Name: preparation and in vitro characterization of magnetized mir-modified endothelial cells
Uploaded: 2017-05-02T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Preparation and In Vitro Characterization of Magnetized miR-modified Endothelial Cells at JoVE.com

Vi vill tacka G. Fulda (Electron Microscopy Centre, Rostock universitet, Tyskland) för teknisk support förvärva TEM-bilder av filtrerad supernanopartiklar och att utföra sina röntgenanalys. Det arbete som utförs på RTC Rostock stöddes av förbundsministeriet för utbildning och forskning Tyskland (FKZ 0312138A, FKZ 316.159 och VIP + 03VP00241) och staten Mecklenburg-Vorpommern med EU: s strukturfonder (ESF / IV-WM-B34- 0030/10 och ESF / IV-BM-B35-0010 / 12) och av DFG (DA 1296-1), Damp-Foundation, och den tyska Heart Foundation (F / 01/12). Frank Wiekhorst stöddes av EU FP7 forskningsprogrammet &quot;NanoMag&quot; FP7-NMP-2013-LARGE-7.

Humana navelsträngar för cellisolering erhölls postpartum från informerade, friska kvinnor som gav sitt skriftliga medgivande till användning av detta material för forskning i enlighet med Helsingforsdeklarationen. Den etiska kommittén vid University of Rostock har godkänt den presenterade studien (reg. Nr A 2011 06, långvarig 23 September, 2013). 1. Framställning av Transfektion Anläggningar <ol><li> Biotinylering av polyetylenimin (PEI). <ol><li> Lös grenad PEI i ult...

Produktion av genetiskt manipulerade celler laddade med superparamagnetiska nanopartiklar för deras ytterligare magnetiskt kontrollerad vägledning presenteras i det nuvarande protokollet. Framgångsrik tillämpning av denna strategi möjliggör upplösningen av vissa svårigheter av cellterapi, såsom låg retention och dålig engraftment i det skadade området 2, 3, 4, genom att tillhandahålla en inriktningsbar cellprodukt ...

Gen- och cellterapi är kraftfulla verktyg som har potential att lösa dagens utmaningar i CVD-behandling. Trots att båda dessa metoder för närvarande testas i kliniska prövningar, är de ännu inte redo för bred klinisk tillämpning 1. Noterbart är ett vanligt tillvägagångssätt för att ta itu med de utmaningar som gen- och cellterapi för att utveckla multifunktionella genlevererande vektorer som är lämpliga för klinisk tillämpning. Bristen på säkra och effektiva gentillförselsystem är det största problemet för genterapi. På samma gång, den genteknik av cellulära produkter före transplantation skulle kunna övervinna de allvarliga utmaningar som cellterapi, såsom låg effektivitet (t ex i hjärtområdet, uppnås endast ~ 5% av funktionell förbättring efter stamcellstransplantation 1 ) och dålig retention / engraftment vid stället för skada (dvs droppar cellkvarhållning under 5 - 10% inom några minuter till timmar post-tillämpning, oberoende av administrationsvägen 2, 3, 4). Hittills, virala vektorer kraftigt överskrider de icke-virala system i termer av effektivitet, vilket har resulterat i en bredare tillämpning i kliniska prövningar (~ 67%) 5. Emellertid, virus fordon medför allvarliga risker, såsom immunogenicitet (och den efterföljande inflammatoriskt svar, med allvarliga komplikationer), onkogenicitet, och begränsningar i storleken på den burna genetiska materialet 6. På grund av dessa säkerhetsproblem och de höga kostnaderna för virusvektorproduktion, är att föredra i vissa fall 7, 8 användningen av icke-virala system. Det är särskilt lämplig för sjukdomar som kräver transient genetisk korrigering, såsom uttrycket av tillväxtfaktorer som kontrollerar angiogenes (t ex för CVD behandling) eller delivery av vacciner. I vår grupp, var ett tillförselsystem utformad genom att kombinera grenpolyetylenimin 25-kDa (PEI) och superparamagnetiska järnoxidnanopartiklar (MNP) sammanbundna av biotin-streptavidin samspel 9. Denna vektor är ett potentiellt verktyg för genetisk manipulering av celler, vilket möjliggör deras samtidiga magnetisering före transplantation. Den senare ger en grund för magnetisk vägledning / retention, vilket är särskilt lovande nuförtiden, som avancerade magnetiska inriktningstekniker håller på att framgångsrikt utvecklat 10. Dessutom, de resulterande magnetiskt påverkbara celler har potentialen att vara icke-invasivt övervakas av magnetisk resonanstomografi (MRI) eller magnetisk partikel avbildning 11, 12. I fallet med PEI / MNP-vektor, säkerställer polyamin nukleinsyra kondensation och därmed skydd mot nedbrytande faktor<html> s, vektor internalisering i celler och endosomala fly 5. Den MNP komplettera egenskaperna hos PEI, inte bara i termer av magnetisk vägledning, men också genom att minska den kända PEI toxicitet 7, 13, 14. Tidigare var PEI / MNP vektor egenskaper justeras i termer av leveranseffektivitet (dvs., pDNA och miRNA) och säkerhet genom att använda fibroblaster och humana mesenkymala stamceller 15, 16. I detta manuskript, är ett detaljerat protokoll om tillämpningen av PEI / MNP för alstringen av miRNA-modifierade celler beskrivna 17. För detta ändamål är HUVECs används och representerar en etablerad modell för in vitro-angiogenes. De är svårt att transfektera och är känsliga för giftiga påverkan 18, 19,ass = &quot;xref&quot;&gt; 20. Dessutom tillhandahåller vi en algoritm för att utvärdera sådana celler in vitro, inklusive deras inriktning, intercellulär kommunikation, och MRI-detektion.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="653">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:197px;">PEI 25 kDa</td>
			<td style="width:159px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">408727</td>
			<td style="width:179px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:197px;">EZ-Link Sulfo-NHS-LC-Biotin</td>
			<td style="width:159px;">Thermo Scientific</td>
			<td style="width:119px;">21335</td>
			<td style="width:179px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:197px;">PD-10 Desalting Columns</td>
			<td style="width:159px;">GE Healthcare</td>
			<td style="width:119px;">17085101</td>
			<td style="width:179px;">Containing Sephadex G-25 Medium</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:197px;">Ninhydrin Reagent solution 2%</td>
			<td style="width:159px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">7285</td>
			<td style="width:179px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:197px;">Glycine</td>
			<td style="width:159px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">410225</td>
			<td style="width:179px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:197px;">Pierce Biotin Quantitation Kit</td>
			<td style="width:159px;">Thermo Scientific</td>
			<td style="width:119px;">28005</td>
			<td style="width:179px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:197px;">&#160;Microplate reader Model 680</td>
			<td style="width:159px;">Bio-Rad</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:179px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:197px;">Streptavidin MagneSphere Paramagnetic Particles</td>
			<td style="width:159px;">Promega</td>
			<td style="width:119px;">Z5481</td>
			<td style="width:179px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:197px;">Millex-HV PVDF Filter</td>
			<td style="width:159px;">Merck</td>
			<td style="width:119px;">SLHV013SL</td>
			<td style="width:179px;">0.45&#181;m</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:197px;">Libra 120 transmission electron microscope&#160;</td>
			<td style="width:159px;">Zeiss</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:179px;">Acceleration Voltage 120KV</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:197px;">Sapphire X-ray detector</td>
			<td style="width:159px;">EDAX-Amatek</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:179px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:197px;">Cell culture plastic</td>
			<td style="width:159px;">TPP</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:179px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:197px;">NHS-Esther Atto 565</td>
			<td style="width:159px;">ATTO-TEC GmbH</td>
			<td style="width:119px;">AD 565-31</td>
			<td style="width:179px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:197px;">NHS-Esther Atto 488&#160;</td>
			<td style="width:159px;">ATTO-TEC GmbH</td>
			<td style="width:119px;">AD 488-31</td>
			<td style="width:179px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:197px;">Cy5 miRNA Label IT kit</td>
			<td style="width:159px;">Mirus Bio</td>
			<td style="width:119px;">MIR 9650</td>
			<td style="width:179px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:197px;">Biotin Atto 565</td>
			<td style="width:159px;">ATTO-TEC GmbH</td>
			<td style="width:119px;">AD 565-71</td>
			<td style="width:179px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:197px;">Collagense Type IV Gibco</td>
			<td style="width:159px;">Thermo Scientific</td>
			<td style="width:119px;">17104019</td>
			<td style="width:179px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:197px;">Endothelial growth medium, EGM-2</td>
			<td style="width:159px;">Lonza</td>
			<td style="width:119px;">CC-3156 &#38; CC-4176</td>
			<td style="width:179px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:197px;">Penicillin/Streptomycin</td>
			<td style="width:159px;">Thermo Scientific</td>
			<td style="width:119px;">15140122</td>
			<td style="width:179px;">100 U/ml, 100&#181;g/ml</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:197px;">Matrigel</td>
			<td style="width:159px;">BD Biosciences</td>
			<td style="width:119px;">356234</td>
			<td style="width:179px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:197px;">anti-PECAM-1 antibody</td>
			<td style="width:159px;">Santa Cruz</td>
			<td style="width:119px;">sc-1506</td>
			<td style="width:179px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:197px;">MS MACS columns</td>
			<td style="width:159px;">Miltenyi Biotec&#160;</td>
			<td style="width:119px;">130-042-201</td>
			<td style="width:179px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:197px;">Near-IR Live/Dead Cell Stain Kit</td>
			<td style="width:159px;">Thermo Scientific</td>
			<td style="width:119px;">L10119</td>
			<td style="width:179px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:197px;">Cy3 Dye-Labeled Pre-miR Negative Control</td>
			<td style="width:159px;">Thermo Scientific</td>
			<td style="width:119px;">AM17120</td>
			<td style="width:179px;">&#34;Cy3-miR&#34; or &#34;Cyanine-miR3&#34; in the manuscript</td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:197px;">Pre-miR miRNA Precursor Molecules - Negative Control&#160;</td>
			<td style="width:159px;">Thermo Scientific</td>
			<td style="width:119px;">AM17110</td>
			<td style="width:179px;">&#34;scr-miR&#34; in the manuscript</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:197px;">Anti-hsa-miR92a-3p synthetic Inhibitor&#160;</td>
			<td style="width:159px;">Thermo Scientific</td>
			<td style="width:119px;">AM10916</td>
			<td style="width:179px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:197px;">LSM 780 ELYRA PS.1 system</td>
			<td style="width:159px;">Zeiss</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:179px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:197px;">Paraformaldehyde</td>
			<td style="width:159px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">158127</td>
			<td style="width:179px;">4% solution in PBS</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:197px;">DAPI nuclear stain</td>
			<td style="width:159px;">Thermo Scientific</td>
			<td style="width:119px;">D1306</td>
			<td style="width:179px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:197px;">NucleoSpin RNA isolation Kit</td>
			<td style="width:159px;">Machery-Nagel</td>
			<td style="width:119px;">740955</td>
			<td style="width:179px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:197px;">mirVana miRNA Isolation Kit</td>
			<td style="width:159px;">Thermo Scientific</td>
			<td style="width:119px;">AM1560</td>
			<td style="width:179px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:197px;">TaqMan MicroRNA Reverse Transcription Kit</td>
			<td style="width:159px;">Thermo Scientific</td>
			<td style="width:119px;">4366596</td>
			<td style="width:179px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:197px;">StepOnePlus Real-Time PCR System</td>
			<td style="width:159px;">Applied Biosystems</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:179px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:197px;">High-Capacity cDNA Reverse Transcription Kit</td>
			<td style="width:159px;">Thermo Scientific</td>
			<td style="width:119px;">4368814</td>
			<td style="width:179px;"></td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:197px;">hsa-miR-92a TaqMan assay</td>
			<td style="width:159px;">Thermo Scientific</td>
			<td style="width:119px;">000431</td>
			<td style="width:179px;">Mature miRNA Sequence: UAUUGCACUUGUCCCGGCCUGU</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">FastGene Taq Ready Mix</td>
			<td style="width:159px;">Nippon Genetics</td>
			<td style="width:119px;">LS27</td>
			<td style="width:179px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:197px;">ITGA5 TaqMan assay</td>
			<td style="width:159px;">Thermo Scientific</td>
			<td style="width:119px;">Hs01547673_m1</td>
			<td style="width:179px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:197px;">RNU6B TaqMan assay</td>
			<td style="width:159px;">Thermo Scientific</td>
			<td style="width:119px;">001093</td>
			<td style="width:179px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:197px;">18S rRNA Endogenous Control</td>
			<td style="width:159px;">Thermo Scientific</td>
			<td style="width:119px;">4333760F</td>
			<td style="width:179px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:197px;">Gelatin</td>
			<td style="width:159px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">G7041</td>
			<td style="width:179px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:197px;">CellTrace Calcein Red-Orange</td>
			<td style="width:159px;">Thermo Scientific</td>
			<td style="width:119px;">C34851</td>
			<td style="width:179px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:197px;">PBS</td>
			<td style="width:159px;">Pan Biotech</td>
			<td style="width:119px;">P04-53500</td>
			<td style="width:179px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:197px;">BSA</td>
			<td style="width:159px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:179px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:197px;">MACS buffer</td>
			<td style="width:159px;">Miltenyi Biotec&#160;</td>
			<td style="width:119px;">130-091-221</td>
			<td style="width:179px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:197px;">Agarose</td>
			<td style="width:159px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">A9539</td>
			<td style="width:179px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:197px;">7.1 Tesla animal MRI system</td>
			<td style="width:159px;">Bruker Corporation</td>
			<td style="width:119px;">A7906</td>
			<td style="width:179px;"></td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:197px;">ImageJ software</td>
			<td style="width:159px;">National Institutes of Health</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:179px;">upgraded with an AngiogenesisAnalyzer (NIH)</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:197px;">MPS device</td>
			<td style="width:159px;">Bruker Biospin</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:179px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:197px;">Matlab software</td>
			<td style="width:159px;">Mathworks</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:179px;"></td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:197px;">Ring Neodym Magnet&#160;</td>
			<td style="width:159px;">magnets4you GmbH</td>
			<td style="width:119px;">RM-10x04x05-G</td>
			<td style="width:179px;">&#248; 10 mm; remanescence is ~1.3T, coercivity &#8805; 955 kA/m</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:197px;">Click-iT EdU Alexa Fluor 647 Imaging Kit</td>
			<td style="width:159px;">Thermo Scientific</td>
			<td style="width:119px;">C10340</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:197px;">FluorSave Reagent</td>
			<td style="width:159px;">Merck</td>
			<td style="width:119px;">345789</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:197px;">Ultrasonic bath</td>
			<td style="width:159px;">Bandelin electronic</td>
			<td style="width:119px;">Type: RK 100 SH</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

preparation and in vitro characterization of magnetized mir-modified endothelial cells

Hittills tillgängliga kirurgiska och farmakologiska behandlingar för hjärt- och kärlsjukdomar (CVD) är begränsade och ofta palliativ. På samma gång, gen- och cellterapi är mycket lovande alternativa tillvägagångssätt för CVD-behandling. Emellertid är bred klinisk tillämpning av genterapi kraftigt begränsad av bristen på lämpliga gen leveranssystem. Utveckling av lämpliga gentillförselvektorer kan ge en lösning på aktuella utmaningar i cellterapi. I synnerhet befintliga nackdelar, såsom begränsad effektivitet och låg retention cell i den skadade organet, kan övervinnas genom lämplig cellteknik (dvs genetiska) före transplantation. Den presenterade protokoll beskriver effektiv och säker övergående modifiering av endotelceller med användning av en polyetylenimin superparamagnetisk nanopartikel (PEI / MNP) -baserad leveransvektor. Dessutom är algoritmen och metoder för cellkarakterisering definierats. Den framgångsrika intracellular leverans av mikroRNA (MIR) i humana navelvenendotelceller (HUVEC) har uppnåtts utan att påverka cellviabilitet, funktionalitet, eller intercellulär kommunikation. Dessutom var detta tillvägagångssätt visat sig orsaka en stark funktionell effekt introducerade exogena miR. Viktigare, tillämpningen av denna MNP-baserad vektor säkerställer cell magnetisering, med åtföljande möjligheter till magnetisk inriktning och icke-invasiv MRI spårning. Detta kan utgöra en grund för magnetiskt styrda, genetiskt manipulerade cell terapeutika som kan övervakas icke-invasivt med MRI.

Det huvudsakliga syftet med det föreslagna protokollet är att producera magnetiskt påverkbara miR-modifierade celler och att föra sin noggrann karaktärisering (figur 1). Som ett resultat, effektivt transfekterade celler, som svarar på magnetisk selektion och vägledning och detekterbara med MRI, bör erhållas. Först framställdes identiteterna av isolerade HUVEC bekräftades genom typisk färgning med ...

Watch this Scientific Journal Video about Preparation and In Vitro Characterization of Magnetized miR-modified Endothelial Cells at JoVE.com

Preparation and In Vitro Characterization of Magnetized miR-modified Endothelial Cells

Detta manuskript beskriver den effektiva, icke-viral avgivning av miR till endotelceller genom en PEI / MNP vektor och deras magnetisering. Sålunda, förutom att genetisk modifiering, tillåter detta tillvägagångssätt för magnetisk cell vägledning och MRI detekterbarhet. Tekniken kan användas för att förbättra egenskaperna hos terapeutiska cellprodukter.

framställning och<em&gt; In Vitro</em&gt; Karakterisering av Magnetized miR-modifierade endotelceller

To date, the available surgical and pharmacological treatments for cardiovascular diseases (CVD) are limited and often palliative. At the same time, gene ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Preparation and In Vitro Characterization of Magnetized miR-modified Endothelial Cells

Corneal Donor Tissue Preparation for Endothelial Keratoplasty

Hornhinnan donatorvävnad Förberedelse för Endothelial keratoplasti

Over the past ten years, corneal transplantation surgical techniques have undergone revolutionary changes1,2. Since its inception, traditional full ...

Isolation, Characterization and Comparative Differentiation of Human Dental Pulp Stem Cells Derived from Permanent Teeth by Using Two Different Methods

Isolering, karakterisering och jämförande differentiering av mänskliga Dental celler Pulp Stem Härstammar från permanenta tänder med hjälp av två olika metoder

Developing wisdom teeth are easy-accessible source of stem cells during the adulthood which could be obtained by routine orthodontic treatments. Human ...

Stretch in Brain Microvascular Endothelial Cells (cEND) as an In Vitro Traumatic Brain Injury Model of the Blood Brain Barrier

Stretch in Brain Microvascular Endothelial Cells cEND as an In Vitro Traumatic Brain Injury Model of the Blood Brain Barrier

Stretch i Brain mikrovaskulära endotelceller (cEND) som en<em&gt; In Vitro</em&gt; Traumatisk hjärnskada Modell av blodhjärnbarriären

Due to the high mortality incident brought about by traumatic brain injury (TBI), methods that would enable one to better understand the underlying ...

In vitro Method to Observe E-selectin-mediated Interactions Between Prostate Circulating Tumor Cells Derived From Patients and Human Endothelial Cells

In vitro Method to Observe E-selectin-mediated Interactions Between Prostate Circulating Tumor Cells Derived From Patients and Human Endothelial Cells

In vitro-metod för att observera E-selektin-förmedlade interaktioner mellan Prostata cirkulerande tumörceller från patienter och humana endotelceller

Metastasis is a process in which tumor cells shed from the primary tumor intravasate blood vascular and lymphatic system, thereby, gaining access to ...

Corneal Donor Tissue Preparation for Descemet's Membrane Endothelial Keratoplasty

Hornhinnan donatorvävnad Förberedelse för Descemets Membrane Endothelial Keratoplasty

Descemet&#8217;s Membrane Endothelial Keratoplasty (DMEK) is a form of corneal transplantation in which only a single cell layer, the corneal endothelium, ...

In vitro Functional Characterization of Mouse Colorectal Afferent Endings

In vitro Functional Characterization of Mouse Colorectal Afferent Endings

In vitro Funktionell karakterisering av mus kolorektal Afferent Endings

This video demonstrates in detail an in vitro single-fiber electrophysiological recording protocol using a mouse colorectum-nerve preparation. The ...

Isolation of Human Lymphatic Endothelial Cells by Multi-parameter Fluorescence-activated Cell Sorting

Isolering av Human Lymphatic endotelceller från Multi-parameter fluorescensaktiverad cellsortering

Lymphatic system disorders such as primary lymphedema, lymphatic malformations and lymphatic tumors are rare conditions that cause significant morbidity ...

Studying Pancreatic Cancer Stem Cell Characteristics for Developing New Treatment Strategies

Studera bukspottkörtelcancer Stem Cell egenskaper för att utveckla nya behandlingsstrategier

Pancreatic ductal adenocarcinoma (PDAC) contains a subset of exclusively tumorigenic cancer stem cells (CSCs) which have been shown to drive tumor ...

Isolation and Culture Expansion of Tumor-specific Endothelial Cells

Isolering och odling Expansion av Tumörspecifika endotelceller

Freshly isolated tumor-specific endothelial cells (TEC) can be used to explore molecular mechanisms of tumor angiogenesis and serve as an in vitro model ...

Isolation and Culture of Primary Endothelial Cells from Canine Arteries and Veins

Isolering och odling av primära endotelceller från Canine artärer och vener

Cardiovascular disease is studied in both human and veterinary medicine. Endothelial cells have been used extensively as an in vitro model to study ...