Name: assessment of spontaneous alternation, novel object recognition and limb clasping in transgenic mouse models of amyloid-&#946; and tau neuropathology
Uploaded: 2017-05-28T13:00:00
Duration: 10 min 2 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Assessment of Spontaneous Alternation, Novel Object Recognition and Limb Clasping in Transgenic Mouse Models of Amyloid-ÃŽÂ² and Tau Neuropathology at JoVE.co

المؤلفين ليس لديهم اعترافات.

<ol>
	<li>Elder, G. A., Gama Sosa, M. A., De Gasperi, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transgenic+mouse+models+of+Alzheimer's+disease.">Transgenic mouse models of Alzheimer's disease.</a> Mt Sinai J Med. 77 (1), 69-81 (2010).</li><li>Onos, K. D., Sukoff Rizzo, S. J., Howell, G. R., Sasner, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Toward+more+predictive+genetic+mouse+models+of+Alzheimer's+disease.">Toward more predictive genetic mouse models of Alzheimer's disease.</a> Brain Res Bull. 122, 1-11 (2016).</li><li>Webster, S. J., Bachstetter, A. D., Nelson, P. T., Schmitt, F. A., Van Eldik, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Using+mice+to+model+Alzheimer's+dementia:+an+overview+of+the+clinical+disease+and+the+preclinical+behavioral+changes+in+10+mouse+models.">Using mice to model Alzheimer's dementia: an overview of the clinical disease and the preclinical behavioral changes in 10 mouse models.</a> Front Genet. 5, 88 (2014).</li><li>Rodgers, S. P., Born, H. A., Das, P., Jankowsky, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transgenic+APP+expression+during+postnatal+development+causes+persistent+locomotor+hyperactivity+in+the+adult.">Transgenic APP expression during postnatal development causes persistent locomotor hyperactivity in the adult.</a> Mol Neurodegener. 7, 28 (2012).</li><li>Hsiao, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Correlative+memory+deficits,+Abeta+elevation,+and+amyloid+plaques+in+transgenic+mice.">Correlative memory deficits, Abeta elevation, and amyloid plaques in transgenic mice.</a> Science. 274 (5284), 99-102 (1996).</li><li>Santacruz, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tau+suppression+in+a+neurodegenerative+mouse+model+improves+memory+function.">Tau suppression in a neurodegenerative mouse model improves memory function.</a> Science. 309 (5733), 476-481 (2005).</li><li>Crawley, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> What's wrong with my mouse? : behavioral phenotyping of transgenic and knockout mice. 2nd edn. , (2007).</li><li>Hughes, R. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+value+of+spontaneous+alternation+behavior+(SAB)+as+a+test+of+retention+in+pharmacological+investigations+of+memory.">The value of spontaneous alternation behavior (SAB) as a test of retention in pharmacological investigations of memory.</a> Neurosci Biobehav Rev. 28 (5), 497-505 (2004).</li><li>Rutala, W. A., Weber, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Guideline+for+disinfection+and+sterilization+in+healthcare+facilities.">Guideline for disinfection and sterilization in healthcare facilities.</a> Centers for Disease Control. , (2008).</li><li>Wes, P. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tau+overexpression+impacts+a+neuroinflammation+gene+expression+network+perturbed+in+Alzheimer's+disease.">Tau overexpression impacts a neuroinflammation gene expression network perturbed in Alzheimer's disease.</a> PLoS One. 9 (8), 106050 (2014).</li><li>Ennaceur, A., Delacour, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+one-trial+test+for+neurobiological+studies+of+memory+in+rats.+1:+Behavioral+data.">A new one-trial test for neurobiological studies of memory in rats. 1: Behavioral data.</a> Behav Brain Res. 31 (1), 47-59 (1988).</li><li>Taglialatela, G., Hogan, D., Zhang, W. R., Dineley, K. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intermediate-+and+long-term+recognition+memory+deficits+in+Tg2576+mice+are+reversed+with+acute+calcineurin+inhibition.">Intermediate- and long-term recognition memory deficits in Tg2576 mice are reversed with acute calcineurin inhibition.</a> Behav Brain Res. 200 (1), 95-99 (2009).</li><li>DeVito, L. M., Eichenbaum, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Distinct+contributions+of+the+hippocampus+and+medial+prefrontal+cortex+to+the+"what-where-when"+components+of+episodic-like+memory+in+mice.">Distinct contributions of the hippocampus and medial prefrontal cortex to the "what-where-when" components of episodic-like memory in mice.</a> Behav Brain Res. 215 (2), 318-325 (2010).</li><li>Lalonde, R., Strazielle, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Brain+regions+and+genes+affecting+limb-clasping+responses.">Brain regions and genes affecting limb-clasping responses.</a> Brain Res Rev. 67 (1-2), 252-259 (2011).</li><li>King, D. L., Arendash, G. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Behavioral+characterization+of+the+Tg2576+transgenic+model+of+Alzheimer's+disease+through+19+months.">Behavioral characterization of the Tg2576 transgenic model of Alzheimer's disease through 19 months.</a> Physiol Behav. 75 (5), 627-642 (2002).</li><li>Lalonde, R., Lewis, T. L., Strazielle, C., Kim, H., Fukuchi, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transgenic+mice+expressing+the+betaAPP695SWE+mutation:+effects+on+exploratory+activity,+anxiety,+and+motor+coordination.">Transgenic mice expressing the betaAPP695SWE mutation: effects on exploratory activity, anxiety, and motor coordination.</a> Brain Res. 977 (1), 38-45 (2003).</li><li>Lewis, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neurofibrillary+tangles,+amyotrophy+and+progressive+motor+disturbance+in+mice+expressing+mutant+(P301L)+tau+protein.">Neurofibrillary tangles, amyotrophy and progressive motor disturbance in mice expressing mutant (P301L) tau protein.</a> Nat Genet. 25 (4), 402-405 (2000).</li><li>Spittaels, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prominent+axonopathy+in+the+brain+and+spinal+cord+of+transgenic+mice+overexpressing+four-repeat+human+tau+protein.">Prominent axonopathy in the brain and spinal cord of transgenic mice overexpressing four-repeat human tau protein.</a> Am J Pathol. 155 (6), 2153-2165 (1999).</li><li>Terwel, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Changed+conformation+of+mutant+Tau-P301L+underlies+the+moribund+tauopathy,+absent+in+progressive,+nonlethal+axonopathy+of+Tau-4R/2N+transgenic+mice.">Changed conformation of mutant Tau-P301L underlies the moribund tauopathy, absent in progressive, nonlethal axonopathy of Tau-4R/2N transgenic mice.</a> J Biol Chem. 280 (5), 3963-3973 (2005).</li><li>Merrow, M., Spoelstra, K., Roenneberg, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+circadian+cycle:+daily+rhythms+from+behaviour+to+genes.">The circadian cycle: daily rhythms from behaviour to genes.</a> EMBO Rep. 6 (10), 930-935 (2005).</li><li>Smarr, B. L., Jennings, K. J., Driscoll, J. R., Kriegsfeld, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+time+to+remember:+the+role+of+circadian+clocks+in+learning+and+memory.">A time to remember: the role of circadian clocks in learning and memory.</a> Behav Neurosci. 128 (3), 283-303 (2014).</li><li>Kandel, E. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+molecular+biology+of+memory+storage:+a+dialogue+between+genes+and+synapses.">The molecular biology of memory storage: a dialogue between genes and synapses.</a> Science. 294 (5544), 1030-1038 (2001).</li><li>Stough, S., Shobe, J. L., Carew, T. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intermediate-term+processes+in+memory+formation.">Intermediate-term processes in memory formation.</a> Curr Opin Neurobiol. 16 (6), 672-678 (2006).</li><li>Stevens, L. M., Brown, R. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reference+and+working+memory+deficits+in+the+3xTg-AD+mouse+between+2+and+15-months+of+age:+a+cross-sectional+study.">Reference and working memory deficits in the 3xTg-AD mouse between 2 and 15-months of age: a cross-sectional study.</a> Behav Brain Res. 278, 496-505 (2015).</li><li>Yue, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Brain+estrogen+deficiency+accelerates+Abeta+plaque+formation+in+an+Alzheimer's+disease+animal+model.">Brain estrogen deficiency accelerates Abeta plaque formation in an Alzheimer's disease animal model.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 102 (52), 19198-19203 (2005).</li><li>McAllister, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+targeting+aromatase+in+male+amyloid+precursor+protein+transgenic+mice+down-regulates+beta-secretase+(BACE1)+and+prevents+Alzheimer-like+pathology+and+cognitive+impairment.">Genetic targeting aromatase in male amyloid precursor protein transgenic mice down-regulates beta-secretase (BACE1) and prevents Alzheimer-like pathology and cognitive impairment.</a> J Neurosci. 30 (21), 7326-7334 (2010).</li><li>Blaney, C. E., Gunn, R. K., Stover, K. R., Brown, R. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Maternal+genotype+influences+behavioral+development+of+3xTg-AD+mouse+pups.">Maternal genotype influences behavioral development of 3xTg-AD mouse pups.</a> Behav Brain Res. , 40-48 (2013).</li></ol>

يتم توظيف جم ليفنسون من قبل بروكلارا العلوم البيولوجية، وشركة C. ميدل، J. باتون، A. ميدل، و E. ميدل يعملون من قبل الحيوانات المختبر هيلتوب.

أهمية التقنية فيما يتعلق بالطرق القائمة وقد تم تصميم هذا الإجراء لفحص النشاط في الجسم الحي من المركبات في نماذج الماوس المعدلة وراثيا من β-الداء النشواني و تاوباثي. النهج المنهجية المستخدمة هنا يضمن الكشف عن المركبات الفعالة في المجالات المعرفية ذات الصلة إلى م 3 . وعلاوة على ذلك، فإن النهج المفصل هنا يستخدم الاختبارات السلوكية التي لها نقاط النهاية المحددة بوضوح، يمكن تنفيذها بسهولة ضوابط مراقبة الجودة، ويمكن تشغيلها في شكل الإنتاجية المعتدلة، وتتطلب القليل من التدخل من المحقق. وتؤدي هذه الخصائص إلى مقايسات تظهر قابلية استنساخ جيدة داخل الحيوانات وعبر الأفواج، مما يؤدي إلى تباين منخفض بين المقايسات وبين الأحجام (2 ≤ f ≤6) تكون قوية بما فيه الكفاية لدعم التنميط السلوكي في بيئة اكتشاف العقاقير. خطوات حاسمة داخل العلاقات العامةotocol العديد من نماذج الماوس في استخدام أد اكتشاف المخدرات سلوكيات تتفق مع القلق والعدوان. وهذا يجعل التعامل مع التعاقد ضروري لأداء أي من الاختبارات السلوكية الموصوفة هنا. كما تعتمد هذه الاختبارات على السلوكيات غير محرض، التعامل مع الخام من قبل المحقق بسبب الماوس مفرط الحركة أو القلق أو العدوانية يمكن أن تؤثر بشكل كبير على الأداء. قد يؤدي القلق المتزايد إلى الفشل في أداء المهمة، مما يقلل من القدرة الكلية للاختبار. وعلاوة على ذلك، فإن مستويات الضوء في الساحة ضرورية لتسهيل الحركة التلقائية اللازمة لكل اختبار. الضوء الساطع يميل إلى زيادة القلق وقمع الحركة في القوارض، ولذلك ينبغي توخي الحذر لضبط مستويات الإضاءة المحيطة إلى 30-35 لوكس في الساحة. جانب آخر هام من الإجراءات هو التقليل من الإشارات البيئية القوية التي من شأنها أن تتداخل مع قدرة الحيوان على أداء المهام. تنظيفالساحة والكائنات في بين أشواط أمر ضروري كما تنجذب الفئران إلى الروائح الجديدة في البيئة. الفشل في تنظيف شامل الساحة والكائنات يمكن أن يؤدي إلى الانحراف عفوية النشاط من الماوس وإخفاء الأداء المعرفي الحقيقي. يجب على المحققين أيضا تقليل استخدام منتجات النظافة الشخصية والكولونيا / العطور عند تنفيذ هذه الإجراءات. وأخيرا، تظهر القوارض تغيرات نهارية ودقيقة في العديد من السلوكيات العلنية 20 بما في ذلك التعلم والذاكرة 21 . لذلك، للحد من التباين بسبب الإيقاعات النهارية في السلوكيات القاعدية والأداء المعرفي، وينبغي أن يتم جميع الاختبارات في نفس الوقت من اليوم عبر الأفواج والدراسات. وعلاوة على ذلك، وعلى وجه التحديد فيما يتعلق التعرف على الكائنات الجديدة، والفترة الزمنية تأخير بين العينة ومرحلة الاختبار، واختيار ووضع الكائنات في البيئة هي معلمات حاسمة. الذاكرة موجودة في 3 أشكال متميزة: ميم قصيرة الأجلأوري (ستم) والذاكرة متوسطة المدى (إيتم) والذاكرة طويلة المدى (لتم) 22 ، 23 . تغيير الفاصل الزمني بين العينة ومراحل الاختبار من دقائق (ستم) إلى ساعات (إيتم) أو أيام (لتم) تغيير نوع الذاكرة اختبارها من قبل الإجراء 12 . وعلاوة على ذلك، قبل تشغيل اختبار التعرف على الكائن الرواية، يجب أن يتم فحص العديد من الكائنات في مجموعة من الفئران اختبار للتحيزات المحتملة في الاستكشاف. لا يمكن استخدام الكائن الذي يكون جذابا أو مفرطا بشكل مفرط لفوج الاختبار عند تقييم التعرف على الكائنات الجديدة. من الناحية المثالية جميع الكائنات التي سيتم استخدامها في الاختبار، عند وضعها في الساحة، وسوف تثير مرات الاستكشاف متساوية من أترابية ساذجة من الفئران. اختبار غير كافية والتحسين من الكائنات يمكن أن تقلل بشكل كبير من قوة التعرف على الكائنات الجديدة. التعديلات واستكشاف الأخطاء وإصلاحها هناك العديد من العوامل التي يمكن أن تزيدتباين واضح في الاختبارات المعرفية الموصوفة هنا. العديد من نماذج الماوس من أد عرض تحرك فرط الديناميكية 3 التي يمكن أن تخفي أو تغيير السلوكيات تقاس كنقطة نهاية المعرفية. وعلاوة على ذلك، هناك أدلة متزايدة على أن الجنس 24 ، 25 ، 26 وحتى النمط الوراثي الأمهات 27 يمكن أن تؤثر على تطور وتطور الاعتلال العصبي والنماذج الظاهرية المعرفية في نماذج الماوس أد. يمكن أن يكون التقلب غير المتوقع أو الفشل في تنفيذ مهمة سلوكية بسبب أي من هذه العوامل. عند تنفيذ أول اختبار سلوكي معين، ينبغي دائما أن تكون الطبقات الطبقية حسب الجنس والعمر وإذا كان ذلك ينطبق، النمط الوراثي الأمهات. وعلاوة على ذلك، ينبغي إجراء فحوص الجودة المبينة في هذا الإجراء دائما للتأكد من أن فرط النشاط أو غيرها من السلوكيات النمطية لا تتدخل في القياس الكمي للنقاط المعرفية. الحياة الفطريةيمكن تسليط الضوء أيضا على السلوك الاستكشافي العفوي من القوارض. الروائح أو الأصوات التي لا يمكن الكشف عنها للباحثين يمكن أن تجذب أو صد الفئران، انحراف نتائج الاختبارات المعرفية التي تعتمد على السلوك العفوي. عند تأسيس Y- متاهة أو التعرف على الأشياء الجديدة في البداية، وأداء تدابير السيطرة لضمان عدم وجود التحيزات الموضعية في استكشاف الكائنات و / أو البيئة أمر ضروري. إذا لوحظ التحيزات الموضعية، يجب على المحققين أن يدققوا بدقة في البيئة ويحتملون تعديل الإضاءة ووضع الساحة وموقع غرفة الاختبار بالنسبة للغرف الأخرى في المنشأة ( أي ليس بالقرب من منطقة ترافيك عالية أو معدات ثقيلة) وإجراءات تنظيف الساحة. إن التعود على بيئة الاختبار هو المفتاح لتحقيق الأداء الأمثل في اختبار التعرف على الأشياء الجديدة. على سبيل المثال، قد يكون انخفاض أوقات الاستكشاف الكلي بسبب عدم كفاية التعود. كبديل ل بروك(القسم 2) والساحة (القسم 4.2) التعود، والتعامل مع المناولة وبيئة الاختبار يمكن أن يؤديها 3، 5 جلسات دقيقة يوميا لمدة 2 أيام متتالية. قيود التقنية كما هو الحال مع أي إجراء، هذه الاختبارات السلوكية لديها قيود. وقد استخدمت هذه الإجراءات لأنها اختبار وظيفة من مختلف المناطق القشرية والحصين. إذا كان نموذج الماوس لا يظهر عجز وظيفي في مناطق الدماغ التي تم فحصها من قبل هذه الاختبارات، ثم هذه التقنيات لن تكون مفيدة. وعلاوة على ذلك، اخترنا الاختبارات المعرفية التي تحقق الذاكرة على المدى القصير. إذا كان من غير المتوقع أن تؤثر آلية عمل المركب تحت التقييم قبل السريرية على الذاكرة قصيرة الأجل، فيجب تعديل هذه الإجراءات وفقا لذلك ( أي زيادة الفاصل الزمني للاختبار عينة الاختبار لاختبار الذاكرة طويلة المدى). وأخيرا، تستخدم هذه الاختبارات سلوكيات غير محفزة. لذلك، إذا كان نموذج الماوس هو إكسيسسمفرط النشاط أو يعرض سلوكيات نمطية أخرى تحول دون استكشاف البيئة، فقد لا تكون هذه الإجراءات الأمثل. كبديل، يمكن للمرء أن استخدام تكييف الخوف ل Tg2576 أو غيرها من نماذج β-اميلويدوسيس الماوس، أو متاهة المياه المكانية ل rTg4510 أو نماذج الماوس الأخرى من تاوباثي 3 . تطبيقات المستقبل مرة واحدة وقد تم اعتماد هذه الإجراءات بنجاح في المختبر، ويمكن إجراء العديد من التعديلات أو التمديدات لتقييم التدابير الحركية المعرفية والوظيفية إضافية. على سبيل المثال، تغيير مهمة التعرف على الكائنات الجديدة لتحديد ما إذا كان الماوس يمكن التعرف على تغيير في موضع كائن 13 . بدلا من ذلك، بدلا من استخدام الكائنات، يمكن للمرء أن استخدام الفئران الأخرى وتنفيذ اختبار الاعتراف الاجتماعي. وفيما يتعلق بالتشابك الأطراف والوظيفة الحركية، يمكن للمرء أن تكمل هذا الاختبار مع سلك تعليق و / أو اختبارات قوة قبضة. الإختباراتمفصلة في هذا الأسلوب تشكل قاعدة صلبة لفحص المركبات التي لها في الجسم الحي فعالية في نماذج الماوس متعدية ل أد، ويمكن تكييفها أو تعديلها في العديد من الطرق لأفضل استجواب نموذج ماوس معين أو تلبية احتياجات برنامج اكتشاف المخدرات فريدة من نوعها .

مرض الزهايمر (أد) هو اضطراب تنكس عصبي تقدمي مما يؤدي إلى تراجع الإدراك المعرفي الذي يؤثر على حوالي 44 مليون شخص في جميع أنحاء العالم. حاليا لا توجد علاجات المتاحة ل أد التي هي تعديل المرض، مؤكدا على الحاجة الماسة إلى الاكتشاف قبل السريرية من الاستراتيجيات العلاجية الجديدة لهذا المرض. تم إنشاء عدد من نماذج الماوس المعدلة وراثيا المختلفة التي تلخص جوانب مختلفة من م 1 ، 2 ، بما في ذلك العجز في المجالات المعرفية تعطلت في المرضى 3 . هذه النماذج الماوس تمثل أداة مفيدة لتسهيل الفحص الفعال في الجسم الحي . عند تقييم مركب لإمكانية في فعالية الجسم الحي ، يجب اتخاذ نهج مرحلي أن شاشات للفعالية في المجالات المعرفية المناسبة وأيضا مراقبة السلوكيات التي يمكن أن تؤثر على نقاط النهاية المحددة المستخدمة فيسيس الإدراك. العديد من نماذج الماوس المعدلة وراثيا من أد المعرض فرط النشاط والسلوكيات الأخرى التي قد تتداخل مع اختبار معرفي معين، وتحظر استخدامه في فحص المخدرات 4 . وعلاوة على ذلك، لنهج يتم تنفيذها في بيئة فحص المخدرات، ينبغي أن الاختبارات الخاصة المستخدمة الحفاظ على ما لا يقل عن الإنتاجية المعتدلة، ونقاط النهاية المحددة بوضوح، والإجراءات التي تتطلب الحد الأدنى من التدخل من قبل المحققين. وباستخدام هذه المعايير، يمكن تنفيذ الشاشات السلوكية التي تظهر قابلية الاستنساخ، وتفاوت التباين داخل المقايسة وفيما بينها، وأبعاد التأثير اللازمة للفحص المركب. مفصلة هنا هي الطرق التي استخدمناها لفحص المركبات الفعالة في التخفيف من المظاهر الحركية المعرفية والحركية الموجودة في نماذج الماوس المعدلة وراثيا من β-الداء النشواني و تاوباثي 5 ، 6 . يتم تكييف الأساليب الموصوفة من النماذج السلوكية الشائعة الاستخدام المبلغ عنها في lإيتيراتور 7 ، مع التحسينات المحددة والتحقق من جودة الرقابة بحيث يمكن استخدامها في نماذج الماوس المعدلة وراثيا ذات الصلة إلى م. هذا البروتوكول يمكن استخدامها مع مجموعة متنوعة من الحصول على البيانات ونظم التحليل ويفترض أن المحقق لديه معرفة عملية من البرامج المرتبطة بها.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="1375">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:216px;">Topscan Lite-High Throughput</td>
			<td style="width:211px;">Cleversys</td>
			<td style="width:136px;"></td>
			<td style="width:812px;">Automated behavioral analysis. Includes cameras and video acquisition system, laptop.</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:216px;">ObjectScan</td>
			<td style="width:211px;">Cleversys</td>
			<td style="width:136px;"></td>
			<td>Software module for accurate object exploration quantification</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:216px;">Open field for mouse</td>
			<td style="width:211px;">Cleversys</td>
			<td style="width:136px;">CSI-OF-M</td>
			<td>Arena for novel object recognition</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:216px;">Y-maze for mouse</td>
			<td style="width:211px;">Custom</td>
			<td style="width:136px;"></td>
			<td>Arms: 30cm long, 10 cm wide, 20cm high walls, placed 120deg apart.</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:216px;">Camera mount for open field</td>
			<td style="width:211px;">Custom</td>
			<td style="width:136px;">Custom</td>
			<td>76 cm tall, 115 cm wide, cameras mounted @ 30cm in from either side.&#160; Two mounts, each covers two boxes.</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:216px;">Camera mount for Y-maze</td>
			<td style="width:211px;">Custom</td>
			<td style="width:136px;">Custom</td>
			<td>76 cm tall, 115 cm wide, cameras mounted @ 30cm in from either side.&#160; One mount covers two mazes.</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:216px;">Marbles</td>
			<td style="width:211px;">Inperial Toy</td>
			<td>8565</td>
			<td>Standard (15.5mm Dia) glass marbles.</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:216px;">Dice</td>
			<td style="width:211px;">Cardinal Industries</td>
			<td>770</td>
			<td>Standard (0.650 inch) white dice with black dots.</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:216px;">LOCTITE Fun-Tak</td>
			<td style="width:211px;">Henkel</td>
			<td>B018A3AG0W</td>
			<td>Standard blue sticky tak</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:216px;">EtOH</td>
			<td style="width:211px;">Nexeo Solutions</td>
			<td style="width:136px;">82452</td>
			<td>100% Ethanol Diluted to 70% using distilled Water</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:216px;">dH2O</td>
			<td style="width:211px;">Tulpenhocken Spring Water Co.</td>
			<td style="width:136px;">-</td>
			<td>PA D.E.P. #31, NJ D.O.H. #0049, NYSHD Cert. #320</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:216px;">Paper towels</td>
			<td style="width:211px;">Procter &#38; Gamble</td>
			<td>B019DM86LA</td>
			<td>Bounty, White</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:216px;">Handheld video camera</td>
			<td style="width:211px;">Apple, Inc.</td>
			<td style="width:136px;">MKV92LL/A</td>
			<td>Acquisition of Limb clasping video, Iphone 6S Plus (or functional equivalent).</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:216px;">Gloves</td>
			<td style="width:211px;">SafePOINT, L.L.C.</td>
			<td style="width:136px;">GL640-2</td>
			<td>Standard, Powder free Latex Gloves, Medium</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:216px;">Light meter</td>
			<td style="width:211px;">Dr. Meter</td>
			<td style="width:136px;">LX1330B</td>
			<td>Lighting @ the bottom of Open Field= 35 LUX, Lighting @ bottom of Y-Maze= 32 LUX</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Bleach germicidal wipes</td>
			<td style="width:211px;">Clorox</td>
			<td style="width:136px;"></td>
			<td>Sterilization of equipment during &#38; after use</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

assessment of spontaneous alternation, novel object recognition and limb clasping in transgenic mouse models of amyloid-&#946; and tau neuropathology

نحن هنا وصف منهج اختبار السلوكية نظموا التي يمكن استخدامها لفحص للمركبات التي تظهر في فعالية الجسم الحي على السلوكيات المعرفية والحركية وظيفية في نماذج الماوس المعدلة وراثيا من β-الداء النشواني و تاوباثي. ويشمل النموذج اختبارات للتناوب التلقائي في Y- المتاهة، والتعرف على الكائن الرواية، وتصفيف الأطراف. وقد تم اختيار هذه الاختبارات لأنها: 1) استجواب وظيفة المجالات المعرفية أو الحركية والدوائر العصبية المترابطة ذات الصلة لدولة المرض البشري، 2) لها نقاط النهاية المحددة بوضوح، 3) يمكن بسهولة تنفيذ اختبارات مراقبة الجودة، 4) يمكن تشغيلها في صيغة إنتاجية معتدلة، و 5) تتطلب القليل من التدخل من قبل المحقق. وقد صممت هذه الأساليب للمحققين تبحث لمركبات الشاشة للنشاط في المهام على المدى القصير والذاكرة العاملة، أو السلوكيات الحركية وظيفية المرتبطة نماذج الفئران مرض الزهايمر. الطرق الموصوفة هنا تستخدم الاختبارات السلوكية التي إنغالعمر عدد من مناطق الدماغ المختلفة بما في ذلك قرن آمون ومختلف المناطق القشرية. المحققون الذين يرغبون في الاختبارات المعرفية التي تقيِّم على وجه التحديد الإدراك بوساطة منطقة دماغية واحدة يمكن أن تستخدم هذه التقنيات لتكملة الاختبارات السلوكية الأخرى.

المسنين Tg2576 الفئران المعرض عجز قوي في التناوب العفوي المحرز داخل Y- المتاهة 15 ، 16 ، النمط الظاهري التي يمكن تكرارها باستخدام أساليب مفصلة هنا ( الشكل 1A ). في حين لوحظ اتجاه لزيادة إدخالات الذراع في هذه الفئران ( الشكل 1B )، فرط النشاط لاحظ في هذا الخط من الفئران لم يؤثر على معدل التناوب العفوي ( الشكل 1C ). في المقابل، تظهر الفئران rtg4510 الذين تتراوح أعمارهم بين أن تظهر زيادة عفوية بالتناوب عند وضعها في Y- المتاهة ( الشكل 1D ). ويرجع ذلك إلى فرط النشاط ( الشكل 1E ) والقولبة 10 ، والتي تتداخل بشكل كبير مع قياس التناوب العفوي ( الشكل 1F ). عند تقييم الفئران في البداية في هذه المهمة، فمن الأهمية بمكان لضمان أن إدخالات الذراع و / أو المسافة المقطوعة ليست كذلكارتباطا كبيرا مع معدل التناوب العفوي. قبل تقييم التعرف على الكائنات الجديدة، يتم إعادتها الفئران إلى الساحة حيث سيتم تنفيذ الاختبار. خلال التعود، فرط النشاط ( الشكل 2A ) والسلوكيات النمطية الأخرى ذات الصلة لنموذج الماوس يمكن تقييمها. خلال مرحلة العينة، فمن الأهمية بمكان لقياس استكشاف كل كائن على حدة بحيث الفئران التي تظهر التحيزات كبيرة في السلوك الاستكشافي يمكن استبعادها من مزيد من التقييم ( الشكل 2B ، والدوائر المفتوحة). يتم تقييم رواية التعرف على الكائن من خلال مقارنة استكشاف كائن مألوف وروائي، ويتم تحليله بشكل شائع بثلاث طرق مختلفة. وإذا كان مجموع الوقت الاستكشافي قابلا للمقارنة عبر الأنماط الجينية و / أو مجموعات العلاج، يمكن عندئذ استخدام الوقت الخام لاستكشاف كل كائن واختبارات التدابير المتكررة المناسبة لتحديد ما إذا كانت هناك اختلافات في الكائن الجديد rالإدراك ( الشكل 2C ). إذا سلالة ماوس معين معارض الاختلافات في مجموع الوقت الاستكشافي، يمكن تقييم الاعتراف كائن رواية باستخدام إما تفضيل الجدة ( الشكل 2D ) أو مؤشر التمييز ( الشكل 2E ). تعشيق الطرف هو اختبار المحرك وظيفية التي تحدد العجز في وظيفة القشرية النخاعية. ويلاحظ التشابك الأطراف، وهو ليس مقياس المعرفي، في العديد من نماذج الماوس تاو المعدلة وراثيا 6 و 17 و 18 و 19 ويلخص بعض العجز في المحركات وظيفية لوحظ في المرضى في مرحلة متأخرة م. تعليق الفئران عن طريق الذيل يثير استجابة الهروب ( الشكل 3A ، &quot;0&quot;). العجز في القدرة على ترسب أطرافه الخلفية وتمديد أصابع القدم وسجل على أساس شدتها على مقياس من 0-4 ( الشكل 3أ). باستخدام الإجراء المبين في هذه الوثيقة، يمكن للمرء أن يلاحظ أطرافهم كبيرة التضمين في الفئران RTg4510 ( الشكل 3B ). <img alt="شكل 1" src="/files/ftp_upload/55523/55523fig1.jpg" /> الشكل 1: التناوب العفوي في Y- المتاهة. ( A ) عند وضعها في متاهة Y، الفئران تبني استراتيجية البحث انقسام التحول التي تؤدي إلى نمط من التنقيب حيث يتم استكشاف كل ذراع مرة واحدة فقط لكل 3 إدخالات الذراع. المسنين Tg2576 الفئران تظهر عجزا كبيرا في التناوب العفوي. باستخدام الإجراءات المبينة في هذه الطريقة، لوحظ استعادة كبيرة من التناوب العفوي بعد العلاج مع مركب الملكية. تم تحليل البيانات باستخدام 1-طريقة أنوفا ومقارنات ما بعد مخصصة ل تغ-بس أجريت باستخدام اختبار دونيت. ** p &lt;0.01. تشير أشرطة الخطأ سيم. ( B ) عدد من إدخالات الذراع لم يكن مختلفا بشكل كبير عبر أيمن المجموعات التي تم رصدها في هذه التجربة. تم تحليل البيانات باستخدام 1-طريقة أنوفا الاختبار. تشير أشرطة الخطأ سيم. ( C ) لم يكن هناك ارتباط بين التناوب العفوي وعدد من إدخالات الذراع جعلت، مشيرا إلى أن أي اختلافات في النشاط الحركي العفوي لم يؤثر على القياس الكمي للتناوب العفوي. تم إجراء اختبار الارتباط باستخدام تحليل ارتباط بيرسون. ( D ) عندما توضع في متاهة Y، RTg4510 الفئران (6 أشهر) ويبدو أن تظهر بشكل ملحوظ أكثر عفوية التناوب بالنسبة ليترمات وت الفئران. تم تحليل البيانات من قبل أنوفا 1-طريقة وأجريت مقارنات بعد إجراء تغ-بس باستخدام اختبار دونيت. ** p &lt;0.01. تشير أشرطة الخطأ سيم. ( E ) جعلت الفئران RTg4510 بشكل ملحوظ أكثر إدخالات الذراع بسبب الحر الشديد هيبيرديناميك. تم تحليل البيانات من قبل أنوفا 1-طريقة وأجريت مقارنات بعد إجراء تغ-بس باستخدام اختبار دونيت. *** p &lt;0.001. أشرطة الخطأ تشير سيM. ( F ) سلوك التناوب العفوي يرتبط ارتباطا كبيرا مع إدخالات الذراع، مشيرا إلى النمط الظاهري الحركي فرط الديناميكية تحجب التناوب العفوي الحقيقي. تم إجراء اختبار الارتباط باستخدام تحليل ارتباط بيرسون (r = 0.7، p &lt;0.0001). <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/55523/55523fig1large.jpg" target="_blank">الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.</a> <img alt="الشكل 2" src="/files/ftp_upload/55523/55523fig2.jpg" /> الشكل 2: التعرف على كائنات الرواية. ( A ) الساحة تصاريح العبور قياس الحركة العفوية والسلوكيات النمطية الأخرى ذات الصلة لنموذج ماوس معين. هنا، الذين تتراوح أعمارهم بين Tg2576 الفئران (22 الشهر) المعرض بشكل ملحوظ أكثر عفوية التنقل بالنسبة ليترمات وت الفئران. تم تحليل البيانات من قبل أنوفا 1-طريقة وأجريت مقارنات بعد تيج-فيه باستخدام دونيت &#39;s الاختبار. ** p &lt;0.01. تشير أشرطة الخطأ سيم. ( ب ) خلال مرحلة العينة، تم تعقب استكشاف كائنين متطابقين بشكل منفصل. تم استبعاد الفئران التي تظهر تحيزات كبيرة نحو استكشاف واحد من اثنين من الأجسام (دوائر مفتوحة) من مرحلة الاختبار. ( C - E ) تم تقييم رواية التعرف على الكائن من خلال قياس استكشاف رواية وجوه مألوفة. تم تقييم التعرف على الكائن الجديد باستخدام ( C ) وقت الاستكشاف الخام، ( D ) تفضيل الجدة أو ( E ) مؤشر التمييز. تم تحليل البيانات في لوحة C باستخدام 2-أنوفا أنوفا مع تدابير متكررة وأجريت مقارنات الزوجية باستخدام اختبار سيداك. تم تحليل البيانات في لوحات دي مع أنوفا في اتجاه واحد وبعد إجراء المقارنات ل تغ-فيه باستخدام اختبار دونيت. * p &lt;0.05، ** p &lt;0.01. تشير أشرطة الخطأ سيم. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/55523/55523fig2large.jpg" target="_blank">من فضلك اضغط</a>هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم. <img alt="الشكل 3" src="/files/ftp_upload/55523/55523fig3.jpg" /> الشكل 3: التشبيك أطرافه. ( A ) صور الممثل من الفئران التي تظهر درجات مختلفة من التصفيف أطرافهم كما هو موضح في الجدول 1. ( B ) RTg4510 الفئران (6 أشهر) تظهر كبيرة أطرافهم تسلق نسبة إلى ليترمات الفئران وت كما سجل باستخدام هذه الأساليب. تم تحليل البيانات باستخدام أنوفا 1-الطريقة وأجريت مقارنات ما بعد المخصصة ل تغ-بس باستخدام اختبار دونيت. *** p &lt;0.001، **** p &lt;0.0001. تشير أشرطة الخطأ سيم. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/55523/55523fig3large.jpg" target="_blank">الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.</a>

Watch this Scientific Journal Video about Assessment of Spontaneous Alternation, Novel Object Recognition and Limb Clasping in Transgenic Mouse Models of Amyloid-ÃŽÂ² and Tau Neuropathology at JoVE.co

Assessment of Spontaneous Alternation, Novel Object Recognition and Limb Clasping in Transgenic Mouse Models of Amyloid-ÃƒÆ’Ã…Â½Ãƒâ€šÃ‚Â² and Tau Neuropathology

وصف هنا هو نهج فرز السلوكية نظموا التي يمكن استخدامها لفحص للمركبات التي تظهر في فعالية الجسم الحي على السلوكيات الحركية المعرفية والوظيفية في نماذج الماوس المعدلة وراثيا من β-الداء النشواني و تاوباثي. يتم تحسين هذه الأساليب لمركبات الشاشة للنشاط في مهام الذاكرة قصيرة الأجل والعمل.

تقييم التناوب العفوي، التعرف على الكائن الرواية وتسلسل الأطراف في الماوس المعدلة وراثيا نماذج من اميلويد β وتاور الاعتلال العصبي

Here we describe a staged, behavioral testing approach that can be used to screen for compounds that exhibit in vivo efficacy on cognitive and functional ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Assessment of Spontaneous Alternation, Novel Object Recognition and Limb Clasping in Transgenic Mouse Models of Amyloid-&#946; and Tau Neuropathology

Longitudinal Evaluation of Mouse Hind Limb Bone Loss After Spinal Cord Injury using Novel, in vivo, Methodology

Longitudinal Evaluation of Mouse Hind Limb Bone Loss After Spinal Cord Injury using Novel, in vivo, Methodology

التقييم الطولي للهند ماوس الاطراف فقدان العظام بعد اصابة النخاع الشوكي به الرواية ، في الجسم الحي ، منهجية

Spinal cord injury (SCI) is often accompanied by osteoporosis in the sublesional regions of the pelvis and lower extremities, leading to a higher ...

A Novel Application of Musculoskeletal Ultrasound Imaging

تطبيق رواية من العظام والعضلات التصوير بالموجات فوق الصوتية

Ultrasound is an attractive modality for imaging muscle and tendon  motion during dynamic tasks and can provide a complementary methodological  approach ...

MRI and PET in Mouse Models of Myocardial Infarction

Myocardial infarction is one of the leading causes of death in the Western world. The similarity of the mouse heart to the human heart has made it an ...

Initiation of Metastatic Breast Carcinoma by Targeting of the Ductal Epithelium with Adenovirus-Cre: A Novel Transgenic Mouse Model of Breast Cancer

بدء النقيلي سرطان الثدي عن طريق استهداف ظهارة الأقنية مع اتش، لجنة المساواة العرقية: رواية المعدلة وراثيا نموذج الفأر من سرطان الثدي

Breast cancer is a heterogeneous disease involving complex cellular interactions between the developing tumor and immune system, eventually resulting in ...

High-frequency Ultrasound Imaging of Mouse Cervical Lymph Nodes

عالية التردد التصوير بالموجات فوق الصوتية للماوس عنق الرحم الغدد الليمفاوية

High-frequency ultrasound (HFUS) is widely employed as a non-invasive method for imaging internal anatomic structures in experimental small animal ...

Motor and Hippocampal Dependent Spatial Learning and Reference Memory Assessment in a Transgenic Rat Model of Alzheimer's Disease with Stroke

السيارات والحصين التعلم المكاني تابع وتقييم الذاكرة المرجعي في الفئران المعدلة وراثيا نموذج من مرض الزهايمر مع السكتة الدماغية

Alzheimer&#39;s disease (AD) is a debilitating neurodegenerative disease that results in neurodegeneration and memory loss. While age is a major risk ...

Orthotopic Hind Limb Transplantation in the Mouse

مثلي هند الاطراف زرع في ماوس

In vivo animal model systems, and in particular mouse models, have evolved into powerful and versatile scientific tools indispensable to basic and ...

An Orthotopic Mouse Model of Spontaneous Breast Cancer Metastasis

ونموذج الفأر مثلي من الثدي العفوي السرطان ورم خبيث

Metastasis is the primary cause of mortality of breast cancer patients. The mechanism underlying cancer cell metastasis, including breast cancer ...

Repeated Measurement of Respiratory Muscle Activity and Ventilation in Mouse Models of Neuromuscular Disease

القياس المتكرر التنفسي آخر العضلات والتهوية في نماذج الماوس من مرض عصبي عضلي

Accessory respiratory muscles help to maintain ventilation when diaphragm function is impaired. The following protocol describes a method for repeated ...

Assessment of Kidney Function in Mouse Models of Glomerular Disease

تقييم لوظيفة الكلي في نماذج الماوس من المرض الكبيبي

The use of murine models to mimic human kidney disease is becoming increasingly common. Our research is focused on the assessment of glomerular function ...