Name: a 5-mc dot blot assay quantifying the dna methylation level of chondrocyte dedifferentiation in vitro
Uploaded: 2017-05-17T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A 5-mC Dot Blot Assay Quantifying the DNA Methylation Level of Chondrocyte Dedifferentiation In Vitro at JoVE.com

עבודה זו נתמכה על ידי המענקים הבאים: קרן המדע הטבעי של סין (מס &#39;81572198, מס&#39; 81260161, מס &#39;81000460); הקרן למדעי הטבע של גואנגדונג, סין (No. 2015A030313772); סין פרויקט קרן פוסט-דוקטורט של קרן המדע הפוסט-דוקטורט (מס &#39;2013M530385); קרן המחקר הרפואי של פרובינציית גואנגדונג, סין (מס &#39;A2016314); שנזן מדע וטכנולוגיה פרוייקטים (מס &#39;JCYJ20160301111338144, מס&#39; JSGG20151030140325149, מס &#39;JSGG20140519105550503, No.GJHZ20130412153906739, מס&#39; JCYJ20140414170821160; No.JCYJ20140414170821200).

מחקר זה אושר על ידי ועדת האתיקה האנושית של בית החולים העממי השני של שנזן. 1. האדם הסחוס ארטיקולרים רקמות אוסף ותרבות chondrocyte <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכנת חומרים <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-alig...

<ol>
	<li>Brittberg, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Treatment+of+deep+cartilage+defects+in+the+knee+with+autologous+chondrocyte+transplantation.">Treatment of deep cartilage defects in the knee with autologous chondrocyte transplantation.</a> N Engl J Med. 331, 889-895 (1994).</li><li>Pareek, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long-Term+Outcomes+After+Autologous+Chondrocyte+Implantation:+A+Systematic+Review+at+Mean+Follow-Up+of+11.4+Years.">Long-Term Outcomes After Autologous Chondrocyte Implantation: A Systematic Review at Mean Follow-Up of 11.4 Years.</a> Cartilage. 7 (4), 298-308 (2016).</li><li>Duan, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cytokine+networking+of+chondrocyte+dedifferentiation+in+vitro+and+its+implications+for+cell-based+cartilage+therapy.">Cytokine networking of chondrocyte dedifferentiation in vitro and its implications for cell-based cartilage therapy.</a> Am J Transl Res. 7 (2), 194-208 (2015).</li><li>Ma, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gene+expression+profiling+of+dedifferentiated+human+articular+chondrocytes+in+monolayer+culture.">Gene expression profiling of dedifferentiated human articular chondrocytes in monolayer culture.</a> Osteoarthritis Cartilage. 21 (4), 599-603 (2013).</li><li>Duan, L., Liang, Y., Ma, B., Zhu, W., Wang, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epigenetic+regulation+in+chondrocyte+phenotype+maintenance+for+cell-based+cartilage+repair.">Epigenetic regulation in chondrocyte phenotype maintenance for cell-based cartilage repair.</a> Am J Transl Res. 7 (11), 2127-2140 (2015).</li><li>Duan, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=DNA+methylation+profiling+in+chondrocyte+dedifferentiation+in+vitro.">DNA methylation profiling in chondrocyte dedifferentiation in vitro.</a> J Cell Physiol. , (2016).</li><li>Bhat, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=DNA+methylation+detection+at+single+base+resolution+using+targeted+next+generation+bisulfite+sequencing+and+cross+validation+using+capillary+sequencing.">DNA methylation detection at single base resolution using targeted next generation bisulfite sequencing and cross validation using capillary sequencing.</a> Gene. , (2016).</li><li>Shi, X. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Exploring+Genome-wide+DNA+Methylation+Profiles+Altered+in+Kashin-Beck+Disease+Using+Infinium+Human+Methylation+450+Bead+Chips.">Exploring Genome-wide DNA Methylation Profiles Altered in Kashin-Beck Disease Using Infinium Human Methylation 450 Bead Chips.</a> Biomed Environ Sci. 29 (7), 539-543 (2016).</li><li>Li, X. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optimization+of+an+HPLC+Method+for+Determining+the+Genomic+Methylation+Levels+of+Taxus+Cells.">Optimization of an HPLC Method for Determining the Genomic Methylation Levels of Taxus Cells.</a> J Chromatogr Sci. 54 (2), 200-205 (2016).</li><li>Maghbooli, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Global+DNA+methylation+as+a+possible+biomarker+fordiabetic+retinopathy.">Global DNA methylation as a possible biomarker fordiabetic retinopathy.</a> Diabetes Metab Res Rev. 31 (2), 183-189 (2015).</li><li>Barlic, A., Drobnic, M., Malicev, E., Kregar-Velikonja, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitative+analysis+of+gene+expression+in+human+articular+chondrocytes+assigned+for+autologous+implantation.">Quantitative analysis of gene expression in human articular chondrocytes assigned for autologous implantation.</a> J Orthop Res. 26 (6), 847-853 (2008).</li><li>Legendre, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Enhanced+hyaline+cartilage+matrix+synthesis+in+collagen+sponge+scaffolds+by+using+siRNA+to+stabilizechondrocytes+phenotype+cultured+with+bone+morphogenetic+protein-2+under+hypoxia.">Enhanced hyaline cartilage matrix synthesis in collagen sponge scaffolds by using siRNA to stabilizechondrocytes phenotype cultured with bone morphogenetic protein-2 under hypoxia.</a> Tissue Eng Part C Methods. 19 (7), 550-567 (2013).</li><li>Niethammer, T. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analysis+of+the+autologous+chondrocyte+quality+of+matrix-based+autologous+chondrocyte+implantation+in+the+knee+joint.">Analysis of the autologous chondrocyte quality of matrix-based autologous chondrocyte implantation in the knee joint.</a> Int Orthop. 40 (1), 205-212 (2016).</li><li>Hayatsu, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+bisulfite+genomic+sequencing+used+in+the+analysis+of+epigenetic+states,+a+technique+in+the+emerging+environmental+genotoxicology+research.">The bisulfite genomic sequencing used in the analysis of epigenetic states, a technique in the emerging environmental genotoxicology research.</a> Mutat Res. 659 (1-2), 77-82 (2008).</li><li>Haque, N., Nishiguchi, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bisulfite+sequencing+for+cytosine-methylation+analysis+in+plants.">Bisulfite sequencing for cytosine-methylation analysis in plants.</a> Methods Mol Biol. 744, 187-197 (2011).</li><li>Ananiev, G. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optical+mapping+discerns+genome+wide+DNA+methylation+profiles.">Optical mapping discerns genome wide DNA methylation profiles.</a> BMC Mol Biol. 9, 68 (2008).</li></ol>

Chondrocyte dedifferentiation במבחנה פוגעת קשות את התוצאה של ACI בטיפול תיקון פגם סחוס 11 , 12 . כדי לייעל את התוצאה ACI, חשוב כדי למנוע את השימוש chondrocytes dediferentiated 13 . מחקרים הראו כי רמה כללית מתילציה דנ&quot;א קשורה במידה של dedondferentiation chondrocyte <s...

השתלת chondrocyte אוטולוגי (ACI) הוא חדש יחסית, המדינה- of-the-art הליך לטיפול מומים סחוס מפרקי 1 , 2 . אחד הצעדים החשובים ב- ACI הוא הגברה של chondrocytes באמצעות תרבות monolayer במבחנה . במהלך הגברה, chondrocytes hyaline בקלות לאבד פנוטיפ שלהם ולהפוך dedifferentiated, וזה לא רצוי לטיפול ACI 3 , 4 . כדי למטב את התוצאה של טיפול ACI, יש לקבוע את מידת ההסתגלות של כונדרוציטים לפני החזרה. זה הכרחי להקים דרך כלכלית מהירה לקבוע את המעמד של chondrocytes. לאחרונה, הקשר בין מתילציה DNA ו dedifferentiation chondrocyte משכה תשומת לב רבה 4 , 5 , 6 . מתילציה דנ&quot;א הוא תהליך של WHIch קבוצות מתיל מתווסף DNA, וכתוצאה מכך המרה של שאריות ציטוזין ל 5-methylcytosine (5-mC). כדי להבהיר את הביולוגיה של מתילציה דנ&quot;א ב dedifferentiation chondrocyte, הצעד הראשון הוא להעריך את רמת מתילציה DNA של chondrocytes, אשר עד כה הוכיחה אתגר. Bisulfite גנומי רצף היא הטכניקה הנפוצה ביותר לנתח מתילציה DNA 7 , 8 . ב assay זה, המרה bisulfite גורם השפלה DNA, ולכן כמות משמעותית של המדגם חייב להינתן assay. כמו כן, ביצועים גבוהים כרומטוגרפיה נוזלית (HPLC) שימשה לכימות רמות מתילציה דנ&quot;א העולמי 9 , 10 . עם זאת, ניתוח HPLC דורש עיכול דנ&quot;א גנומי. בנוסף, נדרשים מכשירים ניסיוניים מתקדמים ויקרים. לכן, בנוסף עלות גבוהה, הליכים אלה הם ניסיוני חסרונות זמןUming. נוגדנים אנטי-5-mC הפכו כעת זמינים מסחרית, אשר יצרה את האפשרות לחסינות חיסונית של דנ&quot;א גנומי 5-cc המכיל גנומים מורכבים. בדו&quot;ח זה, אנו חילוץ DNA גנומי chondrocytes גדל בסדרה של תרבויות monolayer. השתמשנו assay כתם נקודה כדי להעריך את התוכן 5-mC ב chondrocytes האדם עם מספר שונה של מעברים. מצאנו כי 5-mC התוכן היה גדל chondrocytes מאוד dediferentiated לעומת chondrocytes עם dedifferentiation ברמה נמוכה. בנוסף, זיהינו מערכת יחסים בין מצב דיפוזיציה לבין רמות 5-mC. לבסוף, דיווחנו כי השינויים בתוכן 5-mC היו קשורים הפנוטיפ chondrocyte. לכן, 5-mC נקודה כתם assay היא שיטה אמינה, פשוטה, מהירה כדי לזהות את רמת מתילציה DNA chondrocytes.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Reagents</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM&#160;&#160;</td>
			<td>Gibco Inc.</td>
			<td>11965&#8211;092</td>
			<td>Warm in 37 &#176;C water bath before use</td>
		</tr>
		<tr>
			<td rowspan="2">Phosphate-Buffered Saline(PBS)</td>
			<td rowspan="2">HyClone Inc.</td>
			<td rowspan="2">SH30256.01B</td>
			<td>D-PBS, free of&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ca2+/Mg2+</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FBS</td>
			<td>Gibco Inc.</td>
			<td>10099-141</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>0.25%Trypsin/EDTA</td>
			<td>Gibco Inc.</td>
			<td>25200-056</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1%Penicillin-Streptomycin</td>
			<td>Gibco Inc.</td>
			<td>15140-122</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chloroform</td>
			<td>Mallinckrodt</td>
			<td>4440</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoamyl Alcohol</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>I-3643</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phenol</td>
			<td>Gibco BRL</td>
			<td>15513-039</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Proteinase K</td>
			<td>Gibco BRL</td>
			<td>24568-2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TAE buffer&#160;</td>
			<td>Bio Whittaker</td>
			<td>16-011V</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Distilled Water</td>
			<td>Gibco BRL</td>
			<td>15230-170</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1 M Tris-HCl</td>
			<td>Biosharp Inc.</td>
			<td>BL514A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tween20</td>
			<td>Biotopped Inc.</td>
			<td>C58H114O26</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BSA</td>
			<td>Proliant Inc.</td>
			<td>68700</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collagenase, Type II</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>C6885</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Names&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;</td>
			<td>Company&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;</td>
			<td>Catalog number&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Equipment</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell Strainer(40&#956;m nylon&#65289;</td>
			<td>FALCON Inc.</td>
			<td>352340</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hemocytometer</td>
			<td>ISOLAB Inc.</td>
			<td>075.03.001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Falcon 100 mm&#160; dish</td>
			<td>Corning</td>
			<td>353003</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge Tubes</td>
			<td>TPP AG</td>
			<td>91050</td>
			<td>Gamma-sterilized</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>High-speed centrifuge</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>5804R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ThermoMixer</td>
			<td>MIULAB</td>
			<td>MTH-100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Carbon dioxide cell incubator</td>
			<td>Thermo scientific</td>
			<td>3111</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chemi-imaging Analyse System</td>
			<td>UVITEC Cambridge</td>
			<td>ALLIANCE</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a 5-mc dot blot assay quantifying the dna methylation level of chondrocyte dedifferentiation in vitro

Dedifferentiation של chondrocytes hyaline לתוך chondrocytes fibroblastic מלווה לעתים קרובות הרחבת monolayer של chondrocytes במבחנה . רמת מתילציה דנ&quot;א גלובלית של chondrocytes נחשבת ביומרקר מתאים לאובדן פנוטיפ chondrocyte. עם זאת, התוצאות על בסיס שיטות ניסיוניות שונות יכול להיות עקבי. לכן, חשוב להקים שיטה מדויקת, פשוטה, מהירה לכמת רמות מתילציה דנ&quot;א העולמי במהלך dedondferentiation chondrocyte. גנום רחב מתילציה ניתוח טכניקות רחב להסתמך בעיקר על רצף גנומי bisulfite. בשל השפלה דנ&quot;א במהלך המרה bisulfite, שיטות אלה בדרך כלל דורשים נפח מדגם גדול. שיטות אחרות המשמשות לכמת רמות מתילציה דנ&quot;א עולמיות כוללות כרומטוגרפיה נוזלית בעלת ביצועים גבוהים (HPLC). עם זאת, HPLC דורש עיכול שלם של DNA גנומי. בנוסף, עלות גבוהה באופן בלתי נמנע של HPLC בStruments מגבילה את היישום הרחב יותר של HPLC. במחקר זה, DNA גנומי (gDNA) הופק מן chondrocytes האדם מתורבת עם מספר משתנה של מעברים. רמת מתילציה gDNA זוהה באמצעות assay כתם methylation ספציפיים כתם. בגישה זו כתם נקודה, תערובת gDNA המכיל את ה- DNA methylated להיות מזוהים זוהה ישירות על קרום N + כנקודת בתוך תבנית תבנית מעגלית בעבר. לעומת ג &#39;ל אחרים מבוססי אלקטרופורזה גישות מתקדמות נהלים מסובכים אחרים, שיטת כתם נקודה חוסך זמן משמעותי. בנוסף, כתמים נקודה יכול לזהות את רמת מתילציה DNA הכולל באמצעות נוגדן זמין מסחרית 5-mC. מצאנו כי רמת מתילציה דנ&quot;א נבדלה בין תת תרבויות monolayer, ולכן יכול לשחק תפקיד מפתח chondrocyte dedifferentiation. הכתם 5-mC נקודה היא שיטה אמינה, פשוטה, מהירה כדי לזהות את רמת מתילציה DNA הכללית להערכתהפונטיפ chondrocyte.

Chondrocytes היו מתורבת monolayer עד המעבר 6 (P6). Chondrocytes הראו שינויים פנוטיפיים מתקדמת עם מעברים רצופים של התרבות monolayer. P0 chondrocyte מורפולוגיה היה עגול, בעוד התאים הפך צבוט מאוד שטוח עם מעברים רצופים עד P6 ( איור 1 ). שינוי מורפולוגיה זה אופייני לתהליך הפירוק...

Watch this Scientific Journal Video about A 5-mC Dot Blot Assay Quantifying the DNA Methylation Level of Chondrocyte Dedifferentiation In Vitro at JoVE.com

A 5-mC Dot Blot Assay Quantifying the DNA Methylation Level of Chondrocyte Dedifferentiation In Vitro

אנו מציגים שיטה לכמת מתילציה דנ&quot;א מבוסס על 5-methylcytosine (5-mC) כתם נקודה. קבענו את רמות 5-mC במהלך dedondferentiation chondrocyte. טכניקה פשוטה זו יכולה לשמש כדי לקבוע במהירות את הפנוטיפ chondrocyte בטיפול ACI.

5-mc נקודה כתם Assay לכמת את מתילציה DNA רמת Chondrocyte Dedifiationiation<em&gt; במבחנה</em

The dedifferentiation of hyaline chondrocytes into fibroblastic chondrocytes often accompanies monolayer expansion of chondrocytes in vitro. The global ...

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

A 5-mC Dot Blot Assay Quantifying the DNA Methylation Level of Chondrocyte Dedifferentiation In Vitro

Production and Use of Lentivirus to Selectively Transduce Primary Oligodendrocyte Precursor Cells for In Vitro Myelination Assays

Production and Use of Lentivirus to Selectively Transduce Primary Oligodendrocyte Precursor Cells for In Vitro Myelination Assays

ייצור ושימוש בLentivirus לתאי סלקטיבי transduce הראשי oligodendrocyte מבשר ל<em&gt; במבחנה</em&gt; מבחני myelination

Myelination is a complex process that involves both neurons and the myelin forming glial cells, oligodendrocytes in the central nervous system (CNS) and ...

Generation of Human Adipose Stem Cells through Dedifferentiation of Mature Adipocytes in Ceiling Cultures

דור של תאי גזע שומן האדם דרך Dedifferentiation של מבוגרים adipocytes בתרבויות תקרה

Mature adipocytes have been shown to reverse their phenotype into fibroblast-like cells in vitro through a technique called ceiling culture. Mature ...

Application of the DNA-Specific Stain Methyl Green in the Fluorescent Labeling of Embryos

יישום של ה- DNA ספציפי הכתם מתיל הירוק בתיוג פלורסנט של עוברים

Methyl green has long been known as a histological stain with a specific affinity for DNA, although its fluorescent properties have remained unexplored ...

Visualization of Chondrocyte Intercalation and Directional Proliferation via Zebrabow Clonal Cell Analysis in the Embryonic Meckel&#8217;s Cartilage

Visualization of Chondrocyte Intercalation and Directional Proliferation via Zebrabow Clonal Cell Analysis in the Embryonic MeckelÃƒÂ¢Ã¢â€šÂ¬Ã¢â€žÂ¢s Cartilage

ויזואליזציה של הכונדרוציטים עיבור וכיוונית למניעת הפצת נשק באמצעות ניתוח תא משובט Zebrabow בסחוס של העוברית מקל

Development of the vertebrate craniofacial structures requires precise coordination of cell migration, proliferation, adhesion and differentiation. ...

Development of an In Vitro Assay to Evaluate Contractile Function of Mesenchymal Cells that Underwent Epithelial-Mesenchymal Transition

Development of an In Vitro Assay to Evaluate Contractile Function of Mesenchymal Cells that Underwent Epithelial-Mesenchymal Transition

פיתוח של<em&gt; במבחנה</em&gt; Assay לאבחון תפקוד התכווצות של תאי mesenchymal שעבר אפיתל-mesenchymal מעבר

Fibrosis is often involved in the pathogenesis of various chronic progressive diseases such as interstitial pulmonary disease. Pathological hallmark is ...

In Vitro Growth of Mouse Preantral Follicles Under Simulated Microgravity

In Vitro Growth of Mouse Preantral Follicles Under Simulated Microgravity

במבחנה צמיחה של העכבר זקיקים Preantral תחת Microgravity מדומה

14 day-old mouse ovarian tissue and preantral follicles isolated from same-aged mice were incubated in a simulated microgravity culture system. We ...

Quantifying Branching Density in Rat Mammary Gland Whole-mounts Using the Sholl Analysis Method

כימות צפיפות הענף בבלוטת החלב עכברוש- mounts כולו באמצעות שיטת ניתוח Sholl

An increasing number of studies are utilizing the rodent mammary gland as an endpoint for assessing the developmental toxicity of a chemical exposure. The ...

The Aortic Ring Co-culture Assay: A Convenient Tool to Assess the Angiogenic Potential of Mesenchymal Stromal Cells In Vitro

The Aortic Ring Co-culture Assay: A Convenient Tool to Assess the Angiogenic Potential of Mesenchymal Stromal Cells In Vitro

וזמינותו תרבות משותפת הטבעת אבי העורקים: כלי נוח כדי להעריך את הפוטנציאל אנגיוגנזה של תאי סטרומה Mesenchymal במבחנה

Angiogenesis is a complex, highly regulated process responsible for providing and maintaining adequate tissue perfusion. Insufficient vasculature ...

Dissection and Immunofluorescent Staining of Mushroom Body and Photoreceptor Neurons in Adult Drosophila melanogaster Brains

Dissection and Immunofluorescent Staining of Mushroom Body and Photoreceptor Neurons in Adult Drosophila melanogaster Brains

ניתוח Immunofluorescent מכתים של פטריות הגוף והנפש ומה קולט אור נוירונים במוח למבוגרים דרוזופילה melanogaster

Nervous system development involves a sequential series of events that are coordinated by several signaling pathways and regulatory networks. Many of the ...

Isolation of Human Endometrial Stromal Cells for In Vitro Decidualization

Isolation of Human Endometrial Stromal Cells for In Vitro Decidualization

לבידוד של תאי סטרומה רירית הרחם אדם במבחנה Decidualization

The differentiation of human endometrial stromal cells (HESC) from fibroblast-like appearance into secretory decidua is a transformation required for ...