Name: protocols for investigating the host-tissue distribution, transmission-mode, and effect on the host fitness of a densovirus in the cotton bollworm
Uploaded: 2017-04-12T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Protocols for Investigating the Host-tissue Distribution, Transmission-mode, and Effect on the Host Fitness of a Densovirus in the Cotton Bollworm at JoVE.com

Diese Arbeit wurde von der National Key Grundlagenforschungsprogramm von China (Nr 2013CB127602) und der Wissenschaftsfond für kreative Forschungsgruppen von der National Science Foundation of China (Nr 31321004) unterstützt.

1. Aufbau des HaDV2 freien Cotton Bollworm Colony <ol><li> Hintere Baumwolleule Larven (H. armigera) auf einer künstliche Ernährung 32 in einem kontrollierten Wachstumsraum oder eine künstliche Klimakammer bei 25 ± 1 ° C mit 14 h Licht / 10 h Dunkelheit und 60% relativer Luftfeuchtigkeit. </li><li> Beihilfe einpaarigen Paarung von neu eclosed Motten durch einen Kunststoffkäfig pro Paar unter Verwendung von (10 cm Höhe, 5 cm Durchmesser) mit Baumwollgaze bedeckt guter Belüftung ...

<ol>
	<li>Tang, P., Chiu, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Metagenomics+for+the+discovery+of+novel+human+viruses.">Metagenomics for the discovery of novel human viruses.</a> Future Microbiol. 5, 177-189 (2010).</li><li>Rosario, K., Breitbart, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Exploring+the+viral+world+through+metagenomics.">Exploring the viral world through metagenomics.</a> Curr. Opin. Virol. 1, 289-297 (2011).</li><li>Hugenholtz, P., Tyson, G. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microbiology+-+metagenomics.">Microbiology - metagenomics.</a> Nature. 455, 481-483 (2008).</li><li>Kristensen, D. M., Mushegian, A. R., Dolja, V. V., Koonin, E. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=New+dimensions+of+the+virus+world+discovered+through+metagenomics.">New dimensions of the virus world discovered through metagenomics.</a> Trends Microbiol. 18, 11-19 (2010).</li><li>Kleiner, M., Hooper, L. V., Duerkop, B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+methods+to+purify+virus-like+particles+for+metagenomic+sequencing+of+intestinal+viromes.">Evaluation of methods to purify virus-like particles for metagenomic sequencing of intestinal viromes.</a> BMC Genomics. 16, 7 (2015).</li><li>Ho, T., Tzanetakis, I. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+a+virus+detection+and+discovery+pipeline+using+next+generation+sequencing.">Development of a virus detection and discovery pipeline using next generation sequencing.</a> Virology. 471, 54-60 (2014).</li><li>Marx, C. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Can+you+sequence+ecology?+Metagenomics+of+adaptive+diversification.">Can you sequence ecology? Metagenomics of adaptive diversification.</a> PLoS Biol. 11, e1001487 (2013).</li><li>Radford, A. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Application+of+next-generation+sequencing+technologies+in+virology.">Application of next-generation sequencing technologies in virology.</a> J. Gen. Virol. 93, 1853-1868 (2012).</li><li>Liu, S. J., Chen, Y. T., Bonning, B. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=RNA+virus+discovery+in+insects.">RNA virus discovery in insects.</a> Curr. Opin. Insect Sci. 8, 54-61 (2015).</li><li>Mokili, J. L., Rohwer, F., Dutilh, B. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Metagenomics+and+future+perspectives+in+virus+discovery.">Metagenomics and future perspectives in virus discovery.</a> Curr. Opin. Virol. 2, 63-77 (2012).</li><li>Liu, S. J., Vijayendran, D., Bonning, B. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Next+generation+sequencing+technologies+for+insect+virus+discovery.">Next generation sequencing technologies for insect virus discovery.</a> Viruses-Basel. 3, 1849-1869 (2011).</li><li>Cook, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Novel+virus+discovery+and+genome+reconstruction+from+field+RNA+samples+reveals+highly+divergent+viruses+in+Dipteran+hosts.">Novel virus discovery and genome reconstruction from field RNA samples reveals highly divergent viruses in Dipteran hosts.</a> PLoS ONE. 8, e80720 (2013).</li><li>Webster, C. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+discovery,+distribution,+and+evolution+of+viruses+associated+with+Drosophila+melanogaster.">The discovery, distribution, and evolution of viruses associated with Drosophila melanogaster.</a> PLoS Biol. 13, e1002210 (2015).</li><li>Granberg, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Metagenomic+detection+of+viral+pathogens+in+spanish+honeybees:+co-infection+by+aphid+lethal+paralysis,+israel+acute+paralysis+and+lake+sinai+viruses.">Metagenomic detection of viral pathogens in spanish honeybees: co-infection by aphid lethal paralysis, israel acute paralysis and lake sinai viruses.</a> PLoS ONE. 8, e57459 (2013).</li><li>Runckel, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Temporal+analysis+of+the+honey+bee+microbiome+reveals+four+novel+viruses+and+seasonal+prevalence+of+known+viruses,+Nosema,+and+Crithidia.">Temporal analysis of the honey bee microbiome reveals four novel viruses and seasonal prevalence of known viruses, Nosema, and Crithidia.</a> PLoS ONE. 6, 20656 (2011).</li><li>Cox-Foster, D. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+metagenomic+survey+of+microbes+in+honey+bee+colony+collapse+disorder.">A metagenomic survey of microbes in honey bee colony collapse disorder.</a> Science. 318, 283-287 (2007).</li><li>Chandler, J. A., Liu, R. M., Bennett, S. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=RNA+shotgun+metagenomic+sequencing+of+northern+California+(USA)+mosquitoes+uncovers+viruses,+bacteria,+and+fungi.">RNA shotgun metagenomic sequencing of northern California (USA) mosquitoes uncovers viruses, bacteria, and fungi.</a> Front. Microbiol. 6, 185 (2015).</li><li>Shi, C. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+metagenomic+survey+of+viral+abundance+and+diversity+in+mosquitoes+from+Hubei+province.">A metagenomic survey of viral abundance and diversity in mosquitoes from Hubei province.</a> PLoS ONE. 10, e0129845 (2015).</li><li>Nouri, S., Salem, N., Nigg, J. C., Falk, B. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diverse+array+of+new+viral+sequences+identified+in+worldwide+populations+of+the+Asian+citrus+psyllid+(Diaphorina+citri)+using+viral+metagenomics.">Diverse array of new viral sequences identified in worldwide populations of the Asian citrus psyllid (Diaphorina citri) using viral metagenomics.</a> J. Virol. 90, 2434-2445 (2016).</li><li>Dayaram, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+diverse+circular+single-stranded+DNA+viruses+in+adult+dragonflies+and+damselflies+(Insecta+Odonata)+of+Arizona+and+Oklahoma,+USA.">Identification of diverse circular single-stranded DNA viruses in adult dragonflies and damselflies (Insecta Odonata) of Arizona and Oklahoma, USA.</a> Infect. Genet. Evol. 30, 278-287 (2015).</li><li>Jakubowska, A. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simultaneous+occurrence+of+covert+infections+with+small+RNA+viruses+in+the+lepidopteran+Spodoptera+exigua.">Simultaneous occurrence of covert infections with small RNA viruses in the lepidopteran Spodoptera exigua.</a> J.Invert. Pathol. 121, 56-63 (2014).</li><li>Roossinck, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Move+over,+Bacteria!+Viruses+make+their+mark+as+mutualistic+microbial+symbionts.">Move over, Bacteria! Viruses make their mark as mutualistic microbial symbionts.</a> J. Virol. 89, 6532-6535 (2015).</li><li>Ryabov, E. V., Keane, G., Naish, N., Evered, C., Winstanley, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Densovirus+induces+winged+morphs+in+asexual+clones+of+the+rosy+apple+aphid,+Dysaphis+plantaginea.">Densovirus induces winged morphs in asexual clones of the rosy apple aphid, Dysaphis plantaginea.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 106, 8465-8470 (2009).</li><li>Roossinck, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+good+viruses:+viral+mutualistic+symbioses.">The good viruses: viral mutualistic symbioses.</a> Nat. Rev. Microbiol. 9, 99-108 (2011).</li><li>Venkataraman, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Structure+of+seneca+valley+virus-001:+an+oncolytic+picornavirus+representing+a+new+genus.">Structure of seneca valley virus-001: an oncolytic picornavirus representing a new genus.</a> Structure. 16, 1555-1561 (2008).</li><li>Deterding, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hepatitis+a+virus+infection+suppresses+hepatitis+c+virus+replication+and+may+lead+to+clearance+of+hcv.">Hepatitis a virus infection suppresses hepatitis c virus replication and may lead to clearance of hcv.</a> J. Hepatol. 45, 770-778 (2007).</li><li>Barton, E. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Herpesvirus+latency+confers+symbiotic+protection+from+bacterial+infection.">Herpesvirus latency confers symbiotic protection from bacterial infection.</a> Nature. 447, 326-329 (2007).</li><li>Ponferrada, V. G., Mauck, B. S., Wooley, D. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+envelope+glycoprotein+of+human+endogenous+retrovirus+herv-w+induces+cellular+resistance+to+spleen+necrosis+virus.">The envelope glycoprotein of human endogenous retrovirus herv-w induces cellular resistance to spleen necrosis virus.</a> Arch. Virol. 148, 659-675 (2003).</li><li>M&#225;rquez, L. M., Redman, R. S., Rodriguez, R. J., Roossinck, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+virus+in+a+fungus+in+a+plant:+three-way+symbiosis+required+for+thermal+tolerance.">A virus in a fungus in a plant: three-way symbiosis required for thermal tolerance.</a> Science. 315, 513-515 (2007).</li><li>Xu, P. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Complete+genome+sequence+of+a+monosense+densovirus+infecting+the+cotton+bollworm,+Helicoverpa+armigera.">Complete genome sequence of a monosense densovirus infecting the cotton bollworm, Helicoverpa armigera.</a> J. Virol. 86, 10909-10909 (2012).</li><li>Xu, P. J., Liu, Y. Q., Graham, R. I., Wilson, K., Wu, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Densovirus+is+a+mutualistic+symbiont+of+a+global+crop+pest+(Helicoverpa+armigera)+and+protects+against+a+baculovirus+and+Bt+biopesticide.">Densovirus is a mutualistic symbiont of a global crop pest (Helicoverpa armigera) and protects against a baculovirus and Bt biopesticide.</a> PLoS Pathog. 10, e1004490 (2014).</li><li>Liang, G. M., Tan, W. J., Guo, Y. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+improvement+in+the+technique+of+arti&#64257;cial+rearing+cotton+bollworm.">An improvement in the technique of arti&#64257;cial rearing cotton bollworm.</a> Plant Protec. 25, 15-17 (1999).</li><li>Zhou, W. G., Rousset, F., O'Neill, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Phylogeny+and+PCR-based+classification+of+Wolbachia+strains+using+wsp+gene+sequences.">Phylogeny and PCR-based classification of Wolbachia strains using wsp gene sequences.</a> P. Roy. Soc. B-Biol. Sci. 265, 509-515 (1998).</li><li>Mondet, F., de Miranda, J. R., Kretzschmar, A., Le Conte, Y., Mercer, A. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=On+the+front+line:+quantitative+virus+dynamics+in+honeybee+(Apis+mellifera+L.)+colonies+along+a+new+expansion+front+of+the+parasite+Varroa+destructor.">On the front line: quantitative virus dynamics in honeybee (Apis mellifera L.) colonies along a new expansion front of the parasite Varroa destructor.</a> PLoS Pathog. 10, e1004323 (2014).</li><li>Chen, Y. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Israeli+acute+paralysis+virus:+epidemiology,+pathogenesis+and+implications+for+honey+bee+health.">Israeli acute paralysis virus: epidemiology, pathogenesis and implications for honey bee health.</a> PLoS Pathog. 10, e1004261 (2014).</li><li>Hunter, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Large-scale+field+application+of+RNAi+technology+reducing+israeli+acute+paralysis+virus+disease+in+honey+bees+(Apis+mellifera,+Hymenoptera:+Apidae).">Large-scale field application of RNAi technology reducing israeli acute paralysis virus disease in honey bees (Apis mellifera, Hymenoptera: Apidae).</a> PLoS Pathog. 6, e1001160 (2010).</li><li>Halstead, S. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dengue+virus+-+mosquito+interactions.">Dengue virus - mosquito interactions.</a> Annu. Rev. Entomol. 53, 273-291 (2008).</li><li>Whitfield, A. E., Falk, B. W., Rotenberg, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Insect+vector-mediated+transmission+of+plant+viruses.">Insect vector-mediated transmission of plant viruses.</a> Virology. 479-480, 278-289 (2015).</li><li>Moscardi, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessment+of+the+application+of+baculoviruses+for+control+of+Lepidoptera.">Assessment of the application of baculoviruses for control of Lepidoptera.</a> Annu. Rev. Entomol. 44, 257-289 (1999).</li><li>Szelei, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Susceptibility+of+North-American+and+European+crickets+to+Acheta+domesticus+densovirus+(AdDNV)+and+associated+epizootics.">Susceptibility of North-American and European crickets to Acheta domesticus densovirus (AdDNV) and associated epizootics.</a> J. Invert. Pathol. 106, 394-399 (2011).</li></ol>

In den letzten Jahrzehnten sind die meisten Studien über Insekten-Virus - Interaktionen auf die Gesundheit Honigbiene 34 konzentriert haben, 35, 36, Vektoren der Krankheit beim Menschen 37, Viren Anlage 38, und einige insektenpathogenen Viren , die ein großes Potenzial haben als biologische Bekämpfungsmittel 39. Wenig Aufmerksamkeit wurde auf verdeckte V...

In den letzten Jahrzehnten hat sich die Entwicklung der Sequenzierungstechnologie wie Next-Generation - Sequencing (NGS) die Entdeckung vieler neuer DNA und RNA - Viren, vor allem nicht - pathogenen Viren erleichtert, sondern auch neue Isolate von bisher bekannten Viren 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12. In dem Modellorganismus Drosophila melanogaster, mehr als 20 neue Teilvirusgenomen wurden unter Verwendung von 13 metagenomic Techniken nachgewiesen. Viele virale Sequenzen, einschließlich neuer Viren, wurden auch in anderen Insekten, wie Bienen, m identifiziertosquitoes, Asian citrus Psylliden, Libellen und mehrere Lepidoptera - Spezies 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21. In Zukunft kann es, dass mehr neue Viren in Insekten entdeckt wird erwartet, dass diese erweiterten Technologien; damit unser Verständnis der Virus-Wirt - Interaktion kann entsprechend 6 ändern, 9. Zum Beispiel sind Virus-Wirt - Interaktionen als komplizierter sein als bisher angenommen, weil viele neue Viren als mutualistic Partner definiert werden , anstatt strenge Erreger 22. Zum Beispiel induziert der mutualistic densovirus DplDNV in Dysaphis plantaginea den geflügelten Morph und<html> erhöht die Mobilität, die Zerstreuung des Wirtes sowie das Virus 23 zu erleichtern. Darüber hinaus wurden im Hinblick auf die Säugetier-Gesundheit, die Trockenheit und Kältetoleranz von Pflanzen, und die Auswirkungen von bakteriellen Infektionen 24 mutualistic Viren beschrieben. Seneca Tal - Virus-001 gezeigt selektive Zytotoxizität gegenüber Tumorzellen vermitteln mit neuroendokrinen Krebs 25 kennzeichnet. Hepatitis A - Virusinfektionen unterdrücken die Replikation von Hepatitis C Virus und können bis zur Erholung von Hepatitis - C - 26 führen. Herpes - Virus - Latenz verleiht symbiotischen Schutz vor bakterieller Infektion 27. Das Hüllglykoprotein von humanen endogenen Retrovirus HERV-W induziert zelluläre Resistenz gegen Milznekrosevirus 28. Curvularia Thermotoleranz-Virus (CThTV) aus einer Pilz Endophyt ist in der mutualistic Wechselwirkung zwischen diesem Pilze und einem tropischen panic Gras beteiligt&quot;ref&gt; 29. Daher Kenntnis der Wechselwirkungen zwischen den neu gefundenen Viren und ihren Wirten sollten neue Perspektiven auf ihre Biologie und Management generieren. Allerdings sind die neuen Viren, vor allem die versteckten Viren keine offensichtlichen Anzeichen typisch für eine akute Infektion anzeigt, haben selten wurden untersucht, und wir brauchen eine Pipeline und Protokolle, die Auswirkungen der neu gefundenen Viren auf ihren Wirten zu untersuchen. Bisher haben wir die Prävalenz einen neuen monosense densovirus Helicoverpa armigera densovirus (HaDV2) in dem Baumwollkapselwurm, Helicoverpa armigera berichteten, und präsentierten Beweise für eine mutualistic Beziehung zwischen HaDV2 und dem Baumwollkapselwurm 30, 31. In diesem Beitrag werden wir das Laborprotokoll zu untersuchen im Detail die Interaktion zwischen HaDV2 und seinen Baumwolleule Host beschreiben. Das Protokoll hier vorgestellten kann auch von großer Bedeutung für Forscher, die r Prüfungole anderer Viren oral übertragen, vor allem in Lepidoptera-Schädlinge.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>24-well plate</td>
			<td>Corning</td>
			<td>07-200-740</td>
			<td>Multiple suppliers available.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DNA extraction kit</td>
			<td>TIANGEN</td>
			<td>DP304-03</td>
			<td>Multiple suppliers available.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>thermal cycler</td>
			<td>Veriti; Applied Biosystems</td>
			<td>4375786</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PBS</td>
			<td>Corning</td>
			<td>21-040-CV</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>0.22 &#181;m membrane filter</td>
			<td>Millipore</td>
			<td>SLGS025NB</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pEASY-T Cloning Vector</td>
			<td>TransGen, Beijing, China</td>
			<td>CT301-02</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tweezers</td>
			<td>IDEAL-TEK</td>
			<td>2.SA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Premix Ex Taq (Probe qPCR)</td>
			<td>Takara</td>
			<td>RR390A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Probes</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>Custom order</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Primers</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>Custom order</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>microspectrophotometry NanoDrop 2000c&#160;</td>
			<td>Thermo scientific&#160;</td>
			<td>not available</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>7500 Real-Time PCR system</td>
			<td>Applied Biosystems</td>
			<td>not available</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>stereomicroscope SZX-16</td>
			<td>Olympus</td>
			<td>not available</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>sucrose</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Multiple suppliers available.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>vitamin complex</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Multiple suppliers available.</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

protocols for investigating the host-tissue distribution, transmission-mode, and effect on the host fitness of a densovirus in the cotton bollworm

Viele neue Viren wurden in Tierwirten unter Verwendung der nächsten Generation Sequenzierungstechnologien entdeckt. Zuvor berichteten wir ein mutualistic Virus, Helicoverpa armigera densovirus (HaDV2), in einer Lepidoptera - Spezies der Baumwollkapselwurm, Helicoverpa armigera (Hubner). Hier beschreiben wir die Protokolle, die derzeit verwendet werden, um die Wirkung von HaDV2 auf seinem Wirt zu studieren. Erstens haben wir eine HaDV2 freie Baumwollkapselwurm Kolonie aus einem einzigen Zuchtpaar etablieren. Dann wir mündlich einige Neugeborener Larven Nachkommen mit impfen filtrierte Flüssigkeit HaDV2 haltigen zwei Kolonien mit dem gleichen genetischen Hintergrund zu produzieren: ein HaDV2-infiziert ist, der andere nicht infizieren. Ein Protokoll zum Leben Tabellenparameter (zB Larven, Puppen und Erwachsener Zeiten und Fruchtbarkeit) zwischen den HaDV2-infizierten und -uninfected Individuen vergleichen wird ebenfalls vorgestellt, wie die Protokolle sind für die Host-Gewebeverteilung und Übertragungseffizienz von HaDV2 bestimmen. Diese Protokolle WOuld auch geeignet sein, die Wirkung anderer mündlich übertragene Viren auf ihren Insekten Gastgeber, Lepidoptera-Hosts insbesondere zu untersuchen.

Nachkommen von den Eltern , die HaDV2 frei (3A) waren , wurden als NONINF-Dehnungs aufgezogen. Wir amplifizierten erfolgreich die Actin - Gen der gleichen DNA - Vorlagen verwendet wird , was darauf hindeutet , dass die DNA - Matrizen waren von guter Qualität (3B). Darüber hinaus waren die zufällig ausgewählten acht Nachkommen auch frei von HaDV2 (3C), HaNPV (3D) und Wolbachia (3E). ...

Watch this Scientific Journal Video about Protocols for Investigating the Host-tissue Distribution, Transmission-mode, and Effect on the Host Fitness of a Densovirus in the Cotton Bollworm at JoVE.com

Protocols for Investigating the Host-tissue Distribution, Transmission-mode, and Effect on the Host Fitness of a Densovirus in the Cotton Bollworm

Hier präsentieren wir ein Protokoll der Host-Gewebeverteilung, Übertragungsmodus und Wirkung auf den Wirt Eignung eines densovirus innerhalb Lepidoptera-Spezies zu untersuchen, die Baumwollkapselwurm. Dieses Protokoll kann auch für die Untersuchung der Wechselwirkung zwischen anderen oral übertragenen Viren und ihren Insekten Wirten verwendet werden.

Protokolle für die Untersuchung die Host-Gewebeverteilung, Transmission-Modus und Effekt auf der Host-Fitness eines Densovirus im Cotton Bollworm

Many novel viruses have been discovered in animal hosts using next-generation sequencing technologies. Previously, we reported a mutualistic virus, ...

Research

Education

JoVE Journal

JoVE Core

Biology

Immunology and Infection

Genetics

Viruses

SCIENTISTS IN ACTION

In vivo Imaging of Transgenic Leishmania Parasites in a Live Host

In vivo Imaging of Transgenic Leishmania Parasites in a Live Host

In-vivo-Imaging von transgenen Leishmania Parasiten in einer Live-Host

Distinct species of Leishmania, a protozoan parasite of the family Trypanosomatidae, typically cause different human disease manifestations. The most ...

Forschung

Immunologie und Infektion

Use of the EpiAirway Model for Characterizing Long-term Host-pathogen Interactions

Die Nutzung der EpiAirway Modell zur Charakterisierung Langfristige Host-Pathogen Interactions

Nontypeable Haemophilus influenzae  (NTHi) are human-adapted Gram-negative bacteria that can cause recurrent and chronic infections of the respiratory ...

Induction of Graft-versus-host Disease and In Vivo T Cell Monitoring Using an MHC-matched Murine Model

Induction of Graft-versus-host Disease and In Vivo T Cell Monitoring Using an MHC-matched Murine Model

Induktion der Graft-versus-Host-Krankheit und<em&gt; In Vivo</em&gt; T-Zell-Überwachung mit einem MHC-matched Mausmodell

Graft-versus-host disease (GVHD) is the limiting barrier to the broad use of bone marrow transplant as a curative therapy for a variety of hematological ...

The Synergistic Effect of Visible Light and Gentamycin on Pseudomona aeruginosa Microorganisms

The Synergistic Effect of Visible Light and Gentamycin on Pseudomona aeruginosa Microorganisms

Die synergistische Wirkung von sichtbarem Licht und Gentamycin auf<em&gt; Pseudomona aeruginosa</em&gt; Mikroorganismen

Recently there were several publications on the  bactericidal effect of visible light, most of them claiming that blue part of  the spectrum (400 nm-500 ...

Using Click Chemistry to Measure the Effect of Viral Infection on Host-Cell RNA Synthesis

Mit Klick-Chemie, um die Wirkung von Viral Infection auf Host-Zell-RNA Synthese Messen

Many RNA viruses have evolved the ability to inhibit host cell transcription as a means to circumvent cellular defenses. For the study of these viruses, ...

Investigating the Effects of Probiotics on Pneumococcal Colonization Using an In Vitro Adherence Assay

Investigating the Effects of Probiotics on Pneumococcal Colonization Using an In Vitro Adherence Assay

Untersuchung der Effekte von Probiotika auf Pneumokokken-Kolonisation Mit ein<em&gt; In-vitro-</em&gt; Einhaltung Assay

Adherence of Streptococcus pneumoniae (the pneumococcus) to the epithelial lining of the nasopharynx can result in colonization and is considered a ...

Bioenergetics and the Oxidative Burst: Protocols for the Isolation and Evaluation of Human Leukocytes and Platelets

Bioenergetik und die Oxidative Burst: Protokolle für die Isolierung und Bewertung der menschlichen Leukozyten und Thrombozyten

Mitochondrial dysfunction is known to play a significant role in a number of pathological conditions such as atherosclerosis, diabetes, septic shock, and ...

Human Placental and Decidual Organ Cultures to Study Infections at the Maternal-fetal Interface

Menschliche Plazenta und Deziduale Organkulturen Infektionen zu studieren an der Maternal-fetale Schnittstelle

The placenta shows a large degree of interspecies anatomic variability. To best understand biology and pathophysiology of the human placenta, it is ...

Implementation of a Permeable Membrane Insert-based Infection System to Study the Effects of Secreted Bacterial Toxins on Mammalian Host Cells

Implementierung eines Systems durchlässige Membran Insert-basierten Infektion der Auswirkungen von sekretierten bakteriellen Toxins zur Untersuchung auf Säugetierwirtszellen

Many bacterial pathogens secrete potent toxins to aid in the destruction of host tissue, to initiate signaling changes in host cells or to manipulate ...

Visualizing the Effects of Sputum on Biofilm Development Using a Chambered Coverglass Model

Visualisierung der Auswirkungen von Sputum auf Biofilm-Entwicklung eines Modells mit Kammerdeckgläser

Biofilms consist of groups of bacteria encased in a self-secreted matrix. They play an important role in industrial contamination as well as in the ...