Name: bioluminescence imaging of neuroinflammation in transgenic mice after peripheral inoculation of alpha-synuclein fibrils
Uploaded: 2017-04-13T13:00:00
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著者はオルガ・シャルマ、テレサ・ハント、および技術サポートのためのDZNE顕微鏡および動物施設のスタッフに感謝します。

動物を含めたすべての手順は、ノルトライン=ヴェストファーレン州国家環境庁（LANUV）の動物保護委員会の承認を得て行きました。動物を飼育し、12時間の明/暗サイクル、食物および水に自由にアクセスできる標準条件に従って世話しました。 1.動物モデル<ol><li>マウス15、16：ヘミ接合バイジェニックTgは（GFAP -Luc <sup...

<ol>
	<li>Aguzzi, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+biology:+Beyond+the+prion+principle.">Cell biology: Beyond the prion principle.</a> Nature. 459 (7249), 924-925 (2009).</li><li>Kordower, J. H., Chu, Y., Hauser, R. A., Freeman, T. B., Olanow, C. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lewy+body-like+pathology+in+long-term+embryonic+nigral+transplants+in+Parkinson's+disease.">Lewy body-like pathology in long-term embryonic nigral transplants in Parkinson's disease.</a> Nat Med. 14 (5), 504-506 (2008).</li><li>Li, J. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lewy+bodies+in+grafted+neurons+in+subjects+with+Parkinson's+disease+suggest+host-to-graft+disease+propagation.">Lewy bodies in grafted neurons in subjects with Parkinson's disease suggest host-to-graft disease propagation.</a> Nat Med. 14 (5), 501-503 (2008).</li><li>Hansen, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=alpha-Synuclein+propagates+from+mouse+brain+to+grafted+dopaminergic+neurons+and+seeds+aggregation+in+cultured+human+cells.">alpha-Synuclein propagates from mouse brain to grafted dopaminergic neurons and seeds aggregation in cultured human cells.</a> J Clin Invest. 121 (2), 715-725 (2011).</li><li>Masuda-Suzukake, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prion-like+spreading+of+pathological+alpha-synuclein+in+brain.">Prion-like spreading of pathological alpha-synuclein in brain.</a> Brain. 136 (4), 1128-1138 (2013).</li><li>Holmqvist, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Direct+evidence+of+Parkinson+pathology+spread+from+the+gastrointestinal+tract+to+the+brain+in+rats.">Direct evidence of Parkinson pathology spread from the gastrointestinal tract to the brain in rats.</a> Acta Neuropathol. 128 (6), 805-820 (2014).</li><li>Luk, K. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pathological+alpha-synuclein+transmission+initiates+Parkinson-like+neurodegeneration+in+nontransgenic+mice.">Pathological alpha-synuclein transmission initiates Parkinson-like neurodegeneration in nontransgenic mice.</a> Science. 338 (6109), 949-953 (2012).</li><li>Sacino, A. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induction+of+CNS+alpha-synuclein+pathology+by+fibrillar+and+non-amyloidogenic+recombinant+alpha-synuclein.">Induction of CNS alpha-synuclein pathology by fibrillar and non-amyloidogenic recombinant alpha-synuclein.</a> Acta Neuropathol Commun. 1, 38 (2013).</li><li>Sacino, A. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intramuscular+injection+of+alpha-synuclein+induces+CNS+alpha-synuclein+pathology+and+a+rapid-onset+motor+phenotype+in+transgenic+mice.">Intramuscular injection of alpha-synuclein induces CNS alpha-synuclein pathology and a rapid-onset motor phenotype in transgenic mice.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 111 (29), 10732-10737 (2014).</li><li>Mougenot, A. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prion-like+acceleration+of+a+synucleinopathy+in+a+transgenic+mouse+model.">Prion-like acceleration of a synucleinopathy in a transgenic mouse model.</a> Neurobiol Aging. 33 (9), 2225-2228 (2012).</li><li>Bartz, J. C., Kincaid, A. E., Bessen, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rapid+prion+neuroinvasion+following+tongue+infection.">Rapid prion neuroinvasion following tongue infection.</a> J Virol. 77 (1), 583-591 (2003).</li><li>Tamg&#252;ney, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measuring+prions+by+bioluminescence+imaging.">Measuring prions by bioluminescence imaging.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 106 (35), 15002-15006 (2009).</li><li>Watts, J. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transmission+of+multiple+system+atrophy+prions+to+transgenic+mice.">Transmission of multiple system atrophy prions to transgenic mice.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 110 (48), 19555-19560 (2013).</li><li>Breid, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuroinvasion+of+alpha-Synuclein+Prionoids+after+Intraperitoneal+and+Intraglossal+Inoculation.">Neuroinvasion of alpha-Synuclein Prionoids after Intraperitoneal and Intraglossal Inoculation.</a> J Virol. 90 (20), 9182-9193 (2016).</li><li>Giasson, B. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuronal+alpha-synucleinopathy+with+severe+movement+disorder+in+mice+expressing+A53T+human+alpha-synuclein.">Neuronal alpha-synucleinopathy with severe movement disorder in mice expressing A53T human alpha-synuclein.</a> Neuron. 34 (4), 521-533 (2002).</li><li>Zhu, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Non-invasive+imaging+of+GFAP+expression+after+neuronal+damage+in+mice.">Non-invasive imaging of GFAP expression after neuronal damage in mice.</a> Neurosci Lett. 367 (2), 210-212 (2004).</li><li>Bernis, M. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prion-like+propagation+of+human+brain-derived+alpha-synuclein+in+transgenic+mice+expressing+human+wild-type+alpha-synuclein.">Prion-like propagation of human brain-derived alpha-synuclein in transgenic mice expressing human wild-type alpha-synuclein.</a> Acta Neuropathol Commun. 3 (1), 75 (2015).</li><li>Gunther, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clinical+testing+and+spinal+cord+removal+in+a+mouse+model+for+amyotrophic+lateral+sclerosis+(ALS).">Clinical testing and spinal cord removal in a mouse model for amyotrophic lateral sclerosis (ALS).</a> J Vis Exp. (61), (2012).</li><li>Jackson-Lewis, V., Przedborski, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protocol+for+the+MPTP+mouse+model+of+Parkinson's+disease.">Protocol for the MPTP mouse model of Parkinson's disease.</a> Nat Protoc. 2 (1), 141-151 (2007).</li><li>Mathews, S. T., Plaisance, E. P., Kim, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+systems+for+westerns:+chemiluminescence+vs.+infrared+detection.">Imaging systems for westerns: chemiluminescence vs. infrared detection.</a> Methods Mol Biol. 536, 499-513 (2009).</li><li>Kim, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Exposure+to+bacterial+endotoxin+generates+a+distinct+strain+of+alpha-synuclein+fibril.">Exposure to bacterial endotoxin generates a distinct strain of alpha-synuclein fibril.</a> Sci Rep. 6, 30891 (2016).</li><li>Keller, A. F., Gravel, M., Kriz, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Live+imaging+of+amyotrophic+lateral+sclerosis+pathogenesis:+disease+onset+is+characterized+by+marked+induction+of+GFAP+in+Schwann+cells.">Live imaging of amyotrophic lateral sclerosis pathogenesis: disease onset is characterized by marked induction of GFAP in Schwann cells.</a> Glia. 57 (10), 1130-1142 (2009).</li><li>St&#246;hr, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Distinct+synthetic+Abeta+prion+strains+producing+different+amyloid+deposits+in+bigenic+mice.">Distinct synthetic Abeta prion strains producing different amyloid deposits in bigenic mice.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. , (2014).</li><li>Luk, K. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intracerebral+inoculation+of+pathological+alpha-synuclein+initiates+a+rapidly+progressive+neurodegenerative+alpha-synucleinopathy+in+mice.">Intracerebral inoculation of pathological alpha-synuclein initiates a rapidly progressive neurodegenerative alpha-synucleinopathy in mice.</a> J Exp Med. 209 (5), 975-986 (2012).</li><li>Recasens, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lewy+body+extracts+from+Parkinson+disease+brains+trigger+alpha-synuclein+pathology+and+neurodegeneration+in+mice+and+monkeys.">Lewy body extracts from Parkinson disease brains trigger alpha-synuclein pathology and neurodegeneration in mice and monkeys.</a> Ann Neurol. 75 (3), 351-362 (2014).</li><li>Sacino, A. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induction+of+CNS+alpha-synuclein+pathology+by+fibrillar+and+non-amyloidogenic+recombinant+alpha-synuclein.">Induction of CNS alpha-synuclein pathology by fibrillar and non-amyloidogenic recombinant alpha-synuclein.</a> Acta Neuropathol Commun. 1 (1), 38 (2013).</li><li>Peelaerts, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=alpha-Synuclein+strains+cause+distinct+synucleinopathies+after+local+and+systemic+administration.">alpha-Synuclein strains cause distinct synucleinopathies after local and systemic administration.</a> Nature. 522 (7556), 340-344 (2015).</li></ol>

Tgは（M83 +/-：GFAP -Luc +/-）の腹膜内へのα-シヌクレイン線維の末梢注射したマウスは、シヌクレイノパチーの重要な特性を再現するために、神経炎症を伴う神経疾患を誘発するための容易な方法を表します。同様に、舌の注射は、トランスジェニックマウスにおけるα-シヌクレインprionoidsによって神経侵入のための別のルートを表すが、あまり効率的です。私たちは、?...

α-シヌクレインは、特に自己シードする能力で、プリオンタンパク質のものと類似しており、細胞間および神経経路に沿ったミスフォールディングを伝搬特性を有することが成長の証拠があります。 α-シヌクレインのこの特性はまた、「プリオン様」または「prionoid」と呼ばれ、罹患ニューロンから新たに移植され、健康なニューロン1にミスフォールドα-シヌクレインの透過性を示唆している移植実験において観察によって支持され、2 、3、4。また、脳または周囲、 例えば後肢筋肉または腸壁の遠位部分にα-シヌクレイン病理の広がりにおける結果に誤って折り畳まれたα-シヌクレインの直接注入CNS 5、6、7、&lt;SUPクラス= &quot;外部参照&quot;&gt; 8、9、10。我々は、より詳細には、末梢経路を介してα-シヌクレインprionoidsの伝送を分析し、ミスフォールドα-シヌクレインは、単一intraglossalまたは腹腔内注射後にCNSをneuroinvadeできるかどうかを疑問に対処し、以前にプリオンのためではなく、ミスフォールドアルファのために示された機能シヌクレイン。舌へのプリオンの注入後の、CNSの神経侵入は、脳幹11に位置する舌下神経の核につながる舌の舌下神経に沿って伝播を介して達成されます。プリオンプロモーターからのヒトα-シヌクレインのA53T変異体を過剰発現マウス、及びホタルによってアストロサイトの活性化をモニターするために、GFAPプロモーターの制御下でルシフェラーゼ：マウスモデルとして、我々はTgが（GFAP -Luc +/- M83 +/-）を選択しました生物発光、以前の脳に示すように、プリオン感染マウス12。我々の手ではバイジェニックTgは（M83 +/-：GFAP -luc +/-）他13で示されているようマウスは生後23ヶ月まで、疾患を発症しませんでした。 α-シヌクレインprionoidsという仮説を支持するマウス：脳及びTgは（GFAP -Luc +/- M83 +/-）の脊髄での病理と神経疾患を誘発しintraglossalまたは腹腔内経路を介してヒトα-シヌクレイン線維の単回注射プリオン14との重要な特徴を共有します。

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>anti-actin antibody</td>
			<td>Merck Millipore</td>
			<td>MAB1501</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>anti-alpha-synuclein, phospho S129 antibody [pSyn#64]</td>
			<td>Wako</td>
			<td>015-25191</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>anti-alpha-synuclein, phospho S129 antibody [EP1536Y]</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab51253</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>anti-GFAP antibody</td>
			<td>Dako</td>
			<td>Z0334 01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>anti-IBA-1 antibody</td>
			<td>Wako</td>
			<td>019-19741</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>anti-Sequestosome-1 (p62) antibody</td>
			<td>Proteintech</td>
			<td>18420-1-AP</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>anti-ubiquitin antibody [Ubi-1]</td>
			<td>Merck Millipore</td>
			<td>MAB1510</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate-buffered saline (PBS)</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>14190169</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ketamine&#160;</td>
			<td>Ratiopharm</td>
			<td></td>
			<td>100 mg/kg</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xylazine</td>
			<td>Ratiopharm</td>
			<td></td>
			<td>10 mg/kg</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>27-gauge syringe</td>
			<td>VWR</td>
			<td>613-4900</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane&#160;</td>
			<td>Piramal Healthcare</td>
			<td>PZN&#160; 4831850</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Depilatory cream</td>
			<td>Veet</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Secureline lab marker&#160;</td>
			<td>Neolab</td>
			<td>25040</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>D-luciferin potassium salt</td>
			<td>Acris</td>
			<td>LK10000</td>
			<td>30 mg/mL stock solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Thermomixer</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>5776671</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sonopuls Mini20 sonicator</td>
			<td>Bandelin</td>
			<td>3648</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>IVIS Lumina II imaging system</td>
			<td>PerkinElmer</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Living Image 3.0 Software</td>
			<td>PerkinElmer</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tg(M83+/-) mice or B6;C3-Tg(Prnp-SNCA*A53T)83Vle/J mice</td>
			<td>The Jackson Laboratory</td>
			<td>004479</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Standard pattern forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>11000-16</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Narrow pattern forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>11002-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>N-laurylasarcosyl</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>L5125-100G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Optima Max-XP ultracentrifuge&#160;</td>
			<td>Beckman Coulter</td>
			<td></td>
			<td>TLA-110 rotor&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Thickwall polycarbonate tubes</td>
			<td>Beckman Coulter</td>
			<td>362305</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NuPAG Novex 4-12% Bis-Tris Midi Protein Gels</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>WG1401BOX</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HRP conjugated antibody</td>
			<td>Cayman</td>
			<td>Cay10004301-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>IR Dye 680 conjugated antibody&#160;</td>
			<td>LI-COR Biosciences</td>
			<td>926-68070</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SuperSignal West Dura Extended Duration Substrate</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>34075</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stella 3200 imaging system</td>
			<td>Raytest</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Odyssey infrared imaging system&#160;</td>
			<td>LI-COR Biosciences</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tween 20&#160;</td>
			<td>MP Biomedicals</td>
			<td>TWEEN201</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Triton X-100</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>SA/T8787</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Immobilon-FL PVDF membrane</td>
			<td>Merck Millipore</td>
			<td>IPFL00010</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xylol</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>Roth</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hydrogen peroxide</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>SA/00216763/000500</td>
			<td>working solution 3%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bovine serum albumine (BSA)&#160;</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>A3294-100G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Goat serum</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>PCN5000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4,6-diamidino-2-phenylindole (DAPI)</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>D1306</td>
			<td>working dilution 1:50,000</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluoromount media&#160;</td>
			<td>Omnilab</td>
			<td>SA/F4680/000025</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LSM700 confocal laser scanning microscope</td>
			<td>Carl Zeiss</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HALT protease and phosphatase inhibitors</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific&#160;</td>
			<td>10516495</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Precellys 24-Dual homogenizer&#160;</td>
			<td>Peqlab</td>
			<td>91-PCS24D</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alexa Fluor 488 conjugated antibody</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>A31619</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alexa Fluor 594 conjugated antibody</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>A11005</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pierce&#160;BCA&#160;Protein&#160;Assay&#160;Kit</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>10741395</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microtome RM2255</td>
			<td>Leica</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LSM700 confocal laser scanning microscope</td>
			<td>Carl Zeiss</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

bioluminescence imaging of neuroinflammation in transgenic mice after peripheral inoculation of alpha-synuclein fibrils

ミスフォールドα-シヌクレインのプリオンのような挙動を研究するために、マウスモデルは、中枢神経系（CNS）内の神経病理を引き起こすα-シヌクレインprionoids、迅速かつ簡単な伝送を可能にする必要があります。プリオンタンパク質プロモーターからA53T変異を有するヒトα-シヌクレインを過剰発現し、ホタル由来のルシフェラーゼマウス、：ここでは、バイジェニックのTg（GFAP -Luc +/- M83 +/-）にα-シヌクレイン原線維のintraglossalまたは腹腔内注射を記述しますグリア線維性酸性タンパク質（GFAP）のプロモーターは、神経病理学的疾患を誘導するのに十分です。 8ヶ月の年齢で始まる深刻な神経症状を発症ホモ接合体のTg（M83 + / +）マウスと比較して、ヘテロ接合のTg（M83 +/-：GFAP -luc +/-）、彼らが到達するまでの動物は、自発的な病気の自由なまま22ヶ月の年齢。興味深いことに、intraperitone介しα-シヌクレイン線維の注射229±17日の中央値はインキュベーション時間をマウス：アルルートは4 5のTg（GFAP -luc +/- M83 +/-）で麻痺と神経疾患を誘発しました。病気にかかった動物は自分の脳や脊髄にリン酸化αシヌクレインの深刻な沈着を示しました。 α-シヌクレインの蓄積は、サルコシル不溶性であり、ユビキチンおよびP62と共局在し、そして星状細胞グリオーシスおよび小膠細胞を生じる炎症応答を伴いました。驚くべきことに、舌へのα-シヌクレイン線維の接種285日後にα-シヌクレイン病理を示す5注射した動物の一方のみで疾患を引き起こすにはあまり効果的でした。マウス。：私達の調査結果は、intraglossal経路を介して接種し、より多くのように腹腔内経路では、Tgのシヌクレイノパチーの関連する顕著な特徴（GFAP -luc +/- M83 +/-）で神経学的な病気を誘発するのに適していることを示していますこれは、誘導プリオンなどの病因を研究するための新しいモデルを提供しますより詳細にα-シヌクレインprionoidsによってDは

マウス（ 表1及び図1）：舌又はバイジェニックTgはCNS（GFAP -Luc +/- M83 +/-）で腹膜誘導される神経病理を介してα-シヌクレインprionoidsの周辺注射。 α-シヌクレイン線維を持つ単一の腹腔内注射した後、5匹のマウスの4つが229±17日の中央値はインキュベーション時間と神経疾患を発症しました。驚くべきことに、唯一の5匹?...

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Bioluminescence Imaging of Neuroinflammation in Transgenic Mice After Peripheral Inoculation of Alpha-Synuclein Fibrils

Tgは（M83 +/-：GFAP -Luc +/-）の腹膜または舌にα-シヌクレイン原線維の末梢注入家族A53T変異ホタルルシフェラーゼでヒトα-シヌクレインを発現するマウスは、神経炎症を含む、神経病理を誘導することができます、その中枢神経系インチ

α-シヌクレイン線維の末梢接種後のトランスジェニックマウスにおける神経炎症の生物発光イメージング

To study the prion-like behavior of misfolded alpha-synuclein, mouse models are needed that allow fast and simple transmission of alpha-synuclein ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

A Thin-skull Window Technique for Chronic Two-photon In vivo Imaging of Murine Microglia in Models of Neuroinflammation

A Thin-skull Window Technique for Chronic Two-photon In vivo Imaging of Murine Microglia in Models of Neuroinflammation

慢性二光子用薄型頭蓋骨のウィンドウテクニック in vivoで</em神経炎症のモデルのマウスミクログリアの>イメージング

Traditionally in neuroscience, in vivo two photon imaging of the murine central nervous system has either involved the use of open-skull1,2 or ...

Oral Administration of Rotenone using a Gavage and Image Analysis of Alpha-synuclein Inclusions in the Enteric Nervous System

腸神経系ではα-シヌクレインの介在物の強制経口および画像解析を用いたロテノンの経口投与

In Parkinson's disease (PD) patients, the associated pathology follows a characteristic pattern involving inter alia the enteric nervous system (ENS) 1,2, ...

Live Imaging of Dorsal Root Axons after Rhizotomy

根切断術後の後根の軸索のライブイメージング

The primary sensory axons injured by spinal root injuries fail to regenerate into the spinal cord, leading to chronic pain and permanent sensory loss. ...

Generation of Topically Transgenic Rats by In utero Electroporation and In vivo Bioluminescence Screening

Generation of Topically Transgenic Rats by In utero Electroporation and In vivo Bioluminescence Screening

局所トランスジェニックラットの発生により<em&gt;子宮内</em&gt;エレクトロポレーションおよび<em&gt;インビボ</em&gt;生物発光スクリーニング

 In utero electroporation (IUE) is a technique which allows genetic modification of cells in the brain for investigating neuronal development. So far, the ...

Transplantation of Olfactory Ensheathing Cells to Evaluate Functional Recovery after Peripheral Nerve Injury

末梢神経損傷後の機能回復を評価する嗅神経鞘細胞の移植

Olfactory ensheathing cells (OECs) are neural crest cells which allow growth and regrowth of the primary olfactory neurons. Indeed, the primary olfactory ...

Fluorescence and Bioluminescence Imaging of Subcellular Ca2+ in Aged Hippocampal Neurons

Fluorescence and Bioluminescence Imaging of Subcellular Ca2+ in Aged Hippocampal Neurons

細胞内のCaの蛍光と生物発光イメージング<sup&gt; 2+</sup&gt;高齢者における海馬ニューロン

Susceptibility to neuron cell death associated to neurodegeneration and ischemia are exceedingly increased in the aged brain but mechanisms responsible ...

Sequential Extraction of Soluble and Insoluble Alpha-Synuclein from Parkinsonian Brains

パーキンソン脳からの可溶性および不溶性のα-シヌクレインの逐次抽出

Alpha-synuclein (&#945;-syn) protein is abundantly expressed mainly within neurons, and exists in a number of different forms - monomers, tetramers, ...

Imaging Neural Activity in the Primary Somatosensory Cortex Using Thy1-GCaMP6s Transgenic Mice

Imaging Neural Activity in the Primary Somatosensory Cortex Using Thy1-GCaMP6s Transgenic Mice

Thy1を用いた一次体性感覚野における神経活動のイメージング-GCaMP6s トランスジェニック マウス

The mammalian brain exhibits marked symmetry across the sagittal plane. However, detailed description of neural dynamics in symmetric brain regions in ...

Exogenous Administration of Microsomes-associated Alpha-synuclein Aggregates to Primary Neurons As a Powerful Cell Model of Fibrils Formation

線維形成の強力な細胞モデルとして α-シヌクレインのミクロソーム関連付けられた集計一次ニューロンの外因性投与

For years, the inability of replicating formation of insoluble alpha-synuclein (&#945;S) inclusions in cell cultures has been a great limitation in the ...