات الفعالة أو العلاجات. وقد استخدمت نماذج حيوانية من التهابات الرئة والالتهاب لدراسة الربو والتفاعلات الممرضة المضيف، بما في ذلك دور المواد الكيميائية التي تحاكي الظروف البشرية (على سبيل المثال، التعرض لدخان السجائر، لس، إلاستاز، البيضاوي، بولي I: C، وما إلى ذلك ، كما وكذلك مجموعات من ما سبق) 6 . قياس المعلمات المرتبطة بالتهاب يتطلب التضحية من الحيوانات، كما هي مطلوبة النهج الغازية لقياس عوامل مثل الحمل البكتيري، السيتوكينات في الرئتين، وجمع السائل القصبي (بال) السائل. أيضا، غالبا ما تكون هناك حاجة لفحوص النسيجية. إمكانية الحصول على معلومات عن حركية الاستجابة الالتهابية يتطلب استخدام الأسطواناتالفئران. ولذلك، فإن التقنية التي تسمح للحصول على مثل هذه المعلومات دون الحاجة للتضحية بالحيوانات قيمة على الأسس التقنية والأخلاقية والاقتصادية والتشغيلية. إيل-8 هو لاعب أساسي في عملية الالتهاب، وتجنيد الكريات البيض إلى الأنسجة الملتهبة. وهو يمثل قراءة الجزيئية لدراسة تنشيط مسار التهابات. ميب-2 و كك قد يكون مثلي وظيفية من إيل-8 البشري في الفئران. الفئران تعبر عن مستقبل واحد فقط إيل-8 المحتملة، وهو مثلي من CXCR2 الإنسان 7 ، 8 ، لكنها قادرة على تحوير المروج الجيني إيل-8 غير المتغير الذي يدفع الجينات مراسل. وقد تم مؤخرا تطوير نموذج الفئران التهاب الرئة بعد ملاحظة أن البقر إيل-8 المروج / لوسيفيراس مراسل مراسل يمكن أن ترانزاكتيفيزاتد في الفئران. هذه الميزة تسمح للاستفادة من تلألؤ بيولوجي التصوير (بلي) لرصد الاستجابة الالتهابية في العيشنيمالس 9 . وقد تم تكييف هذا النموذج لدراسة الالتهاب الناجم عن إكسوبرودوكتس البكتيريا (على سبيل المثال، لس أو المنتجات الصادرة عن سلالات بكتيرية) أو تنفالفا 10 ، 11 . وتركز عملية اكتشاف المخدرات على تطوير وتحسين الجزيئات القديمة والجديدة المضادة للالتهابات التي يمكن علاج أمراض الرئة، مثل سف والربو، ومرض الانسداد الرئوي المزمن. هذه الكيانات الكيميائية الجديدة يجب اختبارها بسرعة وسهولة في النماذج الحيوانية التي يمكن ربطها إلى المظاهر السريرية محددة من أجل تسهيل تصميم التجارب السريرية الذكية.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="1536">
	<tbody>
		<tr height="30">
			<td height="30" style="height:30px;width:347px;">FMT 2500 Fluorescence Tomography System</td>
			<td style="width:457px;">Perkin Elmer Inc.</td>
			<td style="width:147px;">Experimental Builder</td>
			<td style="width:587px;"></td>
		</tr>
		<tr height="30">
			<td height="30" style="height:30px;">IVIS Lumina serie II Pre-clinical In Vivo Imaging System</td>
			<td style="width:457px;">Perkin Elmer Inc.</td>
			<td>Experimental Builder</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="32">
			<td height="32" style="height:32px;width:347px;">MMPsense 750 FAST</td>
			<td style="width:457px;">Perkin Elmer Inc.</td>
			<td style="width:147px;">NEV10001EX</td>
			<td>Protect from light, store the probe at 4 &#176;C</td>
		</tr>
		<tr height="32">
			<td height="32" style="height:32px;width:347px;">Female inbred BalbC</td>
			<td style="width:457px;">Harlan Laboratories Italy</td>
			<td style="width:147px;"></td>
			<td>Prior to use, animals were acclimatized for at least 5 days to the local vivarium conditions</td>
		</tr>
		<tr height="32">
			<td height="32" style="height:32px;width:347px;">bIL-8-Luc plasmid</td>
			<td style="width:457px;">Department of Medical Veterinary Science, University of Parma, Italy</td>
			<td style="width:147px;"></td>
			<td>Store the plasmid at -20 &#176;C</td>
		</tr>
		<tr height="32">
			<td height="32" style="height:32px;width:347px;">pGL3basic vector</td>
			<td style="width:457px;">Promega</td>
			<td style="width:147px;">E1751</td>
			<td>Store the vector at -20 &#176;C</td>
		</tr>
		<tr height="32">
			<td height="32" style="height:32px;width:347px;">JetPEI DNA transfection reagent</td>
			<td style="width:457px;">Polyplus transfection</td>
			<td style="width:147px;">201B-001G</td>
			<td>The DNA and JetPEI mix was formulated with a final N/P ratio of 7</td>
		</tr>
		<tr height="32">
			<td height="32" style="height:32px;width:347px;">D-luciferin potassium salt 1g</td>
			<td style="width:457px;">Perkin Elmer Inc.</td>
			<td align="right" style="width:147px;">122796</td>
			<td>Protect from light, store at -20 &#176;C</td>
		</tr>
		<tr height="32">
			<td height="32" style="height:32px;width:347px;">Living Image software</td>
			<td style="width:457px;">Caliper Life Sciences,</td>
			<td>Experimental Builder</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="32">
			<td height="32" style="height:32px;width:347px;">Isoflurane</td>
			<td style="width:457px;">ESTEVE spa</td>
			<td style="width:147px;">571329.8</td>
			<td>Do not inhale</td>
		</tr>
		<tr height="32">
			<td height="32" style="height:32px;width:347px;">Bio-Plex Cytokine Assay Kit</td>
			<td style="width:457px;">Bio-Rad Laboratories</td>
			<td style="width:147px;">M60-009RDPD</td>
			<td>Store the unopened kit at 4 &#176;C</td>
		</tr>
		<tr height="32">
			<td height="32" style="height:32px;width:347px;">Automated cell counter</td>
			<td style="width:457px;">Dasit XT 1800J</td>
			<td>Experimental Builder</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="32">
			<td height="32" style="height:32px;width:347px;">Penn-century model DP-4M Dry power insufflator</td>
			<td style="width:457px;">Penn-century</td>
			<td>DPM-EXT</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="32">
			<td height="32" style="height:32px;width:347px;">Gas anesthesia system XGI-8</td>
			<td style="width:457px;">Perkin Elmer Inc.</td>
			<td>Experimental Builder</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="32">
			<td height="32" style="height:32px;width:347px;">PE190 micro medical tubing</td>
			<td style="width:457px;">2biological instruments snc</td>
			<td style="width:147px;">BB31695-PE/8</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="32">
			<td height="32" style="height:32px;width:347px;">Syringe without needle 5ml</td>
			<td style="width:457px;">Terumo</td>
			<td style="width:147px;">SS*05SE1</td>
			<td>Cut the boards of the piston by a scissors</td>
		</tr>
		<tr height="32">
			<td height="32" style="height:32px;width:347px;">Hamilton 0,10 ml (model 1710)</td>
			<td style="width:457px;">Gastight</td>
			<td align="right">81022</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="32">
			<td height="32" style="height:32px;width:347px;">Discofix 3-way Stopcock</td>
			<td style="width:457px;">Braun</td>
			<td align="right">4095111</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="32">
			<td height="32" style="height:32px;width:347px;">Syringe with needle 1ml</td>
			<td style="width:457px;">Pic solution</td>
			<td align="right">3,071,260,300,320</td>
			<td>Use without needle</td>
		</tr>
		<tr height="32">
			<td height="32" style="height:32px;width:347px;">Plastic feeding tubes 18ga x 50mm</td>
			<td style="width:457px;">2biological instruments snc</td>
			<td>FTP-18-50</td>
			<td>Cut obliquely the tip&#160;</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

an il-8 transiently transgenized mouse model for the in vivo long-term monitoring of inflammatory responses

غالبا ما يرتبط التهاب مجرى الهواء مع الالتهابات البكتيرية ويمثل عاملا رئيسيا محددا لأمراض الرئة. في الجسم الحي تحديد القدرات المؤيدة للالتهابات من العوامل المختلفة هو التحدي ويتطلب إجراءات المحطة، مثل غسل القصبات وإزالة الرئتين لتحليل في الموقع ، مما يمنع التصور الطولي في نفس الماوس. هنا، يتسبب التهاب الرئة من خلال تقطير داخل القصبة الهوائية من الزائفة الزنجارية ثقافة طاف (سن) في الفئران المعدلة وراثيا عابرة معربا عن الجينات مراسل لوسيفيراس تحت سيطرة غير متجانسة إيل-8 المروج البقري. يتم رصد التعبير لوسيفيراس في الرئة بواسطة في صورة الجسم الحي بيولومينسنت تحليل (بلي) على الإطار الزمني 2.5- إلى 48 ساعة بعد تقطير. ويمكن تكرار هذا الإجراء عدة مرات في غضون 2-3 أشهر، مما يسمح بتقييم الاستجابة الالتهابية في نفس الفئران ويثووالحاجة إلى إنهاء الحيوانات. يسمح هذا النهج رصد العوامل المؤيدة للالتهابات التي تعمل في الرئة في الوقت الحقيقي، ويبدو مناسبا للدراسات الوظيفية والدوائية.

تم استخدام بيل-8-لوك نموذج الماوس المعدلة وراثيا عابرة لمراقبة الجسم الحي من التهاب الرئة في الفئران تحدى مع طاف البكتيرية المركزة (30X) تحتوي على عوامل الفوعة يفرز. وكانت الاستجابة الالتهابية الناجم عن الكشف عن طريق التصوير في الجسم الحي كز...

Watch this Scientific Journal Video about An IL-8 Transiently Transgenized Mouse Model for the In Vivo Long-term Monitoring of Inflammatory Responses at JoVE.com

An IL-8 Transiently Transgenized Mouse Model for the In Vivo Long-term Monitoring of Inflammatory Responses

الطريقة الموصوفة هنا يسمح لتصور إيل-8 المروج التي تعتمد على تنشيط التهاب في الرئتين من الفئران من خلال التصوير تلألؤ بيولوجي غير الغازية (بلي). نفس الحيوان يمكن أن يتعرض إلى بلي عدة مرات لمدة تصل إلى شهرين من وقت تسليم بناء مراسل لوسيفيراس.

و إيل-8 عابر نموذج الماوس المعدلة وراثيا ل<em&gt; في فيفو</em&gt; رصد طويل الأمد للردود الالتهابية

Airway inflammation is often associated with bacterial infections and represents a major determinant of lung disease. The in vivo determination of the ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

An IL-8 Transiently Transgenized Mouse Model for the In Vivo Long-term Monitoring of Inflammatory Responses

An Orthotopic Model of Serous Ovarian Cancer in Immunocompetent Mice for in vivo Tumor Imaging and Monitoring of Tumor Immune Responses

An Orthotopic Model of Serous Ovarian Cancer in Immunocompetent Mice for in vivo Tumor Imaging and Monitoring of Tumor Immune Responses

نموذج مثلي من سرطان المبيض في الفئران مصلي مناعيا ل في الجسم الحي التصوير الورم ورصد الاستجابات المناعية ورم

Background: Ovarian cancer is generally diagnosed at an advanced stage where the case/fatality ratio is high and thus remains the most lethal of all ...

Use of the EpiAirway Model for Characterizing Long-term Host-pathogen Interactions

استخدام نموذج لوصف EpiAirway طويل الأجل المضيف الممرض التفاعلات

Nontypeable Haemophilus influenzae  (NTHi) are human-adapted Gram-negative bacteria that can cause recurrent and chronic infections of the respiratory ...

Induction of Graft-versus-host Disease and In Vivo T Cell Monitoring Using an MHC-matched Murine Model

Induction of Graft-versus-host Disease and In Vivo T Cell Monitoring Using an MHC-matched Murine Model

تحريض الطعم ضد المضيف المرض و<em&gt; في الجسم الحي</em&gt; مراقبة الخلايا T باستخدام نموذج MHC المطابقة الفئران

Graft-versus-host disease (GVHD) is the limiting barrier to the broad use of bone marrow transplant as a curative therapy for a variety of hematological ...

Differentiating Functional Roles of Gene Expression from Immune and Non-immune Cells in Mouse Colitis by Bone Marrow Transplantation

التفريق الأدوار الوظيفية في التعبير الجيني من الخلايا المناعية وغير المناعية في التهاب القولون الماوس عن طريق زرع نخاع العظم

To understand the role of a gene in the development of colitis, we compared the responses of wild-type mice and gene-of-interest deficient knockout mice ...

Characterization of Inflammatory Responses During Intranasal Colonization with Streptococcus pneumoniae

Characterization of Inflammatory Responses During Intranasal Colonization with Streptococcus pneumoniae

توصيف الاستجابات الالتهابية خلال الاستعمار داخل الشرج مع الالتهاب الرئوي العقدي

Nasopharyngeal colonization by Streptococcus pneumoniae is a prerequisite to invasion to the lungs or bloodstream1. This organism is capable of colonizing ...

Long Term Chronic Pseudomonas aeruginosa Airway Infection in Mice

Long Term Chronic Pseudomonas aeruginosa Airway Infection in Mice

على المدى الطويل المزمن<em&gt; الزائفة الزنجارية</em&gt; عدوى مجرى الهواء في الفئران

A mouse model of chronic airway infection is a key asset in cystic fibrosis (CF) research, although there are a number of concerns regarding the model ...

The Use of Fluorescent Target Arrays for Assessment of T Cell Responses In vivo

The Use of Fluorescent Target Arrays for Assessment of T Cell Responses In vivo

استخدام المصابيح الفلورية الهدف صالحة لتقييم T الردود الخليوي<em&gt; في الجسم الحي</em

The ability to monitor T cell responses in vivo is important for the development of our understanding of the immune response and the design of ...

Application of Long-term cultured Interferon-&#947; Enzyme-linked Immunospot Assay for Assessing Effector and Memory T Cell Responses in Cattle

Application of Long-term cultured Interferon-ÃƒÅ½Ã‚Â³ Enzyme-linked Immunospot Assay for Assessing Effector and Memory T Cell Responses in Cattle

تطبيق على المدى الطويل مثقف انترفيرون γ انزيم مرتبط Immunospot الفحص لتقييم المستجيب والذاكرة T الردود خلية في الماشية

Effector and memory T cells are generated through developmental programing of na&#239;ve cells following antigen recognition. If the infection is ...

An In Vitro Model for Measuring Immune Responses to Malaria in the Context of HIV Co-infection

An In Vitro Model for Measuring Immune Responses to Malaria in the Context of HIV Co-infection

ل<em&gt; في المختبر</em&gt; نموذج لقياس الاستجابات المناعية لمكافحة الملاريا في سياق الفيروس المسبب للإيدز

Malaria and HIV co-infection is a growing health priority. However, most research on malaria or HIV currently focuses on each infection individually. ...

Increased Recovery Time and Decreased LPS Administration to Study the Vagus Nerve Stimulation Mechanisms in Limited Inflammatory Responses

زيادة وقت الاسترداد وانخفاض إدارة LPS لدراسة آليات تحفيز عصب فاجوس في الاستجابات الالتهابية محدودة

Inflammation is a local response to infection and tissue damage mediated by activated macrophages, monocytes, and other immune cells that release ...