Name: a paired bead and magnet array for molding microwells with variable concave geometries
Uploaded: 2018-01-28T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Paired Bead and Magnet Array for Molding Microwells with Variable Concave Geometries at JoVE.com

Denne forskning blev støttet af den grundlæggende videnskab forskningsprogram gennem National Research Foundation af Korea (NRF) finansieret af Ministeriet for videnskab, IKT og fremtidige planlægning (NRF-2014R1A1A2057527 og NRF-2016R1D1A1B03934418).

1. forberedelse af gennem hullet matrix aluminium plade og magnet matrix
<ol><li>Forbered to 50 mm x 50 mm (eller større) aluminium plader. Tykkelsen af hver plade var 300 µm, som er halvdelen af perle diameter.</li>
	<li>Danne en 30 x 30 gennem hullet array på en af aluminium plader ved hjælp af en CNC roterende gravør med lidt Φ550-µm mikro boremaskine med 30 mm/s af springet sats og 8000 RPM spindel hastighed. Afstanden mellem hvert hul (midt til midt) var 1 mm (figur 1a og <stro...

<ol>
	<li>Fennema, E., Rivron, N., Rouwkema, J., van Blitterswijk, C., de Boer, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spheroid+culture+as+a+tool+for+creating+3D+complex+tissues.">Spheroid culture as a tool for creating 3D complex tissues.</a> Trends Biotechnol. 31 (2), 108-115 (2013).</li><li>Djordjevic, B., Lange, C. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hybrid+spheroids+as+a+tool+for+prediction+of+radiosensitivity+in+tumor+therapy.">Hybrid spheroids as a tool for prediction of radiosensitivity in tumor therapy.</a> Indian J Exp Biol. 42 (5), 443-447 (2004).</li><li>Takezawa, T., Yamazaki, M., Mori, Y., Yonaha, T., Yoshizato, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Morphological+and+immuno-cytochemical+characterization+of+a+hetero-spheroid+composed+of+fibroblasts+and+hepatocytes.">Morphological and immuno-cytochemical characterization of a hetero-spheroid composed of fibroblasts and hepatocytes.</a> J Cell Sci. 101 (3), 495-501 (1992).</li><li>Gottfried, E., Kunz-Schughart, L. A., Andreesen, R., Kreutz, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Brave+little+world:+spheroids+as+an+in+vitro+model+to+study+tumor-immune-cell+interactions.">Brave little world: spheroids as an in vitro model to study tumor-immune-cell interactions.</a> Cell Cycle. 5 (7), 691-695 (2006).</li><li>Zhang, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+an+in+vitro+multicellular+tumor+spheroid+model+using+microencapsulation+and+its+application+in+anticancer+drug+screening+and+testing.">Development of an in vitro multicellular tumor spheroid model using microencapsulation and its application in anticancer drug screening and testing.</a> Biotechnol Prog. 21 (4), 1289-1296 (2005).</li><li>Kim, B. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microwell-mediated+micro+cartilage-like+tissue+formation+of+adipose-derived+stem+cell.">Microwell-mediated micro cartilage-like tissue formation of adipose-derived stem cell.</a> Macromol Res. 22 (3), 287-296 (2014).</li><li>Fatehullah, A., Tan, S. H., Barker, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Organoids+as+an+in+vitro+model+of+human+development+and+disease.">Organoids as an in vitro model of human development and disease.</a> Nature cell biology. 18 (3), 246-254 (2016).</li><li>Yuhas, J. M., Li, A. P., Martinez, A. O., Ladman, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+simplified+method+for+production+and+growth+of+multicellular+tumor+spheroids.">A simplified method for production and growth of multicellular tumor spheroids.</a> Cancer Res. 37 (10), 3639-3643 (1977).</li><li>Hamilton, G. A., Westmoreland, C., George, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+medium+composition+on+the+morphology+and+function+of+rat+hepatocytes+cultured+as+spheroids+and+monolayers.">Effects of medium composition on the morphology and function of rat hepatocytes cultured as spheroids and monolayers.</a> In Vitro Cell Dev Biol-Animal. 37 (10), 656-667 (2001).</li><li>Nyberg, S. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rapid,+large-scale+formation+of+porcine+hepatocyte+spheroids+in+a+novel+spheroid+reservoir+bioartificial+liver.">Rapid, large-scale formation of porcine hepatocyte spheroids in a novel spheroid reservoir bioartificial liver.</a> Liver Transplant. 11 (8), 901-910 (2005).</li><li>Lazar, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Extended+liver-specific+functions+of+porcine+hepatocyte+spheroids+entrapped+in+collagen+gel.">Extended liver-specific functions of porcine hepatocyte spheroids entrapped in collagen gel.</a> In Vitro Cell Dev Biol-Animal. 31 (5), 340-346 (1995).</li><li>Kelm, J. M., Timmins, N. E., Brown, C. J., Fussenegger, M., Nielsen, L. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Method+for+generation+of+homogeneous+multicellular+tumor+spheroids+applicable+to+a+wide+variety+of+cell+types.">Method for generation of homogeneous multicellular tumor spheroids applicable to a wide variety of cell types.</a> Biotechnol Bioeng. 83 (2), 173-180 (2003).</li><li>Lin, R. Z., Chang, H. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recent+advances+in+three-dimensional+multicellular+spheroid+culture+for+biomedical+research.">Recent advances in three-dimensional multicellular spheroid culture for biomedical research.</a> Biotechnol J. 3 (9-10), 1172-1184 (2008).</li><li>Choi, Y. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Controlled-size+embryoid+body+formation+in+concave+microwell+arrays.">Controlled-size embryoid body formation in concave microwell arrays.</a> Biomaterials. 31 (15), 4296-4303 (2010).</li><li>Hwang, J. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+clustering+of+pancreatic+islet+cells+using+concave+microwell+array.">Functional clustering of pancreatic islet cells using concave microwell array.</a> Macromol Res. 19 (12), 1320-1326 (2011).</li><li>Wong, S. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Concave+microwell+based+size-controllable+hepatosphere+as+a+three-dimensional+liver+tissue+model.">Concave microwell based size-controllable hepatosphere as a three-dimensional liver tissue model.</a> Biomaterials. 32 (32), 8087-8096 (2011).</li><li>Yeon, S. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Application+of+concave+microwells+to+pancreatic+tumor+spheroids+enabling+anticancer+drug+evaluation+in+a+clinically+relevant+drug+resistance+model.">Application of concave microwells to pancreatic tumor spheroids enabling anticancer drug evaluation in a clinically relevant drug resistance model.</a> PloS one. 8 (9), (2013).</li><li>Park, J. Y., Hwang, C. M., Lee, S. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ice-lithographic+fabrication+of+concave+microwells+and+a+microfluidic+network.">Ice-lithographic fabrication of concave microwells and a microfluidic network.</a> Biomed Microdevices. 11 (1), 129-133 (2009).</li><li>Corning, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Sylgard 184 Silicone Elastomer. Technical Data Sheet. , (2008).</li><li>Giang, U. B. T., Lee, D., King, M. R., DeLouise, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microfabrication+of+cavities+in+polydimethylsiloxane+using+DRIE+silicon+molds.">Microfabrication of cavities in polydimethylsiloxane using DRIE silicon molds.</a> Lab on a Chip. 7 (12), 1660-1662 (2007).</li><li>Choi, J. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Capture+and+culturing+of+single+microalgae+cells,+and+retrieval+of+colonies+using+a+perforated+hemispherical+microwell+structure.">Capture and culturing of single microalgae cells, and retrieval of colonies using a perforated hemispherical microwell structure.</a> RSC Advances. 4 (106), 61298-61304 (2014).</li><li>Zhong, K., Gao, Y., Li, F., Zhang, Z., Luo, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fabrication+of+PDMS+microlens+array+by+digital+maskless+grayscale+lithography+and+replica+molding+technique.">Fabrication of PDMS microlens array by digital maskless grayscale lithography and replica molding technique.</a> Optik. 125 (10), 2413-2416 (2014).</li><li>Lai, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simple+multi-level+microchannel+fabrication+by+pseudo-grayscale+backside+diffused+light+lithography.">Simple multi-level microchannel fabrication by pseudo-grayscale backside diffused light lithography.</a> RSC advances. 3 (42), 19467-19473 (2013).</li><li>Pan, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fabrication+of+a+3D+hair+follicle-like+hydrogel+by+soft+lithography.">Fabrication of a 3D hair follicle-like hydrogel by soft lithography.</a> J Biomed MAter Res A. 101 (11), 3159-3169 (2013).</li><li>Mori, R., Sakai, Y., Nakazawa, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Micropatterned+organoid+culture+of+rat+hepatocytes+and+HepG2+cells.">Micropatterned organoid culture of rat hepatocytes and HepG2 cells.</a> J Biosci Bioeng. 106 (3), 237-242 (2008).</li></ol>

Den store udfordring for denne fabrikation metode var sikre fastsættelse af perler i matrixen gennem hullet i aluminiumplade. For at løse denne udfordring, blev magnetisk kraft i form af en 30 x 30 magnet array brugt til at lave perlerne sikkert, som vist i tallene 6 og 7. Den magnetiske fluxtæthed af matrixen magnet, som har den modsatte polaritet, er stærkest på midten af hver magnet overflade. Fordi styrken af den magnetiske kraft afhænger fluxtæthed, blev perler guidet til mid...

Celler dyrkes i en klumpformet form er mere ligner rigtige væv i kroppen end en to-dimensional plane kultur1. I betragtning af denne fordel, er brug af spheroids blevet vedtaget for at forbedre studie af celle til celle interaktion2,3, immun-aktivering4, stof screening5og differentiering6. Derudover er spheroids inkorporerer flere celletyper for nylig blevet anvendt til organoids (i nærheden af fysiologiske tredimensionale (3D) væv), som er meget nyttigt for at studere menneskelig udvikling og sygdom7. Flere metoder er blevet brugt til at producere spheroids. Den enkleste metode indebærer udnyttelse af en ikke-klæbende overflade, således at cellerne samle med hinanden og form spheroids. En petriskål kan behandles med bovin serum albumin, pluronic F-127 eller en hydrofobe polymer (fx poly 2-hydroxyethl methylmethacrylat) at gøre sin overflade ikke-klæbende89. Metoden spinner-kolbe er en anden velkendt middel til at producere store mængder af spheroids10,11. I denne metode afholdes celler i suspension ved omrøring for at forhindre dem i at blive fastgjort til underlaget. I stedet, den flydende celler aggregat til form spheroids. Både ikke-klæbende overflade metode og spinner kolbe metode kan producere store mængder af spheroids. De er dog underlagt begrænsninger herunder vanskeligheder i kontrollerende klumpformet størrelse samt sporing og overvågning af hver klumpformet. Som et middel for sådanne problemer, en anden klumpformet produktionsmetode, nemlig hængende drop metode kan være ansat12. Dette indebærer deponering celle suspension dråber på undersiden af låget af en kultur parabol. Disse dråber er normalt 15-30 µL i størrelse og indeholder ca 300 til 3000 celler13. Når låget er omvendt, er dråberne holdt på plads af overfladespænding. Vægtløshed miljø i hvert fald koncentrerer de celler, som derefter udgør enkelt spheroids på grænsefladen gratis væske-luft. Fordelene ved hængende slip-metoden er at den giver en velkontrollerede størrelse distribution, mens det er let at spore og overvåge hver sfæroide, i forhold til de ikke-klæbende overflade og spinner kolbe metoder. Men denne metode pådrager sig en ulempe i den massive produktion af spheroids og produktionsprocessen, selv er overdrevent labor intensiv.
En microwell array er en flad plade med mange mikro-størrelse wells, hver med en diameter, der spænder fra 100 til 1000 µm. Klumpformet produktion princippet ved brug af microwells er svarer til den ikke-klæbende overflade metode. Fordele omfatter det forhold, at microwells skaber mellemrum mellem microwells til at adskille celler eller spheroids, således at det er let at styre den sfæroide størrelse, mens også gør det let at overvåge hver enkelt klumpformet. Med et stort antal microwells er høj overførselshastighed klumpformet produktion også muligt. En anden fordel ved microwells er mulighed for at form brønde i forskellige former (hexahedral, cylindriske, trigonal prismatisk) afhængigt af brugernes unikke forsøgsformål. Generelt, dog en tredimensional (3D) konkave (eller halvkugleformet) figur betragtes som værende den mest egnet til fremstilling af ensartet størrelse enkelt spheroids. Derfor, nytten af konkave microwells er rapporteret for mange celle biologi undersøgelser som dem undersøge cardiomyocyte differentiering af embryonale stamceller14, insulin udskillelsen af islet celle klynger15, den enzymatisk aktivitet af hepatocytter16og lægemiddelresistens af tumor spheroids17.
Desværre, fabrikation af microwells ofte kræver specialiseret micropatterning faciliteter; konventionelle fotolitografi-baserede metoder kræver eksponering og udvikle faciliteter mens reaktive ion-ætsning-baserede metoder skal plasma og ion-beam udstyr. Sådant udstyr er dyrt som, sammen med de komplicerede fabrikationsproces, præsenterer en høj adgangsbarriere for biologer, der ikke har adgang til mikroteknologi. For at overvinde disse problemer, andre omkostningseffektive metoder såsom is litografi18 (ved hjælp af frosne vanddråber) og fleksibel membran metode14 (ved hjælp af en membran, gennem hullet substrat og et vakuum) har foreslået. Men disse metoder også pådrage sig alvorlige ulemper som det er vanskeligt at styre mønster størrelser, opnåelse af høje skærmformater og produktion af større område microwells.
For at overvinde ovennævnte spørgsmål, foreslår vi en roman konkave microwell fabrikationsanlæg metode udnytter gennem hullet substrat, stål perler og en magnet array. Brug denne metode, kan hundredvis af konkave sfæriske microwells fremstilles ved at drage fordel af mekanismen for magnetisk-kraft-hjalp selvlåsende metallisk perler (figur 1). Fabrikationsproces indebærer brug af meget få dyre og komplicerede faciliteter og kræver ikke mange avancerede færdigheder. Som sådan, kan selv ufaglærte personer nemt foretage denne fabrikation metode. For at demonstrere den foreslåede metode, kulturperler human-fedt-afledte stamceller i den konkave microwells at producere spheroids.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="612">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">CNC rotary engraver</td>
			<td style="width:111px;">Roland DGA</td>
			<td style="width:119px;">EGX-350</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Micro drill bit</td>
			<td style="width:111px;">HAM Pr&#228;zision</td>
			<td style="width:119px;">30-1301 TA</td>
			<td>&#934; 0.55 and 0.75 mm</td>
		</tr>
		<tr height="84">
			<td height="84" style="height:84px;width:216px;">Sulfuric acid 98%</td>
			<td style="width:111px;">Daejung</td>
			<td style="width:119px;">7683-4100</td>
			<td style="width:167px;">For cleaning aluminum plate. 
			Dilute with distilled water with 15% solution</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Neodymium magnet</td>
			<td style="width:111px;">Supermagnete</td>
			<td>W-01-N</td>
			<td>1 x 1 x 1 mm</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Bearing ball</td>
			<td style="width:111px;">Agami Modeling</td>
			<td style="width:119px;">SUJ2</td>
			<td>&#934; 600 &#956;m steel bead</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Polydimethylsiloxane (PDMS)</td>
			<td style="width:111px;">Dowcorning</td>
			<td style="width:119px;">Sylgard 184</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Pluronic F-127</td>
			<td style="width:111px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">p2443</td>
			<td>Dilute with phosphate buffered saline to 4% (w/v) solution</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Dulbecco&#39;s modified eaggle&#39;s medium (DMEM)</td>
			<td style="width:111px;">ATCC</td>
			<td style="width:119px;">30-2002</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Dulbecco&#39;s phosphate buffered saline (D-PBS)</td>
			<td style="width:111px;">ATCC</td>
			<td style="width:119px;">30-2200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Fetal bovine serum</td>
			<td style="width:111px;">ATCC</td>
			<td style="width:119px;">30-2020</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Adipose-derived mesenchymal stem cells</td>
			<td style="width:111px;">ATCC</td>
			<td style="width:119px;">ATCC PCS-500-011</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a paired bead and magnet array for molding microwells with variable concave geometries

En klumpformet kultur er et nyttigt redskab for at forstå cellulære adfærd, fordi det giver en i vivo-som tre-dimensionelle miljø. Forskellige klumpformet produktionsmetoder stamceller såsom ikke-klæbende overflader, spinner kolber, hængende dråber og microwells har været anvendt i studier af celle til celle interaktion, immun-aktivering, stof screening, Celledifferentiering og organoid generation. Blandt disse metoder, har microwells med en tre-dimensionel konkave geometri fået opmærksomhed af videnskabsfolk og ingeniører, da deres fordele af ensartet størrelse klumpformet generation og den lethed, hvormed svar af individuelle spheroids kan være overvåges. Selv om omkostningseffektive metoder såsom brugen af fleksible membraner og ice litografi er blevet foreslået, disse teknikker pådrage sig alvorlige ulemper såsom vanskeligheden i at kontrollere mønster størrelser, opnåelse af høje skærmformater og produktion af større områder af microwells. For at overvinde disse problemer, foreslår vi en robust metode for at fabrikere konkave microwells uden behov for komplekse høje omkostninger faciliteter. Denne metode udnytter en 30 x 30 gennem hullet array, flere hundrede mikrometer-ordre stål perler og magnetiske kraft til at fabrikere 900 microwells i 3 cm x 3 cm Polydimethylsiloxan (PDMS) substrat. For at påvise anvendeligheden af vores metode til celle biologiske applikationer, vi kulturperler adipøst stamceller i 3 dage og med held fremstillet spheroids ved hjælp af vores microwell platform. Derudover udførte vi en magnetostatic simulering for at efterforske den mekanisme, hvorved magnetiske kraft blev brugt til at fælde de stål perler i gennem hullerne. Vi mener, at den foreslåede microwell fabrikation metode kunne anvendes til mange klumpformet-baserede cellular undersøgelser såsom narkotika screening, vævsregeneration, stamcelle differentiering og kræft metastaser.

En konveks mug og microwell mønster blev med held fremstillet ved at følge trin 2.1 til 3.7. (Figur 4). De kommercielle stål perler blev fanget i matrixen 30 x 30 gennem hullet. Perlerne blev holdt stramt uden nogen huller mellem perlerne og de tilsvarende (figur 4a) gennem huller. Form af opdigtede konkave microwell er konkave halvkugleformet, med en diameter på 600 µm, som er den samme som den stål kugle (<strong class="x...

Watch this Scientific Journal Video about A Paired Bead and Magnet Array for Molding Microwells with Variable Concave Geometries at JoVE.com

A Paired Bead and Magnet Array for Molding Microwells with Variable Concave Geometries

Dette manuskript introducerer en robust metode til at opdigte konkave microwells uden behov for komplekse høje omkostninger faciliteter. Ved hjælp af magnetisk kraft, stål perler og en gennem hullet array, blev flere hundrede microwells dannet i 3 cm x 3 cm Polydimethylsiloxan (PDMS) substrat.

En parret perle og Magnet Array for Molding Microwells med variabel konkave geometrier

A spheroid culture is a useful tool for understanding cellular behavior in that it provides an in vivo-like three-dimensional environment. Various ...

Research

Education

JoVE Core

JoVE Journal

Physics

Bioengineering

Unit 1

Magnetic Forces and Fields

SCIENTISTS IN ACTION

Investigating Receptor-ligand Systems of the Cellulosome with AFM-based Single-molecule Force Spectroscopy

Cellulosomes are discrete multienzyme complexes used by a subset of anaerobic bacteria and fungi to digest lignocellulosic substrates. Assembly of the ...

Microfluidic Fabrication of Polymeric and Biohybrid Fibers with Predesigned Size and Shape

Mikrofluidisk fremstilling af polymere og biohybridfibre med foruddefineret størrelse og form

A &#8220;sheath&#8221; fluid passing through a microfluidic channel at low Reynolds number can be directed around another &#8220;core&#8221; stream and ...

Rapid and Low-cost Prototyping of Medical Devices Using 3D Printed Molds for Liquid Injection Molding

Hurtig og Lavprisselskaber Prototyping af Medical Devices Brug 3D Trykt støbeforme til flydende Injection Molding

Biologically inert elastomers such as silicone are favorable materials for medical device fabrication, but forming and curing these elastomers using ...

Bead Aggregation Assays for the Characterization of Putative Cell Adhesion Molecules

Bead Aggregation Analyser til karakterisering af formodede celleadhæsionsmolekyler

Cell-cell adhesion is fundamental to multicellular life and is mediated by a diverse array of cell surface proteins. However, the adhesive interactions ...

Polymeric Microneedle Array Fabrication by Photolithography

Polymere mikronålarray Fabrication ved Fotolitografi

This manuscript describes the fabrication of polymeric microneedle (MN) arrays by photolithography. It involves a simple mold-free process by using a ...

Multi-step Variable Height Photolithography for Valved Multilayer Microfluidic Devices

Multi-trins Variabel Højde Fotolitografi for med ventiler Multilayer mikrofluidenheder

Microfluidic systems have enabled powerful new approaches to high-throughput biochemical and biological analysis. However, there remains a barrier to ...

Assembly and Tracking of Microbial Community Development within a Microwell Array Platform

Samling og sporing af mikrobiell fællesskabsudvikling inden for en Microwell Array Platform

The development of microbial communities depends on a combination of complex deterministic and stochastic factors that can dramatically alter the spatial ...

Visual Detection of Multiple Nucleic Acids in a Capillary Array

Visuel genkendelse af flere nukleinsyrer i en kapillær Array

Multi-target, short time, and resource-affordable methodologies for the detection of multiple nucleic acids in a single, easy to operate test are urgently ...

Fabrication of a Multiplexed Artificial Cellular MicroEnvironment Array

Fabrikation af en multiplex kunstige cellulære mikromiljø Array

Cellular microenvironments consist of a variety of cues, such as growth factors, extracellular matrices, and intercellular interactions. These cues are ...

Conducting Multiple Imaging Modes with One Fluorescence Microscope

Gennemføre flere Imaging tilstande med et fluorescens mikroskop

Fluorescence microscopy is a powerful tool to detect biological molecules in situ and monitor their dynamics and interactions in real-time. In addition to ...