Name: bioluminescence imaging of neuroinflammation in transgenic mice after peripheral inoculation of alpha-synuclein fibrils
Uploaded: 2017-04-13T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Bioluminescence Imaging of Neuroinflammation in Transgenic Mice After Peripheral Inoculation of Alpha-Synuclein Fibrils at JoVE.com

Авторы благодарят Ольгу Шарма, Тереса Хандт, и персонал микроскопии и животных объектов DZNE для технической поддержки.

Все процедуры, включая животных, были проведены с одобрения комитета защиты животных Северного Рейна-Вестфалии Государственного агентства по окружающей среде (LANUV). Животных содержали и уход в соответствии со стандартными условиями с 12 ч цикл свет / темнота и свободный доступ к пище и в...

<ol>
	<li>Aguzzi, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+biology:+Beyond+the+prion+principle.">Cell biology: Beyond the prion principle.</a> Nature. 459 (7249), 924-925 (2009).</li><li>Kordower, J. H., Chu, Y., Hauser, R. A., Freeman, T. B., Olanow, C. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lewy+body-like+pathology+in+long-term+embryonic+nigral+transplants+in+Parkinson's+disease.">Lewy body-like pathology in long-term embryonic nigral transplants in Parkinson's disease.</a> Nat Med. 14 (5), 504-506 (2008).</li><li>Li, J. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lewy+bodies+in+grafted+neurons+in+subjects+with+Parkinson's+disease+suggest+host-to-graft+disease+propagation.">Lewy bodies in grafted neurons in subjects with Parkinson's disease suggest host-to-graft disease propagation.</a> Nat Med. 14 (5), 501-503 (2008).</li><li>Hansen, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=alpha-Synuclein+propagates+from+mouse+brain+to+grafted+dopaminergic+neurons+and+seeds+aggregation+in+cultured+human+cells.">alpha-Synuclein propagates from mouse brain to grafted dopaminergic neurons and seeds aggregation in cultured human cells.</a> J Clin Invest. 121 (2), 715-725 (2011).</li><li>Masuda-Suzukake, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prion-like+spreading+of+pathological+alpha-synuclein+in+brain.">Prion-like spreading of pathological alpha-synuclein in brain.</a> Brain. 136 (4), 1128-1138 (2013).</li><li>Holmqvist, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Direct+evidence+of+Parkinson+pathology+spread+from+the+gastrointestinal+tract+to+the+brain+in+rats.">Direct evidence of Parkinson pathology spread from the gastrointestinal tract to the brain in rats.</a> Acta Neuropathol. 128 (6), 805-820 (2014).</li><li>Luk, K. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pathological+alpha-synuclein+transmission+initiates+Parkinson-like+neurodegeneration+in+nontransgenic+mice.">Pathological alpha-synuclein transmission initiates Parkinson-like neurodegeneration in nontransgenic mice.</a> Science. 338 (6109), 949-953 (2012).</li><li>Sacino, A. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induction+of+CNS+alpha-synuclein+pathology+by+fibrillar+and+non-amyloidogenic+recombinant+alpha-synuclein.">Induction of CNS alpha-synuclein pathology by fibrillar and non-amyloidogenic recombinant alpha-synuclein.</a> Acta Neuropathol Commun. 1, 38 (2013).</li><li>Sacino, A. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intramuscular+injection+of+alpha-synuclein+induces+CNS+alpha-synuclein+pathology+and+a+rapid-onset+motor+phenotype+in+transgenic+mice.">Intramuscular injection of alpha-synuclein induces CNS alpha-synuclein pathology and a rapid-onset motor phenotype in transgenic mice.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 111 (29), 10732-10737 (2014).</li><li>Mougenot, A. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prion-like+acceleration+of+a+synucleinopathy+in+a+transgenic+mouse+model.">Prion-like acceleration of a synucleinopathy in a transgenic mouse model.</a> Neurobiol Aging. 33 (9), 2225-2228 (2012).</li><li>Bartz, J. C., Kincaid, A. E., Bessen, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rapid+prion+neuroinvasion+following+tongue+infection.">Rapid prion neuroinvasion following tongue infection.</a> J Virol. 77 (1), 583-591 (2003).</li><li>Tamg&#252;ney, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measuring+prions+by+bioluminescence+imaging.">Measuring prions by bioluminescence imaging.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 106 (35), 15002-15006 (2009).</li><li>Watts, J. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transmission+of+multiple+system+atrophy+prions+to+transgenic+mice.">Transmission of multiple system atrophy prions to transgenic mice.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 110 (48), 19555-19560 (2013).</li><li>Breid, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuroinvasion+of+alpha-Synuclein+Prionoids+after+Intraperitoneal+and+Intraglossal+Inoculation.">Neuroinvasion of alpha-Synuclein Prionoids after Intraperitoneal and Intraglossal Inoculation.</a> J Virol. 90 (20), 9182-9193 (2016).</li><li>Giasson, B. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuronal+alpha-synucleinopathy+with+severe+movement+disorder+in+mice+expressing+A53T+human+alpha-synuclein.">Neuronal alpha-synucleinopathy with severe movement disorder in mice expressing A53T human alpha-synuclein.</a> Neuron. 34 (4), 521-533 (2002).</li><li>Zhu, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Non-invasive+imaging+of+GFAP+expression+after+neuronal+damage+in+mice.">Non-invasive imaging of GFAP expression after neuronal damage in mice.</a> Neurosci Lett. 367 (2), 210-212 (2004).</li><li>Bernis, M. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prion-like+propagation+of+human+brain-derived+alpha-synuclein+in+transgenic+mice+expressing+human+wild-type+alpha-synuclein.">Prion-like propagation of human brain-derived alpha-synuclein in transgenic mice expressing human wild-type alpha-synuclein.</a> Acta Neuropathol Commun. 3 (1), 75 (2015).</li><li>Gunther, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clinical+testing+and+spinal+cord+removal+in+a+mouse+model+for+amyotrophic+lateral+sclerosis+(ALS).">Clinical testing and spinal cord removal in a mouse model for amyotrophic lateral sclerosis (ALS).</a> J Vis Exp. (61), (2012).</li><li>Jackson-Lewis, V., Przedborski, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protocol+for+the+MPTP+mouse+model+of+Parkinson's+disease.">Protocol for the MPTP mouse model of Parkinson's disease.</a> Nat Protoc. 2 (1), 141-151 (2007).</li><li>Mathews, S. T., Plaisance, E. P., Kim, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+systems+for+westerns:+chemiluminescence+vs.+infrared+detection.">Imaging systems for westerns: chemiluminescence vs. infrared detection.</a> Methods Mol Biol. 536, 499-513 (2009).</li><li>Kim, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Exposure+to+bacterial+endotoxin+generates+a+distinct+strain+of+alpha-synuclein+fibril.">Exposure to bacterial endotoxin generates a distinct strain of alpha-synuclein fibril.</a> Sci Rep. 6, 30891 (2016).</li><li>Keller, A. F., Gravel, M., Kriz, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Live+imaging+of+amyotrophic+lateral+sclerosis+pathogenesis:+disease+onset+is+characterized+by+marked+induction+of+GFAP+in+Schwann+cells.">Live imaging of amyotrophic lateral sclerosis pathogenesis: disease onset is characterized by marked induction of GFAP in Schwann cells.</a> Glia. 57 (10), 1130-1142 (2009).</li><li>St&#246;hr, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Distinct+synthetic+Abeta+prion+strains+producing+different+amyloid+deposits+in+bigenic+mice.">Distinct synthetic Abeta prion strains producing different amyloid deposits in bigenic mice.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. , (2014).</li><li>Luk, K. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intracerebral+inoculation+of+pathological+alpha-synuclein+initiates+a+rapidly+progressive+neurodegenerative+alpha-synucleinopathy+in+mice.">Intracerebral inoculation of pathological alpha-synuclein initiates a rapidly progressive neurodegenerative alpha-synucleinopathy in mice.</a> J Exp Med. 209 (5), 975-986 (2012).</li><li>Recasens, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lewy+body+extracts+from+Parkinson+disease+brains+trigger+alpha-synuclein+pathology+and+neurodegeneration+in+mice+and+monkeys.">Lewy body extracts from Parkinson disease brains trigger alpha-synuclein pathology and neurodegeneration in mice and monkeys.</a> Ann Neurol. 75 (3), 351-362 (2014).</li><li>Sacino, A. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induction+of+CNS+alpha-synuclein+pathology+by+fibrillar+and+non-amyloidogenic+recombinant+alpha-synuclein.">Induction of CNS alpha-synuclein pathology by fibrillar and non-amyloidogenic recombinant alpha-synuclein.</a> Acta Neuropathol Commun. 1 (1), 38 (2013).</li><li>Peelaerts, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=alpha-Synuclein+strains+cause+distinct+synucleinopathies+after+local+and+systemic+administration.">alpha-Synuclein strains cause distinct synucleinopathies after local and systemic administration.</a> Nature. 522 (7556), 340-344 (2015).</li></ol>

Периферийные инъекции альфа-синуклеина фибрилл в брюшину Tg (M83 +/-: GFAP -luc +/-) мышей представляет собой метод , легкое , чтобы вызвать неврологическое заболевание , сопровождающееся нейровоспаления резюмировать важные характеристики синуклеинопатий. Аналогичным образом, ...

Существует все больше доказательств того, что альфа-синуклеин имеет характеристики, которые аналогичны прионный белок, в частности, в его способности к самостоятельным семенам и распространяющихся неправильному фолдинг между клетками и вдоль нервными путями. Это свойство альфа-синуклеина также упоминается как «прионов типа» или «prionoid», и подтверждается наблюдениями в трансплантации экспериментов, которые предполагают трансмиссивности неправильно свернутых альфа-синуклеина из пораженных нейронов вновь пересаженные здоровые нейроны 1, 2 , 3, 4. Кроме того, прямая инъекция альфа-неправильно свернутых синуклеина в мозг или на периферии, например, мышцы задних конечностей или кишечной стенки, приводит к распространению альфа-синуклеина патологии в дистальных отделах ЦНС 5, 6, 7, &lt;SUP класс = &quot;Xref&quot;&gt; 8, 9, 10. Мы проанализировали передачу альфа-синуклеина prionoids через периферийных маршрутов более подробно рассмотрены на вопрос, может ли неправильно уложенный альфа-синуклеина neuroinvade ЦНС после однократного intraglossal или внутрибрюшинного введения, функцию, которая ранее была показана для прионов, но не для неправильно свернутых альфа- синуклеин. После инъекции прионов в язык, neuroinvasion ЦНС достигается с помощью распространения вдоль подъязычного нерва языка , что приводит к ядру подъязычного нерва, который расположен в стволе головного мозга 11. В мышиной модели мы выбрали Tg (M83 +/-: GFAP -luc +/-) мышей , которые сверхэкспрессируют A53T мутант человеческого альфа-синуклеина от промотора приона и люциферазы светлячка под контролем промотора GFAP астроцитов , чтобы контролировать активацию биолюминесценции, как ранее показано, в головном мозгеприон-инфицированных мышей 12. В наших руках bigenic Tg (M83 +/-: GFAP -luc +/-) мышей не развивается болезнь до 23 месяцев , как было показано , другие 13. Однократное введение альфа-синуклеина фибрилл человека через intraglossal или внутрибрюшинно индуцированных заболеваний неврологического с патологией в головном мозге и спинном мозге Tg (M83 +/-: GFAP -luc +/-) мышей , поддерживающих гипотезу о том, что альфа-синуклеина prionoids делиться важными характеристиками с прионов 14.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>anti-actin antibody</td>
			<td>Merck Millipore</td>
			<td>MAB1501</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>anti-alpha-synuclein, phospho S129 antibody [pSyn#64]</td>
			<td>Wako</td>
			<td>015-25191</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>anti-alpha-synuclein, phospho S129 antibody [EP1536Y]</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab51253</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>anti-GFAP antibody</td>
			<td>Dako</td>
			<td>Z0334 01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>anti-IBA-1 antibody</td>
			<td>Wako</td>
			<td>019-19741</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>anti-Sequestosome-1 (p62) antibody</td>
			<td>Proteintech</td>
			<td>18420-1-AP</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>anti-ubiquitin antibody [Ubi-1]</td>
			<td>Merck Millipore</td>
			<td>MAB1510</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate-buffered saline (PBS)</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>14190169</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ketamine&#160;</td>
			<td>Ratiopharm</td>
			<td></td>
			<td>100 mg/kg</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xylazine</td>
			<td>Ratiopharm</td>
			<td></td>
			<td>10 mg/kg</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>27-gauge syringe</td>
			<td>VWR</td>
			<td>613-4900</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane&#160;</td>
			<td>Piramal Healthcare</td>
			<td>PZN&#160; 4831850</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Depilatory cream</td>
			<td>Veet</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Secureline lab marker&#160;</td>
			<td>Neolab</td>
			<td>25040</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>D-luciferin potassium salt</td>
			<td>Acris</td>
			<td>LK10000</td>
			<td>30 mg/mL stock solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Thermomixer</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>5776671</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sonopuls Mini20 sonicator</td>
			<td>Bandelin</td>
			<td>3648</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>IVIS Lumina II imaging system</td>
			<td>PerkinElmer</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Living Image 3.0 Software</td>
			<td>PerkinElmer</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tg(M83+/-) mice or B6;C3-Tg(Prnp-SNCA*A53T)83Vle/J mice</td>
			<td>The Jackson Laboratory</td>
			<td>004479</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Standard pattern forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>11000-16</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Narrow pattern forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>11002-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>N-laurylasarcosyl</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>L5125-100G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Optima Max-XP ultracentrifuge&#160;</td>
			<td>Beckman Coulter</td>
			<td></td>
			<td>TLA-110 rotor&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Thickwall polycarbonate tubes</td>
			<td>Beckman Coulter</td>
			<td>362305</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NuPAG Novex 4-12% Bis-Tris Midi Protein Gels</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>WG1401BOX</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HRP conjugated antibody</td>
			<td>Cayman</td>
			<td>Cay10004301-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>IR Dye 680 conjugated antibody&#160;</td>
			<td>LI-COR Biosciences</td>
			<td>926-68070</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SuperSignal West Dura Extended Duration Substrate</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>34075</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stella 3200 imaging system</td>
			<td>Raytest</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Odyssey infrared imaging system&#160;</td>
			<td>LI-COR Biosciences</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tween 20&#160;</td>
			<td>MP Biomedicals</td>
			<td>TWEEN201</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Triton X-100</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>SA/T8787</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Immobilon-FL PVDF membrane</td>
			<td>Merck Millipore</td>
			<td>IPFL00010</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xylol</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>Roth</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hydrogen peroxide</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>SA/00216763/000500</td>
			<td>working solution 3%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bovine serum albumine (BSA)&#160;</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>A3294-100G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Goat serum</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>PCN5000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4,6-diamidino-2-phenylindole (DAPI)</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>D1306</td>
			<td>working dilution 1:50,000</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluoromount media&#160;</td>
			<td>Omnilab</td>
			<td>SA/F4680/000025</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LSM700 confocal laser scanning microscope</td>
			<td>Carl Zeiss</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HALT protease and phosphatase inhibitors</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific&#160;</td>
			<td>10516495</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Precellys 24-Dual homogenizer&#160;</td>
			<td>Peqlab</td>
			<td>91-PCS24D</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alexa Fluor 488 conjugated antibody</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>A31619</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alexa Fluor 594 conjugated antibody</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>A11005</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pierce&#160;BCA&#160;Protein&#160;Assay&#160;Kit</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>10741395</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microtome RM2255</td>
			<td>Leica</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LSM700 confocal laser scanning microscope</td>
			<td>Carl Zeiss</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

bioluminescence imaging of neuroinflammation in transgenic mice after peripheral inoculation of alpha-synuclein fibrils

Для изучения прионов, как поведение неправильно свернутых альфа-синуклеина, мышиные модели необходимы, что позволяет быстро и просто передавать альфа-синуклеина prionoids, которые вызывают невропатологии в пределах центральной нервной системы (ЦНС). Здесь мы описываем , что intraglossal или внутрибрюшинную инъекцию альфа-синуклеина фибрилл в bigenic Tg (M83 +/-: GFAP -luc +/-) мышей, которым гиперэкспрессией человеческий альфа-синуклеина с мутацией A53T от промотора прионного белка и люциферазы светлячка из промотор для глиальных фибриллярного кислого белка (GFAP), является достаточным , чтобы вызвать заболевание нейропатологического. По сравнению с гомозиготной Tg (M83 + / +) мышей , которые развиваются тяжелые неврологические симптомы , начиная в возрасте 8 месяцев, гетерозиготных Tg (M83 +/-: GFAP -luc +/-) животные остаются свободными от спонтанного заболевания , пока они не достигнут возраст 22 месяцев. Интересно, что инъекция альфа-синуклеина фибрилл через intraperitoneаль маршрут индуцированное неврологическое заболевание с параличами в четырех из пяти Tg (M83 +/-: GFAP -luc +/-) мышей со средним временем инкубации 229 ± 17 дней. Пораженные животные показали серьезные отложения фосфорилированного альфа-синуклеина в мозге и спинном мозге. Скопление альфа-синуклеин было саркозили-нерастворимым и локализуется с убиквитиным и p62, и сопровождался воспалительной реакция, в результате чего астроцитов глиоза и microgliosis. Удивительно, но инокуляция альфа-синуклеина фибрилл в язык был менее эффективен в возникновении болезни только с одним из пяти инъецированных животных с альфа-синуклеина патологии после 285 дней. Наши результаты показывают , что прививка через intraglossal маршрута и тем более через внутрибрюшинно подходит для индукции неврологического заболевания с соответствующим клеймом синуклеинопатий в Tg (M83 +/-: GFAP -luc +/-) мышей. Это дает новую модель для изучения прионов-как патогенез индуцируютd с помощью альфа-синуклеина prionoids более подробно.

Периферийные инъекции альфа-синуклеина prionoids с помощью языка или брюшины индуцированной невропатологии в ЦНС bigenic Tg (M83 +/-: GFAP -luc +/-) мышей (таблица 1 и рисунок 1). После однократного внутрибрюшинного введения с альфа-синуклеина фибрилл, ...

Watch this Scientific Journal Video about Bioluminescence Imaging of Neuroinflammation in Transgenic Mice After Peripheral Inoculation of Alpha-Synuclein Fibrils at JoVE.com

Bioluminescence Imaging of Neuroinflammation in Transgenic Mice After Peripheral Inoculation of Alpha-Synuclein Fibrils

Периферийные инъекции альфа-синуклеина фибрилл в брюшину или языком Tg (M83 +/-: GFAP -luc +/-) мышей, которые экспрессируют человеческий альфа-синуклеина с наследственной мутации A53T и люциферазы светлячка, может вызвать невропатологии, в том числе нейровоспаления , в их центральной нервной системе.

Биолюминесценция Визуализация нейровоспаления у трансгенных мышей после инокуляции периферической альфа-синуклеина фибрилл

To study the prion-like behavior of misfolded alpha-synuclein, mouse models are needed that allow fast and simple transmission of alpha-synuclein ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

A Thin-skull Window Technique for Chronic Two-photon In vivo Imaging of Murine Microglia in Models of Neuroinflammation

A Thin-skull Window Technique for Chronic Two-photon In vivo Imaging of Murine Microglia in Models of Neuroinflammation

Тонкие черепа Window Техника для Хронический Двухфотонное В естественных условиях Визуализация мышей микроглии в моделях Neuroinflammation

Traditionally in neuroscience, in vivo two photon imaging of the murine central nervous system has either involved the use of open-skull1,2 or ...

Oral Administration of Rotenone using a Gavage and Image Analysis of Alpha-synuclein Inclusions in the Enteric Nervous System

Устные Администрации Ротенон использованием принудительного кормления и анализ изображений Альфа-синуклеина включений в кишечной нервной системы

In Parkinson's disease (PD) patients, the associated pathology follows a characteristic pattern involving inter alia the enteric nervous system (ENS) 1,2, ...

Live Imaging of Dorsal Root Axons after Rhizotomy

Живая съемка Спинной Аксоны Корневая после ризотомия

The primary sensory axons injured by spinal root injuries fail to regenerate into the spinal cord, leading to chronic pain and permanent sensory loss. ...

Generation of Topically Transgenic Rats by In utero Electroporation and In vivo Bioluminescence Screening

Generation of Topically Transgenic Rats by In utero Electroporation and In vivo Bioluminescence Screening

Генерация Тематически трансгенных крыс<em&gt; В утробе матери</em&gt; Электропорацию и<em&gt; В естественных условиях</em&gt; Биолюминесценция Скрининг

 In utero electroporation (IUE) is a technique which allows genetic modification of cells in the brain for investigating neuronal development. So far, the ...

Transplantation of Olfactory Ensheathing Cells to Evaluate Functional Recovery after Peripheral Nerve Injury

Трансплантация Обонятельная оболочечная клеток для оценки функционального восстановления после периферической нервной травмы

Olfactory ensheathing cells (OECs) are neural crest cells which allow growth and regrowth of the primary olfactory neurons. Indeed, the primary olfactory ...

Fluorescence and Bioluminescence Imaging of Subcellular Ca2+ in Aged Hippocampal Neurons

Fluorescence and Bioluminescence Imaging of Subcellular Ca2+ in Aged Hippocampal Neurons

Флуоресценции и Биолюминесценция изображений субклеточных Ca<sup&gt; 2+</sup&gt; У пожилых нейронов гиппокампа

Susceptibility to neuron cell death associated to neurodegeneration and ischemia are exceedingly increased in the aged brain but mechanisms responsible ...

Sequential Extraction of Soluble and Insoluble Alpha-Synuclein from Parkinsonian Brains

Последовательное извлечение растворимых и нерастворимых Альфа-синуклеина из Паркинсона Brains

Alpha-synuclein (&#945;-syn) protein is abundantly expressed mainly within neurons, and exists in a number of different forms - monomers, tetramers, ...

Imaging Neural Activity in the Primary Somatosensory Cortex Using Thy1-GCaMP6s Transgenic Mice

Imaging Neural Activity in the Primary Somatosensory Cortex Using Thy1-GCaMP6s Transgenic Mice

Imaging нейронной активности в первичной соматосенсорной коры, с помощью Thy1-GCaMP6s трансгенных мышей

The mammalian brain exhibits marked symmetry across the sagittal plane. However, detailed description of neural dynamics in symmetric brain regions in ...

Exogenous Administration of Microsomes-associated Alpha-synuclein Aggregates to Primary Neurons As a Powerful Cell Model of Fibrils Formation

Администрации экзогенных микросом связанные альфа synuclein агрегатов для первичной нейроны как мощный ячеечная модель формирования фибрилл

For years, the inability of replicating formation of insoluble alpha-synuclein (&#945;S) inclusions in cell cultures has been a great limitation in the ...