Name: a paired bead and magnet array for molding microwells with variable concave geometries
Uploaded: 2018-01-28T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Paired Bead and Magnet Array for Molding Microwells with Variable Concave Geometries at JoVE.com

מחקר זה נתמך על-ידי התוכנית מחקר מדעי בסיסי דרך לאומי מחקר קרן של קוריאה (ב- NRF) במימון של משרד המדע, ICT ותכנון העתיד (ה-NRF-2014R1A1A2057527 ו- NRF-2016R1D1A1B03934418).

1. הכנת מערך דרך חור אלומיניום פלייט, מגנט מערך
<ol><li>להכין שני 50 מ"מ x 50 מ"מ (או גדול) פלטות אלומיניום. העובי של כל צלחת היה מיקרומטר 300 זה ממחצית הקוטר חרוז.</li>
	<li>טופס מערך דרך חור 30 x 30 על אחד הלוחות אלומיניום באמצעות חרט סיבוביים CNC עם Φ550-מיקרומטר מיקרו מקדחה עם 30 מ מ/s של 8000 סל"ד של פלך מהירות וק...

<ol>
	<li>Fennema, E., Rivron, N., Rouwkema, J., van Blitterswijk, C., de Boer, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spheroid+culture+as+a+tool+for+creating+3D+complex+tissues.">Spheroid culture as a tool for creating 3D complex tissues.</a> Trends Biotechnol. 31 (2), 108-115 (2013).</li><li>Djordjevic, B., Lange, C. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hybrid+spheroids+as+a+tool+for+prediction+of+radiosensitivity+in+tumor+therapy.">Hybrid spheroids as a tool for prediction of radiosensitivity in tumor therapy.</a> Indian J Exp Biol. 42 (5), 443-447 (2004).</li><li>Takezawa, T., Yamazaki, M., Mori, Y., Yonaha, T., Yoshizato, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Morphological+and+immuno-cytochemical+characterization+of+a+hetero-spheroid+composed+of+fibroblasts+and+hepatocytes.">Morphological and immuno-cytochemical characterization of a hetero-spheroid composed of fibroblasts and hepatocytes.</a> J Cell Sci. 101 (3), 495-501 (1992).</li><li>Gottfried, E., Kunz-Schughart, L. A., Andreesen, R., Kreutz, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Brave+little+world:+spheroids+as+an+in+vitro+model+to+study+tumor-immune-cell+interactions.">Brave little world: spheroids as an in vitro model to study tumor-immune-cell interactions.</a> Cell Cycle. 5 (7), 691-695 (2006).</li><li>Zhang, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+an+in+vitro+multicellular+tumor+spheroid+model+using+microencapsulation+and+its+application+in+anticancer+drug+screening+and+testing.">Development of an in vitro multicellular tumor spheroid model using microencapsulation and its application in anticancer drug screening and testing.</a> Biotechnol Prog. 21 (4), 1289-1296 (2005).</li><li>Kim, B. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microwell-mediated+micro+cartilage-like+tissue+formation+of+adipose-derived+stem+cell.">Microwell-mediated micro cartilage-like tissue formation of adipose-derived stem cell.</a> Macromol Res. 22 (3), 287-296 (2014).</li><li>Fatehullah, A., Tan, S. H., Barker, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Organoids+as+an+in+vitro+model+of+human+development+and+disease.">Organoids as an in vitro model of human development and disease.</a> Nature cell biology. 18 (3), 246-254 (2016).</li><li>Yuhas, J. M., Li, A. P., Martinez, A. O., Ladman, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+simplified+method+for+production+and+growth+of+multicellular+tumor+spheroids.">A simplified method for production and growth of multicellular tumor spheroids.</a> Cancer Res. 37 (10), 3639-3643 (1977).</li><li>Hamilton, G. A., Westmoreland, C., George, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+medium+composition+on+the+morphology+and+function+of+rat+hepatocytes+cultured+as+spheroids+and+monolayers.">Effects of medium composition on the morphology and function of rat hepatocytes cultured as spheroids and monolayers.</a> In Vitro Cell Dev Biol-Animal. 37 (10), 656-667 (2001).</li><li>Nyberg, S. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rapid,+large-scale+formation+of+porcine+hepatocyte+spheroids+in+a+novel+spheroid+reservoir+bioartificial+liver.">Rapid, large-scale formation of porcine hepatocyte spheroids in a novel spheroid reservoir bioartificial liver.</a> Liver Transplant. 11 (8), 901-910 (2005).</li><li>Lazar, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Extended+liver-specific+functions+of+porcine+hepatocyte+spheroids+entrapped+in+collagen+gel.">Extended liver-specific functions of porcine hepatocyte spheroids entrapped in collagen gel.</a> In Vitro Cell Dev Biol-Animal. 31 (5), 340-346 (1995).</li><li>Kelm, J. M., Timmins, N. E., Brown, C. J., Fussenegger, M., Nielsen, L. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Method+for+generation+of+homogeneous+multicellular+tumor+spheroids+applicable+to+a+wide+variety+of+cell+types.">Method for generation of homogeneous multicellular tumor spheroids applicable to a wide variety of cell types.</a> Biotechnol Bioeng. 83 (2), 173-180 (2003).</li><li>Lin, R. Z., Chang, H. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recent+advances+in+three-dimensional+multicellular+spheroid+culture+for+biomedical+research.">Recent advances in three-dimensional multicellular spheroid culture for biomedical research.</a> Biotechnol J. 3 (9-10), 1172-1184 (2008).</li><li>Choi, Y. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Controlled-size+embryoid+body+formation+in+concave+microwell+arrays.">Controlled-size embryoid body formation in concave microwell arrays.</a> Biomaterials. 31 (15), 4296-4303 (2010).</li><li>Hwang, J. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+clustering+of+pancreatic+islet+cells+using+concave+microwell+array.">Functional clustering of pancreatic islet cells using concave microwell array.</a> Macromol Res. 19 (12), 1320-1326 (2011).</li><li>Wong, S. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Concave+microwell+based+size-controllable+hepatosphere+as+a+three-dimensional+liver+tissue+model.">Concave microwell based size-controllable hepatosphere as a three-dimensional liver tissue model.</a> Biomaterials. 32 (32), 8087-8096 (2011).</li><li>Yeon, S. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Application+of+concave+microwells+to+pancreatic+tumor+spheroids+enabling+anticancer+drug+evaluation+in+a+clinically+relevant+drug+resistance+model.">Application of concave microwells to pancreatic tumor spheroids enabling anticancer drug evaluation in a clinically relevant drug resistance model.</a> PloS one. 8 (9), (2013).</li><li>Park, J. Y., Hwang, C. M., Lee, S. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ice-lithographic+fabrication+of+concave+microwells+and+a+microfluidic+network.">Ice-lithographic fabrication of concave microwells and a microfluidic network.</a> Biomed Microdevices. 11 (1), 129-133 (2009).</li><li>Corning, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Sylgard 184 Silicone Elastomer. Technical Data Sheet. , (2008).</li><li>Giang, U. B. T., Lee, D., King, M. R., DeLouise, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microfabrication+of+cavities+in+polydimethylsiloxane+using+DRIE+silicon+molds.">Microfabrication of cavities in polydimethylsiloxane using DRIE silicon molds.</a> Lab on a Chip. 7 (12), 1660-1662 (2007).</li><li>Choi, J. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Capture+and+culturing+of+single+microalgae+cells,+and+retrieval+of+colonies+using+a+perforated+hemispherical+microwell+structure.">Capture and culturing of single microalgae cells, and retrieval of colonies using a perforated hemispherical microwell structure.</a> RSC Advances. 4 (106), 61298-61304 (2014).</li><li>Zhong, K., Gao, Y., Li, F., Zhang, Z., Luo, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fabrication+of+PDMS+microlens+array+by+digital+maskless+grayscale+lithography+and+replica+molding+technique.">Fabrication of PDMS microlens array by digital maskless grayscale lithography and replica molding technique.</a> Optik. 125 (10), 2413-2416 (2014).</li><li>Lai, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simple+multi-level+microchannel+fabrication+by+pseudo-grayscale+backside+diffused+light+lithography.">Simple multi-level microchannel fabrication by pseudo-grayscale backside diffused light lithography.</a> RSC advances. 3 (42), 19467-19473 (2013).</li><li>Pan, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fabrication+of+a+3D+hair+follicle-like+hydrogel+by+soft+lithography.">Fabrication of a 3D hair follicle-like hydrogel by soft lithography.</a> J Biomed MAter Res A. 101 (11), 3159-3169 (2013).</li><li>Mori, R., Sakai, Y., Nakazawa, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Micropatterned+organoid+culture+of+rat+hepatocytes+and+HepG2+cells.">Micropatterned organoid culture of rat hepatocytes and HepG2 cells.</a> J Biosci Bioeng. 106 (3), 237-242 (2008).</li></ol>

האתגר של מרכזי בשיטה זו פבריקציה נוספת היה מתקן מאובטח של החרוזים במערך דרך חור בצלחת אלומיניום. כדי לפתור את האתגר הזה, כוח מגנטי בצורה של מערך מגנט 30 x 30 שימש כדי לתקן את החרוזים בצורה מאובטחת, כפי שמוצג דמויות 6 ו -7. צפיפות השטף המגנטי של המערך מגנט, הכולל את הקוטביות הפוכ...

התאים גדלו לתוך טופס ספרואיד דומים יותר אמיתי רקמות בגוף מאשר תרבות מישורי דו-ממדי1. בהתחשב יתרון זה, השימוש spheroids אומץ כדי לשפר את המחקר של אינטראקציה לתא2,3, ההפעלה החיסונית4, סמים הקרנת5וכן בידול6. בנוסף, spheroids שילוב סוגי תאים מרובים לאחרונה הוחלו על organoids (ליד-פיזיולוגיים תלת מימדי (3D) רקמות), אשר מאוד שימושי עבור לימוד ופיתוח המחלה האנושית7. מספר שיטות השתמשו כדי לייצר spheroids. השיטה הפשוטה ביותר כרוך הניצול של משטח ללא דבק, כך התאים צבירה עם כל טופס spheroids. צלחת פטרי יכולים להיות מטופלים עם אלבומין שור, pluronic F-127 או פולימר הידרופובי (למשל פולי 2-hydroxyethl methacrylate) כדי להפוך את השטח ללא דבק89. השיטה ספינר-הבקבוק הוא אמצעים ידועים אחרים לייצר כמויות גדולות של spheroids10,11. בשיטה זו, תאים מוחזקים השעיה על-ידי ערבוב כדי למנוע מהם להפוך למצע. במקום זאת, הצפים תאים צבירה כדי טופס spheroids. שיטת משטח ללא דבק והן טווה את הבקבוק שיטה לייצר כמויות גדולות של spheroids. עם זאת, הם כפופים למגבלות לרבות קשיים שליטה בגודל ספרואיד, כמו גם את המעקב וניטור של כל ספרואיד. כתרופה בעיות כאלה, שיטה אחרת ספרואיד הייצור, כלומר, התליה זרוק שיטה יכול להיות מועסקים12. פעולה זו כרוכה הפקדת תא טיפות השעיה על החלק התחתון של המכסה לצלחת תרבות. טיפות אלה הם בדרך כלל 15 אל 30 µL בגודל ומכילים כ 300 עד 3000 תאים13. כאשר המכסה היא הפוכה, הטיפות מתקיימים במקום על ידי מתח. הסביבה microgravity כל טיפה מרכזת את התאים, המהווים ואז spheroids יחיד-הממשק נוזלי-אוויר חופשי. היתרונות של התליה טיפה שיטה הם שהיא מציעה התפלגות גודל ומבוקרות היטב, בעוד קל לאתר ולעקוב אחר כל ספרואיד, יחסית ללא דבק השטח, טווה את הבקבוק השיטות. עם זאת, שיטה זו כרוך חיסרון אחד בייצור מאסיבי של spheroids תהליך הייצור עצמה היא מוגזמת עבודה אינטנסיבית.
מערך microwell הוא שטוח צלחת עם בארות רבות בגודל מיקרו, שלכל אחד מהם בקוטר הנע בין 100 מיקרומטר 1000. העיקרון ייצור ספרואיד בעת שימוש microwells דומה לזה של שיטת משטח ללא דבק. היתרונות כוללים את העובדה כי microwells לספק רווחים בין microwells להפריד את התאים או spheroids, כך קל לשלוט על גודל ספרואיד, תוך כדי גם מה שהופך אותו קל לעקוב אחר כל ספרואיד יחיד. עם מספר גדול של microwells, ייצור תפוקה גבוהה ספרואיד אפשרי גם כן. יתרון נוסף של microwells הוא האפשרות טופס בארות של צורות שונות (מסגרות, גלילי, הטריגונלית מנסרתיים) בהתאם למטרות ניסוי ייחודי של המשתמשים. בדרך כלל, עם זאת, תלת מימדי (3D) קעורה (או המיספרי) צורה כמטוס המתאימים ביותר להפקת spheroids יחיד בגודל אחיד. לכן, התועלת של microwells קעורה דווחה ללימודי ביולוגיה תא רבים כגון אלה לבחון את הבידול cardiomyocyte של תאי גזע עובריים14, הפרשת אינסולין תא איון אשכולות15, פעילות אנזימטי של hepatocytes16, וההתנגדות סמים של גידול spheroids17.
לצערי, הזיוף של microwells לעיתים קרובות דורשת מתקנים מיוחדים micropatterning; שיטות קונבנציונליות מבוססי פוטוליתוגרפיה דורשות חשיפה ומתקני המתפתח בעוד שיטות המבוססות על יון-איכול תגובתי צריך ציוד פלזמה ויון-קרן. ציוד כזה הוא יקר, יחד עם תהליך ייצור מורכב, שמציג מחסום כניסה גבוה לביולוגים שאין להם גישה מיקרוטכנולוגיה. כדי להתגבר על בעיות אלה, חסכונית בשיטות אחרות כגון קרח ליתוגרפיה18 (באמצעות טיפות מים קפואים), שיטת הממברנה הגמישה14 (באמצעות קרום, דרך חור המצע ואקום) שהוצעו. עם זאת, שיטות אלה כרוכים גם החסרונות רציני כמו שזה היה קשה לשלוט את גודל דוגמת המילוי, הפרי של יחסי גודל גבוה, ואת הייצור של אזור גדול יותר microwells.
כדי להתגבר על הבעיות הנ ל, מה שאנו מציעים שיטת ייצור חדשניים microwell קעורה ניצול מצע דרך חור פלדה חרוזים, מערך מגנט. באמצעות שיטה זו, מאות קעורה microwells כדורית יכול להיות מפוברק על ידי ניצול של המנגנון של מגנטי כוח-בסיוע עצמית נעילה מתכתי חרוזים (איור 1). תהליך ייצור כרוכה בשימוש במתקני מעט מאוד יקר ומסובך, אינה דורשת מיומנויות מתקדמות רבות. ככזה, אנשים אפילו מיומנים יכולים בקלות מתחייבים בשיטה זו פבריקציה נוספת. כדי להדגים את השיטה המוצעת, נגזר על האדם-שומן בתאי גזע היו תרבותי ב microwells קעורה כדי לייצר spheroids.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="612">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">CNC rotary engraver</td>
			<td style="width:111px;">Roland DGA</td>
			<td style="width:119px;">EGX-350</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Micro drill bit</td>
			<td style="width:111px;">HAM Pr&#228;zision</td>
			<td style="width:119px;">30-1301 TA</td>
			<td>&#934; 0.55 and 0.75 mm</td>
		</tr>
		<tr height="84">
			<td height="84" style="height:84px;width:216px;">Sulfuric acid 98%</td>
			<td style="width:111px;">Daejung</td>
			<td style="width:119px;">7683-4100</td>
			<td style="width:167px;">For cleaning aluminum plate. 
			Dilute with distilled water with 15% solution</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Neodymium magnet</td>
			<td style="width:111px;">Supermagnete</td>
			<td>W-01-N</td>
			<td>1 x 1 x 1 mm</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Bearing ball</td>
			<td style="width:111px;">Agami Modeling</td>
			<td style="width:119px;">SUJ2</td>
			<td>&#934; 600 &#956;m steel bead</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Polydimethylsiloxane (PDMS)</td>
			<td style="width:111px;">Dowcorning</td>
			<td style="width:119px;">Sylgard 184</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Pluronic F-127</td>
			<td style="width:111px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">p2443</td>
			<td>Dilute with phosphate buffered saline to 4% (w/v) solution</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Dulbecco&#39;s modified eaggle&#39;s medium (DMEM)</td>
			<td style="width:111px;">ATCC</td>
			<td style="width:119px;">30-2002</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Dulbecco&#39;s phosphate buffered saline (D-PBS)</td>
			<td style="width:111px;">ATCC</td>
			<td style="width:119px;">30-2200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Fetal bovine serum</td>
			<td style="width:111px;">ATCC</td>
			<td style="width:119px;">30-2020</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Adipose-derived mesenchymal stem cells</td>
			<td style="width:111px;">ATCC</td>
			<td style="width:119px;">ATCC PCS-500-011</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a paired bead and magnet array for molding microwells with variable concave geometries

תרבות ספרואיד הוא כלי שימושי להבנת התנהגות הסלולר בכך שהוא מספק של ויוו-כמו סביבה תלת-ממדי. שיטות הייצור ספרואיד שונים כגון משטחים ללא דבק, טווה מבחנות, טיפות באוויר, microwells השתמשו במחקרים של אינטראקציה לתא, ההפעלה החיסונית, סמים הקרנה, גזע תאית התמיינות, ויצירת תא צורב. בין השיטות, microwells עם גאומטריה קעורה תלת מימדי השיגו את תשומת הלב של מדענים ומהנדסים, בהתחשב יתרונם של דור ספרואיד בגודל אחיד ואת הקלות שבה ניתן התגובות של spheroids בודדים פיקוח. אף-על-פי שיטות חסכוניים כגון השימוש של ממברנות גמיש, ליתוגרפיה קרח הוצעו, טכניקות אלו כרוכות חסרונות רציניים כגון קושי בשליטה על גודל התבנית, ההישג של יחסי גודל גבוהה והייצור של אזורים גדולים של microwells. כדי להתגבר על בעיות אלה, אנו מציעים שיטה חזקה בדיית קעורה microwells ללא צורך מתחם מתקני עלות גבוהה. שיטה זו משתמשת מערך דרך חור 30 x 30, פלדה מיקרומטר מאה-הזמנה מספר חרוזים, כוח מגנטי כדי לבדות 900 microwells על מצע polydimethylsiloxane (PDMS) 3 ס"מ על 3 ס"מ. כדי להדגים את הישימות של השיטה שלנו ליישומים ביולוגית התא, אנחנו תרבותי תאי גזע אדיפוז 3 ימים והפיק בהצלחה spheroids באמצעות הפלטפורמה שלנו microwell. בנוסף, נוכל לבצע סימולציה magnetostatic לחקור את המנגנון, לפיה כוח מגנטי שימש כדי ללכוד את החרוזים פלדה החורים דרך. אנו מאמינים כי שיטת ייצור microwell המוצע יכול להיות מיושם מבוססי ספרואיד הסלולר מחקרים רבים כגון והתרופות הקרנה, התחדשות רקמות, התמיינות תאי סרטן גרורות.

Microwell דפוס ולעצב קמורה זוייפו בהצלחה על-ידי ביצוע שלבים 2.1 ל 3.7. (איור 4). החרוזים פלדה מסחרי נלכדו במערך דרך חור 30 x 30. החרוזים התקיימו בחוזקה ללא פערים בין החרוזים המתאים דרך-החורים (איור 4a). צורת microwell קעורה מפוברק קעור המיספרי, בקוטר של 600 מיק?...

Watch this Scientific Journal Video about A Paired Bead and Magnet Array for Molding Microwells with Variable Concave Geometries at JoVE.com

A Paired Bead and Magnet Array for Molding Microwells with Variable Concave Geometries

כתב יד זה מציג שיטה חזקה של בדיית קעורה microwells ללא צורך מתחם מתקני עלות גבוהה. באמצעות כוח מגנטי, חרוזים פלדה מערך דרך חור, מספר מאות microwells נוצרו במצע polydimethylsiloxane (PDMS) 3 ס"מ על 3 ס"מ.

חרוז לזווג עם מגנט במערך צורניים Microwells עם משתנה גיאומטריות קעורה

A spheroid culture is a useful tool for understanding cellular behavior in that it provides an in vivo-like three-dimensional environment. Various ...

Research

Education

JoVE Core

JoVE Journal

Physics

Bioengineering

Unit 1

Magnetic Forces and Fields

SCIENTISTS IN ACTION

Investigating Receptor-ligand Systems of the Cellulosome with AFM-based Single-molecule Force Spectroscopy

חוקר מערכות קולטן ליגנד של Cellulosome עם המולקולה בודדת מבוססת AFM חיל ספקטרוסקופיה

Cellulosomes are discrete multienzyme complexes used by a subset of anaerobic bacteria and fungi to digest lignocellulosic substrates. Assembly of the ...

Microfluidic Fabrication of Polymeric and Biohybrid Fibers with Predesigned Size and Shape

ייצור מיקרופלואידי של סיבים פולימריים וביוהיברידים עם גודל וצורה מעוצבים מראש

A &#8220;sheath&#8221; fluid passing through a microfluidic channel at low Reynolds number can be directed around another &#8220;core&#8221; stream and ...

Rapid and Low-cost Prototyping of Medical Devices Using 3D Printed Molds for Liquid Injection Molding

דיגום מהיר ועלות נמוכה של מכשירים רפואיים באמצעות 3D מודפס תבניות להזרקת נוזלים

Biologically inert elastomers such as silicone are favorable materials for medical device fabrication, but forming and curing these elastomers using ...

Bead Aggregation Assays for the Characterization of Putative Cell Adhesion Molecules

מבחני צבירת חרוז לאפיון של תא המשוערת הידבקות מולקולות

Cell-cell adhesion is fundamental to multicellular life and is mediated by a diverse array of cell surface proteins. However, the adhesive interactions ...

Polymeric Microneedle Array Fabrication by Photolithography

ייצור מערך microneedle פולימרית יתוגרפיה

This manuscript describes the fabrication of polymeric microneedle (MN) arrays by photolithography. It involves a simple mold-free process by using a ...

Multi-step Variable Height Photolithography for Valved Multilayer Microfluidic Devices

פוטו-ליתוגרפיה גובה רב שלבי משתנה עבור Valved רב שכבתי מכשירים microfluidic

Microfluidic systems have enabled powerful new approaches to high-throughput biochemical and biological analysis. However, there remains a barrier to ...

Assembly and Tracking of Microbial Community Development within a Microwell Array Platform

העצרת ומעקב אחר פיתוח הקהילה מיקרוביאלית בתוך פלטפורמת מערך Microell

The development of microbial communities depends on a combination of complex deterministic and stochastic factors that can dramatically alter the spatial ...

Visual Detection of Multiple Nucleic Acids in a Capillary Array

זיהוי ויזואלי של מספר חומצות גרעין ב מערך נימי

Multi-target, short time, and resource-affordable methodologies for the detection of multiple nucleic acids in a single, easy to operate test are urgently ...

Fabrication of a Multiplexed Artificial Cellular MicroEnvironment Array

ייצור של מערך מרובבת MicroEnvironment הסלולר מלאכותי

Cellular microenvironments consist of a variety of cues, such as growth factors, extracellular matrices, and intercellular interactions. These cues are ...

Conducting Multiple Imaging Modes with One Fluorescence Microscope

ניצוח מספר מצבי הדמיה עם מיקרוסקופ זריחה אחת

Fluorescence microscopy is a powerful tool to detect biological molecules in situ and monitor their dynamics and interactions in real-time. In addition to ...